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M O D I F I CAC I O N E S P O S T RAD U C C I O NAL E S

El objetivo principal de esta MAP es que el alumno complemente los conocimientos adquiridos en la clase magistral sobre estructura de protenas. Debe comprender que las estructura de las protenas no slo depende de la secuencia de Aminocidos si no tambin de las seales externas. La estructura de las protenas puede ser modificada y por tanto las funciones de las protenas pueden ser moduladas.

Modificaciones postraduccionales.
Pueden ocurrir una vez finalizada la sntesis del pptido, una vez liberado del ribosoma o, ms frecuentemente, de forma simultnea a su sntesis. Son muchos los tipos de modificaciones que se pueden encontrar y son muchos los aminocidos que pueden ser modificados. Los aminocidos que no se suelen modificar son Gly, Ala (aminocidos pequeos), Leu, Ile, Val o Trp (aminocidos hidrfobos). En la tabla siguiente se presentan las modificaciones ms frecuentes:

MAP corresponendiente al Tema : Modificaciones postraduccionales.

J o s e p C l o t e t

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1. Puentes disulfuro

Se trata de la formacin de un enlace covalente entre dos Cys de la misma o distintas cadenas polipeptdicas. Se consigue mediante una reaccin redox catalizada por la protena-disulfuro-isomerasa en presencia de glutatin, que sufre el proceso inverso (ruptura de su doble enlace). Es un tipo de enlace que da una estructura muy resistente a las protenas. Estos enlaces pueden deshacerse de forma artificial aplicando un ambiente reductor (como por ejemplo el betamercaptoetanol); si se revierte esta modificacin, la protena se desnaturaliza parcialmente.

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2. Glucosilacin

Se trata de la unin covalente de uno o varios glucosilos (radicales de glcidos) encadenados (o sea, la unin de oligosacridos o glucanos). Normalmente, se glucosilan protenas que se van a secretar o son de membrana, y nunca se da en los procariotas. La funcin de estos oligosacridos es: favorecer o estabilizar la conformacin final de la protena extracelular o de membrana. 2. aumentar la vida media de la protena incrementando su estabilidad y su resistencia a la digestin por las proteasas. 3. aumentar la solubilidad en un medio acuoso. 4. aportar las estructuras que van a reconocer algunos receptores.
1.

La adicin de los oligosacridos tiene lugar tanto cotraduccional (mientras se importa al RER) como postraduccionalmente (en el Golgi). El nmero de azcares que puede aadirse a una misma protena no es fijo por lo que cuando se analiza el tamao de las protenas glicosiladas en una electroforesis en gel de acrilamida1, aparecen como una banda borrosa.

Para saber ms....

La glucosilacin comienza en el lado citoslico del RER con las glucosil-transferasas asociadas a membranas. La hay de dos tipos (no excluyentes): La O-glucosilacin se da sobre el grupo hidroxilo de la Ser o Thr. Produce oligosacridos simples que comienzan por Nacetil-galactosamina normalmente. Es post-traduccional porque siempre comienza en el Golgi. La N-glucosilacin se da sobre el grupo amida del aminocido Asn que se encuentre a dos aminocidos antes de Ser, Thr o Cys. Elmproceso comienza con la adicin de N-acetilglucosamina sobre un lpido: el dolicol-fostato. Tras varias etapas de polimerizacin sobreviene una reorientacin, de manera que el oligosacrido queda situado en el lado del lumen del RER. Se completa entonces la sntesis del polisacrido y se 1 La electroforesis en gel de acrilamida es una tcnica de anlisis de protenas que se transfiere a una Asn de pptido que se est introduciendo en el estudiar com ms detalle en la asignaturadel Biologia Molecular, durante el segundo RER. El pptido parcialmente glucosilado se dirige al Golgi donde semestre. se completa la modificacin de la cadena oligosacardica. Los glucanos unidos por N-glucosilacin son ms complejos y 3 diversos que los introducidos por O-glucosilacin.

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Esquema de la N-glucosilacin de las protenas celulares

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3. Fosforilacin
Se trata de una modificacin covalente postraduccional, que se da una vez que la protena est completamente sintetizada y plegada. Se basa en la adicin de un tomo de fsforo a los grupos OH de Ser, Thr y Tyr, loq eu produce un incremento notable de carga negativa en la protena ocasionando una variacin de la estructura de la misma. Es reversible y un mecanismo muy frecuente. La fosforilacin la realizan las protena-quinasas transfiriendo el grupo (el ltimo fosfato) del ATP. El mproceso inverso, (la desfosforilacin) la catalizan las protena-fosfatasas.

4. Acetilacin
Se trata de una modificacin covalente postraduccional basada en la introduccin de un grupo acetilo en el grupo amino de un aminocido. Lo ms frecuente es la acetilacin de la Met del extremo amino (lo que hace que la protena no se pueda secuenciar), pero tambin puede ocurrir sobre el grupo amino libre de las Lys. Es un proceso reversible catalizado por las acetilasas y deacetilasas. El caso ms conocido es la acetilacin de las histonas, lo que produce un cambio en su afinidad por el DNA.

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5. Carboxilacin
Se puede producir la carboxilacin del CH2 en posicin de un Asp o el CH2 en posicin de un Glu. Para la carboxilacin de los factores sanguneos se necesita vitamina K, que es el cofactor de la carboxilasa. La presencia de -carboxiglutamato acta como quelante de Ca2+, suceso imprescindible para el proceso de la coagulacin sangunea.

6. Metilacin

La metilacin se supona un fenmeno exclusivo de los cidos nucleicos, pero en las protenas tambin pueden incorporarse grupos metilo en el -amino de una cadena de Lys o en el -carboxilo de un Glu. La reaccin est

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catalizada por metil-transferasas que utilizan SAM2 como el donador de los metilos. En el caso de la Lys se pueden incorporar hasta 3 metilos en el mismo grupo amino. Ejemplos de protenas que sufren este tipo de modificaciones son la histona H4, algunas protenas musculares, el citocromo c y la calmodulina (sta contiene trimetil-Lys).

7. Hidroxilacin
Consiste en la incorporacin de grupos OH en residuos de Pro y Lys (como en el caso del colgeno). Esta modificacin la realizan varias hidroxilasas presentes en el retculo endoplsmico. La reaccin es qumicamente compleja, pues conlleva la descarboxilacin de la molcula donadora del OH.

8. Acilacin
Se trata de una modificacin cotraduccional que consiste en la unin de un cido graso para aumentar la hidrofobicidad de la protena lo que permite que se ancle en alguna de las membranas de las clulas. Suele ocurrir sobre los residuos de Ser, Thr o Cys y el cido graso incorporado suele un grupo miristilo, acetilo o palmitoilo. Muchas protenas implicadas en la transduccin de seales (Ser/thr/Tyr qinasas, protenas G...) estn miristiladas y ocurre sobre una
2

SAM = S-Adenosil-Metionina.

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secuencia N-Glu-X-X-X-(Ser,Thr)-Y-Y donde Y son aminocidos bsicos.

9. Prenilacin
Consiste en unir radicales terpenoides (derivados del isopreno) a las Cys de las protenas citoslicas y servirles de anclaje a la membrana como en el caso de la acilacin. Los terpenoides ms habitulaes son el geranilo (10C), farnesilo (15C) y el geranilgeranilo (20C). La oncoprotena Ras tiene que estar farnesilada para ser oncognica. Tambin se prenilan las protenas G y algunas protenas de la matriz nuclear (lamininas).

10. Protelisis
La protelisis parcial de las protenas se produce en el retculo endoplsmico, Golgi o citoplasma y suele servir para generar una protena activa. Los ejemplos ms frecuentes son: 1) la activacin de zimgenos (de pro-protenas a protenas), como por ejemplo de procarboxipeptidasa a peptidasa. 2) las protenas con pptidos de trnsito (de preprotena a protena madura) 3) las caspasas durante la apoptosis.

11. Ubiquitinacin
Las protenas tienen una vida media determinada, lo que implica que llega un momento que se destruyen. Las clulas tienen un sistema de marcado de las protenas que tienen que ser destruidas, basado en la adicin de grupos ubiquitina por parte de las ubiquitin-ligasas. La adicin, de estos grupos es irreversible, y se realiza en los aminocidos de Lys. Las protenas, una vez marcadas seran destruidas por el proteosoma.

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Para saber ms....

Otras modificaciones
Algunos grupos prostticos se unen covalentemente a la enzima, como por ejemplo la biotina en la acetil-CoA carboxilasa, o el grupo hemo del citocromo c. En otros, como el de la glutamina sintetasa de procariotas, las enzimas se pueden adenilar (aadir AMP) para regular su actividad. La ADP-ribosilacin es una modificacin reversible sobre residuos de His, Arg, Asn, Lys o Glu empleando NAD+ como cosustrato. Las toximas diftrica, colrica y pertsica ADPribosilan protenas intracelulares (por ejemplo, eIF-2) inespecficamente por lo que perturban la fisiologa celular. Tambin existe esta actividad en una protena telomrica para regular el ensamblaje y desensamblaje del telmero. En algunas protenas se pueden sulfatar las Tyr en el Golgi. La desformilasa procaritica elimina el formilo de la fMet en la primera posicin de las protenas al poco de aparecer el extremo N fuera del ribosoma.