Determinacin de Metales Pesados (Pb, Hg, Cd y As ), en Agua de Mar y Ostin (Crassostrea iridiscens ) en la Costa del Estado de Colima.

Madrigal A. L. , Vzquez G. J. , Velasco V. S., Rodriguez P. A., ( Facultad de Ciencias Qumicas de la Universidad de Colima ). Resumen El objetivo de este estudio fue cuantificar concentraciones de metales (Cd, Pb, As y Hg) en tejido de ostin (Crassostrea iridiscens ) y agua de mar, en la Costa de Colima; de Mayo, Julio y Noviembre (2004-2005). Los valores se compararon con los estipulados en las NOM 031-SSA-1993, 129-SSA-1995, 001-ECOL-1996 y la FDA. Se obtuvieron 33 muestras en 3 temporadas (12, 9 y 12 respectivamente), se trataron por triplicado, se homogenizaron y se sometieron a digestin hmeda. Se analizaron y cuantificaron las concentraciones de metales en moluscos previa digestin con acido ntrico al 65% y el agua de mar fue filtrada y acidificada (cido ntrico de alta pureza).Las lecturas se realizaron en el espectrofotmetro de absorcin atmica Modelo Varian Spectra AA 220 FS. En ostin las concentraciones mas elevadas de Cd, Pb, As y Hg fueron respectivamente. 3.21 ppm, 0.50 ppm, 0.021 ppm y 0.07 ppm

Respecto al agua de mar fueron 0.038 ppm, 2.91 ppm y 0.0013 ppm

para Cd, Pb, y Hg respectivamente y no detectndose valor para el As. Abstrac The objective was to quantify metal concentrations as Cd Pb As and Hg in weave of ostrich ( Crassostrea iridiscens) and water of seas in the coast of Colima during May, July and November (2004-2005). The values were compared with the stipulated ones in NOM -031SSA-1993, 129-SSA-1995, 001-ECOL-1996 and the FDA. 33 samples in 3 seasons were obtained (12, 9 and 12 respectively), treated by triplicate, they are homogenized and put under humid digestion. The metal concentrations were analyzed and quantified in mollusks previous digestion with nitric acid to 65% and for water of sea it was leaked and acidified (nitric acid of high purity), using spectrophotometer of atomic absorption Mod. Varian Spectra AA 220 FS. In ostrich the elevated concentrations but of CD, Pb, As and 3,21 Hg were ppm., 0,50 ppm., 0,021 ppm. and 0,07 ppm. respectively. About the water of sea they were 0,038 ppm, 2,91 ppm and 0,0013 ppm for Cd, Pb, and Hg respectively and As for this case it wasnt detected

Introduccin: En la regin del Pacfico Mexicano, el ostin de roca (Crassostrea iridiscens), est presente a lo largo de la costa asociado a los sustratos rocosos (Paz-Osuna et al., 1995). Recientemente se ha descrito su ciclo reproductivo (Fras-Espericueta et al., 1997) en tres fases; una de reclinacin a partir de noviembre a enero; otra de maduracin a partir de abril a mayo y por ltimo la fase de reproduccin a partir de julio a octubre. Los moluscos se utilizan extensivamente en programas de supervisin en el ambiente marino debido a su capacidad de concentrar los agentes contaminantes a varias profundidades marinas. Phillips & Rainbow, (1993) mencionan que un bioindicador ideal es aquel que satisface varios requisitos: Ser sedentario, robusto, fcil de identificar y muestrear en sus temporadas del ao, tales caractersticas corresponden al Crassostrea iridiscens, especie que presenta una distribucin amplia, muy conveniente como indicador de la contaminacin para metales pesados. (Fras-Espericueta et al., 1997). Los metales pesados se encuentran ampliamente distribuidos en la naturaleza, lo que hace inevitable su presencia en todo ser vivo. Elementos como cadmio, cromo, cobre y plomo causan efectos indeseables en el metabolismo, an en concentraciones bajas su toxicidad depende de la dosis en que se ingieran as como de su acumulacin en el organismo (FAO/OMS, 2000). Por la tendencia a bioacumularse, es importante determinar las cantidades de estos metales en moluscos de uso comn entre la poblacin del Estado de Colima, con la finalidad de determinar la presencia y grado de peligrosidad de los mismos en el ser humano. (CSIC, 2002). El propsito del estudio es evaluar la concentracin de 4 metales pesados Plomo (Pb), Cadmio (Cd), Mercurio (Hg) y Arsnico (As) en un total de siete sitios de muestreo a lo largo de la zona costera de Colima, con el fin de evaluar si las concentraciones detectadas se encuentran dentro de los lmites permisibles que marcan las Normas Oficiales Mexicanas NOM-129-SSA1-1995 (Productos de la pesca: secos-salados. Disposiciones y

especificaciones sanitarias) y la norma NOM-031-SSA1-1993 (Productos de la pesca. Moluscos bivalvos frescos-refrigerados. Especificaciones sanitarias).

Materiales y Mtodos: Se establecieron 7 sitios de muestreo a lo largo de la zona costera de Colima, para esto se tuvo el apoyo de investigadores del CET del mar y del CRIP, los cuales se ubicaron en: 1) Baha de Miramar; 2) Punta Campos; 3) Boca Tepalcates; 4) Boca Ventanas; 5) Baha Manzanillo; 6) Baha de Santiago; 7) Pea Blanca. El muestreo se realiz en tres pocas del ao; el primero en Mayo con el fin de tener las muestras en el periodo anterior a la poca de lluvias, el segundo muestreo se realiz en Julio, que corresponde a poca de lluvias y el tercero se realiz en Noviembre con el fin de tener las muestras del perodo posterior a la poca de lluvias. Figura 1. Puntos de Muestreo:

Ostin (Crassostrea iridiscens): Se obtuvieron 3 rplicas de 10 organismos cada una, los cuales se enjuagaron in situ con agua de mar, se colocaron en bolsas de polietileno y se transportaron al laboratorio para su anlisis conservadas con hielo y se almacenaron a -10 C hasta su anlisis. Agua: Se colectaron 3 muestras de 500 mL en frascos de polietileno lavados con cido clorhdrico grado analtico y cido clorhdrico de alta pureza. Las muestras se acidificaron con 2 mL de cido ntrico de alta pureza, se almacenaron a 10 C hasta su anlisis. Preparacin de las muestras: Ostin: Se separ el molusco de las valvas, usando cuchillo de plstico, se enjuagaron con agua desionizada y se escurrieron. Digestin de las muestras para determinacin de Cd, Pb y Hg: La masa de las muestras de ostin se lavaron con agua libre de metales y posteriormente se peso 1 g (peso seco), se digirieron con 5 mL de cido ntrico al 65 % y a temperatura .de 110 C hasta tener una

solucin clara (Cheung & Wong 1992a). Esta se filtr con papel Wathman # 42 diluyendo a 25 mL con agua destilada, se determin Cd, Pb y Hg en un espectrofotmetro de absorcin atmica marca Varian Spectra AA 220 FS equipado con horno de grafito y generador de hidruros. Digestin de las muestras para determinacin de As: Se realiz con 0.5 g de muestra (peso seco), se aadi 5 mL de cido ntrico al 65 % a una temperatura de 95 C por 30 minutos, se aadieron de 15 a 20 gotas de perxido de hidrgeno al 30 % y se continu la digestin por 30 minutos. Se repiti la adicin de perxido de hidrgeno dos veces a intervalos de 30 minutos hasta completar la digestin (Cheung & Wong 1992b). Se filtraron con papel Wathman # 42 y se diluy con 25 mL de agua desionizada. Se determin As en un espectrofotmetro de absorcin atmica marca Varian Spectra AA 220 FS equipado con generador de hidruros. Preparacin de las muestras de agua: Se filtraron con papel Wathman # 42 previo a su anlisis en un espectrofotmetro de absorcin atmica marca Varian Spectra AA 220 FS, equipado con horno de grafito, el cual se utiliz para el anlisis de elementos traza ya que tiene una sensibilidad de 100 a 1000 veces superior a los mtodos de absorcin atmica con flama, lo que evita la necesidad de concentrar las muestras por otros procedimientos. Mtodos de anlisis para Ostin y Agua: Cuadro 2. Mtodos de referencia.
Metal Pesado Cadmio Plomo Arsnico Mercurio Mtodo-Referencia 973.34, AOAC 1990 973., AOAC 1990 986.15, AOAC 1990 ( Con Gen de Hid.) 972.15, AOAC 1990 (Con Gen. de Hid.)

Anlisis estadstico de los datos Se realizaron por triplicado para cada muestra, considerando el peso de la muestra en peso fresco. La calibracin para la precisin de las medidas se realiz con patrones de referencia tratados y analizados en la misma forma que las muestras. El espectrofotmetro se calibr con estndares debidamente certificados, diluidos cuantitativamente. Resultados y Discusin De acuerdo a las Normas Oficiales Mexicanas NOM-031-SSA1-1993 y NOM-129-SSA1-1995 el lmite mximo permitido para Cadmio es de 0.5 ppm y Plomo de 1 ppm para ostin.

La Administracin de Alimentos y Drogas (FDA) y la Norma Oficial Mexicana NOM-031SSA1-1993 tienen establecido un nivel permisible mximo de 1 ppm de Mercurio en ostin. La Fundacin Ibrica para la Seguridad Alimentaria tiene una legislacin vigente que fija unos valores mximos de contenido en arsnico en materias primas para la fabricacin de alimentos animales de 2 a 4 ppm, permitiendo hasta 10 ppm en los fosfatos o materias procedentes de la transformacin de mariscos. (Almudena & Lizaso, 2001). Segn la Norma Oficial Mexicana, NOM-001-ECOL-1996, que establece los lmites mximos permisibles de contaminantes en las descargas de aguas residuales y aguas nacionales, se presenta en el siguiente cuadro. Cuadro 3. Criterios Ecolgicos de Calidad del Agua Marina para Proteccin de la Vida Acutica.
Sustancia o Parmetro Cadmio Plomo Arsnico Mercurio Nivel mximo en ppm para Agua marina (reas costeras) 0.0009 0.006 0.04 0.00002

SEMARNAP. Diario Oficial de la Federacin. Lunes 6 de enero de 1997.

Cuadro 4. Contenido de Cd. en Agua de Mar y Ostion (Crassostrea iridiscens).

Numero de Muestreo Punto de Muestreo Agua de mar (ppm) Ostin (ppm) Boca Ventanas 0.0187 0.0426 2.3492 0.0605 Boca Tepalcates 0.0379 0.0018 2.7183 0.0987 MAYO Pea Blanca N.D. 3.2184 0.0392 Baha de Santiago N.D. 1.5345 0.0163 Baha de Manzanillo N.D. 1.0976 0.0138 Pea Blanca 0.0383 0.0017 1.2185 0.0212 JULIO Baha de Miramar N.D. 1.4801 0.0066 Pea Blanca 0.0383 0.0013 0.9612 0.0365 Baha de Miramar 0.0381 0.0010 0.8718 0.0145 NOVIEMBRE Boca Tepalcates 0.0385 0.0017 1.0575 0.0026 Punta Campos _______ 0.4869 0.0033 N.D.: No Detectado Concentracin de cadmio en partes por milln (ppm). Nivel permitido para ostin: 0.5 ppm Concentracin de cadmio en partes por milln (ppm). Nivel permitido para agua de mar: 0.0009 ppm

Para agua de mar, las concentraciones ms elevadas fueron en Boca de Tepalcates en mayo y noviembre, con una concentracin de 0.0379 ppm y 0.0385 ppm. respectivamente En Pea Blanca los valores fueron similares en julio 0.0383 ppm y noviembre 0.0383 ppm, ,en mayo no se detect. En Baha de Miramar slo se detect en noviembre (0.0381 ppm) y julio no se detecto. El valor mnimo fu Boca Ventanas en mayo con 0.0187 ppm.

La mayora de las concentraciones en cada sitio exceden los criterios ecolgicos segn la Norma Oficial Mexicana, NOM-001-ECOL-1996. Para el ostin las concentraciones varan en los distintos puntos, siendo el valor ms elevado el de Pea Blanca para mayo que es de 3.2184 ppm, el cual rebasa el lmite permisible (0.5 ppm para Cd) segn la NOM-031-SSA1-1993 y NOM-129-SSA1-1995., comparado con julio (1.2185 ppm.) y noviembre que fue de 0.9612 ppm. Haciendo una comparacin en los diferentes puntos en las tres temporadas de recoleccin, se observa que en Boca Tepalcates en mayo (2.7183 ppm), la concentracin de Cadmio en ostin es mayor 2.5 veces que la del mes de noviembre (1.0575 ppm), de la misma manera para mayo en boca de ventanas las concentraciones fueron elevadas en 2.3492 ppm. En la Baha de Miramar en julio se obtuvieron concentraciones elevadas 1.7 veces (1.4801 ppm) respecto a noviembre (0.8718 ppm). De manera general las concentraciones ms elevadas fueron en Mayo, por lo que estas, pueden representar un peligro para el ser humano que consuma grandes cantidades de ostin. Cuadro 5. Contenido de Pb. en Agua de Mar Y Ostin (Crassostrea iridiscens).
Numero de Muestreo Punto de Muestreo Boca Ventanas MAYO Boca Tepalcates Pea Blanca Baha de Santiago Baha de Manzanillo Pea Blanca Baha de Miramar Pea Blanca Baha de Miramar Boca Tepalcates Punta Campos Agua de mar (ppm) 2.9167 7.3106 0.0817 0.0112 N.D. N.D. N.D. 0.0806 0.0388 N.D. 0.1500 0.5418 0.0918 0.0190 0.0750 0.0184 _______ Ostin (ppm) 0.2286 0.0027 0.5031 0.0300 0.3000 0.0027 0.3498 0.0000 0.4640 0.0136 0.3419 0.0655 0.3619 0.0245 0.2316 0.0218 0.3274 0.0054 0.4861 0.0546

JULIO

NOVIEMBRE

0.4482 0.0395 N.D.: No Detectado Concentracin de plomo en partes por milln (ppm). Nivel permitido para ostin: 1 ppm Concentracin de plomo en partes por milln (ppm). Nivel permitido para agua de mar: 0.006 ppm

Para agua de mar, en Boca Ventanas en mayo se tienen los valores mas altos de 2.9167 ppm en Boca Tepalcates fu de 0.0817 ppm excediendo 1.08 veces a noviembre, que fu de 0.0750 ppm. Para Pea Blanca el dato ms elevado es de noviembre (0.1500 ppm) por 1.86 veces ms que julio (0.0806 ppm) y para mayo no se detecto concentracin. En la Baha de Miramar en noviembre la concentracin fue de 0.0918 ppm no detectndose en julio, existiendo una considerable variacin de las concentraciones entre las diferentes temporadas de muestreo, lo cual indica que la acumulacin de metales pesados no es

especfica de un mes del ao. Por otro lado es importante mencionar que la mayora de los puntos referidos, los valores exceden lo permisible segn la (NOM-001-ECOL-1996) que refiere 0.006 ppm. Respecto al ostin, los valores para Boca de Tepalcate en el mes de mayo se observan los valores mas altos (0.5031 ppm), que no sobrepasan el lmite permisible segn la NOM-129SSA1-1995 y NOM-031-SSA1-1993, que es de 1 ppm para ostin. Por lo anterior comparando los diferentes puntos en las tres temporadas, con los valores de Boca de Tepalcates arriba sealados, que son los tiempos de recoleccin de la muestra de ostin, se observa que es mayor por 1.04 veces ms respecto a noviembre (0.4861 ppm). En Pea Blanca se analiz en las tres temporadas mostrndose una tendencia semejante en julio (0.3419 ppm) y mayo (0.3000 ppm), no as para noviembre que fue de 0.2316 ppm. .En la Baha de Miramar se obtuvieron concentraciones en julio 0.3619 ppm y en el mes de noviembre de 0.3274 ppm. El problema del Pb a nivel ecolgico es su acumulacin en las cadenas alimenticias ya que ste en concentraciones elevadas se vuelve un contaminante txico para el ser humano. En el cuadro 6 se presentan los resultados del Arsnico en ostin y en agua de mar, resaltando que en agua de mar no se detecto concentracin en ningn punto de muestreo en las tres pocas. Cuadro 6. Contenido de Arsnico As. en Agua de Mar y Ostin (Crassostrea iridiscens).
Numero de Muestreo Punto de Muestreo Boca Ventanas Boca Tepalcates Pea Blanca Baha de Santiago Baha de Manzanillo Pea Blanca Baha de Miramar Pea Blanca Baha de Miramar Boca Tepalcates Punta Campos Agua de mar (ppm) N.D. N.D. N.D. N.D. N.D. N.D N.D. N.D. N.D. N.D. _______ Ostin (ppm) 0.0027 0.0188 0.0212 0.1350 0.0175 0.0664 0.0081 0.0066 0.0018 0.0000 0.0174 0.1007 0.0108 0.0166 0.0046 0.0044 0.0124 0.1704 0.0017 0.0044 0.0056 0.0133

MAYO

JULIO

NOVIEMBRE

N.D.: No Detectado Concentracin de arsnico en partes por milln (ppm). Nivel permitido para ostin: 2 a 4 ppm Concentracin de arsnico en partes por milln (ppm). Nivel permitido para agua de mar: 0.04 ppm

La concentracin ms elevada fu en mayo en Boca Tepalcates (0.0212 ppm), comparado para el mismo sitio en noviembre, donde fueron mas bajas (0.0017 ppm).

De acuerdo a los resultados obtenidos, las concentraciones en los diferentes puntos, no presenta peligro para la salud humana y ambiental, porque no rebasan el lmite permisible ( 2 a 4 ppm), segn la NOM-031-SSA1-1993 y NOM-129-SSA1-1995. Cuadro 7. Contenido de Mercurio Hg en Agua de Mar y Ostin (Crassostrea iridiscens).
Numero de Muestreo Punto de Muestreo Agua de mar (ppm) Boca Ventanas 0.0006 0.0001 Boca Tepalcates 0.0003 0.0001 Mayo Pea Blanca 0.0004 0.0007 Baha de Santiago 0.0008 0.0027 Baha de Manzanillo 0.0010 0.0027 Julio Pea Blanca 0.0002 0.0001 Baha de Miramar 0.0007 0.0012 Pea Blanca 0.0010 0.0004 Noviembre Baha de Miramar Boca Tepalcates Punta Campos 0.0010 0.0010 0.0013 0.0008 ________ Ostin (ppm) 0.0269 0.0000 0.0163 0.0000 0.0194 0.1230 0.0355 0.1845 0.0708 0.0000 0.0260 0.1537 0.0210 0.0922 0.0242 0.0000 0.0395 0.0615 0.0293 0.0922 0.0339 0.0922

Concentracin de mercurio en partes por milln (ppm). Nivel permitido para ostin: 1 ppm Concentracin de mercurio en partes por milln (ppm). Nivel permitido para agua de mar: 0.00002 ppm

Para agua de mar en Tepalcates, noviembre tuvo el valor mas alto para el Hg que fu de 0.0013 ppm, excediendo el lmite permisible segn la NOM-001-ECOL-1996, que es de 0.00002 ppm. Analizando las diversas concentraciones, se observa que en mayo fu de (0.0003 ppm); para Pea Blanca, el ms elevado pertenece a noviembre (0.0010 ppm) por 2.5 veces ms que para mayo (0.0004 ppm) y por 5 veces para julio (0.0002 ppm); en Baha de Miramar en noviembre (0.0010 ppm) rebasa 1.4 veces la concentracin de Julio (0.0007 ppm). Comparando los puntos en las tres temporadas del ao para el ostin, se puede observar que en Boca Tepalcates en noviembre (0.0293 ppm), la concentracin de Mercurio es mayor 1.8 veces ms que mayo (0.0163 ppm). En Pea Blanca las tres temporadas mostraron valores de 1.1 veces ms que julio (0.0260 ppm) que en el mes de noviembre (0.0242 ppm) y 1.3 veces mayor que en mayo (0.0194 ppm). En Baha de Miramar se obtuvieron concentraciones 2 veces ms elevadas en noviembre (0.0395 ppm), que julio (0.0210 ppm), no representando peligro segn la NOM031-SSA1-1993 y NOM-129-SSA1-1995 que recomienda 1 ppm.

Bibliografa: Almudena, A. & Lizaso J., (2001). Los Metales Pesados en la Alimentacin, Fundacin Ibrica para la Seguridad Alimentaria, Inscripcin 1, Tomo XXX, p. 1-25. http://www.fundisa.org/articulos/fmetales.pdf Accesada: Abril 2004. AOAC, (1990). Official Methods of Analysis. Association of Official Analytical Chemists, 15 th Edition, Arlington, Virginia, USA. CRIP, (1996). Estudio basal ambiental. Proyecto Puerto Santiago, Manzanillo, Col. p.120-166. CSIC, (2002). Consejo Superior de Investigaciones Cientficas, Espaa. Informe de resultados de los anlisis en niveles de metales pesados en muestras de pescados, moluscos y crustceos en la zona costera de Huelva. www.csic.es/documentacion. Accesada: Mayo 2003. FAO/OMS, (2000). Informe de la 32 reunin del Comit Codex sobre Aditivos Alimentarios y Contaminantes de los Alimentos http:// www.codexalimentarius.net. Accesada: Julio 2004. Fras-Espericueta, M.G., Pez-Osuna, F. & Osuna-Lpez, J.I., (1997). Seasonal changes in the gonadal sate of the oysters Crassostrea iridiscens and Crassostrea corteziensis (Filibranchia: Ostreidae) in the Northwest coast of Mexico. Rev. Biol. Trop. 45: 1061-1066. NOM-129-SSA1-1995. Productos de la pesca: secos-salados. Disposiciones y especificaciones sanitarias. NOM-031-SSA1-1993. Productos de la pesca. Moluscos bivalvos frescosrefrigerados. Especificaciones sanitarias.NOM-001-ECOL-1996. Que establece los lmites mximos permisibles de contaminantes en las descargas de aguas residuales en aguas y bienes nacionales. Pez-Osuna, F., Fras-Espericueta, M.G. & Osuna-Lpez, J.I., (1995). Trace metals concentrations in relation to season and gonadal maturation in the oyster Crassostrea iridiscens. Mar. Environ. Res. 40: 19-32. Phillips, D.J.H. & Rainbow, P.S. (1993). Biomonitoring of trace aquatic contaminants. Elsevier, New York. 371 pp.