CEFALEXINA

HO O N N H H H O CH3 H2O S

H2N

C16H17N3O4S . H2O Anhidra

PM: 365,4 PM: 347,4

23325-78-2 15686-71-2

Definicin - Cefalexina es el cido [6R[6,7(R*)]]-7-[(aminofenilacetil)amino]-3-metil8-oxo-5-tia-1-azabiciclo[4.2.0]oct-2-eno-2carboxlico, monohidrato. Debe contener no menos de 95,0 por ciento y no ms de 103,0 por ciento de C16H17N3O4S, calculado sobre la sustancia anhidra y debe cumplir con las siguientes especificaciones. Caracteres generales - Polvo cristalino blanco o casi blanco. Poco soluble en agua; prcticamente insoluble en alcohol, cloroformo y ter. Sustancia de referencia - Cefalexina SR-FA. CONSERVACIN En envases de cierre perfecto. ENSAYOS Identificacin A - Absorcin infrarroja <460>. En fase slida. B - Absorcin ultravioleta <470>. El espectro de absorcin ultravioleta de una solucin de Cefalexina 1 en 50.000 debe presentar mximos y mnimos a las mismas longitudes de onda que una solucin similar de Cefalexina SR-FA. La absortividad, calculada sobre la sustancia anhidra, a la longitud de onda de mxima absorcin, aproximadamente 262 nm, debe estar comprendida entre 95,0 y 104,0 % de la de la Cefalexina SR-FA, considerando la potencia de la Sustancia de Referencia. C - Aplicar la siguiente tcnica cromatogrfica. Fase estacionaria - Emplear una placa para cromatografa en capa delgada (ver 100. Cromatografa) recubierta con gel de slice para cromatografa con indicador de fluorescencia, de 0,25 mm de espesor. Fase mvil - Acetato de etilo, agua, acetonitrilo y cido actico glacial (42:18:14:14) Solucin muestra - Preparar una solucin de Cefalexina en agua, con la ayuda de cido clorhdrico 0,1 N, con una concentracin de aproximadamente 25 mg por ml.

Solucin estndar - Preparar una solucin de Cefalexina SR-FA en agua, con la ayuda de cido clorhdrico 0,1 N, con una concentracin de aproximadamente 25 mg por ml. Procedimiento - Aplicar por separado sobre la placa 5 l de la Solucin muestra y 5 l de la Solucin estndar, dejar secar las aplicaciones y desarrollar los cromatogramas hasta que el frente del solvente haya recorrido aproximadamente tres cuartas partes de la longitud de la placa. Retirar la placa de la cmara, marcar el frente del solvente, dejar secar al aire y examinar bajo luz ultravioleta a 254 nm: el valor de Rf de la mancha principal en el cromatograma obtenido a partir de la Solucin muestra se debe corresponder con el obtenido con la Solucin estndar. Determinacin de la rotacin ptica <170> Rotacin especfica: Entre +149 y +158. Solucin muestra: 5 mg por ml, en Solucin reguladora de ftalato neutralizada pH 4,4 (ver Soluciones reguladoras en Soluciones). Cristalinidad Colocar partculas de Cefalexina en aceite mineral sobre un portaobjetos de vidrio. Examinar la mezcla empleando un microscopio ptico con luz polarizada: las partculas deben presentar birrefringencia y posiciones de extincin cuando se gira la platina del microscopio. Determinacin del pH <250> Entre 3,0 y 5,5, determinado sobre una suspensin acuosa de aproximadamente 50 mg por ml. Determinacin de agua <120> Titulacin volumtrica directa. 8,0 %. Entre 4,0 y

Sustancias relacionadas Sistema cromatogrfico - Proceder segn se indica en Valoracin, excepto que el caudal debe ser aproximadamente 1,0 ml por minuto. Solucin A Disolver 1,0 g de 1pentanosulfonato de sodio en una mezcla de 1 litro de agua y 15 ml de trietilamina. Ajustar a pH 2,5 0,1 con cido fosfrico. Solucin B Disolver 1,0 g de 1pentanosulfonato de sodio en una mezcla de 300 ml de agua y 15 ml de trietilamina. Ajustar a pH 2,5 0,1 con cido fosfrico, agregar 350 ml de acetonitrilo, 350 ml de metanol y mezclar. Fase mvil - Emplear mezclas variables de Solucin A y Solucin B. Hacer los ajustes necesarios (ver Aptitud del sistema en 100. Cromatografa ). Programar el cromatgrafo del siguiente modo: Tiempo Solucin A (minutos) (%) Solucin B (%) Etapa

0-1 1-33,3 33,3-34,3

100 1000 0

0 0100 100

Isocrtico Gradiente lineal Isocrtico

Diluyente - Disolver 18 g de fosfato monobsico de potasio en 1 litro de agua. Solucin estndar A - Disolver una cantidad exactamente pesada de Cefalexina SR-FA en Diluyente para obtener una solucin de aproximadamente 0,08 mg por ml. Solucin estndar B - Disolver una cantidad exactamente pesada de Cefalexina SR-FA en Diluyente para obtener una solucin de aproximadamente 0,16 mg por ml. Solucin muestra - Pesar exactamente alrededor de 25 mg de Cefalexina, transferir a un matraz aforado de 5 ml, disolver en Diluyente, completar a volumen con Diluyente y mezclar. Procedimiento - Inyectar por separado en el cromatgrafo volmenes iguales (aproximadamente 20 l) de la Solucin estndar A, la Solucin estndar B y la Solucin muestra, registrar los cromatogramas y medir las respuestas de los picos de cefalexina en el cromatograma obtenido a partir de las Soluciones estndar A y B y de todos los picos, distintos al de cefalexina, en el cromatograma obtenido a partir de la Solucin muestra. Graficar las respuestas de los picos de cefalexina obtenidos a partir de las Soluciones estndar A y B en funcin de la concentracin en mg por ml, calculada sobre la sustancia anhidra. Hallar la ecuacin de la recta que mejor ajuste entre estos dos puntos y el cero. A partir de la ecuacin de la recta y de las respuestas de los picos obtenidos con la Solucin muestra, determinar la concentracin en mg por ml de cada sustancia relacionada en el cromatograma de la Solucin muestra. Calcular el porcentaje de cada sustancia relacionada. No debe contener ms de 1,0 % de ninguna sustancia relacionada individual; y la suma de todas las sustancias relacionadas no debe ser mayor de 5,0 %. Lmite de dimetilanilina <570> Cumple con los requisitos. VALORACIN Sistema cromatogrfico - Emplear un equipo para cromatografa de lquidos con un detector ultravioleta ajustado a 254 nm y una columna de 25 cm 4,6 mm con fase estacionaria constituida por octadecilsilano qumicamente unido a partculas porosas de slice de 3 a 10 m de dimetro, de baja acidez. El caudal debe ser aproximadamente 1,5 ml por minuto.

Fase mvil - Agua, acetonitrilo, metanol y trietilamina (85:10:5:1,5). Disolver 1,0 g de 1pentanosulfonato de sodio, ajustar a pH 3,0 0,1 con cido fosfrico y desgasificar. Hacer los ajustes necesarios (ver Aptitud del sistema en 100. Cromatografa). Solucin del estndar interno - Transferir 300 mg de 1-hidroxibenzotriazol a un matraz aforado de 1 litro, disolver en 10 ml de metanol, completar a volumen con Fase mvil y mezclar. Preparacin madre del estndar - Disolver una cantidad exactamente pesada de Cefalexina SR-FA en agua para obtener una solucin de aproximadamente 1 mg por ml. Preparacin estndar - Transferir 10,0 ml de la Preparacin madre del estndar a un erlenmeyer de 50 ml con tapn de vidrio, agregar 15,0 ml de Solucin del estndar interno y mezclar. Preparacin muestra - Pesar exactamente alrededor 100 mg de Cefalexina, transferir a un matraz aforado de 100 ml, disolver en agua, completar a volumen con agua y mezclar. Transferir 10,0 ml de esta solucin a un erlenmeyer de 50 ml con tapn de vidrio, agregar 15,0 ml de Solucin del estndar interno y mezclar. Aptitud del sistema (ver 100. Cromatografa) Cromatografiar la Preparacin estndar y registrar las respuestas de los picos segn se indica en Procedimiento: los tiempos de retencin relativos deben ser aproximadamente 0,35 para 1hidroxibenzotriazol y 1,0 para cefalexina; la resolucin R entre los picos del estndar interno y de cefalexina no debe ser menor de 5; la desviacin estndar relativa para inyecciones repetidas no debe ser mayor de 2,0 %. Procedimiento - Inyectar por separado en el cromatgrafo volmenes iguales (aproximadamente 20 l) de la Preparacin estndar y la Preparacin muestra, registrar los cromatogramas y medir las respuestas de los picos principales. Calcular la cantidad de C16H17N3O4S en la porcin de Cefalexina en ensayo.