APOMIXIS: UNA HERRAMIENTA PODEROSA PARA EL MEJORAMIENTO

La apomixis es una forma de reproduccin clonal a partir de la formacin de semillas que portan un embrin genticamente idntico a la planta materna. Este modo de reproduccin aparece naturalmente en muchas especies de horqueta (Paspalum notatum) y el pasto llorn (Eragrostis curvula). plantas como las frutillas, la manzana, los ctricos, el mango, la mandioca y numerosas gramneas forrajeras como el pasto

Las plantas apomcticas no realizan las etapas normales de la reproduccin sexual: no reducen a la mitad el contenido de cromosomas durante la formacin de las clulas reproductivas (gametas), ni tampoco llevan a cabo la fecundacin, salvo para generar en algunos casos el endosperma de las semillas. Los embriones se originan a partir de clulas maternas, pero lo hacen siempre dentro de los confines del vulo. Se forma as una semilla verdadera y perfecta, que contiene adentro un individuo idntico a la planta materna.

Durante la reproduccin sexual una clula del vulo (clula madre de la megspora) inicia un proceso de reduccin meitica que concluye con la formacin de cuatro megasporas haploides. En la mayora de las angiospermas slo una de integrado por una clula huevo, dos sinrgidas, dos ncleos polares y tres antpodas. Saco embrionario reducido de un genotipo sexual de Paspalum notatum. En el extremo micropilar se observa la clula huevo rodeada por las sinrgidas. Hacia el centro del saco se observan los dos ncleos polares. En el extremo de la chalaza se observan 4 antpodas las megsporas es funcional (las dems degeneran) y se divide por mitosis para formar un saco embrionario octanucleado

Durante la reproduccin apomctica de tipo gametoftica se forma siempre un saco embrionario no reducido, cuyas clulas contienen el nmero de cromosomas tpico de las clulas somticas. Por ejemplo en la reproduccin apomctica

aposprica algunas clulas de la nucela se dividen por mitosis para formar uno o varios sacos embrionarios no reducidos, que contienen una clula huevo, las sinrgidas y ncleos polares y pueden o no poseer antpodas, segn el caso.

vulo. Se distinguen varios sacos en el mismo vulo, que se originaron en distintas clulas nucelares. Es notable la ausencia de antpodas

Sacos embrionarios no reducidos de un genotipo apomctico de Paspalum notatum. Se trata de un corte seriado del mismo

Mientras la clula huevo reducida de una planta sexual espera la fecundacin para formar el cigoto y luego el embrin, la clula huevo no reducida de las plantas apomcticas inicia la formacin del embrin por partenognesis, sin esperar la desarrolla en forma autnoma. La introduccin de la apomixis en los cultivos mayores (maz, arroz, sorgo y otros) permitira propagar en forma clonal a intergenricos con mucha facilidad, ya que la apomixis elimina las restricciones en la reproduccin que impone el fecundacin. A veces la fecundacin es necesaria para formar el endosperma (pseudogamia), pero otras veces ste se

los hbridos, perpetuando su vigor en forma indefinida. Pero tambin permitira obtener nuevos hbridos interespecficos e proceso de reduccin de cromosomas durante la formacin de las clulas reproductivas. Por otra parte, sera sencillo mantener lneas puras sin necesidad de aislamiento fsico. Se facilitara la tecnologa de transgnicos, ya que una vez de manera uniforme por la progenie. Adems, el uso programado del carcter permitira reproducir por semillas muchas especies que actualmente se propagan por mtodos vegetativos. introducido un transgen en un fondo gentico apomctico no sera necesario realizar retrocruzas para que sea heredado

La apomixis representa un beneficio potencial enorme para la agricultura de los pases en desarrollo y sus muchos posibles usos varan de acuerdo a la regin considerada. Asia necesita urgentemente nuevas variedades de sus principales duplicar su produccin en los prximos 50 aos utilizando el mismo rea de cultivo. Uno de los principales obstculos variedades mejoradas con otras salvajes portadoras de genes de inters agronmico. La introduccin de la apomixis en el cereales (principalmente arroz) que posean un mayor potencial de rendimiento que las usadas actualmente, ya que deber que enfrenta la produccin de arroz hbrido de mayor calidad es la imposibilidad de realizar cruzamientos viables de las arroz facilitara enormemente la produccin de arroz hbrido, ya que sta eliminara las etapas propias de la reproduccin innumerables generaciones. El beneficio potencial calculado para la generacin de arroz hbrido usando la tecnologa de apomixis se llevan a cabo desde hace varios aos intentos por transferir la apomixis al arroz. Sexualidad versus Apomixis Las estrategias de manipulacin de la apomixis deben desarrollarse cuidadosamente para impedir que el carcter se disperse en forma indiscriminada a variedades sexuales salvajes, disminuyendo la variabilidad gentica y el potencial evolutivo de las especies en cuestin. Las plantas utilizan la sexualidad para mantener la variabilidad gentica dentro de

sexual (que no pueden llevarse a cabo correctamente en los hbridos) y permitira propagar clonalmente a los mismos por

sus poblaciones, ya que este modo de reproduccin implica la recombinacin o rearreglo de genes durante el proceso de formacin de las clulas reproductivas (gametas) seguida de la reunin en un mismo individuo de genes recombinados Esta variabilidad es sumamente importante para la evolucin y supervivencia de las especies. Las plantas apomcticas naturales no prescinden en absoluto de las ventajas de la sexualidad. Utilizan variadas estrategias para mantener tanto su capacidad de variar cuando es necesario como de reproducirse velozmente en forma clonal si esto resulta conveniente. Muchas plantas apomcticas forman una parte de su progenie por sexualidad y otra por apomixis. Otras usan una tctica ms refinada an: presentan individuos de dos tipos diferentes, los que tienen un nmero bajo de cromosomas (diploides) se reproducen por sexualidad y los que tienen un nmero alto de cromosomas (poliploides) se provenientes de los progenitores femenino y masculino. As, cada individuo generado de la reproduccin sexual es nico.

reproducen clonalmente por apomixis. Los individuos sexuales pueden eventualmente duplicar su nmero de cromosomas y convertirse en individuos apomcticos poliploides. Esta estrategia compleja de reproduccin (conocida como estrategia Henry Ford, en memoria del creador de los conocidos automviles) le permite a la planta generar variabilidad a niveles diploides hasta producir un individuo de caractersticas superiores, cuya nmero de cromosomas es ensayando miles de modelos infructuosos hasta producir el exitossimo Ford T, que vendi por millones en todos los luego duplicado para reproducirlo muy eficientemente en forma clonal. Tal como hizo alguna vez el famoso americano

rincones del mundo. No debe extraarnos entonces que las plantas apomcticas hayan invadido y ocupado velozmente todas las reas del planeta que quedaron disponibles luego de la ltima glaciacin, y que muchas de ellas sean consideradas malezas por su muy eficiente velocidad de propagacin.

En el caso de utilizarse una tecnologa para generar hbridos clonales por la manipulacin de la apomixis es esencial confinar el carcter exclusivamente a los individuos a cultivar, evitando su dispersin descontrolada a las especies macho-estriles que no produzcan polen. La planta podra entonces reproducirse eficientemente en forma clonal, sin apomcticas autnomas, donde tanto el embrin como el endosperma son generados sin necesidad de fecundacin. Investigacin de las bases moleculares de la apomixis Como sucede con cualquier otro carcter de inters agronmico, la manipulacin de la apomixis aplicada al mejoramiento requiere de un conocimiento detallado de sus bases moleculares. O sea, cules son los genes involucrados en el desarrollo del carcter y cules las vas metablicas afectadas. salvajes. Entre las varias estrategias a utilizar para lograr este objetivo est la de introducir el carcter en individuos generar polen que pueda dispersar los genes fuera del sistema cerrado del cultivo. De hecho existen numerosas especies

Nuestro grupo se dedica a estudiar cules son los genes y las vas moleculares involucradas en la reproduccin apomctica. Este trabajo se realiza en el marco de una colaboracin entre la Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional de Rosario (FCA UNR) el CERZOS (Centro de Recursos Naturales de la Zona Semirida, CONICET, Baha Blanca) y el IBONE (Instituto de Botnica del Nordeste, CONICET, Corrientes). Inicialmente se identific el locus genmico que controla la apomixis aposprica en el pasto africano Brachiaria brizantha. Luego se llev a cabo una de Amrica. Esta caracterizacin detallada nos permiti seleccionar genotipos apropiados para obtener cruzamientos con el fin de realizar un mapa gentico completo de la especie Paspalum notatum.

caracterizacin gentica de ms de 40 accesiones del pasto apomctico Paspalum notatum, originarias de diferentes pases

familia fue generada a partir del cruzamiento entre una planta madre sexual (parental pistilado) y un dador de polen apomctico. La poblacin es segregante para el carcter apomixis. A partir de ella se gener un mapa gentico completo de especie.

Poblacin utilizada para el mapeo gentico y localizacin del locus que gobierna a la apomixis en Paspalum notatum. Esta

Paspalum notatum a nivel tetraploide y se caracteriz la regin genmica que dispara la reproduccin asexual en esta

Un mapa gentico es un esquema de la posicin que ocupan los genes dentro de los cromosomas. Utilizando marcadores moleculares se desarrollaron mapas genticos completos a nivel diploide y tetraploide.

Construccin del mapa gentico de Paspalum notatum. En la foto se observa un patrn de bandeo correspondiente a

marcadores moleculares de AFLP (Amplification Fragment Length Polymorphisms) obtenido a partir de la poblacin de mapeo. Cada calle del gel corresponde a una planta de la familia segregante utilizada.

Se determin que en P. notatum el/los gen/es que controlan la apomixis se encuentran localizados en un sector de un cromosoma que ha sufrido una alteracin (posiblemente una inversin). Los genes ubicados cerca y dentro de esta regin estn inactivados, dando origen a la apomixis. Se caracteriz a nivel molecular el desarrollo en los rganos reproductivos de plantas apomcticas de Paspalum notatum y de Eragrostis curvula (pasto llorn), comparndolo con el de las plantas sexuales. De esa manera logramos identificar numerosos genes que presentaban actividad o estaban inhibidos genmica que gobierna el carcter. Los genes descubiertos son una caja de herramientas con la que se puede intentar la expresin de los genes identificados en plantas de pasto horqueta.

(silenciados) nicamente en la planta apomctica. Algunos de estos genes se hallan localizados dentro de la regin manipular el carcter apomixis para utilizarlo en beneficio de la agricultura. Se han iniciado experimentos para modificar

INTRODUCCIN la reproduccin asexual por medio de semillas. Las plantas que presentan este tipo de reproduccin (las que se denominan plantas apomcticas) producen sus semillas sin que ocurra meiosis ni fertilizacin, por lo que sus descendientes son genticamente idnticos a la planta madre.1 Aunque desde el punto de vista evolutivo las plantas apomcticas carecen de las ventajas adaptativas que ofrece la reproduccin sexual, la apomixis permite la fijacin indefinida de genotipos altamente adaptados a su ambiente. Esta ventaja de la apomixis es -desde el punto de vista gentico- la misma que presenta la multiplicacin vegetativa. No obstante, en el caso de las plantas apomcticas los descendientes no permanecen en las inmediaciones de la planta madre, compitiendo con ella por recursos, sino que gracias a la dispersin de las semillas los nuevos individuos pueden explorar y conquistar nuevos ambientes