Produo do Material de Referncia Interno GONF50 para Anlises de Elementos-Trao em Plantas

Bruno Leonardo Fernandes Souza (1); Teresa Cristina Lara Lanza de S e Melo Marques (2); Luiz Roberto Guimares Guilherme (3)
(1)

Graduando de Qumica, Bolsista Modalidade IC do CNPq; Departamento de Cincia do Solo; Universidade Federal de Lavras; Campus UFLA, Caixa Postal 3037; email: blfsouza@yahoo.com.br; (2) Ps-doutoranda em Qumica do Solo; Departamento de Cincia do Solo; Universidade Federal de Lavras; Campus UFLA, Caixa Postal 3037; (3) Professor PhD em Cincia do Solo; Departamento de Cincia do Solo; Universidade Federal de Lavras; Campus UFLA, Caixa Postal 3037.

RESUMO - Apesar da reconhecida importncia do uso de materiais de referncia certificados (MRCs), a ampla variedade de substncias qumicas existentes e as diversas matrizes nas quais estas podem estar contidas, ocasionam a inexistncia destes materiais em um nmero que atenda a todas as medies. No Brasil, esta dificuldade se soma ao custo, muitas vezes elevado, para a importao destes materiais, burocracia e morosidade associadas ao transporte e liberao dos materiais importados pelas autoridades competentes e ainda, ao desconhecimento do tema materiais de referncia por parte da comunidade de laboratrios nacionais. Uma alternativa ento a utilizao de Materiais de Referncia de Laboratrios (MRLs), para reduzir despesas com compras de MRCs. Dessa forma, o presente trabalho teve a finalidade de preparar um Material de Referncia Interno para determinao de As, Cd, Ni, Pb e Zn em matrizes do tipo planta contaminadas por elementos-trao. Os testes conduzidos para a escolha da espcie utilizada para o MRI foram baseados no cultivo de diferentes espcies, Chrysopogon zizanioides (L.) Roberty, Gomphrena claussenii Moq., Pteris vittata, Pityrogramma calomelanos e Arundo donax, em solos contaminados e no cultivo sob doses sucessivas de sulfato de cdmio e sulfato de zinco da espcie Gomphrena claussenii Moq.. Aps anlise estatstica, o material produzido (GONF 50) mostrou-se adequado para estudos que envolvem anlises de Cd, Ni e Pb devido aos seus valores razoveis de CV, recuperao em relao ao padro e limite de deteco, no caso do Zn. Palavras-chave: Padres analticos, metais pesados. INTRODUO - Materiais de Referncia so todos os materiais ou substncias que tm um ou mais valores de propriedades que so suficientemente homogneos e bem estabelecidos para serem usados na calibrao de um aparelho, na avaliao de um mtodo de medio ou na atribuio de valores a materiais. O uso de MRCs na garantia da qualidade de anlises e monitoramentos ambientais de grande importncia, sendo que problemas

relacionados essa garantia foram extensivamente descritos por Batley (1999). Os elementos-trao so, e sempre sero onipresentes em solos, sedimentos e sistemas aquticos (Guilherme et al., 2005). Sua concentrao em solos antes da adio antropognica , geralmente, aceita como benigna, ou de pouco risco, porque o crescimento de plantas ou a qualidade da gua no so afetados adversamente (Chang et al., 1984). Entretanto, h locais onde, mesmo sem a adio de materiais contendo elementos-trao, sua concentrao excede os limites admissveis para solos devido a processos naturais de enriquecimento com elementos-trao ou de fatores de formao do solo. Em tais locais e em situaes onde eles possam estar presentes em formas muito mveis no solo, podem vir a ser biodisponveis, elevando os riscos gerados pela sua presena (Guilherme et al., 2005). Nestes casos, o monitoramento de teores atravs de anlise peridicas em laboratrios confiveis passa a ser importante do ponto de vista de gerenciamento de riscos. A participao em programas interlaboratoriais muito importante, pois permite comparar os resultados analticos e o desempenho entre instituies e congneres (Hedges et al., 1993). Os estudos colaborativos tm propiciado uma harmonizao nos procedimentos de extraes de espcies qumicas. Isso frequentemente leva a uma melhoria geral dos laboratrios participantes, conferindo confiana, credibilidade e aquisies de certificados de qualidade. Alm disso, resultados obtidos em experimentos interlaboratoriais tm revelado a ocorrncia de erros sistemticos, os quais os pesquisadores visam reduzir a nveis mnimos (Ure et al., 1992). Para que a confiabilidade dos dados amostrados em um laboratrio seja atingida, o emprego de amostras de referncia de grande importncia, bem como ainda a participao em um bom programa de controle e segurana de qualidade analtica (Soares, 2001). De modo geral, os materiais de referncia certificados (MRCs) so muito caros e os custos podem aumentar rapidamente se forem usados rotineiramente para checar o desempenho de mtodos em qumica analtica.

Apesar da reconhecida importncia do uso de materiais de referncia certificados, a ampla variedade de substncias qumicas existentes e as diversas matrizes nas quais estas podem estar contidas, ocasionam a inexistncia destes materiais em um nmero que atenda todas as medies. Esta dificuldade se soma ao custo, muitas vezes elevado, para a importao destes materiais, burocracia e morosidade associadas ao transporte e liberao dos materiais importados pelas autoridades competentes e ainda, heterogeneidade de conhecimento da importncia do tema materiais de referncia por parte da comunidade de laboratrios nacionais. Uma alternativa ento a utilizao de Materiais de Referncia de Laboratrios (MRLs), para reduzir despesas com compras de MRCs. De acordo com Embrapa (1999), a utilizao de padro interno do laboratrio em avaliaes de desempenho analtico nos experimentos laboratoriais um passo importante na obteno de qualidade analtica. Sendo assim, o objetivo geral desse trabalho foi pesquisar e produzir uma ou mais espcies de plantas tolerantes a altos nveis de ETs para anlises ambientais em estudos laboratoriais e interlaboratoriais como MRI. Os elementos de interesse avaliados nesta primeira fase foram: arsnio, cdmio, chumbo, nquel e zinco. MATERIAL E MTODOS - Produziu-se uma mistura de rejeitos da rea de minerao e processamento de Zn em Trs Marias (25%), MG, da rea de minerao de ouro em Paracatu (25%), MG, e do solo sem contaminao de uma rea localizada no Campus da Universidade Federal de Lavras (50%), no municpio de Lavras, MG. Na busca por espcies tolerantes, foram plantadas nesta mistura cinco espcies: Chrysopogon zizanioides (L.) Roberty, Gomphrena claussenii Moq., Pteris vittata, Pityrogramma calomelanos e Arundo donax. As mudas de Gomphrena Claussenii Moq., Pteris vittata e Pityrogramma calomelanos no resistiram. A mistura contaminada foi letal para as espcies assim que elas foram transplantadas para os vasos. Aps um ms, as espcies Chrysopogon zizanioides (L.) Roberty e Arundo donax sobreviveram, a segunda encontrou-se em melhores condies. Portanto os testes de tolerncia das espcies continuaram, por mais 5 meses. Para tais testes, novas mudas de Chrysopogon zizanioides (L.) Roberty e Arundo donax foram coletadas. O excesso de folhas das mudas de Chrysopogon zizanioides (L.) Roberty foi cortado e as plantas foram colocadas em bandejas contendo soluo nutritiva com a finalidade de enraizamento, permanecendo por 15 dias at serem transplantadas para a mistura contaminada. Os rizomas de Arundo donax foram coletados e colocados em bandejas contendo soluo nutritiva com a mesma finalidade, tambm por 15 dias. Antes do plantio das mudas, proporcionou-se s misturas de solo contaminado

adubaes fosfatadas (200 mg P kg-1) e com Ca (90 mg Ca kg-1). Os adubos foram pesados e misturados aos solos dos vasos, de 5L cada, separadamente. Foram feitas adubaes com Mg (30 mg Mg kg-1), dividida em quatro vezes, sendo a primeira aplicao realizada um dia aps o plantio das mudas. As plantas permaneceram durante 5 meses em casa de vegetao e apresentaram vrios sintomas de toxidez causada pelos ETs, sendo o principal deles o desenvolvimento lento e com pouca biomassa na parte area em relao ao controle. Devido isto no houve prosseguimento no cultivo das espcies para a produo do MRI. Durante o tempo decorrido, mudas de Gomphrena Claussenii Moq. foram cultivadas em vasos que variaram de 3 a 5 dm3. O substrato utilizado, prprio para plantas tropicais, foi produzido pela empresa Plantmax e mantido sob contaminaes sucessivas de solues estoque de 3Cd(SO4).8H2O PA-ACM (sulfato de cdmio), da empresa Vetec e ZnSO4.7H2O PA (sulfato de zinco), produzido pela mesma empresa. As plantas receberam a cada 3 meses, durante 3 semanas, em intervalos de 3 a 4 dias, 10 mL de 50 mmolL-1 de Cd e 20 mL 500 mmol L-1 de Zn com a ajuda de uma pipeta automtica previamente calibrada da empresa Thermo Scientific. Buscou-se fazer a aplicao ao derredor e o mais prximo possvel dos caules de maneira que os mesmos no sofressem os efeitos antecipados da absoro em relao s partes areas e para que as solues pudessem entrar em contato com o maior nmero possvel de razes, garantindo uma maior eficincia na absoro. Aps os perodos de contaminao, as partes areas das plantas foram colhidas, imediatamente lavadas em gua potvel e, logo aps, lavadas em gua destilada. A secagem prvia foi feita em bandejas forradas com folhas de papel absorvente por uma noite em temperatura ambiente, sendo em seguida, colocadas em estufa com circulao de ar a 65C, para secagem. Concluda a desidratao, o material foi modo em moinhos da fabricante Marconi, modelo MA-340 seguido pelo modelo MA-048, buscando-se um tamanho mnimo de partculas. Como finalizao, todo o material modo foi peneirado em malhas de 0,147 mm. O processo de moagem e peneirao da matria retida na malha se repetiu por vrias vezes para melhor aproveitamento. Visando maior homogeneidade, o material peneirado foi levado a um quarteador inox por sucessivas vezes e ento colocado em frascos mbar de 100 mL, armazenados em local seco e protegido. A determinao da concentrao de elementos-trao no material produzido foi realizada a partir do mtodo de extrao 3051 da USEPA (1998). Cerca de 0,5 g do material slido e 5 mL de HNO3 concentrado em frascos de Teflon hermeticamente fechados, foram levados ao

aparelho de micro-ondas por 10 minutos. Utilizou-se como padro de referncia o material BCR 414 com intuito de assegurar maior confiabilidade nas determinaes. O limite de deteco do mtodo (LDM) foi calculado medindo-se a concentrao de As, Cd, Ni, Pb e Zn em amostras em branco e aplicando-se a frmula: LDM = (med + t.s).Fd; onde med o teor mdio de As, Cd, Ni, Pb e Zn em amostras em branco, s o desvio padro das amostras em branco, t o valor de Student para n-1 graus de liberdade e probabilidade igual a 0,01 e Fd o fator de diluio das amostras. RESULTADOS E DISCUSSO - O termo homogeneidade reconhece que apenas as solues podem ser verdadeiramente homogneas. Entretanto, um material de referncia s suficientemente homogneo quando o contedo dos seus diversos frascos no difere entre si o bastante para afetar seus usos previstos no Guia 33 (ISO 1989). Apenas o valor mdio do teor de Zn (Tabela 1) encontrou-se acima do limite de deteco do mtodo (LDM) para a metodologia que inclui leitura dos extratos no EAA.
Tabela 1. Valores dos limites de deteco do mtodo (LDM) para os elementos-trao estudados. Elemento As Cd Ni Pb Zn .........mg.kg-1........ 13,21 g kg-1 (FORNO) - (CHAMA) - (FORNO) 5,13 g kg-1 (FORNO) 20,4 mg kg-1 (CHAMA)

Tabela 2. Concentrao mdia, desvio padro (DP) e coeficiente de variao (CV) para amostras de CONT1000 e GONF50, determinadas no EAA. GONF50 Mdia Desvio Padro
-1

CV % 24 3 7 13 4

............ mg kg ........... As Cd Ni Pb Zn 1,46 1579,93 1,13 5,05 10847,77 0,36 50,87 0,08 0,68 404,45

Os valores de recuperao para os elementos As, Cd, Ni, Pb e Zn, no material certificado BCR 414 encontram-se expostos na tabela 3.
Tabela 3. Valores mdios obtidos e valores certificados nas amostras de referncia. BCR 414 Obtido As Cd Ni Pb Zn 3,52 175,3 17,26 3,07 72,23 Certificado
-1

Recuperao % 52 78 92 77 65

........... mg kg .......... 6,82 226 18,8 3,97 111,6

Devido diferena de concentrao entre as amostras, foi necessrio fazer as determinaes do As e Cd no EAA com forno de grafite. A avaliao da preciso analtica dos resultados encontra-se na tabela 2 com os valores mdios dos teores dos elementos-trao, seus desvios padres (DP) e coeficientes de variao (CV).

CONCLUSES - Os resultados de recuperao obtidos para Cd, Ni e Pb no material GONF50, alm dos valores razoveis de CVs, credenciam o material de referncia interno para anlise confivel destes elementos. Contudo, comparaes com protocolos de diferentes laboratrios so de extrema importncia para reafirmarem os valores obtidos alm da possibilidade do estabelecimento de padronizao de novas metodologias de anlise. AGRADECIMENTOS - FAPEMIG, CNPq e CAPES.

REFERNCIAS
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