LABORATORIO DE ALIMENTOS REUNION POR LA DIRECCION 2012 Marcela Caro Gallardo

CONTROL DE CALIDAD
Esquema 1: Control calidad material laboratorio

Detergente EXTRAN (Merck) ALCALINO

Control residuos detergente

Residuos inhibidores

Material de vidrio (Cada lote lavado)

Lote nuevo de detergente

Control residuo detergente: Frecuencia: Diaria, se verifica rutinariamente el procedimiento de lavado con Azul de
bromotimol 0.04%.

Anlisis: NCh 2047 Resultados: Solo hay un hallazgo desfavorable (16/06/2011) con una partida de tubos de
ensayos nuevos que se probaron, los cuales fueron devueltos al proveedor. Grafico 1: Control residuo detergente

Satisfactorio

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Tabla 1: Test de residuos inhibitorios 2010 Detergente Suma F4 Suma F4 Extran MA01 Lote ----------1007628 1025 Fecha ensayo 11/02/2010 12/07/2010 15/12/2010 Resultado Satisfactorio Satisfactorio Satisfactorio

Tabla 2: Test de residuos inhibitorios 2011 Detergente Extran MA01 Extran MA01 Lote 1110 1137 Fecha ensayo 11/07/2011 23/11/2011 Resultado Satisfactorio Satisfactorio

Frecuencia: Semestral, la cual esta dada por la cantidad conocida gastada en el laboratorio de
microbiologa. Se adquieren 2 bidones de 30 litros cada uno, 2 veces al ao.

Anlisis: NCh 2047, NCh 2313/5 Resultados: Se decide trabajar con el detergente Extran desde fines del 2010 en adelante por que
no tiene efectos irritantes tan nocivos para el usuario como era el caso del detergente Suma F4. Para los 2 ensayos realizados el ao 2011, los resultados fueron satisfactorios por lo tanto se concluye que el detergente EXTRAN MA01 no produce efecto inhibitorio sobre la flora microbiana, su calidad esta comprobada por el fabricante a travs de la validacin de este producto por medio de determinacin fotomtrica.

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Tabla 1: Cepas de reserva laboratorio de microbiologa

Microorganismo
Staphylococcus epidermidis Staphylococcus aureus subsp aureus Enterobacter aerogenes Listeria monocytogenes (serotipo 4b) Listeria innocua (serotipo 6a) Escherichia coli Vibrio parahaemolyticus Aspergillus brasiliensis (niger)
Salmonella entrica subsp. entrica serovar Enteritidis (Grupo D)

Coleccin
ATCC 12228 ATCC 25923 ATCC13048 ATCC 13932 ATCC 33090 ATCC 25922 ATCC 17802 ATCC 16404 ATCC 13076 ATCC 13124 ATCC 6633 ATCC 19433 ATCC 27853 ISP 4117-90 ATCC 23357 ISP
Servicio Salud Vald.

Lote
37124 36079 30610 12910 81467 33550 81851 39209 34587 31836 48648 36797 35336 75617 68830 25619

Fecha de recepcin
08/07/2010 08/07/2010 08/07/2010 03/08/2010 08/07/2010 08/07/2010 08/07/2010 08/07/2010 08/07/2010 08/07/2010 08/07/2010 08/07/2010 08/07/2010 17/02/2011 6/04/2011 6/04/2011 2007 06/2007 2006 17/06/2008

Clostridium perfringens Bacillus subtilis subsp spizizenii Enterococcus faecalis Pseudomona aeruginosa Salmonella Thyphimurium (H2S negativa) Klebsiella pneumoniae Escherichia coli O:157,H7 Vibrio cholerae Enterobacter sakazakii Micrococcus luteus Bacillus cereus

ATCC 51329 ATCC 9341 ATCC 11778

Frecuencia: Se adquiere una nueva coleccin cada vez que se agoten las cepas de reserva del
microrganismo en cuestin. Anlisis: 1. Viabilidad: Siembra en superficie del micoorganismo en agar no selectivo. 2. Pureza: Observacin microscpica del cultivo, teido por el mtodo Gram. 3. Identidad: Pruebas bioqumicas. Resultados: Satisfactorios en un 100% de los casos.

Grafico 1: Cepas de trabajo reconstituidas mensualmente laboratorio de microbiologa

Bacillus Subtilis Micrococus Luteus

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Frecuencia: Mensual
Anlisis: 4. Viabilidad: Siembra en superficie del micoorganismo en agar no selectivo. 5. Pureza: Observacin microscpica del cultivo, teido por el mtodo Gram. 6. Identidad: Pruebas bioqumicas. Resultados: Satisfactorios en un 100% de los casos. La correcta reconstitucin y manipulacin del cepario es punto crtico de control para el desarrollo de los ensayos.

Grafico 2: Comparacin control de calidad cepas de referencia y cepas de trabajo 2010-2011

Esquema 1: Control calidad agua destilada

Agua destilada

pH

Conductividad (S)

Cloro total (Mg/l)

Hetertrofas (Ufc/mL)

TOC (Mg/L)

Metales Pesados

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Tabla 1: Resumen resultados control de calidad del agua para anlisis Parmetros Limites segn normativa pH 5-7 Conductividad 2 s Cloro No detectado 0.01mg/l Hetertrofas < 1000 ufc/ml Toc < 1 mg/l Metales Pesados 0.05 mg/l Frecuencia Diario Diario Diario Mensual Semestral Anual 2010 X 6.08 1.36 0.04 21 0.17 Satisfactorio 2011 Max Min 7.4 5.05 1.980 1.109 0.1 0.00 88 2.27 X 6.11 1,492 0.02

0 20 0.1 0.5 Satisfactorio

Anlisis: NCh 426/2.Of97

Resultados: pH= En trminos generales el control del pH en el agua destilada del laboratorio es satisfactorio, lo cual se demuestra por que el promedio a lo largo de los 2 ltimos aos son similares y se encuentran en la media del limite establecido. Solo existe una desviacin de un pH =7.4, que en el rea microbiolgica no afect en el ph de los medios de cultivo preparados ese da. Cloro= El laboratorio no cumple con este parmetro, en Diciembre 2011 se realizo un nuevo estudio en el cual se determino cloro total en distintos das y distintos horarios con agua destilada de diferentes autoclavados, con lo cual se quera probar que al hervir el agua bajara el valor de cloro. El resultado arrojo un IDL=0.04, por lo tanto esto no prueba que el agua destinada a anlisis microbiolgico cumpla con este requisito de calidad. La accin a seguir es incorporar un filtro de carbono activado al destilador, que tiene la propiedad de remover cloro y materia orgnica.

Tabla 2: Resumen resultados control de calidad del agua para anlisis Fecha 31.01.2011 15.02.2011 10.03.2011 06.04.2011 16.05.2011 22.06.2011 14.07.2011 17.08.2011 27.10.2011 27.10.2011 TOC <0.10 0.60 0.13 0.15 <0.10 2.27 1.60 <0.1 0.18 <0.20 RAM 8 22 11 16 5 88 48 14 1 1

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30.11.2011 0.50 9

TOC= La tabla demuestra que los valores de TOC obtenidos mensualmente son proporcionales a los resultados de RAM. Considerando esto, se puede concluir que en aquellas situaciones en que el nivel de TOC ha superado los estndares de control de calidad establecidos, no ha generado mayores implicancias en los ensayos microbiolgicos, lo cual se puede verificar en el control de calidad rutinario de los medios de cultivo. Tabla 3: Tiempos de respuesta laboratorio Sernageomin Laboratorio Sernageomin Sernageomin Identificacin Muestra 22.06.2011 14.07.2011 Fecha envo 22.06.2011 14.07.2011 Fecha inicio ensayo 01/07/2011 02/08/2011 Fecha recepcin informe 18/08/2011 31/08/2011

Tabla 4: Evaluacin para estimacin de frecuencia de control Laboratorio Sernageomin Sernageomin Hidrolab Anam Identificacin Muestra 082011 102011 102011 112011 Fecha envo 17/08/11 27/10/11 27/10/11 30/11/11 Fecha inicio ensayo 26/11/11 15/11/11 29/10/11 14/12/11 Fecha recepcin informe 08/09/11 18/11/11 07/11/11 19/12/11 Tiempo respuesta 22 dias 18 dias 10 dias 19 dias

A raz de los tiempos de respuesta de este anlisis, se decide enviar muestras a los 3 laboratorios del pas que tienen acreditado este examen, llegando a la conclusin que el tiempo mnimo de respuesta es de 10 das, lo cual sigue siendo un lapso de tiempo que no permite tomar medidas oportunas en el caso de que se obtengan resultados fuera de limite, por todo lo anterior, se determina que la frecuencia del control ser SEMESTRAL, para todo el laboratorio.

Esquema 1: Control calidad laboratorio Microbiolgico

Control calidad laboratorio Microbiologa

Ambiental

Superficies

Material Vidrio
6

Placas ambiente

Torulado

Incubacin caldo

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Control Ambiental:
Frecuencia: Mensual Tabla 1: Puntos de control del ambiente de trabajo 2011 PUNTOS DE MUESTREO EneroMayo 2011 Laboratorio Microbiologa Gabinete bioseguridad Laboratorio hongos Sala pesaje muestras Junio en adelante Laboratorio Microbiologa Gabinete bioseguridad Laboratorio hongos Sala pesaje muestras

Sala estufas Sala balanzas Anlisis: Standard Methods 21 th Ed. Grafico 1: Resultados del control de Recuento aerobios mesofilos en ambientes de trabajo

Grafico 2: Resultados del control de Mohos en ambientes de trabajo

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MOH OS

Resultados: El recuento de aerobios mesofilos es satisfactorio ya que todos los resultados

obtenidos se encuentran por debajo del lmite permitido. En el caso del control de mohos en el ambiente, se detecta un caso que excede el lmite permitido, se da la instruccin al personal auxiliar de laboratorio de hacer una limpieza profunda a la sala y posteriormente se repite el ensayo, dando como resultando 1 UFC/15Minutos.

Control Superficies:
Frecuencia: Mensual Anlisis: Standard Methods 21 th Ed. Tabla 2: Puntos de control de superficies de trabajo 2011 PUNTOS DE MUESTREO EneroMayo 2011 Laboratorio Microbiologa Gabinete bioseguridad Laboratorio hongos Sala pesaje muestras Junio en adelante Laboratorio Microbiologa Gabinete bioseguridad Laboratorio hongos Sala pesaje muestras

Sala estufas Sala balanzas

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Resultados: Tabla 3: Resultados control de superficies de trabajo 2011 en todos los puntos del laboratorioControl de superficies 2011 Promedio Ram (ufc/cm2) 0.06 Ufc/cm2 Limite permitido <2 Ufc/cm2

Los resultados del control de esterilidad de las superficies de trabajo demuestran que las actividades de limpieza e higiene son efectivas.

Material de vidrio:
Frecuencia: Mensual Anlisis: Standard Methods 21 th Ed. Resultados: Esquema 2: Resultados control de calidad a material de vidrio ao 2011

Placas

Rastrillos 100% Satisfactorio

Pipetas 100% Satisfactorio

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Grafico 3: Comparacin 2010-2011 resultados control de calidad de ambiente, superficies de trabajo y material de vidrio.

201 0 201

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Ensayos intralaboratorio rea Microbiologa:

Tabla 1: Ensayos intralaboratorio rea microbiologa 2010-2011 Tipo de ensayo Error Personal Reproducibilidad Analistas Evaluacin doble cierre en conservas NMP Coliformes totales, fecales y E.coli en agua residual Anlisis NCh 2659 Of 2002 NCh 2659 Of 2002 NCh 2701 Of 2002 Standard Methods Frecuencia Mensual Semestral Semestral Semestral Ensayos 2010 11 2 2 ---Ensayos 2011 11 (falto Abril) 2 2 2

Resultados:
Tabla 2: Resultados error personal 2010-2011 Error personal 2010 2011 Satisfactorio 100 % Satisfactorio 100%

Tabla 3: Resultados repetibilidad y reproducibilidad analistas 2010-2011 Ensayo Reproducibilidad Repetibilidad Reproducibilidad Repetibilidad Fecha Mayo 2011 Mayo 2011 Noviembre 2011 Noviembre 2011 Matriz Chorito Carne Longaniza Resultados <0.3 log 10 <0.3 log 10 <0.3 log 10 <0.3 log 10

Reproducibilidad Analistas 2010 2011 Satisfactorio 100% Satisfactorio 100%

Tabla 4: Resultados evaluacin doble cierre 2010-2011 Ensayo Fecha Matriz Resultados

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Reproducibilidad Repetibilidad Reproducibilidad Repetibilidad Mayo 2011 Mayo 2011 Octubre 2011 Octubre 2011 Conserva Conserva Satisfactorio Satisfactorio Satisfactorio Satisfactorio

Evaluacin doble cierre conservas 2010 2011 Satisfactorio 100 % Satisfactorio 100% Para evaluar reproducibilidad se elaboran grficos de control (I-Chart) a partir de las mediciones realizadas por la analista con ms experiencia. Para evaluar repetibilidad se compara DS (desviacin estndar), CV (coeficiente de variacin), e (incertidumbre). Tabla 5: Resultados NMP en agua 2010-2011

Ensayo NMP Agua residual NMP Agua residual NMP agua residual

Fecha Julio 2011 Noviembre 2011 Diciembre 2011

Matriz Agua residual Agua residual Agua vertiente

Resultados Satisfactorio Satisfactorio Insatisfactorio * Satisfactorio

* El ensayo no se realiza dentro de los tiempos estipulados por una de las analistas de acuerdo a lo que exige la normativa de la tcnica, por lo tanto el intralaboratorio queda nulo y se repite a la semana siguiente. NMP Agua Residual 2010 2011 --Satisfactorio 100%

Del total de ensayos realizados el ao 2011 el 100% concluy con resultados satisfactorios.

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Ensayos aptitud realizados en el rea Microbiologa durante el ao 2011

Tabla 1: Resultados Ensayos aptitud realizados en el rea Microbiologa durante el ao 2011 Fecha Mayo Mayo Agosto Proveedor PEEC/ISP LACM PEEC/ISP Ensayo Deteccin de Salmonella spp y Listeria spp Recuento de Bacillus cereus en productos lcteos Enumeracin de S.aureus y recuento aerobios mesfilos Recuento de microrganismos a 30C en productos lcteos Enumeracin de enterobacterias, coliformes, E.coli Tipo ensayo Cualitativo Cuantitativo Cuantitativo Resultados Satisfactorio Satisfactorio Satisfactorio

Septiembre

LACM

Cuantitativo

Satisfactorio

Octubre

PEEC/ISP

Cuantitativo

Satisfactorio

Grafico 1: Comparacin resultados Ensayos aptitud realizados en el rea Microbiologa ao 20102011

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Se concluye que el ao 2011 se mejoro y se logro obtener resultados satisfactorios en el 100% de los casos.

Evaluacin de posibilidades de mejorar en infrastructura fisica y equipos

Tabla 1: Equipos e instrumentos adquiridos durante el ao 2011 Fecha Enero Febrero Marzo Abril Mayo Noviembre Equipo/Instrumento Autoclave Grabadora Bao termorregulado Aire acondicionado Aire acondicionado Horno microondas Lmpara UV Computador Micrmetro Marca/Modelo Huxley Sony Memmert WNB29 L6100375 Konhe, Split KFR 25 GW Konhe, Split KFR 32 GW Sindelen, MG-3000 NG UVP,UVL-21 GA-M68MT-S2 Mitutoyo 147-103 CSM3-13 Valor $ $3.804.394 $39.990 $1.831.050 $59.990 $120.600 $204.246 $77.304

Equipos dados de baja durante el periodo 2011

En el periodo 2011 se da de baja un equipo de aire acondicionado ubicado en la sala de estufas de cultivo.

Evaluacin de los prestadores de servicios de mantencin y reparacin

Tabla 2: Evaluacin prestadores de servicios 2011 Nombre Prestador de servicio Cesmec (Calibracin) Cientec Equilab Meldic Servicios Jeay Dictuc Bice ingenieria Jorge Risco Sigisfredo Fernandez Evaluacin 2011 87.5% 80% 83% 100% 100% 85% 95% 87.5% 68.75%

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Grafico 1: Evaluacin prestadores de servicios en el rea Microbiologa 2011

De los proveedores que realizan mantencin preventiva, alcanzaron la mejor evaluacin Servicios Jeay y Meldic con un 100% de todos los aspectos solicitados.

Grafico 2: Comparacin evaluacin prestadores de servicios en el rea Microbiologa 2010-2011

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En relacin con el ao 2010, el 2011 aumento el nmero de prestadores, y la evaluacin de todos los externos (Equilab, Meldic, Servicios Jeay) mejoraron su valoracin, mientras que los internos (Jorge Risco y Sigisfredo Fernndez), bajaron su calificacin , bsicamente esto se debe a los tiempos de respuesta a los requerimientos del laboratorio.

Deteccin de necesidades de capacitacin y entrenamiento del personal

Evaluacin del programa de capacitacin y de entrenamiento de personal contratado o con nuevas funciones 2011 Marcela Caro Gallardo Analista Microbiologa Jefe tcnico rea Microbiologa (Noviembre)

Se efectu capacitacin en los siguientes puntos: Curso microbiologa y qumica de los alimentos y agua (1Modulo diplomado en inocuidad de alimentos) Programa induccin analista microbiologa Programa induccin Jefe tcnico Capacitacin en metodologas del Programa de Reduccin de patgenos SAG Entrenamiento en ensayos de evaluacin de cierre en envases de hojalata. Anlisis organolptico de productos hidrobiolgicos en conserva Aseguramiento de calidad y pruebas de control de calidad de los medios de cultivo Iso 11133 Para todos los tems el resultado de las capacitaciones fueron satisfactorias En la revisin por la direccin del ao 2010, se detecto debilidad del personal tcnico del rea en algunos aspectos, por lo cual se considero necesario capacitar en: Tabla 1: Capacitacin personal microbiologa 2011

Curso capacitacin Entrenamiento en el uso de ordenes de trabajo Entrenamiento en recepcin de muestras qumicas Entrenamiento en anlisis microbiolgico de conservas Capacitacin en el calculo e interpretacin de resultados

Dirigido a: Auxiliares y Jac Auxiliares y Jac Analistas Analistas

Evaluacin En continua supervisin En continua supervisin Satisfactorio Satisfactorio

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Grafico 1: Anlisis y evaluacin de las calificaciones del personal

Todas las evaluaciones fueron satisfactorias ya que se encuentran sobre el porcentaje mnimo
exigido del 75% (PG12), con esto se comprueba que es correcto el desempeo de las funciones definidas para cada cargo y persona en particular.

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Nuevas necesidades de mtodos rea microbiologa:

Tabla 1: Ensayos nuevos ofrecidos durante el periodo 2011 Ensayos Salmonella spp mtodo tradicional USDA/FSIS Recuento de Coliformes y E.coli Tcnica del petrifilm Tabla 2: Ampliacin alcance INN Ensayos Recuento de Clostridium perfringens (incluidas las esporas) Deteccin y enumeracin de Enterococos fecales mediante el mtodo filtracin por membrana Salmonella spp mtodo tradicional USDA/FSIS Recuento de Coliformes y E.coli Tcnica del petrifilm Norma/especificacin Directiva 98/83/CE del consejo, 3 Noviembre 1998 anexo III Iso 7899-2 USDA/FSIS Microbiology Laboratory Guidebook Cap.4.02 AOAC 991.14 o 998.08 Producto a que se aplica Aguas destinadas a consumo humano y aguas Aguas de consumo humano y aguas tratadas Carnes, productos crnicos, esponjas y muestras de enjuague, huevo y productos derivados del huevo. Carnes, productos crnicos, esponjas y muestras de enjuague Acreditacin ----INN Nueva acreditacin SAG SAG

Se encuentra en espera la autorizacin u acreditacin de estos ensayos. En el ao 2011 se realiz un estudio de la normativa ISP, concluyendo que se deba implementar la tcnica de Deteccin de Salmonella PRT-712.02-012 y las pruebas bioqumicas de 2 tcnicas: Deteccin de Vibrio Cholerae, PRT-712.02-014 y Deteccin de Listeria Monocytogenes PRT712-02-003. Estas tcnicas se queran incluir en la ampliacin de la acreditacin INN 2012 pero por motivos de fuerza mayor, no se pudieron agregar por lo tanto solo se cuenta con la acreditacin antigua segn manual ISP 1998. Tabla 3: Ensayos no realizados durante el periodo 2011 Ensayo Recuento de bacterias aerobias mesfilas viables a 30 Determinacin de coliformes y coliformes fecales y Escherichia Norma ICMSF 2 edicin 1978 NCh 2732.Of 2002 Producto a que se aplica Producto hidrobiolgico, alimento en general Moluscos bivalvos vivos

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coli Determinacin de anaerobios sulfitos reductores Determinacin de aerobios mesfilos a 32C Determinacin de Estreptococos fecales

NCh 2730.Of2002 NCh 204.Of1998 NCh 2658.Of 2002

Productos hidrobiolgicos Leche cruda Aguas crudas, aguas residuales y sedimentos no tratados y clorados.

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