Protocolo para la recogida, conservacin y remisin de muestras entomolgicas en casos forenses.

Collecting, keeping and shipment protocol for entomological evidences in forensic practice.
M.I. Arnaldos, E. Romera , M.D. Garca! y A. Luna"
RESUMEN Dada la importancia y creciente utilizacin de las evidencias entomolgicas en la prctica forense, este trabajo propone un protocolo para la adecuada recogida, conservacin y remisin de muestras entomolgicas para su inclusin en la rutina mdico-legal. La utilizacin de este protocolo permitir la obtencin de una base de datos homognea y perfectamente extrapolable a otros casos en el rea geogrfica. ABSTRACT Nowadays the importance and utility of entomological evidences are increasing in medicolegal practices. This paper porpuses a protocol for suitable collect, conservation and sending of entomological samples for its inclusion in medicolegal routine. Puting into effect this protocol will allow to get an homogeneus data base which will be perfectly comparable to another cases in the same geographical area.

Palabras clave: entomologa forense, evidencias entomolgicas, protocolo, recogida de muestras, remisin de muestras.

Key words: forensic entomology, entomological evidences, protocol, collecting samples, sending samples.

Correspondencia: Dra. M Dolores Garca. Departamento de Zoologa. Facultad de Biologa. Universidad de Murcia. 30100 Espinardo (Murcia, Espaa). E-mail: mdgarcia@um.es. 1 Profesora Asociada de Zoologa. Universidad de Murcia. 2 Profesora Ayudante de Zoologa. Universidad de Murcia. 3 Profesora Titular de Zoologa. Universidad de Murcia. 4 Catedrtico de Medicina Legal. Universidad de Murcia.

Fecha de recepcin: 07.AGO.01

Fecha de aceptacin: 01.OCT.01

Cuadernos de Medicina Forense N 25 - Julio 2001

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Protocolo para la recogida, conservacin y remisin de muestras entomolgicas en casos forenses.

INTRODUCCIN: La utilizacin de las evidencias entomolgicas para la obtencin de conclusiones en el mbito forense es cada vez ms frecuente [1-9]. En el caso concreto de la entomologa mdico-legal, la utilizacin de los insectos y otros artrpodos como elemento de la investigacin est justificada por diversas razones. Entre ellas, cabe destacar que los insectos son los primeros organismos que descubren un cadver, incluso si se ha tratado de ocultar el cuerpo [10, 11]. Por ejemplo, los dpteros son capaces de localizar un cadver tan solo unos minutos despus de ocurrida la muerte, o incluso antes, y, por otro lado, los artrpodos aparecen en un cuerpo en descomposicin en una secuencia temporal determinable y, por tanto, predecible, aunque es variable en funcin de la regin geogrfica y la poca del ao. As, se pueden extraer conclusiones, significativas desde un punto de vista forense, a partir de los datos relativos al estado de colonizacin sucesiva de un cadver, o identificando el estado de desarrollo de los insectos colectados en el cadver o en relacin con l. Pero, adems, de los artrpodos existentes en un cadver podemos obtener no solo indicaciones de los intervalos postmortem [12] sino evidencias que colaboren en el esclarecimiento de las circunstancias de los hechos, como la determinacin del lugar de una muerte, la existencia de manipulacin y traslado del cadver, identificacin del culpable de un homicidio, determinacin de la existencia de malos tratos, e incluso, la identificacin de la presencia en el cadver de diferentes sustancias (medicamentos, estupefacientes ...) a partir de las larvas de ciertos insectos, cuando es imposible hacerlo a partir de los tejidos del cadver. Por tanto, la entomofauna sarcosaprfaga es importante en s misma y en su aspecto aplicado a la prctica mdico-legal. Es fundamental sealar que cualquier material entomolgico, aunque sea de tipo oportunista o accidental, es de gran valor por su misma presencia adems de ofrecer informacin acerca de la procedencia geogrfica y caractersticas ambientales del lugar de los hechos. Esto, en combinacin con los datos procedentes de otras especies de mayor utilidad a la hora de datar, puede utilizarse para ponderar con mayor precisin el clculo de la data. Por otro lado, es conocido el altsimo valor que los estados preimaginales de los artrpodos necrfagos tienen a la hora de estimar el intervalo postmortem [13-15]. A la hora de obtener conclusiones a partir de evidencias entomolgicas, el entomlogo tiene que tener la seguridad de que la muestra recogida es representativa, cualitativa y cuantitativamente, de la fauna existente en el cadver y que esa muestra ha sido mantenida, tanto en el caso de ejemplares vivos como fijados, adecuadamente. Las evidencias entomolgicas deben ser tratadas de modo que los caracteres que permiten la identificacin especfica y la etapa de desarrollo alcanzada, as como el sexo de los ejemplares, se conserven adecuadamente. Una muestra poco representativa o mal conservada de la entomofauna existente puede inducir al entomlogo a un error a la hora de obtener conclusiones [16]. Por todo ello se entiende aconsejable tratar de uniformizar, del modo ms sencillo, completo y adecuado posible, el conjunto de procedimientos a seguir, en el orden ms conveniente, para la adecuada recoleccin, conservacin y remisin de las evidencias entomolgicas, de modo que se convierta en el protocolo a seguir en la rutina forense. As, a continuacin proponemos un protocolo de recogida, conservacin y remisin de muestras entomolgicas para ser incluido en la rutina mdico-legal.

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Protocolo para la recogida, conservacin y remisin de muestras entomolgicas en casos forenses.

PROTOCOLO DE RECOGIDA, CONSERVACIN Y REMISIN DE MUESTRAS ENTOMOLGICAS: De modo general, cuando la recogida del material entomolgico se realiza antes del levantamiento del cadver, y para evitar que sta produzca alguna perturbacin en las primeros momentos de la investigacin forense, antes deben tomarse anotaciones donde se reflejen el hbitat general, las condiciones climticas del momento, la localizacin del cuerpo y todo aquello que pueda resultar de inters en relacin con el escenario forense. Tiene especial importancia todo lo relacionado con la actividad de los insectos y la ubicacin del cuerpo en el propio escenario forense. Todos los datos recogidos durante la captura del material y la posterior autopsia del cadver se incluirn en el formulario presente en el Anexo 1. MATERIAL NECESARIO: Se recomienda el siguiente material para la recogida, manipulacin y conservacin del material entomolgico: guantes pinzas de punta fina pincel (nmero 2 o similar) 4 trampas adhesivas o, en su defecto, tiras adhesivas para insectos. recipientes tipo frasco para anlisis, 15 de 60 ml. en plstico, 20 de 25 ml. en vidrio, tubos plstico de 5 ml. bolsas hermticas de un litro de capacidad recipiente con etanol de 70 recipiente trmico con agua muy caliente (cercana a la ebullicin) sustrato alimenticio sonda trmica pala o azada para recogida de muestras de suelo y hojarasca papel en trozos para etiquetas lpiz de grafito

PROCEDIMIENTO: REGISTRO DE DATOS AMBIENTALES Una vez hechas las anotaciones de las condiciones ambientales del escenario forense y, si es posible, fotografiado el entorno, se deben tomar los datos de temperatura. Deben registrarse los siguientes: la temperatura ambiente hacia 1 metro sobre la superficie, siempre en las proximidades del cuerpo. temperatura de la superficie del suelo. temperatura de la superficie del cuerpo. temperatura de la zona de contacto cuerpo-superficie, deslizando la sonda entre el cuerpo y la superficie del sustrato. Es conveniente estimar la duracin de la exposicin del cadver a la luz solar directa. Para ello se debe observar el entorno vegetal (si lo hay) o la localizacin de las ventanas (si es en el interior de una construccin). Si se trata de un lugar cerrado, como un automvil, hay que tener en cuenta que, probablemente, ha sufrido temperaturas no comparables con las exteriores; por ello tambin es conveniente el registro de temperaturas en el interior.
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2.- INTERIOR DE UNA EDIFICACIN O VEHCULO: Si el cadver se encuentra en el interior de una edificacin, o en un vehculo cerrado, o un entorno similar, hay que adoptar una serie de precauciones adicionales. En primer lugar hay que prospectar el exterior de la edificacin o vehculo porque, si el olor ha emanado fuera del lugar cerrado, los insectos, aun cuando no tengan acceso directo al cuerpo, estarn en los alrededores. Estos insectos deben ser recogidos del modo habitual. En una habitacin cerrada la mayora de los insectos que se van a encontrar en relacin a un cadver son dpteros, tanto larvas como adultos e, incluso, puparios. En este caso hay que inspeccionar los bordes de la habitacin y las esquinas y, si hay alfombras o algo similar en el suelo, hay que mirar debajo. No hay que descuidar las tapiceras ni los registros elctricos o enchufes. Hay que tener cuidado de no confundir los puparios con excrementos de roedores pero, en caso de duda, recjase todo lo que se encuentre. En un vehculo se debe buscar, principalmente, bajo las alfombrillas, debajo de los asientos, en sus bordes y en cualquier hendidura del interior del vehculo. No debe olvidarse el maletero ni la zona del motor.

RECOGIDA DE MATERIAL ENTOMOLGICO 1.- SOBRE EL TERRENO: Se deben recoger solo los animales que se vean con facilidad sobre el cadver, y ser cuidadoso en la manipulacin para evitar cualquier tipo de lesin que, inadvertidamente, pueda causarse al cuerpo. Hay que hacer especial mencin a ciertas zonas del cuerpo en que los insectos tienden a concentrarse o mostrar mayor actividad; estas son: orificios nasales, orejas, boca, ojos y las zonas con traumatismos (heridas incisas, contusiones,...), pliegues del cuello, nacimiento del pelo y cerca de las aberturas naturales del cuerpo. Bsicamente podemos encontrar tres tipos de evidencias entomolgicas: insectos voladores, artrpodos no voladores y estados preimaginales, esto es, huevos, larvas y pupas. La recoleccin de los insectos voladores se puede realizar mediante la utilizacin de trampas adhesivas (o tiras adhesivas) que deben colocarse aproximadamente a un metro del cadver, sobre el sustrato, y antes de que los restos sean examinados de cerca; as los insectos no habrn sido molestados y, en consecuencia, no habrn abandonado el cuerpo. Los artrpodos no voladores, tanto de los alrededores del cadver como los que se encuentran sobre l, y los huevos, larvas y pupas existentes en el cadver, pueden ser capturados directamente con pinzas, con un pincel humedecido o, incluso, con los dedos. Se proceder a la toma de muestras de suelo una vez realizado el levantamiento del cadver. Deben tomarse muestras del sustrato, tanto de debajo del cadver como de las inmediaciones. Las muestras deben contener la hojarasca, humus y las capas superiores del suelo. Debe ahondarse hasta unos 10 cm. Cada muestra puede introducirse, por ejemplo, en una bolsa de plstico; el volumen de sustrato a recoger debe ser de aproximadamente un litro (la capacidad de la bolsa hermtica). El nmero de muestras de sustrato podrn ser dos, una de debajo del cadver y otra de sus alrededores.

En la sala de autopsias, se debe tener en cuenta si el cadver ha sido conservado en cmara frigorfica y conocer el tiempo que el cadver ha pasado en la cmara y la temperatura a que ha estado sometido, y si dicha temperatura ha variado en algn momento y en qu medida. Si existiere alguna masa de larvas establecida en el cadver tambin debe registrarse su temperatura.

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3.- AUTOPSIA: En primer lugar se debe revisar la bolsa, o el contenedor, en que ha sido transportado el cadver; la superficie externa de la bolsa puede llegar a tener insectos, tanto en forma de larva como adultos. En segundo lugar se debe revisar cuidadosamente la ropa del cadver, si la posee, en especial pliegues y zonas humedecidas. En tercer lugar, ya durante el proceso de la autopsia propiamente dicha, hay que centrar la bsqueda en: crneo, con sus aberturas naturales, ojos, odos, pelo y cuero cabelludo, tracto respiratorio, incluyendo la regin bucofarngea, cuello, axilas, reas genital y rectal y las lesiones y heridas. De cada una de la zonas mencionada en que se encuentre material entomolgico, se deben recoger muestras (fijada y en vivo), conservndolas y etiquetndolas por separado.

CONSERVACIN Y REMISIN DE LAS MUESTRAS: ADULTOS: Todos los artrpodos capturados deben ser introducidos en frascos con etanol de 70 como lquido fijador. El etanol de 70 se elabora en el propio laboratorio diluyendo en la proporcin adecuada el etanol de uso mdico (96) considerando este como puro. HUEVOS Y LARVAS Los huevos y larvas de diferentes estadios se conservarn de modo diferente, la mitad del material recogido debe fijarse introducindolos en agua hirviente tres minutos; tras este tiempo se sacarn del agua y se introducirn en etanol de 70. El resto de los ejemplares debe conservarse vivo y remitido con sustrato alimenticio (comida para animales, hgado de pollo...) al laboratorio. Este recipiente debe ir perfectamente aireado, se sugiere taparlo con gasas de uso habitual sujetas con una goma elstica o cualquier otro tipo de procedimiento.

ETIQUETADO: Cada recipiente debe ir perfectamente etiquetado. Las etiquetas se introducirn en los frascos, escritas con lpiz de grafito, nunca con pluma, bolgrafo u otro til de ese tipo porque la tinta se puede correr y resultar entonces ilegible. Es conveniente incorporar un duplicado de la etiqueta en el exterior del frasco con los ejemplares. En la etiqueta se sealarn todos los datos posibles en relacin al caso forense, lugar, fecha, hora y zona en que se ha recogido el material (fig. 1). En los recipientes contenedores Localidad: de las muestras de suelo tambin se introLugar de recogida: ducir una etiqueta, lo ms completa posible e indicando, como en los casos anterio- Fecha de recoleccin: res, con exactitud de dnde se ha tomado N muestra: Caso de referencia: la muestra, con relacin al cadver. Los ejemplares recogidos durante Recolector: la autopsia sern etiquetados por separado, en funcin de la zona de procedencia con p .ECKH= especial mencin de sta. En la etiqueta de los ejemplares recogidos durante el examen de la bolsa o contenedor del cadver se anotar cuidadosamente en qu parte del cuerpo han sido encontrados. No debemos olvidar, una vez ms, que las muestras recogidas deben reflejar la composicin cualitativa y cuantitativa de la fauna existente. q
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ANEXO 1:

CASO FORENSE N

AUTOPSIA: N referencia:

JUZGADO

MUESTRA REMITIDA POR:

CADVER Identificacin: Edad: Otros:

Mdico que la realiza:

MUESTRA ENTREGADA POR:

Fecha:

Fecha y Firma

Sexo:

LOCALIZACIN Poblacin: Topnimo exacto:

Provincia:

Ubicacin del cadver:

Interior de vivienda: _______ Ventanas: _______ n _______ abiertas: ________ cerradas: ________ otros: _____________________________________

En vivienda semiderruida: ______ Techo: _________ completo: __________ semiderruido: _________ Paredes: _______ completo: __________ semiderruido: _________ Interior de vehculo: ______ Ventanas: _______ n ________ abiertas: ________ cerradas: ________ Otras aberturas: ____________________________________ Motor en funcionamiento: _____________________________

Al abrigo de vegetacin: ______ Tipo: rboles: _____ arbustos: _____ otros: _____________________ A resguardo por otras causas: __________ Especificar tipo: ___________________________________ Disposicin del cadver: Caractersticas: Exterior: ___________________ Enterramiento: NO o S o Sustrato: Tierra: _________ Vegetacin (ramas, hojas): __________ Otros: __________ especificar: ________________________________________________________ Enterramiento completo: ______________ Superficial:_________________________ Profundo: __________ a __________ cm. Enterramiento parcial: ________________ Semienterrado 2/3: __________ zonas del cadver al descubierto: ___________ Semienterrado : ___________ zonas del cadver al descubierto: ___________ Semienterrado 1/3: __________ zonas del cadver al descubierto: ___________ Solamente enterradas ciertas zonas del cuerpo: ____ especificar: ____________

Sumergido: NO o S o Agua dulce: __________ Lugar: Ro: ________ Remanso: ________ Ribera: ________ Poza: ________ Estanque: ________ Otros: __________ Especificar: ________________________________________________________ Agua marina: _________ Lugar: Playa: _______ Acantilado: _________ Cueva: _________ Otros: __________ Especificar: ________________________________________________________

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ANEXO 1(Cont.):

Caractersticas:

Sumergido completamente: ________ profundidad: __________ Sumergido parcialmente: __________ Sumergido 2/3: __________ zonas del cadver al descubierto: _______________ Sumergido : ___________ zonas del cadver al descubierto: _______________ Sumergido 1/3: __________ zonas del cadver al descubierto: _______________ Solamente sumergidas ciertas zonas del cuerpo: ____ especificar: ____________

Vestidos: NO o S o Caractersticas: Vestido totalmente: ________ Vestido parcialmente: ______ zonas del cadver al descubierto: _______________ Vestiduras rotas: __________ zonas del cadver al descubierto: _______________ Otros: ______________________________________________________________ Insolacin del cadver: NO o S o Hora de la observacin in situ: __________

Observacin a lo largo de un da: Insolacin por la maana: __________ horas: __________ Insolacin por la tarde: _____________ horas: __________

Alteraciones del cadver y/o entorno (heridas apreciables, actividad de carroeros,...): ________________ _____________________________________________________________________________________ DATOS AMBIENTALES Hora de registro: __________ T ambiente: __________ T superficie suelo: __________ T superficie del cuerpo: __________ T zona de contacto cuerpo-superficie: __________ CAUSAS DE LA MUERTE (AUTOPSIA): Natural: _______ Violenta: _______

Zonas del cadver insoladas: En el momento de la recogida: Todo: _____ Parcialmente: _____ especificar cules: ________________________ Durante periodo de permanencia en el lugar de los hechos: Todo: _____ Parcialmente: _____ especificar cules: ________________________

Hora de la autopsia: __________ Tiempo de permanencia en cmara frigorfica: ________ T cmara frigorfica: _________

Lesiones: S o NO o Tipo y localizacin en el cadver: ____________________________ _________________________________________________________________________________________ Masa de larvas: S o NO o Nmero y localizacin en el cadver: _________________________ _________________________________________________________________________________________ Temperatura: __________ Hora de registro: __________

Otros datos derivados de la autopsia: ___________________________________________________________ _________________________________________________________________________________________

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ANEXO 1(Cont.):

DATOS RELATIVOS A LA MUESTRA: Muestra n: Zona de procedencia: VIVA FIJADA

Alimentada con: Conservante:

Muestra n: Zona de procedencia: VIVA FIJADA

Alimentada con: Conservante:

Muestra n: Zona de procedencia: VIVA FIJADA

Alimentada con: Conservante:

Muestra n: Zona de procedencia: VIVA FIJADA

Alimentada con: Conservante:

TIPO, CONDICIN Y ABUNDANCIA DE LA FAUNA OBSERVADA: Durante la inspeccin in situ del cadver

Durante la autopsia

CROQUIS DEL LUGAR CON LA UBICACIN Y DISPOSICIN DEL CUERPO:

OTRAS OBSERVACIONES:

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