TEJIDOS DIANA DE DAO OXIDATIVO

II Curso Nacional Terico Prctico Antioxidantes en Recursos Teraputicos

Emilio Guija Poma Universidad Cientfica del SUR Universidad Nacional Mayor de San Marcos Octubre 2012

Radicales libres
Los

experimentos realizados por Rebeca Gershman (1954) fueron determinantes en las futuras investigaciones sobre los radicales libres en sistemas biolgicos. El tejido nervioso es muy sensible al dao oxidativo. Irwing Fridovich y Joe McCord (1969) describieron la existencia de la superxido dismutasa respald la teora de la toxicidad del oxgeno.

Radicales libres
Un radical libre es una molcula o fragmento

de molcula que puede tener uno o ms de un electrn desapareado en su orbital externo. Esta condicin lo torna en un elemento altamente reactivo. El oxgeno es un birradical que por absorcin de energa se convierte en un oxgeno singulete o singlete altamente reactivo.

Fuentes de Radicales libres

Los contaminantes ambientales generan diversos derivados de NO que daan la piel y los pulmones. Varios xenobiticos: pesticidas y herbicidas, as como, compuestos qumicos: gas mostaza y alcohol forman ROS como productos de su metabolismo. Los alimentos son una fuente importante de ROS, su consumo produce: perxidos, cidos grasos oxidados, metales de transicin, etc.

Radicales libres
Los

radicales libres se generan en el organismo humano a travs de diversas reacciones. En la mitocondria se generan en la cadena respiratoria con participacin de los componentes respiratorios I y III. En el citosol se forman con participacin de metales de transicin (Cobre y Fierro), perxido de hidrgeno, NADPH oxidasa, etc.

RADICALES LIBRES:
Cadena Transportadora de Electrones Mitocondrial

O2

+ eSOD

O2
H2O2 + 2 H2O + O2 OH- + Fe3+ + OH O2

2 O2- + 2 H+ 2 H2O2 H2O2 + Fe2+

Catalasa

Fuentes de Radicales libres

Xantina XO Araquidonato COX Oxgeno NADPHoxidasa

CTE

O2-

Fuentes de Radicales libres

H2O2
2 GSH Fe2+ Reaccin de Fenton Fe3+ OH

GPX GSSG
H2O

CAT

2 H2O

Acido ascrbico:
Autooxidacin
Cu2+
AH2 + O2 A + H 2O 2

AH2 + Cu2+ H2O2 + Cu+

AH + Cu+ + H+ OH + OH + Cu2+

ANTIOXIDANTE
Es cualquier sustancia que cuando est

presente en bajas concentraciones, comparadas con aquellas de un sustrato oxidable, retarda significativamente, o previene, la oxidacin de dicho sustrato El trmino sustrato oxidable incluye casi todos los compuestos encontrados en las clulas vivientes.

DEFENSA ANTIOXIDANTE
Los

organismos vivientes han desarrollado sistemas de defensa antioxidante destinado a contrarrestar el efecto perjudicial de los radicales libres. Los sistemas antioxidantes pueden clasificarse de diversa manera: 1.- Segn sus caractersticas bioqumicas:
A.-

Enzimticos B.- No enzimticos

ANTIOXIDANTES: ENZIMTICOS
CATALASA
SUPEROXIDO DISMUTASA

GLUTATION PEROXIDASA

GLUTATION REDUCTASA

ANTIOXIDANTES: MECANISMOS DE ACCIN

Captador (scavenger): aqul antioxidante que

evita la reaccin de propagacin de los radicales libres.

Inhibidor: aquel antioxidante que impide la

accin de la sustancia que participa en la generacin de radicales libres.

DEFENSA ANTIOXIDANTE
La

ingesta de sustancias potencialmente capaces de generar radicales libres puede originar el estrs oxidativo. ocurre cuando la defensa antioxidante no es suficientemente eficiente para evitar el dao.

Ello

PROPIEDADES DE UN ANTIOXIDANTE IDEAL

Debe estar presente en cantidades adecuadas en el organismo. Debe ser verstil. Debe estar disponible. Debe regenerarse adecuadamente. De tener una toxicidad tolerable Debe encontrarse adecuadamente compartimentalizado.

RADICALES LIBRES Y ANTIOXIDANTES

DESEQUILIBRIO ANTI-OXIDANTE PRO-OXIDANTE

ESTRS OXIDATIVO
ENFERMEDAD

CITOTOXICIDAD DE LOS RADICALES LIBRES

Anin superxido Perxido de hidrgeno Radical hidroxilo

Oxidacin de Lpidos

Oxidacin de Protenas

Oxidacin de ADN

Condiciones clnicas en las que intervienen las Especies Reactivas de Oxgeno

Hepatitis Cataratas Dermatitis

Apopleja

Artritis

Especies Reactivas de Oxgeno

Cncer Asma

Psoriasis

Infarto al miocardio

Aterosclerosis

MECANISMOS DE LESION CELULAR

Un agente lesivo acta fundamentalmente sobre 4 sistemas intracelulares especialmente vulnerables. Integridad de la membrana celular. Eficiencia de la CTE. Mantenimiento del aparato gentico. Biosntesis de protenas.

A. B. C. D.

Molculas nutricionales: Mecanismos Antioxidantes Potenciales

Interaccin competitiva con enzimas

Modulacin alostrica
Regulacin

de la transduccin de de

seales Modulacin de los factores transcripcin Biosntesis de glutation Expresin gnica en general.

Radicales libres y estrs oxidativo

Es difcil cuantificar la secuela fisiopatolgica

del estrs oxidativo. An no es posible explicar el significado biolgico del estrs oxidativo, aunque se tiene conocimiento que es un componente muy importante en los procesos patolgicos. Existe un estrecho vnculo entre el estrs oxidativo y el proceso inflamatorio.

Radicales libres y vas de sealizacin

En el estrs oxidativo y la inflamacin los ROS

funcionan como segundos mensajeros. Los ROS tienen la propiedad de interactuar con receptores cuya seal se propaga a travs de vas de sealizacin. Los factores de transcripcin y la expresin gnica traducen la seal generada por los ROS. La actual estrategia para el tratamiento de varias enfermedades se utilizan estos conocimientos bsicos sobre expresin gnica.

Radicales libres y vas de sealizacin

El

efecto antioxidante ejercido por componentes de los alimentos o por las plantas medicinales no puede circunscribirse a la proteccin que ejercen sobre los lpidos, protenas y ADN. Es necesario considerar las modificaciones que se producen en las vas de sealizacin celular, sistema redox, expresin gnica, etc.

Radicales libres y vas de sealizacin

En la enfermedad inflamatoria crnica la

p38MAPK regula la expresin de citoquinas inflamatorias como la IL1, as como la expresin de COX-2 e iNOS, esta observacin fue realizada en la enfermedad de Alzheimer. Tambin se ha observado un proceso de hiperfosforilacin de p38MAPK en el tejido cerebral en la enfermedad de Alzheimer.

Radicales libres y vas de sealizacin

La simultnea supresin del gen inflamatorio

y la expresin de iNOS ejercido por fenil-Nter-butilnitrona y la supresin de la transcripcin de componentes proapoptsicos, como la caspasa 3, podra explicarse por la accin antagnica de las vas de transduccin de seales redox-sensible y no solamente por la cascada p38MAPK.

Radicales libres y vas de sealizacin

Desde hace algn tiempo existe un incrementado inters por los ROS, RNS RONS y por su rol en el desarrollo de un gran nmero de enfermedades degenerativas: enfermedades cardiovasculares, enfermedades neurodegenerativas, inflamacin crnica, diversos tipos de cncer, etc.

GENES DE RESPUESTA AL ESTRS

Diversos factores, como las ROS, rayos ultravioleta, metales pesados, desencadenan respuestas genticas al estrs. Los genes se encuentran reguladas por factores de transcripcin como: NFB, factor de choque trmico (HSF), AP-1 (fos, jun).

Modulacin de Factores de Transcripcin

Los ROS actan como segundos mensajeros afectando las vas de sealizacin celular, tales como vas de sealizacin proinflamatorias y la modulacin de la expresin de genes. La mayora de los efectos se han observado en las vas de sealizacin MAPK/AP-1, NF-B y JAK-STAT.

Va de sealizacin

Isquemia y reperfusin
I
ATP

M
Inosina

I O2

A
Hipoxantina

ADP AMP Adenosina

REPERFUSION O2O2

xo
Xantina

xo
Acido rico

Isquemia y Reperfusin: Radicales libres

EFECTO DE EPIGALOCATEQUINA: ISQUEMIA Y REPERFUSION

Ratas tratadas con epigalocatequina en un experimento sobre isquemia y reperfusin miocrdica mostraron eventos que estuvieron asociados con un reducido dao al miocardio. Los efectos benficos tuvieron relacin con una reduccin de la unin de NF-B y AP-1 al ADN.
Molecular Medicine (2004)

Miocardio Porcino Control y Miocardio Reperfundido despus de 30 minutos.

Rev Esp Cardiol. 2009;62:199-209.

Isquemia Reperfusin Heptica

Consejo Superior de Investigaciones Cientficas - Catalua

Dao isqumico cerebral

Uno

de los principales eventos es la generacin de radicales libres, que daan lpidos, protenas y DNA conduciendo a la muerte neuronal. Estas especies reactivas comprende al NO, O2-, ONOO- y OH El H2O2 no es precisamente una especie reactiva de oxgeno pero se encuentra estrechamente ligada a estos procesos.

Dao isqumico cerebral

El dao isqumico est asociado con una

respuesta inflamatoria en el que se liberan o activan molculas de adhesin y citoquinas. La respuesta inflamatoria es una consecuencia de la expresin de un gen activo que dispara el proceso isqumico. Se activan o sintetizan factores de transcripcin tales como: NF-B, factor inducible de hipoxia-1 (HIF-1) y el factor regulatorio de interferon-1 (IRF-1).

Radicales libres, Placa Amiloide y Enfermedad de Alzheimer

Radicales libres y Enfermedad de Alzheimer

Alteracin de los mecanismos de sealizacin en la Enfermedad de Alzheimer

Ricardo Maccioni Baraona.- Medwave 2008 Dic;8(11)

Dao isqumico cerebral

El cerebro dispone de una eficiente defensa

antioxidante endgena contra el anin superxido, tales como glutation y SOD. Tambin utiliza captadores dietticos como: ascorbato y -tocoferol. El anin superxido por dismutacin (SOD) es convertido en perxido de hidrgeno y ste por accin de la CAT en agua y O2. En la isquemia/reperfusin esta defensa antioxidante es superada por los ROS.

Mecanismos de produccin de Radicales libres

Anin superxido
Durante la isquemia cerebral la elevacin de Ca2+ activa la PLA2. Esta enzima libera araquidonato e inicia la generacin de ROS va COX y Lipoxigenasa. La COX adiciona dos O2 al araquidonato para formar PGG2 y luego PGH2. Una importante fuente de O2- en la isquemia cerebral es la isoforma inducible de COX-2.

Mecanismos de produccin de Radicales libres

La formacin del radical hidroxilo se realiza

mediante la reaccin de Fenton. El H2O2 formado a partir del anin superxido podra reaccionar con el Cu+ o el Fe2+ y generar el radical hidroxilo (OH). Esta reaccin podra ser favorecida por una disminucin en el pH, que prevalece durante y despus de la isquemia.