UNIVERSIDADE FEDERAL DA PARABA CENTRO DE CIENCIAS EXATAS E DA NATUREZA DEPARTAMENTO DE QUMICA DISCIPLINA: INT.

AOS MTODOS INSTRUMENTAIS EXPERIMENTAIS PROFESSOR: MRIO CSAR UGULINO

AULA PRTICA N 03 ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORO MOLECULAR UV-VIS: Determinao de Fe (II) usando 1,10-Fenantrolina como reagente complexante. Comparao entre mtodos.

GRUPO: Iran Ferreira Matriculas: 10811361 Frederico Bezerra 10811348 Gilmar Feliciano 10811365 Josueliton Cavalcante 10721380 Eduardo Fernandes 11128348

Sumrio
INTRODUO........................................................................................................................................ 1 INSTRUMENTAO .............................................................................................................................. 2 CALIBRAO COM PADRO EXTERNO ............................................................................................ 2 SENSIBILIDADE E LIMITE DE DETECO ....................................................................................... 2 OBJETIVOS ............................................................................................................................................ 3 REAGENTES E MATERIAIS................................................................................................................... 3 PROCEDIMENTOS ................................................................................................................................ 3 RESULTADOS E DISCUSSO ............................................................................................................... 4 CONCLUSO.......................................................................................................................................... 6 BIBLIOGRAFIA ...................................................................................................................................... 6 ANEXOS .................................................................................................................................................. 6 Preparo da soluo estoque de Fe (II) 125 mg/ L................................................................................... 6 Preparo das solues padro externo de Fe (II) 2,0; 4,0; 6,0; 8,0 e 10 mg/ L .................................... 6

INTRODUO

A luz que incide em determinada substncia pode sofrer reflexo, refrao, espalhamento ou absoro por parte do material e pode haver ou no uma parte da radiao que no sofre nenhum desses processos e o atravessa ( transmitida). A absoro ocorre em nvel molecular. Uma caracterstica das molculas possuir nveis de energia quantizados, os quais podem ser ocupados pelos eltrons. Na radiao luminosa o valor da energia depende do seu comprimento de onda. Quando a energia que a luz transporta igual diferena entre dois nveis energticos, ocorre a absoro, de modo que a energia da radiao transferida para a molcula (1). Diferentes substncias absorvem de forma distinta a radiao de um determinado comprimento de onda, possuindo o chamado espectro de absoro caracterstico. Tal diferena entre os espectros de absoro permite a identificao das substncias pela anlise da medida da intensidade de luz que atravessa a amostra, bem como a quantidade em que elas esto presentes em determinada soluo. Para encontrar uma concentrao, deseja-se medir a luz absorvida, ento se deve ajustar o equipamento emissor de modo que incida sobre a amostra apenas a luz absorvida por ela, excluindo-se os demais comprimentos de onda. Dessa forma, o que o receptor realmente mede a parte da luz que consegue passar, a que transmitida (2). Um mtodo espectrofotomtrico de anlise envolve a interao da radiao eletromagntica com a matria. As regies mais comuns do espectro eletro magntico, usadas na anlise de substncias qumicas so as UV, IV e VISVEL. Esta ltima cobrindo um intervalo de 400 a 700 nm em comprimento de onda. A absoro depende da natureza do meio, do percurso ptico, do comprimento de onda dos ftons incidentes e da concentrao dos compostos absorventes. Lambert, por volta de 1760, estudou a transmisso de luz por slidos homogneos. Beer em 1852 estendeu o trabalho de Lambert ao estudo de solues. As concluses dos pesquisadores mostram a relao entre a intensidade da radiao incidente, I0, e a intensidade transmitida, It, a concentrao do composto absorvente, C e a espessura do meio, b, esta relao a lei de Beer-Lambert: 1) ( )

Onde A chamada absorbncia e a o coeficiente de absoro por mol, o qual depende da natureza absorvente e do comprimento de onda. O fator I0/ It denominado transmitncia, T, e relaciona-se com a absorbncia da seguinte forma: 2) ( )

Como a absoro molar uma funo do comprimento de onda da radiao incidente, a transmitncia e a absorbncia so grandezas que variam com o comprimento de onda. Quantitativamente a absorbncia de uma soluo , geralmente, estudada no comprimento de onda de maior absorbncia. Para determinar tal comprimento de onda, tira-se o espectro (Absorbncia versus comprimento de onda) e observa-se em que comprimento de onda a absorbncia maior.

INSTRUMENTAO

Os instrumentos utilizados para a determinao quantitativa de espcies absorventes de radiao so diversos, mas o funcionamento de tais aparelhos pode ser dividido em duas classes os aparelhos de varredura e os aparelhos de filtro. Sendo os aparelhos que trabalham no sistema de varredura mais confiveis que os de filtro, visto que estes ltimos operam em apenas um comprimento de onda, o qual especificado pelo operador antes do incio da anlise. O comprimento de onda a ser escolhido para a realizao de determinada anlise, cujo intuito a quantificao confivel de algum analito presente na amostra, deve ser aquele em que ocorra o mximo de absoro do analito. Esta condio garante que no ocorram desvios na quantificao. Em qualquer outro comprimento de onda da radiao que no aquele correspondente ao mximo de absoro, ocorrero possveis desvios da lei de Beer- Lambert, resultando em uma quantificao imprecisa e inexata.

CALIBRAO COM PADRO EXTERNO

Padres externos so utilizados para calibrar instrumentos e procedimentos quando no h efeitos de interferncia de componentes da matriz na soluo do analito. Uma srie desses padres externos contendo o analito em concentraes conhecidas preparada. A calibrao realizada obtendo-se o sinal de resposta (absorbncia, altura do pico, rea do pico) como uma funo da concentrao conhecida do analito. Uma curva de calibrao preparada colocando-se os dados em forma de grfico ou ajustando-os por meio de uma equao matemtica adequada, como a relao linear utilizada no mtodo dos mnimos quadrados. Ento a concentrao do analito na amostra original calculada a partir de c d pela aplicao dos fatores de diluio apropriados decorrentes das etapas de preparao da amostra (SKOOG, WEST, HOLLER, & CROUCH).

SENSIBILIDADE E LIMITE DE DETECO

A definio mais frequentemente utilizada de sensibilidade a sensibilidade da calibrao, ou a variao no sinal de resposta pela variao da concentrao do analito. A sensibilidade da calibrao , portanto, a inclinao da curva de calibrao. Se a curva de calibrao for linear, a sensibilidade ser constante e independente da concentrao. Se a curva de calibrao no for linear, a sensibilidade variar com a concentrao e no tem um valor nico. A sensibilidade da calibrao no indica quais as diferenas de concentrao que podem ser detectadas. O rudo presente nos sinais de resposta precisa ser considerado a fim de que se possa expressar quantitativamente as diferenas passveis de serem detectadas. Por essa razo, algumas vezes o termo sensibilidade analtica utilizado. A sensibilidade analtica a razo entre a inclinao da curva de calibrao e o desvio padro do sinal analtico a uma dada concentrao do analito. A sensibilidade analtica , geralmente, fortemente dependente da concentrao. O limite de deteco (LD) a menor concentrao que pode ser distinguida com certo nvel de confiana. Toda tcnica analtica tem um limite de deteco. Para os mtodos que empregam uma curva de calibrao, o limite de deteco definido como a
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concentrao analtica que gera uma resposta com um fator de confiana k superior ao desvio padro do branco, Sb, o limite de deteco de uma anlise dado por: 3) Onde m a sensibilidade da calibrao, o coeficiente angular, no caso de uma reta (SKOOG, WEST, HOLLER, & CROUCH).

OBJETIVOS

Determinar a sensibilidade de dois aparelhos utilizados em espectrometria molecular UV-VIS. Sendo uma aparelho de filtro MICRONAL e um aparelho de varredura hp, ambos usados em um comprimento de onda fixado.

REAGENTES E MATERIAIS

Materiais Erlenmeyers Pipetas graduadas e volumtricas Bqueres Bales volumtricos Cubetas de quartzo Espectrofotmetros UV-VIS MICRONAL e hp.

Reagentes 100 mL de soluo 0,25% de 1,10 - fenantrolina. 250 mL de soluo de Fe SO4 a 125 mg / L. 100 mL de soluo de NaCH3COO a 2 mol/ L. Solues padres de Fe (II) de concentraes 2,0; 4,0; 6,0; 8,0 e 10 mg/ L. Solues problema A e B so gua da torneira e gua deionizada, respectivamente. Soluo padro de branco (gua destilada). Devido ao fato de as solues de fenantrolina e acetato de sdio terem sido preparadas previamente, sero expostos aqui (Anexos) apenas os dados e clculos utilizados na preparao da soluo estoque e dos padres de FeSO4.

PROCEDIMENTOS

Foram preparadas as solues estoque e padres de FeSO4 (Anexos). Com os padres preparados, utilizou-se uma pipeta volumtrica de 50 mL transferiu-se a soluo padro de 2,0 ppm de Fe(II) para um erlenmeyer, aps esta etapa foram adicionados 0,3 mL de acetato

de sdio e 4 mL de fenantrolina. O processo fora repetido para as outras solues padro e para as amostras A e B. Os padres e as amostras foram analisados no aparelho MICRONAL e no hp, os valores obtidos de absorbncia nos dois aparelhos foram anotados. Por fim os valores obtidos de absorbncia, dos padres, foram relacionados com a concentrao dos mesmos de modo a obter-se a curva de calibrao e com esta calcular as concentraes das amostras problema A e B, de acordo com os dados fornecidos pelos dois aparelhos.

RESULTADOS E DISCUSSO

Os valores obtidos para a absorbncia e concentrao das solues padro de Fe (II), bem como os valores de absorbncia das amostras problema, obtidos em ambos os aparelhos so mostrados na Tabela 1. Tabela 1 Absorbncia das solues padro e problema, obtidos nos aparelhos utilizados e a concentrao fixadas das solues padro. Absorbncia Solues [Fe(II)] (mg/ L) hp Micronal 2 0,32524 0,32 p1 4 0,65549 0,619 p2 6 0,97774 0,879 p3 8 1,2746 1,081 p4 10 1,5954 1,24 p5 2,02E-02 0,006 A Amostras 1,72E-03 0 B Os valores de absorbncia para cada uma das solues padro, obtidas nos aparelhos MICRONAL e hp, foram utilizados na construo do grfico de absorbncia versus concentrao. Os grficos obtidos (curvas de calibrao) para os dois aparelhos so mostrados na Figura 1.

1,6 1,4 1,2

Absorb. hp Linear Fit of Absorb. hp

1,6 1,4 1,2 1,0 0,8 0,6

1,0 0,8 0,6 0,4 0,2 2 4 6 8 10

Absorb. MICRONAL Linear Fit of Absorb. MICRONAL

0,4 0,2

[Fe(II)] (mg/ L)

Figura 1 Grficos de absorbncia Vs concentrao, obtidos com os aparelhos MICRONAL e hp. A equao da reta obtida pelo mtodo dos mnimos quadrados bem como os valores de R2 para os aparelhos MICRONAL e hp, so mostradas abaixo. MICRONAL [ ( )]

Hp

( )]

Segundo as fontes consultadas, a melhor curva de calibrao fora a obtida com o aparelho hp, visto que a mesma apresenta um maior valor de coeficiente angular (SKOOG, WEST, HOLLER, & CROUCH). As concentraes das solues problema foram calculadas utilizando-se os valores das duas curvas de calibrao. A Tabela 2 mostra os valores obtidos. Os resultados se mostraram interessantes, porm dentro da expectativa, principalmente para o aparelho hp, cujo valor negativo fora encontrado apenas para a concentrao da amostra B. Isto mostra a importncia de se escolher o branco da anlise de forma adequada, neste estudo o branco adotado fora a gua destilada, logo o valor da absorbncia para a amostra B, obtida com o aparelho hp, caiu muito abaixo do valor mnimo estipulado pela curva de calibrao, que o valor do coeficiente linear. Para os valores calculados a partir da curva de calibrao resultante das anlises com o aparelho MICRONAL ambos os valore, A e B foram negativos, o que ressalta a deficincia do aparelho para determinaes quantitativas.

Absorb. MICRONAL

Absorb. hp

Tabela 2 Valores calculados para as solues problema A e B, utilizando o mtodo da curva de calibrao. Concentrao das Solues problema Amostra hp MICRONAL 0,014749636 -1,139878367 A -0,102234602 -1,19200695 B

CONCLUSO

O aparelho hp mostra uma sensibilidade maior para a quantificao; O branco utilizado na calibrao do aparelho deve apresentar a menor quantidade possvel do analito; Os valores negativos das concentraes das amostras problema, so devidos aos valores dos coeficientes lineares das duas curvas de calibrao.

BIBLIOGRAFIA
1. (s.d.). Acesso em 28 de abril de http://plato.if.usp.br/~fap0181d/texts/espectro-2006.pdf 2012, disponvel em

2. (s.d.). Acesso em 28 de abril de 2012, http://www.ifrj.edu.br/aluno/a/instrumental/espectrofotometria.pdf

disponvel

em

SKOOG, WEST, HOLLER, & CROUCH. (s.d.). Fundamentos de Qumica Analtica. Thomson.

ANEXOS

Preparo da soluo estoque de Fe (II) 125 mg/ L A soluo estoque de Fe (II) foi preparada pesando-se 0,1558 g de FeSO4 . 7H2O que foi ento dissolvido em um pouco de gua destilada com 2,5 mL de H2SO4, a soluo foi ento transferida para um balo volumtrico e adicionou-se gua destilada at que se completasse o volume de 250 mL de soluo. Preparo das solues padro externo de Fe (II) 2,0; 4,0; 6,0; 8,0 e 10 mg/ L Partindo da soluo estoque de Fe (II), preparada na etapa anterior foram calculados os volumes das alquotas a serem retirados da soluo inicial para que o preparo das solues estoque pudesse ser realizado. Os clculos usados foram apenas de diluio de soluo, para

evitar repetio de clculos ser mostrado aqui o procedimento de preparo apenas da soluo padro 2,0 mg/ L de Fe (II) partindo da soluo estoque 125 mg/ L. Nessa etapa fora utilizado o conhecido clculo para preparo de solues por diluio de uma soluo de concentrao conhecida. 1 - A) Onde C1 a concentrao em mg/ L da soluo estoque, V1 o volume da alquota a ser retirado da soluo estoque, C2 a concentrao da soluo padro em mg/ L e V2 o volume desejado para a soluo padro. Aqui V2 foi de 50 mL para todos os padres, C1 fora 125 mg/ L e C2 fora 2, 4, 6, 8 e 10 mg/ L. Para o primeiro padro C2 = 2,0 mg/ L, logo, o rearranjo da equao (1) nos leva a, ( ) 2 - A) A substituio dos valores conhecidos de C1, C2 e V2 nos fornece o valor de V1. ( )

Os clculos adotados para o preparo dos padres restantes so idnticos ao mostrado aqui. Os valores dos volumes das alquotas necessrios para o preparo dos padres so mostrados em vermelho na Tabela 1A. Tabela 1A Valores calculados para o volume das alquotas utilizados no preparo dos padres de Fe (II).
C1 (mg/ L) 125 125 125 125 125 Preparo dos padres V1 (L) C2 (mg/ L) 0,008 2 0,016 4 0,024 6 0,032 8 0,04 10 V2 (L) 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5

Com uma pipeta graduada, de volume compatvel com o da alquota, retirou-se a quantidade necessria para o preparo da soluo padro, que no caso do padro 2,0 mg/ L fora de 8 mL da soluo estoque o volume da alquota foi transferido para um balo volumtrico de 50 mL e o volume foi completado at a aferio no menisco. O procedimento de preparo do restante das solues padro foi o mesmo descrito aqui.