TemasselectosdeCalidadenSerologa (aplicacinenelbancodesangre)

Validacinyverificacindemtodos deexamencuantitativos

IgnacioReyesRamrez entidad mexicana de acreditacin, a.c.

Introduccin

Sedescribirnlospuntosaconsiderarparala validacinyverificacindelos procedimientosdeexamencuantitativos, paraelcumplimientoyevaluacindelpunto 5.5.2 delanormaNMXEC151892008.

 Conformealasdirectricesestablecidasenla Guaparalavalidacinylaverificacindelos procedimientosdeexamencuantitativos empleadosporellaboratorioclnico.

AlcancedelaGua

Ladebenaplicarloslaboratoriosclnicosque seencuentranenalgunaetapadelprocesode acreditacinantelaentidadmexicanade acreditacin,a.c. atodoslosprocedimientos deexamencuantitativosdelalcancedela acreditacin

Descripcin

Yaqueexistendiversostipodemtodos analticos disponiblesenelmercado. Esimportantequeellaboratorioevale los diferentesmtodosyseleccioneaquelque mejorseadecuealasnecesidadesyrecursos.

Validacin

Sedefinecomo: LaConfirmacinmedianteelsuministrode evidenciaobjetivadequesehancumplido losrequisitosdelmtodoparauna utilizacinoaplicacinespecificaprevista.

(NMXCH152IMNC2005)

 Losdatosdela validacindelmtodo losinformael fabricanteensus instructivosyestos puedencomprender porsuaplicacin:

Linealidad. Precisin. Veracidad. Limitededeteccin. Selectividad. Sensibilidadanaltica. Intervalodetrabajo. Especificidadanaltica. Incertidumbre.

 Siseutilizanmtodos desarrolladosporel laboratoriooalguno fuemodificado,se deberealizarla validacincompletay presentarlas evidencias correspondientes.

Linealidad. Precisin. Veracidad. Limitededeteccin. Selectividad. Sensibilidadanaltica. Intervalodetrabajo. Especificidadanaltica. Incertidumbre.

 Lavalidacin compruebalaaptituddelos procedimientosdeexamen yreflejalas condicionesrealesdelaaplicacindelos mismos.

Verificacin

Laconfirmacinmediantelaaportacinde evidenciaobjetivadequesehancumplidolos requisitosespecificadosparaunmtodo.

(NMXCC9000IMNC2005)

 Laverificacinconsisteenevaluarel desempeodelmtodo parademostrarque cumpleconlosrequisitosparaelusoprevisto, quefueronespecificadoscomoresultadode suvalidacin.(NMXCH152IMNC2005)

VE= Valor Esperado del Reactivo. VO= Valor Observado del Reactivo.

Parmetrosdedesempeo
Ellaboratoriodebe realizarlaverificacin delosmtodosy evidenciarsicumplen conlascaractersticas dedesempeoenlas condicionesdel laboratorio. Linealidad. Precisin. Veracidad. Incertidumbre.

EvaluacindelosParmetros
Linealidad Evaluarelintervalo analticodelmtodo enellaboratorio. Elcomportamiento lineal. Laverificacindebe tomarencuentalos puntosdedecisin clnica.

 Precisin. Valordelamagnitud. Estimacindelvalor delmensurando. Errordemedida (aleatorioy sistemtico).

Veracidad. Concordanciaentrela mediaaritmticayel valorverdaderoo aceptadocomo referencia. Errorsistemtico (sesgo).

 Errorsistemtico. Mediaqueresultadeun nmeroinfinitodemedicionesdelmismo mensurando,efectuadobajocondicionesde repetibilidad,menosunvalorverdaderodel mensurando. (NMXZ055IMNC)

 Exactituddemedicin. proximidaddela concordanciaentreelresultadodeuna medicin yunvalorverdaderodel mensurando.(NMXCH152IMNC2005)

EjemplodeExactituddemedicin.

EXACTITUD

ERROR DE MEDIDA

ERROR ALEATORIO

ERROR SISTEMATICO

PRECISIN

VERACIDAD

Relacin entre los distintos tipos de error y los correspondientes conceptos cualitativos

 Incertidumbre.

Intervalodentrodelcualseespera queseencuentrelacantidad medida,teniendoencuentatodas lasfuentesdeerror. Incertidumbreestndar(u). 1DS Incertidumbreexpandida(U). U=u xk IncertidumbreCombinada(Uc). Errorcuadrticomedio(ECM).

 Incertidumbredemedicin. Parmetro asociadoalresultadodeunamedicinque caracterizaladispersindelosvaloresque podranrazonablemente,seratribuidosal mensurando.(NMXCH152IMNC2005)

VRS

O
media VRI

O O O O OO

O O O

Incertidumbredemedicin.

Aplicacindelaverificacin
Objetivo Verificareldesempeodelmtodoanaltico paralacuantificacindeAc.rico enun equipoautomatizadoconformealo establecidoenlaGuadeValidacinde mtodoscuantitativos.

Caractersticasdelreactivo
IntervaloBiolgicodeReferencia: 2,0a7,0mg/dL (hombre). 2,0a5,0mg/dL (mujeres). Reproducibilidad: Nivel:3,7mg/dL,DS: 0,23mg/dL,CV%:0,61 Nivel:6,2mg/dL,DS: 0,37mg/dL,CV%:0,60 Nivel:10,0mg/dL,DS: 1,60mg/dL,CV%:1,60 Recuperacin: Entre97a101%paraunniveldeUricemia de10 mg/dL.

Lmitededeteccin: Enespectrofotmetroelestndarde10,0mg/dL proporcionaunalecturaaproximadade0,290 D.O. Loquesignificaqueelcambiomnimode concentracindetectableenesascondiciones para0,001D.O.ser aproximadamentede0,03 mg/dL. Linealidad: Lareaccineslinealhasta20mg/dL

Linealidad
VERIFICACION DE LA LINEALIDAD DEL AC. URICO

No. 1 2 3 4 5

Dilucin % 0 25 50 75 100

Concentracin minima y maxima (mg/dL) 20

Valor obtenido mg/dL 17.83 8.66 4.57 2.28

Valor Teorico (X) mg/ dL 20 10 5 2.5 1.25

Sesgo 2.17 1.34 0.43 0.22 0.04

% Error 0.11 0.13 0.09 0.09 0.03

1.25

1.21

Promedio

0.08

Grafico de Linealidad
[ ] mg/ dL Ac. Urico 20.00 15.00 10.00 5.00 0.00 0 1.21 20 2.28 40 4.57 60 Dilucin Ensayo de Linealidad 80 100 120 8.66 17.83

Datosdela CorrelacinLineal

Regresion Lineal Constante [A] coeficiente de regresion [b] coeficiente de correlacin [r] coeficiente critico de correlacion [r2]

Valor obtenido mg/dL 0.060

0.884

0.999

0.999

Ecuacin de la recta

y = (0.884)x + (0.60)

r2 = 0.999

Grafico de Linealidad
Valor obtenido [ ] mg/dL Ac. Urico 20.00 15.00 10.00 5.00 0.00 0 5 10 15 20 25 Valor asignado [ ] mg/dL Ac. Urico y = (0.884)x + (0.60) r2 = 0.999

Ensayo de Linealidad

Criteriosdeaceptabilidad
Calcularlapendiente(1)ylaordenadaal origen(0). Compararelsesgooelporcentajede errorparacadadilucinycompararcon elfabricante. Tomarladecisindeaceptarorechazar.

Decisin
Elmtodoanalticoenlascondicionesdel optimasdellaboratoriopresentaunrango linealconfiablede1,12a17,83mg/dL. Elcoeficientedecorrelacinlineal(r2)de 0,999 loqueindicaqueelintervalo evaluado,lafuncindecalibracines lineal.

VERIFICACION DE LA LINEALIDAD DEL AC. URICO

No. 1 2 3 4 5

Dilucin % 0 25 50 75 100

Valor 1 17.50 8.50 4.50 2.30 1.25

Valor 2 18.00 9.00 4.70 2.25 1.20

Valor 3 18.00 8.50 4.50 2.30 1.17

Media 17.83 8.66 4.57 2.28 1.21 Promedi o

DS 0.24 0.24 0.09 0.02 0.03

0.08

 Alcompararladesviacinestndardecada dilucinseobservaunpromediode0,08. El%Errornosuperael0,08%. Porloqueelrangoevaluadoparaelmtodo eslinealsegnloestablecidoporel fabricante,yaqueaconcentracionesbajas permiteunadesviacinde 0,23mg/dLy altasa 1,60mg/dL.

Precisin
SueroControldeAc. ricode5,25y9,01 mg/dL. 20datoscorrida intrada. Secalcula: media desviacinestndar %delcoeficientede variacin
No. de Lectura Ac. Urico (mg/dL) Normal Ac. Urico (mg/dL) Patologico

Valor Asignado x DS CV% %Error relativo %Recobro

5.25 5.1587756 0.082078268 1.591041645 1.737607617 98.26239238

0.91 8.98855357 0.11357817 1.26358669 0.23802924 99.7619708

 DeacuerdoconCLIAparaimprecisin intraserialointrada,laDSobtenidadebeser igualomenora delErrorTotalpermitido. ParaAc.ricoelerrortotalpermitido 5%. DSIntrada 0,25ET, 1,25% Sustituyendo SueroNormal:0,082 1,25% SueroPatolgico:0,113 1,25%

Veracidad
Laveracidaddelmtodosepuedeestimarpormediodel errorrelativo.
%deErrorrelativo=[Valorreal Valordelamedicin ]x100 Valorreal

Criterio: Elvalordelerrorrelativoseamenoroigualalreportado. Resultados: SueroNormal:1,73% SueroPatolgico:0,23%

La veracidad del mtodo se puede estimar por medio del calculo del porcentaje de recuperacin. % Recuperacin = [___Valor obtenido___] x 100 Valor de referencia

Criterio: El % de recuperacin sean menor o igual al reportado por el fabricante. Resultados: Intervalo del fabricante de 97 al 101 % Suero Normal: 98,26 % Suero Patolgico: 99,76 %

Incertidumbre

Mtodoenzimticoparalacuantificacinde cidoricoespectrofotomtricoconuricasa. Empleandouncalibradorconunvalorde10 0.005mg/dLconunfactordecoberturak=2 paraunniveldeconfianzadel95%.

Componentesdelaincertidumbre

Variabilidadpremetrolgica. Incertidumbredelvalordelcalibrador. Magnitudesinfluyentesendgenas. Imprecisininterdiaria.

Variabilidadpremetrolgica

Elconjuntodeactividadesrealizadasdesdela tomadelamuestrahastaquelamuestrade sueroestalistaparalamedicinprovocaun coeficientedevariacinpremetrolgicade 0,8%.Estavariabilidadaplicadaalresultado obtenido(5,25mg/dL)correspondeauna incertidumbreestandarde0,04mg/dL.

Incertidumbredelvalordelcalibrador

Elvalordelcalibradoresde10mg/dLyla incertidumbreexpandidaesde0,005mg/dL. Porlotanto,laincertidumbreestndar relativadelvalorasignadoalcalibradores 0.05%,queaplicadoalresultadoobtenido (5,25mg/dL)correspondeauna incertidumbreestndarde0,002mg/dL.

Magnitudesinfluyentesendgenas
Segnelfabricantedelosreactivoselcriterio paraaceptarqueunaconcentracinde bilirrubinas,cidoascrbicoobromurode hioscinaenelplasmaproduzcaunainterferencia significativaesquenoaltereelvalordel mensurandoen 10%. Losposiblescambiosdelvalorverdaderodel mensurandoestarnenelintervalo[0%;10%] [10%;0%],aunqueesmsprobablequeest mscercade0%quedel10% del0%.

Considerandounadistribucintriangular rectangular:u=[(ba)2/18]0,5 dondeaybson,respectivamente,loslimites inferiorysuperiordelintervalo;enestecaso: u=[(100)2/18]0,5 =2,4% queaplicadoalresultadode5,25mg/dL, correspondea0,126mg/dL;ycomoestoes aplicableatresmagnitudesinfluyentes: Uc =[3X(0,126mg/dL)2 ]0,5=0,027mg/dL

Imprecisininterdiaria Esteprocedimientodemedidatieneun comportamientoheterocedsticoconun coeficientedevariacinmetrolgico, aproximadamenteconstantealolargodel intervalodemedida,igualal1,6%.Esta imprecisininterdiariaaplicadaalresultado 5,25mg/dLyexpresadacomoincertidumbre estndar,correspondea0,08mg/dL.

Estimacindelaincertidumbre
uc =(0,042 +0,0022+0,0272 +0,082)0,5= 0,047mg/dL U=uc xk=0,047mg/dLx2=0,094mg/dL Resultado: 5,25 0,094mg/dL Intervalo: 5,15a5,34mg/dL

Datosdelaverificacin
VerificacindelMtodoenzimticode uricasaparaladeterminacindecidorico. Linealidad: Elmtodoeslinealde1,2a17.8mg/dL Precisin: SueroNormal:DS=0,08;CV=1,59% SueroPatolgico:DS=0,11;CV=1,26%

 Veracidad: ErrorRelativo SueroNormal:1,73% SueroPatolgico:0,230 % Recuperacin SueroNormal:98,26% SueroPatolgico:99,76 %

Incertidumbre: U=0,094mg/dL Resultadodela muestra: 5,25 0,094mg/dL Intervalo: 5,15a5,34mg/dL

Criteriosdeevaluacindela normaNMXEC15189IMNC 2008/ISO15189:2007

MP-FE009-00 Entrada en vigor 2009-05-08

Requisitos tcnicos

Requisitos tcnicos

Requisitos tcnicos

Requisitos tcnicos

MUCHASGRACIAS