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EVALUACIN DE DESINFECTANTES USADOS EN EL HOSPITAL OBRERO DE LA CIUDAD DE LA PAZ SOBRE MICROORGANISMOS CAUSANTES DE INFECCIONES NOSOCOMIALES 1.

RESUMEN La implicacin higienicosanitaria y epidemiolgica que acarrea la existencia de bacterias patgenas en el medio hospitalario tiene gran significacin si consideramos que la circulacin de estos microorganismos constituye un peligro potencial para la salud, el estudio sobre la efectividad de los desinfectantes usados en los hospitales resulta ser importante y necesario para perfilar recomendaciones y as unificar los criterios en esta temtica. El objetivo de este trabajo fue evaluar los desinfectantes usados en el Hospital Obrero de la ciudad de La Paz sobre microorganismos causantes de infecciones nosocomiales. Se aplic la prueba de CIM (concentracin mnima inhibitoria) con los siguientes microorganismos: Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa. Los materiales usados para la prueba fueron: 22 tubos de ensayo, 2 pipetas, jeringas: 10ml -1ml, caldo MUELLER-HINTON, agua destilada, fenol 2%- 1%, hipoclorito de sodio 1%- 0,5%. Un asa bacteriologica Palabras Clave: resistencia bacteriana desinfectantes - Infeccin nosocomial

2. INTRODUCCION.
Las infecciones nosocomiales ocurren en todo el mundo y afectan a los pases desarrollados y a los carentes de recursos, las infecciones contradas en los establecimientos de atencin de salud estn entre las principales causas de defuncin y de aumento de la morbilidad en pacientes hospitalizados, la limpieza y la desinfeccin, constituyen, junto con la esterilizacin, los elementos primarios y ms eficaces para romper la cadena epidemiolgica de la infeccin. Se piensa comnmente que los desinfectantes y antispticos no son selectivos y tienen un espectro continuo e inespecfico de actividad, a veces se desconocen y no se aplican en la prctica mdica hospitalaria los requisitos mnimos que condicionan la eficiencia de los procesos, lo que genera una situacin problemtica que tiene como mayor exponente la resistencia intrnseca y extrnseca de los productos a cepas de bacterias circulantes en el hospital. Tanto Staphylococcus aureus como Pseudomonas son causantes de infecciones nosocomiales el primero como uno de lo microorganismos mas frecuentes y el segundo asociado a varios casos de resistencia a desinfectantes, ambos utilizados como referencia en pruebas de resistencia y susceptibilidad de desinfectantes. Los desinfectantes utilizados actan de manera diferente para destruir a un microorganismo: El fenol daa la integridad estructural de la membrana (es decir, la disposicin ordenada de lpidos y protenas), de modo que interfieren con su funcin, ejerciendo un efecto neto de Interferencia con procesos de transporte y metabolismo energtico, salida de pequeas molculas de la clula; el hipoclorito de sodio como agente oxidante se caracteriza, en general, por alterar grupos que forman parte de los centros activos de enzimas y otras protenas y alterar grupos funcionales de cidos nucleicos, componentes de pared y de membrana. La creciente resistencia bacteriana constituye un problema actual y cada ves de mayor frecuencia, por lo que se hace necesario incorporar pruebas con desinfectantes para un conocimiento mas amplio con respecto al tema. 3. MARCO TEORICO. Los estudios realizados alrededor del mundo documentan que las infecciones nosocomiales son una importante causa de morbilidad y mortalidad. Una elevada frecuencia de infecciones nosocomiales

comprueba la calidad deficiente de la prestacin de servicios de atencin de salud y ocasiona costos evitables. Muchos factores contribuyen a la frecuencia de las infecciones nosocomiales: los pacientes hospitalizados sufren a menudo compromiso inmunitario, se someten a exmenes y tratamientos invasivos y las prcticas de atencin de los pacientes y el medio del hospital pueden facilitar la transmisin de microorganismos entre ellos. La limpieza y la desinfeccin, constituyen, junto con la esterilizacin, los elementos primarios y ms eficaces para romper la cadena epidemiolgica de la infeccin. Para comprender la relevancia de estos factores en relacin con la aparicin de la infeccin nosocomial es preciso comprender cmo se desarrolla y cules son sus determinantes. La infeccin hospitalaria constituye un tema de extraordinaria actualidad por su frecuencia, gravedad y repercusin econmica, y viene condicionada por tres determinantes principales: el husped, el agente patgeno y el propio ambiente hospitalario. Si el husped resulta muy susceptible, el germen es muy virulento y las condiciones de saneamiento ambiental son deficitarias, la infeccin nosocomial ocupar un lugar preferente en el hospital1.

A continuacin se citan los agentes patgenos nosocomiales ms comunes. Es preciso hacer una distincin entre los siguientes:

Bacterias comensales encontradas en la flora normal de las personas sanas. Tienen una importante funcin protectora al prevenir la colonizacin por microorganismos patgenos. Algunas bacterias comensales pueden causar infeccin si el husped natural est comprometido. Por ejemplo, los estafilococos cutneos negativos a la coagulasa pueden causar infeccin del catter intravascular y Escherichia coli intestinal es la causa ms comn de infeccin urinaria. Las bacterias patgenas tienen mayor virulencia y causan infecciones (espordicas o endmicas), independientemente del estado del husped. Por ejemplo: Los bastoncillos grampositivos anaerobios (por ejemplo, Clostridium) causan gangrena. Las bacterias grampositivas: Staphylococcus aureus (bacterias cutneas que colonizan la piel y la nariz del personal de los hospitales y de los pacientes) causan una gran variedad de infecciones pulmonares, seas, cardacas y sanguneas y a menudo son resistentes a los antibiticos; los estreptococos beta-hemolticos tambin son importantes. Las bacterias gramnegativas: Las bacterias de la familia Enterobacteriaceae (por ejemplo, Escherichia coli, Proteus,Klebsiella, Enterobacter, Serratia marcescens) pueden colonizar varios sitios cuando las defensas del husped estn comprometidas (insercin de un catter o de una cnula, sonda vesical) y causar infecciones graves (del sitio de una intervencin quirrgica, los pulmones, el peritoneo, bacteriemia). Pueden ser sumamente resistentes. Los microorganismos gramnegativos como Pseudomonas spp. a menudo se aslan en agua y en zonas hmedas. Pueden colonizar el aparato digestivo de los pacientes hospitalizados.

Otras bacterias determinadas representan un riesgo singular en los hospitales. Por ejemplo, la especie Legionella puede causar neumona (espordica o endmica) por medio de inhalacin de aerosoles que contienen agua contaminada (en sistemas de acondicionamiento de aire, duchas y aerosoles teraputicos). Las bacterias causantes de las infecciones nosocomiales pueden transmitirse de varias formas: 1. La flora permanente o transitoria del paciente (infeccin endgena). Las bacterias presentes en la flora normal causan infeccin por transmisin a sitios fuera del hbitat natural. La flora de otro paciente o miembro del personal (infeccin cruzada exgena). Las bacterias se transmiten de un paciente a otro. La flora del ambiente de atencin de salud (infecciones ambientales exgenas endmicas o epidmicas). Varios tipos de microorganismos sobreviven bien en el ambiente del hospital: En agua, zonas hmedas y, a veces, en productos estriles o desinfectantes (Pseudomonas, Acinetobacter, Mycobacterium). En artculos como ropa de cama, equipo y suministros empleados en la atencin; la limpieza apropiada normalmente limita el riesgo de supervivencia de las bacterias, puesto que la mayora de los microorganismos necesitan condiciones hmedas o calientes y nutrientes para sobrevivir. En los alimentos. En el polvo fino y los ncleos de gotitas generados al toser o hablar (las bacterias de menos de 10 m de dimetro permanecen en el aire por varias horas y pueden inhalarse de la misma manera que el polvo fino)2.

Staphylococcus aureus es una bacteria que se encuentra en la piel y fosas nasales de las personas sanas, que causa gran variedad de infecciones, desde infecciones menores de la piel (forunculos, ampollas, vejigas) y abscesos cutneos hasta enfermedades que pueden poner en peligro la vida como neumona, meningitis, endocarditis, sndrome del shock toxico (SST) y sepsis. Es un coco que crece agrupado en racimos (de ah su raz "Staphylo"), que responde positivamente a la tincin de Gram, es aerobio y anaerobio facultativo por lo que puede crecer tanto en una atmsfera con oxgeno y tambin sin el mismo, no presenta movilidad ni forma cpsula. Es capaz de crecer hasta con un 10 % de sal comn. Por esto puede crecer en el agua del mar. Produce la fermentacin lctica. Es catalasa positivo y coagulasa positivo. Grupo de riesgo El Staphilococcus aureus es un agente patgenico que acta como un microorganismo saprfito, se encuentra en la piel del individuo sano pero en ocasiones en que las defensas de la piel caen puede causar enfermedad. Infeccin Infeccin de piel y partes blandas. Neumona. Sepsis con o sin metstasis (ostetis, artritis, endocarditis, abscesos localizados). Enfermedades por toxinas (sndrome de la piel escaldada, sndrome del shock txico y gastroenteritis). Enzimas Coagulasa, fibrinolisina, hialuronidasa, termonucleasas, bacteriocinas y Catalasa.- la descomposicin del agua oxigenada en agua&penicilinasas , ADNasa y oxgeno molecular, por la catalasa, podra inferir en la destruccin Coagulasa libre.- es&intrafagoctica mediada por radicales txico de oxgeno. un profermento que en presencia de protrombina, o un cofactor del plasma de

conejo (coagulase reacting factor, CRF), o ambos, forma un complejo de actividad proteoltica que transforma el fibringeno en fibrina, determinando la formacin Hialuronidasa.- aumenta el poder invasivo de los&de cogulos intravenosos. estafilococos al hidrolizar el cido hialurnico, mucopolisacrido constituyente Estafilocinasa.- acta sobre la fibrina por&fundamentalmente de los tejidos. activacin de una profibrinolisina, destruyendo los cogulos de fibrina y &pudiendo, facilitar la formacin de microtrombos y las metstasis spticas. Lipasa.- tales como fosfolipasas o esterasas, capaces de metabolizarlas grasas Nucleasas.- hidrolizan el ADN de las cluilas eucariotas, por lo que&cutneas. podran contribuir a las lesiones tisulares. Toxinas Hemolisina, leucocidinas, toxina del sndrome del shock txico, toxina epidermoltica y enterotoxinas. Citotoxinas como:` - alfa toxina: destruye monocitos y plaquetas (forma anillo polimrico) - beta toxina: esfingomielinasa C - gamma toxina: hemoltica - delta toxina: tipo Detergente

Para no tener problemas con este microorganismo es necesario evitar la contaminacin cruzada en la elaboracin de alimentos, almacenarlos a altas o bajas temperaturas para evitar o restringir su crecimiento y cocinar los alimentos. S. aureus: es un agente corriente de las infecciones pigenas y de las toxiinfecciones alimentarias. Los estafilococos se diseminan por las actividades domesticas y comunitarias tales como hacer cama, vestirse o desvestirse. Se hallan presentes fosas nasales, sobre la piel y el cabello de una gran proporcin de la poblacin. S. aureus es cogulasa positivo, lo cual constituye su caracterstica ms distintiva. En los pocos casos de un posible S aureus que no produce coagulasa puede realizarse la prueba para desoxirribonucleasa termoestable que es an ms especfica. Pseudomonas aeruginosa (o Pseudomonas pyocyanea) es una bacteria Gram-negativa, aerobica, con motilidad unipolar. Es un patgeno oportunista para los humanos, P. aeruginosa lo es tambin para las plantas. Como otros Pseudomonas, P. aeruginosa secreta una variedad de pigmentos, como piocianina (azul verdoso), fluoresceina (amarillo verdoso fluorescente), y piorubina (rojo pardo). King, Ward, & Raney desarrollaron Pseudomonas Agar P (aka King A media) para mejorar la produccin de piocianina y piorubina y Pseudomonas Agar F (aka King B media) para la fluoresceina. P. aeruginosa es frecuentemente y preliminarmente identificada por su apariencia perlada y olor a grapa in vitro. La identificaicn definitiva clnica de P. aeruginosa frecuentemente incluye identificar la produccin de ambas piocianina y fluoresceina como su habilidad de crecer a 42 C. P. aeruginosa es capaz de crecer en combustible diesel y kerosene, donde se conoce su utilizacin de un hidrocarbono, causando estragos de corrosin microbiana; y creando una gelatina oscura que a veces inapropiadamente se la llama "alga". Etimologa El trmino Pseudomona significa 'falsa unidad', procede del griego pseudo, que significa 'falso', y monas, que significa unidad simple. El nombre fue usado inicialmente en la historia de la microbiologia como sinnimo de grmenes. Aeruginosa es el nombre latino para el cardenillo u 'xido de cobre'. Esto describe el pigmento azul verdoso bacteriano, visto en los cultivos de laboratorio " de P. aeruginosa ". La biosntesis de piocianina es regulada por mecanismos homeostticos, como en

un biofilme asociada a la colonizacin de P. aeruginosa en los pulmones de los pacientes con fibrosis qustica. Patognesis P. aeruginosa al microscopio de escaneo Raster Este patgeno oportunista de individuos immunocomprometidos, P. aeruginosa infecta el tracto pulmonar, el urinario, tejidos, heridas, y tambin causa otras infecciones de sangre. Pseudomonas puede causar neumonas a grupos, necesitando a veces ayuda mecnica para superar dichas neumonas, siendo uno de los ms comunes agentes aislados en muchos estudios. La piocianina es un factor de virulencia de la bacteria y se ha conocido que puede hasta causar muerte en C. elegans por estrs oxidativo. Sin embargo, la investigacin indica que el cido saliclico puede inhibir la produccin de piocianinaUno en diez hospitales se infectan con Pseudomonas. la fibrosis cstica est tambin predispuesta a la infeccin con P. aeruginosa de los pulmones. P. aeruginosa es el causante de dermatitis, causada por disminucin del control de la calidad del agua de bebida. El ms comn causante de altas fiebres en infecciones es P. aeruginosa. Con plantas, P. aeruginosa induce sntomas de "pudricin de races" conArabidopsis thaliana (Thale cress) y Letuca sativa (lechuga). Es un poderoso patgeno con Arabidopsis and with some animals: Caenorhabditis elegans, Drosophila and Galleria mellonella. The associations of virulence factors are the same for vegetal and animal infections. Walker et al han demostrado en 2001 que en la colonizacin radicular, P. aeruginosa forma biofilmes que confieren resistencia contra los antibiticos secregados por las races. La raza patognica P. aeruginosa PAO1 y PA14 causa mortalidad de plantas 7 das de postinoculacin en Arabidopsis y en Ocimum basilicum. P. aeruginosa forma biofilmes antes de la mortalidad alrededor de las races. Ya infectado, las races de Ocium secretan cido rosmarnico, un multifuncional ster del cido cafeico que exhibe in vitro actividad antibacterial contra clulas planktnicas de ambas razas de P. aeruginosa con un mnimo de concentracin inhibitoria de 3 g mL-1. Sin embargo, el cido rosmarnico no produjo niveles de concentracin mnimos inhibitorios en exudados de races de Ocium, antes de P. aeruginosa que forma un biofilme que resiste los efectos microbiales del cido rosmarnico, y al final causa mortalidad de plantas. La induccin de la secrecin de cido rosmarnico suplementando las races y con suplementacin exgena de exudados de taces de Arabidopsis con cido rosmarnico antes de la infeccin, confiriendo resistencia a P. aeruginosa. Bajo las ltimas condiciones y con microscopa de escaneado laser confocal, grands aglomerados de P. aeruginosa muerta se han visto en la superficie radicular de Arabidopsis y no se observa formacin de biofilme. Los estudios con mutantes quorum sensibles PAO210 (rhlI), PAO214 (lasI), y PAO216 (lasI rhlI) demostraron que todas las razas eran patognicas a Arabidopsis, que naturalmente no secretan cido rosmarnico como un exudado de races. Sin embargo, PAO214 fue la nica raza patognica que emiti exudado dulce, y biofilme de PAO214 pareci comparable con biofilmes formados en razas salvajes de P. aeruginosa. En cuanto a los antispticos y desinfectantes se definen como aquellos productos qumicos que destruyen o inhiben el crecimiento de microorganismos sobre la piel o el tejido, frente a los desinfectantes que son los utilizados sobre objetos inanimados o superficies. En ocasiones, estos ltimos pueden ser utilizados como antispticos, si no producen irritacin de los tejidos, ni toxicidad por absorcin sistmica y no se inactivan en presencia de materia orgnica. Tanto los desinfectantes como los antispticos pueden clasificarse segn su estructura qumica en dos grandes grupos (Tabla 1): compuestos qumicos inorgnicos y compuestos qumicos orgnicos. Debido a que en numerosas ocasiones las mismas sustancias pueden emplearse como

desinfectante o como antisptico, resulta necesario establecer una clasificacin conjunta de todos los productos qumicos empleados 3-4. El antisptico ideal debera reunir las siguientes propiedades: amplio espectro, rapidez de accin, baja toxicidad para los tejidos vivos, alta actividad residual, actividad en presencia de materia orgnica, solubilidad, estabilidad, aceptacin por el personal que lo maneja y bajo coste.

Tabla 1. Principales grupos de desinfectantes y antispticos.

Los principales mecanismos de accin de los antispticos y de los desinfectantes son: la desnaturalizacin de protenas, alteraciones de la membrana celular (permeabilidad, alteraciones enzimticas) y la oxidacin celular. Los principales antispticos utilizados en el medio hospitalario son la Fenol 2% y Hipoclorito de sodio 1%. cido peractico Las soluciones de cido peractico (peroxiactico) al 35%, que pueden ser diluidas hasta un mnimo del 0,2%, se emplean como sustitutos del glutaraldehdo, que es el desinfectante ms ampliamente usado. El cido peractico es una substancia corrosiva y comburente, que a concentraciones superiores al 10% tiene asignadas las frases R: 7-10-20/21/22-35 y S: 3/7-14-36/37/ 39-45. Agua oxigenada (perxido de hidrgeno) Se emplea en soluciones acuosas en concentraciones del orden del 35% o tambin, cuando se trata de procedimientos que implican la generacin de fase vapor, a concentraciones ambientales no inferiores a 2 mg/L. Se usa muchas veces como sustituto del glutaraldehdo. El perxido de hidrgeno es un compuesto que, a concentraciones superiores al 20%, es corrosivo y comburente. La American Conference of Governmental Industrial Hygienists (ACGIH) establece para el perxido de hidrgeno un TLV-TWA (valor lmite ambiental para exposiciones de 8 horas/da y 40 horas a la semana) de 1 ppm (1,4 mg/m3). Las frases asignadas son R: 8-34 y S: 3-28-36/39. Alcohol etlico (etanol) Es el desinfectante de uso tpico ms conocido y universalmente aplicado, especialmente para desinfeccin de la piel. Se emplea a diferentes concentraciones en agua. Es poco eficaz frente a

ciertos tipos de virus y la mayora de esporas. Tiene un valor TLV-TWA de 1.000 ppm (1.880 mg/m 3). Es una substancia inflamable; tiene asignadas las frases R: 11 y S: 7-16. Alcohol isoproplico (isopropanol) Es utilizado tambin como antisptico de uso tpico en concentraciones del 70% en agua, con una efectividad equivalente a la del etanol. El TLV-TWA es de 400 ppm (983 mg/m3) y el TLV-STEL (valor lmite umbral para exposiciones de corta duracin) de 500 ppm (1230 mg/m 3). Es una substancia inflamable y tiene asignadas las frases R: 11 y S: 7-16. Aldehdos La actividad de los aldehdos, bsicamente formaldehdo y glutaraldehdo, est ligada a la desnaturalizacin de las protenas y de los cidos nuclicos por reduccin qumica. Los aldehdos destruyen muy bien las bacterias, los hongos microscpicos y tienen tambin una excelente accin virucida. Se emplean para desinfectar superficies, aparatos e instrumentos. Formol-formaldehdo El formol o formalina es la disolucin de formaldehdo en agua en una proporcin de alrededor de un 37% en peso, conteniendo as mismo entre un 10 y un 15% de metanol para evitar su polimerizacin. Las soluciones de formol que contienen concentraciones de formaldehdo iguales o superiores al 5% constituyen un eficaz desinfectante lquido de uso muy extendido. El formaldehdo debe considerarse como un producto especialmente peligroso, ya que, adems de su accin irritante (la irritacin ocular en el hombre se presenta a concentraciones entre 0,1 y 1 ppm) y alrgena (el formol es responsable adems de sensibilizaciones cutneas), est clasificado por la International Agency for Research on Cancer (IARC) en el grupo 2A (substancia probablemente cancergena). La ACGIH ha fijado un TLV-C (valor techo no sobrepasable en ningn instante) de 0,3 ppm (0,37 mg/m3) y lo incluye en el grupo A2 (carcingenos con sospecha de serio en el humano). Es una substancia considerada txica, por lo que la exposicin debe reducirse al mximo; tiene asignadas las frases R: 23/24/25-34-40-43 y S: 26-36/37-45-51. Glutaraldehdo La solucin de glutaraldehdo al 2% aplicada durante 30 minutos es efectiva como desinfectante y, en aplicaciones de 10 a 12 horas, se puede utilizar como esterilizante. La ACGIH establece un valor TLV-C para el glutaraldehdo de 0,2 ppm (0,82 mg/m3). La solucin de esta substancia entre el 2 y el 10% est clasificada como nociva y peligrosa para el medio ambiente y tiene asignadas las frases R: 20/22-37/38-41-42/43-50 y S: 26-36/37/39-45-61. En la prctica diaria, el glutaraldehdo no es un producto que presente una especial peligrosidad, ya que tiene una tensin de vapor muy baja (es poco voltil) y, por ello, raramente se encuentra en forma de vapor en el aire, a no ser que se calienten las soluciones que se empleen del mismo que, por otro lado, suelen ser siempre bastante diluidas; sin embargo se pueden generar aerosoles por agitacin o manipulaciones bruscas al sumergir o sacar material del lquido. El formol y el glutaraldehdo se pueden emplear solos o bien asociados a un detergente, siendo esta ltima combinacin especialmente efectiva frente a los polivirus. Tambin se emplean mezclados con fenol y fenolatos. Cloro. Hipoclorito sdico

El cloro es el desinfectante universal, activo frente a todos los microorganismos. En general, se utiliza en forma de hipoclorito sdico, con diversas concentraciones de cloro libre. Se trata de un enrgico agente oxidante, corrosivo para los metales. Como desinfectante general, se utiliza a una concentracin de 1 g/l (1000 ppm) de cloro libre. En caso de salpicaduras de sangre o en presencia de materia orgnica en cantidad apreciable, se recurre a una solucin ms concentrada de 10 g/l (10.000 ppm) de cloro libre. Estas diluciones se preparan a partir de la leja comercial (de 40 g/l a 80 g/l de cloro libre). Si se utiliza leja con 40 g de cloro libre por litro, la preparacin de la solucin de 10 g/l se efectuar de la siguiente manera: 250 ml de leja (40 g/l de cloro libre) + 750 ml de H20 Estas soluciones son inestables, por lo cual se han de mantener tapadas, siendo recomendable su preparacin diaria. En la leja de uso domstico, no siempre se indica la cantidad de cloro libre que contiene. Cuando no se dispone de este dato, se ha comprobado que las soluciones de leja domstica al 10% son eficaces para la desinfeccin general. La inhalacin de cloro, que es un gas irritante de las mucosas y del aparato respiratorio, puede producir hiperreactividad bronquial en individuos susceptibles. La ACGIH establece un TLV-TWA para el cloro de 0,5 ppm (1,5 mg/m3) y un TLV-STEL de 1 ppm (2,9 mg/m3). Las soluciones de hipoclorito sdico que contienen concentraciones de cloro libre superiores al 10% deben considerarse como corrosivas y tienen asignadas las frases R: 31-34 y S: 28-45-50. Debe sealarse aqu que el uso extensivo en nuestro pas del hipoclorito sdico (leja) como producto domstico, al revs de lo que ocurre en la mayora de pases de la Unin Europea, no debe hacer olvidar sus caractersticas de peligrosidad, que implican la necesidad de tener un especial cuidado en su manejo. Compuestos de amonio cauternario Este conjunto de compuestos (conocidos como "quats") representan una familia de compuestos antimicrobianos en los cuales las cuatro valencias del tomo de nitrgeno estn ocupadas por grupos tipo alquilo de complejidad variable. Son solubles en agua y en alcohol y poseen propiedades tensioactivas. Los compuestos de amonio cuaternario actan a nivel de la superficie celular, incrementando la permeabilidad de la membrana con la consecuente prdida de los componentes citoplasmticos. El espectro de actividad de estos productos es bastante elevado frente a bacterias y hongos, pero escaso frente a virus y esporas. Es necesario remarcar que hay microorganismos, como pseudomonas, que en algunos amonios cuaternarios encuentran un medio de cultivo en el que se multiplican perfectamente. Esta bacteria puede crecer, por ejemplo, en cloruro de benzalconio que, utilizado como desinfectante de superficies, ha sido la causa de inesperadas infecciones en hospitales. Los compuestos de amonio cuaternario son inactivos frente a las aguas duras, por lo que no deben utilizarse para desinfectar el agua de los sifones de vaciado, rica en sales.

Compuestos fenlicos Diferentes compuestos fenlicos constituyen la base de muchos desinfectantes corrientes, emplendose a veces para sustituir a los hipocloritos. Los aril-fenol halogenados o no halogenados tienen una muy buena actividad bactericida, pero su actividad fungicida es muy discreta y su accin virucida es discutida. El fenol y sus derivados son irritantes de la piel y mucosas respiratorias y oculares. Tienen efecto alergnico y fotosensibilizante. El TLV-TWA establecido para el fenol es de 5 ppm (19 mg/m 3). Las soluciones de concentraciones superiores al 5% se clasifican como txicas y tienen asignadas las frases R: 24/25-34 y S: 28-45. Yodo y Yodforos La accin de estos desinfectantes es parecida a la del hipoclorito. Las superficies limpias pueden tratarse adecuadamente con soluciones que contengan 75 ppm de yodo libre. En presencia de una cantidad apreciable de material proteico, su eficacia no es tan buena. Los yodforos pueden diluirse en alcohol etlico para el lavado de manos o como esporicida. La ACGIH establece para el yodo un TLV-C de 0,1 ppm (1,0 mg/m3). Se considera una substancia nociva y tiene asignadas las frases R: 20/21 y S: 23-25. Povidona-Yodada (complejo de Polivinipirrolidona con yodo) Es el yodforo mejor conocido. Se compone de un polmero de 1- vinil - 2 - pirrolidona con yodo, con un 9-12 % de yodo disponible. Se utiliza en forma de solucin, es de color amarillo pardo y olor caracterstico. Es de uso teraputico en aplicaciones tpicas como desinfectante. Comercialmente se conoce bajo distintos nombres: Topionic, Betadine e lsodine, entre otros5.

4. OBJETIVOS.
OBJETIVO GENERAL.

Evaluar los desinfectantes usados en el Hospital Obrero de la ciudad de La Paz sobre microorganismos causantes de infecciones nosocomiales.

OBJETIVOS ESPECIFICOS.

Comparar el efecto antimicrobiano de los dos desinfectantes en determinados intervalos de tiempo. Evaluar la efectividad antimicrobiana a diferentes concertaciones de los desinfectantes. Determinar si los microorganismos usados para la prueba presentan resistencia o susceptibilidad a los desinfectantes. Determinar la efectividad del desinfctate fenol vs hipoclorito de sodio

5. MATERIAL Y METODOS. Material: El material utilizado en este ensayo es el siguiente: a) Desinfectantes: desinfectante A: solucin de Fenol al 2% y 1% Las diluciones se realizan mediante agua destilada estril en matraces.

desinfectante B: solucin de Hipoclorito de sodio 1% y 0,5% Las diluciones correspondientes tambin se llevan a cabo en agua destilada estril.
b) Bacterias: los estudios se realizan con cepas proporcionadas por el Hospital Obrero de la ciudad de La Paz. Se utilizo 1 cepa de cada una de las siguientes especies bacterianas: Pseudomonas aeruginosa y Staphylococcus aureus. Los mtodos empleados para probar la actividad de estos dos desinfectantes y poder comparar su accin antibacteriana, se describen a continuacin: Tcnica de dilucin en tubo: utilizada en la Universidad central de Venezuela Facultad de farmacia laboratorio de microbiologa aplicada al control de medicamentos

Preparar las diluciones del fenol (2 diluciones); stas sern 2% y 1%, Colocar 5 mL de cada dilucin del desinfectante, en tubos de vi-drio. Aadir a cada dilucin 0,5 mL del cultivo de prueba. Agitar muy bien el cultivo a utilizar se aadio el cultivo con jeringa de insulina. Para sembrar los tubos, estos debern conservarse en posicin inclinada, insertando la jeringa en el tubo de forma que quede justo por encima de la superficie del desinfectante dejando escurrir el cultivo sin que la aguja toque el desinfectante, para asegurar la distribucin uniforme de las bacterias, agitar moderada, pero totalmente, los tubos despus de la adicin del cultivo. Despus de 5 10 15 de haber sembrado el primer tubo de la serie, transplantar un asa de la mezcla del cultivo y el desinfectante diluido al correspondiente tubo de subcultivo. El asa debe doblarse de forma tal que forme un ngulo de 30 con el mango. A fin de facilitar la transferencia de gotas uniformes de esta mezcla, se debe sostener el tubo con una inclinacin de 60 y retirar el asa de manera que su plano sea paralelo a la superficie del lquido (Ver Figura 1).

6. RESULTADOS En el Cuadro se muestran las concentraciones obtenidas con ambos desinfectantes (A y B) y el tiempo de exposicin en cada uno, frente a las dos especies bacterianas ensayadas ( P. aeruginosa, S. aureus),

Cepas Tiempo de exposicin en minutos S. aureus P. aeruginosa

Fenol 2%

Fenol 1%

Hipoclorito de sodio 1% 15 + + 5 + 10 + 15 -

Hipoclorito de sodio 0,5% 5 + + 10 + + 15 + -

5 + +

10 + +

15 + -

5 + +

10 + +

7. DISCUSIN Y CONCLUCIONES

Fueron determinadas 2 cepas bacterianas causantes de infeccin nosocomial y se evalu la resistencia de las mismas a 2 soluciones desinfectantes. Staphylococcus aureus mostro una resistencia total al fenol pero cierta suceptibilidad al hipoclorito de sodio , Pseudomonas aeruginosa mostro suceptibilidad a ambos desinfectantes pero sobresalieno una ves mas el hiclorito de sodio ante el fenol en la eficacia.
Fue determinante una exposicin prolongada para una mejor efectividad de los desinfectantes por lo menos de 15 min Los desinfectantes mostraron una limitada efectividad frente a las bacterias ya que hubo desarrollo en casi todos los cultivos La resistencia a los desinfectantes fue muy marcada por ambas especies de bacerias El hipoclorito de sodio mostro una mejor eficacia que el fenol

8. BIBLIOGRAFIA

1. Limpieza y desinfeccin en el hospital Hygiene and disinfection in the hospital - F. Repraz 2. Prevencinde las infecciones nosocomiales - G. Ducel, Fundacin Hygie, Ginebra, Suiza 3. Staphylococcus 4. 5. 6. 7. 8.
-http://www.who.int/csr/resources/publications/ES_WHO_CDS_CSR_EPH_2002_12.pdf aureus Wikipedia Enciclopeida de uso libre http://es.wikipedia.org/wiki/Staphylococcus_aureus Pseudomonas aeruginosa Wikipedia Enciclopeida de uso libre Staphylococcus aureus Wikipedia Enciclopeida de uso libre http://es.wikipedia.org/wiki/Staphylococcus_aureus LA PREVENCION DE INFECCIONES NOSOCOMIALES EN LAS UNIDADES DE MEDICINA INTENSIVA Dra. M Victoria de la Torre Prados http://www.uninet.edu/cimc2001/conferencias/infecciones/MVTorre/ Infecciones nosocomiales (intrahospitalarias) - Consuelo Ibez Mart mdico salubrista - http://weblogs.madrimasd.org/salud_publica/archive/2007/03/08/60693.aspx CONTROL DE LAS POBLACIONES MICROBIANAS: ESTERILIZACION Y DESINFECCION - Dr. Pedro F. Mateos - Departamento de Microbiologa y Gentica. Facultad de Farmacia. Universidad de Salamanca - http://www.atl-gestion.com/Asepsia%20y%20desinfeccion.htm UNIVERSIDAD CENTRAL DE VENEZUELA FACULTAD DE FARMACIA LABORATORIO DE MICROBIOLOGA APLICADA AL CONTROL DE MEDICAMENTOS - MANUAL DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGA APLICADA AL CONTROL DE MEDICAMENTOS Mara Luisa de Curtis de Fernndez - Yajaira Bastardo Hahn - Norma De Castro Sira 2002 - http://www.ucv.ve/Farmacia/Micro_web/Mmedicamentos/manualmed.pdf http://www.cfnavarra.es/salud/anales/textos/vol23/suple2/suple8a.html

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