O Microscpio Eletrnico

O microscpio eletrnico apareceu em 1932 e vem sendo rapidamente aperfeioado. As mquinas mais atuais permitem aumentos de 5 mil a 500 mil vezes, sem muita dificuldade. A diferena bsica entre os microscpios tico e eletrnico que neste ltimo no utilizada a luz, mas sim feixes de eltrons. No microscpio eletrnico no h lentes de cristal e sim bobinas, chamadas de lentes eletromagnticas. Estas lentes ampliam a imagem gerada pela passagem do feixe de eltrons no material e a projetam para uma tela onde formada uma imagem de pontos mais ou menos brilhantes, semelhante de um televisor em branco e preto. No possvel observar material vivo neste tipo de microscpio. O material a ser estudado passa por um complexo processo de desidratao, fixao e incluso em resinas especiais, muito duras, que permitem cortes ultrafinos obtidos atravs das navalhas de vidro do instrumento conhecido como ultramicrtomo.

Fonte: www.cnpab.embrapa.br

MICROSCPIO PTICO

ROSCPIO PTICO

O Microscpio ptico um instrumento usado para ampliar, com uma srie de lentes, estruturas pequenas impossveis de visualizar a olho nu. constitudo por um componente mecnico que suporta e permite controlar um componente ptico que amplia as imagens.

Microscpio ptico. 1-Ocular; 2-Revlver; 3-Objectiva; 4-Parafuso macromtrico; 5-Parafuso micromtrico;

6-Platina; 7-Espelho; 8-Condensador

Poro mecnica
A poro mecnica composta por: P ou base serve de apoio dos restantes componentes do microscpio. Coluna ou brao fixo base, serve de suporte a outros elementos. Platina onde se fixa a reparao a observar; tem uma janela por onde passam os raios luminosos e tambm parafusos dentados que permitem deslocar a preparao. Tubo ou canho suporta a ocular na extremidade superior. Revlver pea giratria portadora de objectivas de diferentes ampliaes. Parafuso macromtrico a sua rotao responsvel por movimentos verticais da platina, rpidos e de grande amplitude. Parafuso micromtrico a sua rotao responsvel por movimentos verticais da platina, lentos e de pequena amplitude, permitem aperfeioar a focagem.

Poro ptica
Na parte ptica temos: Condensador conjunto de duas ou mais lentes convergentes que orientam e espalham regularmente a luz emitida pela fonte luminosa sobre o campo de viso do microscpio. Diafragma constitudo por palhetas que podem ser aproximadas ou afastadas do centro atravs de uma alavanca ou parafuso, permitindo regular a intensidade da luz que incide no campo de viso do microscpio. Objectivas permitem ampliar a imagem do objecto 10x, 40x, 50x, 90x ou 100x. As objectivas de 10x, 40x e 50x so designadas objectivas secas pois entre a preparao e a objectiva existe somente ar. As objectivas de 90x e 100x so designadas objectivas de imerso, uma vez que, para as utilizar, necessrio colocar uma gota de leo de imerso entre elas e a preparao, a qual, por ter um ndice de refraco semelhante ao do vidro, evita o desvio do feixe luminoso para fora da objectiva.

Oculares sistema de lentes que permite ampliarem a imagem real fornecida pela objectiva, formando uma imagem virtual que se situa a aproximadamente 25 cm dos olhos do observador. As oculares mais utilizadas so as de ampliao 10x, mas nos microscpios binoculares tambm existem oculares de 12,5, 8x e 6x. Fonte luminosa a mais utilizada actualmente a luz artificial, fornecida por uma lmpada de tungstnio ou de halogneo, includa no aparelho juntamente com um interruptor com restato, que permite regular a intensidade da luz emitida......

Operao
A intensidade luminosa regulavel: aumenta-se a intensidade luminosa sobindo-se o condensador e abre-se o diafragma ou diminui-se a intensidade luminosa descendo o condensador e baixa-se o diafragma. A ampliao consiste no grau de aumento da imagem em relao ao objecto. A ampliao total obtida com o microscpio ptico consiste no produto da ampliao da objectiva pela ampliao da ocular. Esta, sem distoro, no ultrapassa as 1200x. O factor mais significativo para a obteno de uma boa imagem , contudo, o poder de resoluo, que corresponde distncia mnima que necessrio existir entre dois pontos para que possam ser distinguidos ao microscpio. Para o microscpio ptico essa distncia de 0,2 m devido ao comprimento de onda das radiaes visveis. Com efeito, a propriedade da ampliao s tem interesse prtico se for acompanhada de um aumento do poder de resoluo. No que respeita a microscopia ptica vulgar existem dois mtodos fundamentais de observao, de acordo com o tipo de preparao a observar: Se a lmina no est corada (exame a fresco): a observao feita com objectivas secas, do seguinte modo: Desce-se o condensador e sobe-se o diafragma para que a iluminao no seja muito intensa, j que as lminas no esto coradas. Com a objectiva de 10x escolhe-se o pormenor a observar. Seguidamente foca-se com a objectiva de 40x, fazendo uma primeira aproximao da objectiva lmina por controlo visual externo, e s depois a focagem por afastamento usando o parafuso macromtrico e posteriormente o micromtrico para focagem final. Se a lmina est corada: a observao feita com objectivas de imerso, procedendo do seguinte modo. Sobe-se o condensador, abre-se o diafragma e regula-se a iluminao da fonte luminosa no mximo, de modo a conseguir-se uma iluminao intensa, apropriada observao de lmina coradas.

Coloca-se na lmina uma gota de leo de imerso e procede-se focagem. Primeiro aproximando a objectiva lmina com controlo visual externo, seguidamente a focagem propriamente dita com o parafuso macromtrico e finalmente o aperfeioamento da focagem com o parafuso micromtrico. Alguns microorganismos esto no limiar do poder de resoluo do microscpio ptico. A sua observao pode ser facilitada com o emprego de tcnicas especiais de microscopia ptica.

Microscpio de 1751

Microscopia de fundo escuro

uma aplicao do princpio de Tyndall. Assim os corpsculos a examinar so fortemente iluminados por feixes luminosos que penetram lateralmente, o que conseguido com condensadores especiais. Deste modo, a nica luz que penetra na objectiva a difractada pelas partculas presentes na preparao, pelo que passam a ser visveis em fundo escuro.

Microscopia de fluorescncia
Permite observar microorganismos capazes de fixar substncias fluorescentes (fluorocromos). A luz UV, ao incidir nessas partculas, provoca a emisso de luz visvel e observa-se os microorganismos a brilhar em fundo escuro. Como exemplo, o bacilo da tuberculose fixa a auramina, pelo que o diagnstico da doena pode ser feito por microscopia de fluorescncia.

Microscopia de contraste de fase

Permite a observao de microorganismos vivos, sem colorao, atravs do contraste devido diferena de fase dos raios luminosos que atravessam o fundo relativamente fase da luz que atravessa os microorganismos. Esta diferena de fase conseguida por utilizao de uma objectiva de fase, que consiste num disco de vidro com um escavao circular, de modo que a luz que atravessa a escavao tem diferena de 1/4 de fase em relao que travessa a outra poro do vidro. Assim, os objectos no corados podem funcionar como verdadeiras redes de difraco, pois os pormenores da sua estructura resultam de pequenas diferenas nos ndices de refraco dos componentes celulares, e estes originam diferenas de fase nas radiaes que os atravessam

Fonte: pt.wikipedia.org