Espectroscopa Ultravioleta / Visible

INTRODUCCIN
La espectroscopa es un rea de la ciencia que comprende un conjunto de tcnicas
instrumentales, modernas, las cuales permiten obtener informacin detallada y rpida
sobre la estructura molecular de una sustancia y adems tienen la ventaja de que se
requieren cantidades muy pequeas (recuperables) de la sustancia a analizar. De ah que
la espectroscopa es una de las herramientas ms tiles en qumica orgnica en la
identificacin de un compuesto desconocido.

DEFINICIN
Estudio de la interaccin de la materia con las radiaciones electromagnticas.
Cuando un rayo de luz atraviesa un material, este va a ser afectado por la luz
dependiendo de la intensidad y de otras propiedades de la luz. Por ejemplo: hoy en da se
habla mucho sobre el dao que la luz ultravioleta puede causar en la piel humana en ese
caso se ve reflejada esa interaccin materia-energa radiante, aunque de manera
destructiva.

FUNDAMENTO
La espectroscopia permite medir la cantidad de radiacin que absorbe una sustancia a
diferentes longitudes de onda, pasando de un nivel de energa bsico a un nivel de
energa excitado.

CONCEPTOS BSICOS EN EL ESTUDIO DE LAS RADIACIONES
ELECTROMAGNTICAS

Radiaciones electromagnticas (luz): Es la energa radiante que se transmite al espacio
en forma de ondas pero que tambin tiene propiedades de partcula.
Espectro electromagntico: Es el conjunto de los diferentes tipos de radiaciones
electromagnticas. Ver tabla 1.
Debido a que la radiacin electromagntica tiene propiedades de onda. Se pudiera
describir por su longitud de onda (). La longitud de onda es la distancia entre la cresta
de una onda y la cresta de la onda ms prxima. La longitud de onda puede ser medida
desde km hasta micrmetros o micrones ().
Debido a que la radiacin electromagntica tiene propiedades de partcula, esta se
transmite mediante fotones o cuantos que se definen como paquetes corpusculares de
energa.
Frecuencia (v).- Es el nmero completo de ciclos por segundo (Hz), (cps).
Constante de Planck (h).- Es una constante de proporcionalidad que conecta la
frecuencia de radiacin y la energa de un fotn.


2
Ecuacin de Planck



E = Energa de 1 fotn
h = Constante de Planck, 6.62 x 10
-34
J-s
v = Frecuencia, s
-1
= Longitud de onda, cm
c = Velocidad de la luz, 3.00 x 10
10
cm/s


Tabla 1. Regiones del espectro electromagntico.

Regin del espectro Longitud de
onda (m)
Frecuencia
(Hz)
Energa (J) Efecto en las
molculas
Rayos gamma < 10 pm >30.0 EHz >19.9E-15 J
Ionizacin
Rayos X < 10 nm >30.0 PHz >19.9E-18 J
Ultravioleta Lejano < 200 nm >1.5 PHz >993E-21 J
Transiciones
electrnicas
Ultravioleta Cercano < 380 nm >789 THz >523E-21 J
Luz Visible < 780 nm >384 THz >255E-21 J
Infrarrojo Cercano < 2.5 m >120 THz >79.5E-21 J
Vibraciones
moleculares
Infrarrojo Medio < 50 m >6.00 THz >3.98E-21 J
Infrarrojo Lejano < 1 mm >300 GHz >199E-24 J
Microondas < 30 cm >1.0 GHz >1.99e-24 J Rotacin molecular
Ultra Alta Frecuencia
Radio
<1 m >300 MHz >1.99e-25 J
Movimientos giratorios
Transiciones de spin
nuclear
Muy Alta Frecuencia
Radio
<10 m >30 MHz >2.05e-26 J
Onda Corta Radio <180 m >1.7 MHz >1.13e-27 J
Onda Media Radio <650 m >650 kHz >4.31e-28 J
Onda Larga Radio <10 km >30 kHz >1.98e-29 J
Muy Baja Frecuencia
Radio
>10 km <30 kHz <1.99e-29 J

v
hc
h E = = A


3
Equivalencias comunes:

Factor Prefijo Smbolo Factor Prefijo Smbolo
10
24
yotta Y 10
-24
yocto y
10
21
zetta Z 10
-21
zepto z
10
18
exa E 10
-18
atto a
10
15
peta P 10
-15
femto f
10
12
tera T 10
-12
pico p
10
9
giga G 10
-9
nano n
10
6
mega M 10
-6
micro
10
3
kilo k 10
-3
mili m
10
2
hecto h 10
-2
centi c
10
1
deca da 10
-1
deci d


ESPECTROSCOPA ULTRAVIOLETA/VISIBLE

DEFINICIN
Estudio de la interaccin de la materia con las radiaciones electromagnticas
ultravioleta visible.
Ultra: ms alla/violeta: regin visible de mayor frecuencia. Se detecta a que van de los
200 a los 400 nm e inciden con una energa que va desde los 70 a 140 kcal.
Visible: regin del espectro electromagntico que el ojo humano es capaz de percibir, por
lo general va desde 400 a 700 nm con una Frecuencia: 3,8410
14
Hz 7,8910
14
Hz.
Calcule la Energa.
FUNDAMENTO
Cuando la molcula absorbe energa de la regin UV/VISIBLE, un electrn es promovido
desde su estado fundamental a un estado electrnico excitado. En absorcin UV-Visible,
pueden observarse las distintas transiciones electrnicas debido a que cualquiera de estos
tipos de e- pueden ser promovidos (excitados) desde sus orbitales moleculares de enlace
hasta los orbitales anti-enlace.

Teora de los orbitales moleculares.- Relaciona la tendencia de los electrones para
llenar sus octetos basados en su propiedad ondulatoria. Los enlaces covalentes se forman
cuando los orbitales atmicos se solapan formando orbitales moleculares.
Tipos de orbitales moleculares.-
- Orbital molecular enlazante
- Orbital molecular antienlazante

La configuracin electrnica "normal" de una molcula es conocida como estado basal.


4
Cuando una molcula absorbe luz de una longitud de onda en particular, un electrn es
promovido desde su estado basal a su estado excitado. Esta transicin es llamada una
transicin electrnica y cuando ocurre, la molcula est en estado excitado.

HOMO.- Highest occupied molecular orbital
LUMO.- Lowest unoccupied molecular orbital
En el estado Basal las molculas orgnicas ubican sus e
-
de valencia en 3 tipos de
orbitales moleculares.
Orbitales o (electrones de enlace o)
Orbitales t (electrones de enlace t)
Orbitales q (pares de electrones libres de no enlace q)

q t-
q o-
t t-
o o-

Caractersticas de transiciones electrnicas que ocurren por absorcin de energa
UV-Visible

1. Transiciones o o-:
Ocurre en los enlaces covalentes simples. Debido a la fuerza de este enlace
(solapamiento frontal de orbitales atmicos), la excitacin de este tipo de electrones
requiere de radiacin UV de alta energa ( muy cortas).
Ej. 130 nm (220 Kcal/mol) para alcanos y cicloalcanos.

2. Transiciones q o-:
Ocurre en enlaces donde un electrn n de un par de electrones sin compartir
(electrones de no enlace es excitado hasta un orbital vaco antienlazante o-). En este
caso, para provocar la excitacin, la radiacin ultravioleta aplicada, debe ser de
longitudes de onda menores a los 200 nm.
Ej. Halogenuros de alquilo, alcoholes, fenoles, teres y aminas
~ 185 nm (150 Kcal/mol)
Las transiciones mencionadas anteriormente no son registradas por el UV cercano
(cuarzo) y no son de inters en este campo.

3. Transiciones t t-:
Debido a que el enlace t es un enlace dbil, es ms fcil producir la excitacin
t t-. Sin embargo, cuando se trata de enlaces t aislados, estas transiciones no se
registran en el UV de cuarzo debido a que absorben tambin a longitudes de onda
menor a 200 nm. Se observan en los enlaces covalentes dobles y triples.

Cuando los enlaces t son conjugados, las transiciones t t- si pueden ser
detectadas en el UV cercano debido a la mayor estabilidad por resonancia y menor
requerimiento de energa para ser excitados.


5

Efecto de la conjugacin en los espectros UV

Compuesto requerida para la excitacin
2-buteno 210 nm
butadieno 217 nm
1,3,5-hexatrieno 258 nm
1,3,5,7-octatetraeno 286 nm

4. Transiciones q t-:

Se observan cuando hay pares de electrones no compartidos que forman parte de un
enlace mltiple que se podran excitar produciendo transiciones q o-, q t-. Las
primeras requieren alta energa para producirse y no son de utilidad para esta tcnica.
Las segundas se logran a longitudes de onda alrededor de los 280 nm y son bien
observables en el UV cercano y an en la regin visible en forma de un espectro de
absorcin.
Se observa en compuestos con grupos
R R R R
N
N N
O


MEDICIN DE LA ESPECTROSCOPIA UV/VISIBLE
El aparato utilizado para mediciones de espectroscopia UV/VISIBLE es el
espectrofotmetro UV/Visible, el cual tiene una fuente que emite todas las frecuencias
del ultravioleta (mas de 200nm). Esta luz pasa a travs de un monocromador, que emplea
una rejilla de difraccin o una prisma para descomponer la luz en un espectro y
seleccionar una longitud de onda determinada. Esta longitud de onda se divida en dos
haces, uno que pasa a travs de la muestra y el otro que pasa a travs de la celda de
referencia (solvente). El detector mide de forma continua la relacin de intensidad del haz
de referencia (I
r
) en comparacin con el haz de la muestra (I
m
). Al barrer el espectrmetro
las longitudes de onda de la regin ultravioleta, un registrador traza una grfica (que se
llama espectro) de la absorbancia de la muestra como funcin de la longitud de onda (fig.
1)





Detector
Fuente
luminosa
Muestra Detector Espectro
Detector Detector
Fuente
luminosa
Muestra Detector Espectro


6
Para medir el espectro ultravioleta (o ultravioleta-visible) de un compuesto, la muestra se
disuelve con un solvente (que no absorba a mas de 200nm. Los tpicos son: metanol,
etanol, hexano y agua). La solucin de la mezcla se coloca en una celda de cuarzo y se
coloca un poco de solvente en una celda de referencia. Las muestras y los solventes para
la espectroscopia ultravioleta deben ser muy puros. La presencia de una impureza con un
coeficiente de extincin grande, puede ocultar fcilmente el espectro del compuesto
deseado.
Cuando un haz de radiacin UV-Vis atraviesa una disolucin conteniendo un analito
absorbente, la intensidad incidente de luz (I
r
) es atenuada hasta I
m
. Esta fraccin de
radiacin que no ha logrado traspasar la muestra es denominada transmitancia (T)
(T=I
m
/I
r
). El inverso (cantidad de energa absorbida) es la absorbancia (A) (A=-logT).
La absorbancia, A de la muestra a una longitud de onda determinada est gobernada por
la Ley de Beer.
A = log ( I
r
/I
m
) = c l
c = concentracin de la muestra en moles por litro
l = longitud de la trayectoria de la luz a travs de la celda en centmetros
= coeficiente de extincin molar (o absortividad molar) de la muestra,
es una medida de la fuerza con que la muestra absorbe la luz de esa
longitud de onda. Absorbancia que podra ser observada cuando se usa una
solucin 1 M en una celda de 1 cm de longitud. El solvente en el cual la
muestra es disuelta debe ser reportado ya que la absortividad molar no es
igual en todos los solventes
Un espectro ultravioleta es una grfica de A, la absorbancia de la muestra, como funcin
de la longitud de onda.
Los espectros ultravioleta y visible tienden a mostrar picos y valles bastantes amplios. Los
datos espectrales que son los ms caractersticos de la muestra son:
- Las de absorbancia mxima,
max

- El valor del coeficiente de extincin en cada mximo.
Si los espectros ultravioleta y visible son anchos y carecen de detalle, simplemente se da
la informacin espectral como el valor o valores de
max
junto con el coeficiente de
extincin para cada valor de
max
. Por ejemplo el espectro del isopreno (2-metil-1,3-
butadieno). Este espectro se puede resumir como sigue:
max
= 222nm = 20000
Ej. c
acetona
= 900 a 187 nm c
acetona
= 15 a 270 nm
Se reporta: 187 nm (c = 900, hexano).



7
Qu factores rigen la cantidad de luz energa absorbida?

1. La estructura del compuesto.
2. El nmero de molculas que posee la muestra que depende de la concentracin del
compuesto y de la longitud de la celda.

INTERPRETACIN DE LOS ESPECTROS UV/VIS

La parte de la molcula responsable de la absorcin UV/visible se denomina cromforo.
Los sustituyentes que cuando se unen a un cromforo alteran la
max
y la intensidad de la
absorcin son llamados auxocromos.
Ej los grupos OH, NH
2
cuando se introducen en un cromforo disponen los pares de
electrones libres para interactuar con los electrones t y producir transiciones t t-.
La presencia de un auxocromo puede provocar alteracin a mayores o menores valores
de
max
.
Si la alteracin es a ms largas, hablamos de un desplazamiento batocrmico.
Si es a ms cortas es un desplazamiento hipsocrmico.



La intensidad de la absorcin depende de la probabilidad de interaccin entre la luz y el
sistema electrnico de la molcula. A mayor momento bipolar mayor es la probabilidad de
interaccin.
Ej. Estructuras de resonancia de la anilina indican como el auxocromo incrementa el
momento bipolar de la molcula y por lo tanto la absortividad molar del compuesto.
Este desplazamiento en la c debido a la presencia de un auxocromo puede producir los:

Efecto hipercrmico.- Es el aumento de c

Efecto hipocrmico.- Reduccin de la c

200 nm 400 nm
Desplazamiento batocrmico. Desplazamiento rojo
Desplazamiento hipsocrmico. Desplazamiento azul


8


La aplicacin tangible de la espectroscopia UV es la localizacin e identificacin de los
sistemas conjugados en los que ocurran transiciones q t-.
La adicin de un doble enlace a un sistema conjugado tiene un efecto importante sobre la

max
. Si se va del etileno (
max
= 171nm) al butadieno (217nm), al 1,3,5-hexatrieno (258nm)
y al 1,3,5,7-octatetraeno (290nm), los valores de
max
aumentan en unos 30 a 40 nm para
cada doble enlace que aumenta el sistema conjugado. Tambin los grupos alquilo
aumentan el valor de
max
, en unos 5nm por cada uno. Por ejemplo, el 2,4-dimetil-1,3-
pentadieno tiene el mismo sistema conjugado que el 1,3-butadieno, pero con tres grupos
alquilos adicionales; su absorcin es 232nm, que es 15nm mayor que que la del 1,3-
butadieno, que es 217nm. Si un compuesto tiene suficientes dobles enlaces, absorber luz
visible (
max
> 400 nm) y el compuesto ser coloreado.
Ejemplos:
|-caroteno: precursor de la vitamina A es una sustancia anaranjada que se encuentra en
las zanahorias, duraznos y patatas.
Licopeno: sustancia roja que se encuentra en tomates, patilla y grapefruit roja.


|-caroteno
max
= 455 nm
Efecto hipocrmico
Efecto hipercrmico
c


9

Licopeno
max
= 474 nm

Qu buscar en un espectro UV?

Es difcil extraer informacin de un espectro UV, sin embargo, se pueden hacer algunas
generalizaciones las cuales combinadas con un espectro IR pudieran servir para identificar
grupos carbonilos, dobles enlaces, sistemas aromticos, grupos NO
2
, nitrilos, enonas y
otros cromforos. En ausencia de un espectro IR nos podramos guiar de la siguiente
manera:
1. Una banda simple de baja a mediana intensidad (c = 100 a 10 000) y a menores
de 220 nm, usualmente indica la presencia de transiciones q o-. Hay la
posibilidad de encontrar aminas, alcoholes, teres, tioles. Una excepcin es la
transicin q t- de los grupos ciano que aparece en esta regin.
2. Una banda simple de baja intensidad (c = 10 a 100) en la regin de 250 a 360 nm
transicin q t-. Debido a que la absorcin no ocurre a larga se indica la
presencia de un cromforo no conjugado o simple que contiene O, N S ( C = O, C
= N, N = N, -NO
2
, -COOR, -COOH CONH
2
).
3. Dos bandas de mediana intensidad (c = 1000 a 10000) ambas con
max
sobre los
200 nm generalmente indica la presencia de un sistema aromtico. Sustituciones en
los anillos aromticos incrementarn la absortividad molar arriba de los 10 000.
4. Bandas muy intensas (c = 10 000 a 20 000) sobre los 210 nm generalmente
representan tanto una cetona o-|- insaturada un dieno polieno.
5. Cetonas simples, cidos, steres, amidas y otros compuestos que contienen
sistemas t y pares de e
-
desapareados, mostrarn 2 absorciones:
a. q t- transicin a > 300 nm (baja intensidad)
b. t t- transicin a < 250 (alta intensidad).
6. Compuestos altamente coloreados absorben en la regin visible comnmente
presentan largas cadenas de sistemas conjugados o cromforos policciclicos
aromticos, sin embargo algunos nitro, azo, nitroso o-diceto, compuestos
policromados o iodados pueden ser vistos en esta zona.

Los valores de
max
y de de una molcula conjugada dependen de la naturaleza exacta
del sistema conjugado y sus sustituyentes. R. B. Woodward y L. F. Fieser desarrollaron
un extenso conjunto de correlaciones entre las estructuras moleculares y sus mximos de
absorcin, y enunciaron las reglas de Woodward y Fieser. Sin embargo, para la mayor
parte de los casos, se pueden emplear algunas generalizaciones sencillas para estimar los
valores aproximados de
max
para los sistemas ms comunes.


10
Reglas de Woodward Fieser para dienos

En general los dienos exhiben una banda de intensidad (c = 20 000 a 26 000) en la regin
de 217 a 245 nm perteneciente a las transiciones t t-.
Luego del estudio de una gran cantidad de dienos Woodward y Fieser realizaron una
correlacin emprica de las variaciones estructurales que permitieron predecir la longitud
de onda a la cual un dieno conjugado desconocido ser absorbido tomando como
referencia el butadieno.


Valor base para un dieno acclico 217 nm
Valor base para un dieno heteroanular 214 nm
Valor base para un dieno homoanular 253 nm
Incrementos por:
Doble enlace extendiendo la conjugacin 30 nm
Sustituyentes alqulicos o residuos de anillo 5 nm
Doble enlace exocclico 5 nm
Grupos polares
-OAc 0 nm
- O-alquil 6 nm
- S-alquil 30 nm
- Cl, Br 5 nm
- N-(alquil)
2
60 nm


Reglas de Woodward Fieser para enonas

La conjugacin de un doble enlace con un grupo carbonlico induce a una intensidad de
absorcin (c = 8000 a 20000) correspondiente a una transicin t t- de el grupo
carbonilo. La absorcin es encontrada entre 220 y 250 nm en enonas simples. La
transicin q t- es mucho menos intensa (c = 50 a 100) y aparece a 310 330 nm.
Mientras que la transicin t t- es afectada por modificaciones del cromforo. La
transicin q t- no exhibe un comportamiento predecible. Woodward examin el
espectro UV de una gran cantidad de enonas y fue capaz de formular una serie de reglas
empricas las cuales permiten predecir la en la cual la transicin t t- ocurrir en una
enona desconocida.
Grupos carbonilo o-| insaturados

-C=C-C=C-C=O
o
|
_
o





11
Valor base para anillos de 6 miembros enonas
parientes acclicas
215 nm
Valor base para anillos de 5 miembros 202 nm
Valor base para cidos carboxlicos steres 195 nm
Valor base para aldehdos 210 nm
Valor base para dienonas acclicas 245 nm
Incrementos por:
Doble enlace extendiendo la conjugacin 30 nm
Sustituyentes alqulicos o residuos de anillo
o: 10 nm
|: 12 nm
en adelante: 18 nm
Doble enlace exocclico 5 nm
Componente dieno homocclico 39 nm
Grupos polares
- OH
o: 35 nm
|: 30 nm
o: 50 nm
-OAc o,|,o: 6 nm
- O-CH
3
o: 35 nm
|: 30 nm
: 17 nm
o: 31 nm
- Cl
o: 15 nm
|: 12 nm
- Br
o: 25 nm
|: 30 nm
- N-(alquil)
2
|: 95 nm

Reglas para las bandas principales de los derivados bencnicos

Ar CO - G


Valor base cuando G = grupo alquilo o residuo de anillo

246 nm
Valor base cuando G = H

250 nm
Valor base cuando G = OH o O-alquil

230 nm


12


R -Ar CO - G


R

Incremento
Alquil residuo de anillo

o,m + 3 nm
p +10 nm
- OH, OCH
3
, O-alquil-

o,m + 7 nm
p +25 nm
- O
-
o + 11 nm
m + 20 nm
p +78 nm
- Cl
-
o,m + 0 nm
p +10 nm
- Br
-
o,m + 2 nm
p +15 nm
- NH
2
o,m + 13 nm
p + 58 nm


REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

1. Fessenden, R. y Fessenden J., 1983. Qumica Orgnica. 2
da
. Edicin. Mxico. Editorial
Iberoamericana, 1078 p.
2. Hart H. y Craine L., 1995. Qumica Orgnica. 9na. Edicin. McGraw-Hill. Mxico. 578 p.
3. Meislich, H. et al., 1992. Qumica Orgnica. 2
da
. Edicin. McGraw-Hill. Madrid. 626 p.
4. Morrison, R. and Boyd N.,1987. Qumica Orgnica. 5
ta
. Edicin. Boston. Fondo
Educativo Interamericano. 1478 p.
5. Solomons, T.W.G., 1978. Organic Chemistry. New York. Wiley and Sons, 1057 p.
6. Wade L., 1993. Qumica Orgnica. 2
da
. Edicin..Prentice Hall Hispanoamericana.
Mxico. 1312 p.
7. Wingrove, A. y Caret R., 1984. Qumica Orgnica. 7ma. Edicin. Mxico. Fuentes
impresores. 1569 p.
8. Bruice, P. 1998. Organic Chemistry. 2da edicin. New Jersey. Prentice Hall. 1256 p