PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO Y TECNICAS DE SIEMBRA

Yessenia Villamizar Jaimes (1640749), Karent Cardenas Berbesi (1640685), Cristian Contreras (1640 ), Jonnatan Rivera (1640746)
Entregado el 01 de Febrero de 2012

RESUMEN Los medios de cultivo son una mezcla de nutrientes que en concentraciones adecuadas y en condiciones fsicas ptimas, permiten el crecimiento de los microorganismos. El control de su fabricacin, preparacin, conservacin y uso, asegura la exactitud, confiabilidad y reproductibilidad de los resultados obtenidos. En esta prctica utilizaremos estos medios al proceso de aislamiento de la Escherichia Coli, haciendo la siembra en cuatro diferentes tipos de medio, la siembra en caldo, siembra en agar en tubo, siembra en agar en caja.
Palabras claves: Flamear. Inocular, diseminar, estra, siembra, incubacin.

INTRODUCCIN La Escherichia coli es un bacilo gramnegativo poco exigente en sus

siembra en caldo nutritivo que se elabora en un tubo, es un medio lquido, no est solidificado.

necesidades nutritivas y relativamente resistente a los agentes externos, que se cultiva en medios comunes, incluso a temperaturas de 45C, 10 que lo permite diferenciar de los dems coliformes. Los medios utilizados para sembrar esta bacteria fueron primero, la

Segundo, la siembra en agar inclinado, es un medio slido y se elabora en un tubo

inclinado.

flamear nuevamente la boca del tubo y tapar. El Segundo medio utilizado fue siembra en agar inclinado de tubo, para inocular la bacteria en este tubo se sigui el procedimiento para el tubo anterior pero en ves de revolver con el asa, inoculamos en zigzag en la superficie del medio del cultivo, flameamos tambin la boca del tubo y tapamos.

Tercero, la siembra de agar en caja, se puede utilizar cualquier tipo de medio en esta prctica utilizaremos el agar nutritivo y agar mc conkey.

MATERIALES Y MTODOS Se llevo a cabo en el laboratorio de microbiologa la siembra de cultivos en diferentes medios de la bacteria conocida como Escherichia Coli, la muestra fue tomada de un cultivo aportado por el hospital Erasmo Meoz de la ciudad de Ccuta para la universidad francisco de Paula Santander. El primer medio utilizado fue el agar en caldo en tubo, para inocular la bacteria en dicho tubo fue necesario seguir un procedimiento el cual consisti, en tomar el asa y esterilizarla a la llama (esperar el rojo vivo) luego dejar enfriar, tomar la muestra, quitar el tapn del tubo y flamear la boca del tubo, introducimos el asa en el tubo sin tocar las paredes y hacemos rotacin, sacamos el asa,

El tercer medio utilizado fue el agar en caja utilizando el mtodo de siembra en rejilla, el cual se utiliza para el recuento de colonias se hace una sola estria que cruze el centro del agar, luego se hacen estrias en agulo recto con respecto a la estria inicial; se voltea el agar en angulo de 90 y se hacen estrias hasta cubrir todo el agar.

El

cuarto y ultimo mtodo es la siembra por agotamiento que

consiste en dividir el medio en tres partes y estriar hasta la mitad dar vuelta y nuevamente estriar hasta la mitad asi hasta completar el medio completo . Finalmente se llevan incubadora por 48 horas 37C, para su desarrollo crecimiento. a a y

ANALISIS Y DISCUSIN DE RESULTADOS Despus de 48 horas de estar en incubacin los cultivos se observan resultados del crecimiento bacteriano en cada medio. En la siembra caldo en tubo, observamos que el crecimiento microbiano presenta caractersticas de tipo cremoso o lechoso. En la siembra de agar inclinado en tubo, al sacar los tubos de la incubadora y observar el crecimiento bacteriano, vimos que por donde se trazo el asa en zigzag, se formo una lnea blanca es decir indica que hay crecimiento en la poblacin bacteriana.

Seguir el procedimiento adecuado al aplicar cada mtodo de medio de cultivo permite obtener ptimos resultados en la investigacin de una bacteria, en este caso Escherichia Coli. La esterilizacin juega un papel muy importante al eliminar microorganismos que pueden llegar a afectar un medio de cultivo. Por medio de esta practica se logro elaborar medios de cultivo en donde En la siembra en rejilla, observamos que por donde se para el asa es visible el crecimiento de la bacteria. En la siembra por agotamiento observamos que apenas se estaban formando los caminos de bacterias, podemos suponer que en este tipo de medio las bacterias se demoran un poco ms en formar colonias.

A- siembra en caldo en tubo, B- siembra de agar inclinado en tubo, Csiembra en rejilla, D- por agotamiento.

A
Antes

CONCLUSIONES

Despus

se pudo observar 48 horas y a una de 37 las caractersticas de microbiano en la Coli .

despus de temperatura diferentes crecimiento bacteria E.

Villalobos Escobar Sandra Guadalupe; Comparacin de resultados de proceso de esterilizacin con dos indicadores biolgicos; Revista enfermeras IMSS 2001; 9(3): 143-146 http://es.scribd.com/doc/31 429855/Medios-de-Cultivoy-Tecnicas-de-Siembra-KvO http://laboratoristasmack.bl ogspot.com/2009/05/tiposde-siembra-en-medios-decultivo.html
Envolver correctamente los medios de cultivo y que estos cuando se almacenan en cajas de petri deben colocarse inversamente para evitar su deshidratacin por evaporacin y de esta manera no tener que desechar las muestras.

Tambin se observ (con la teora) que de acuerdo al tipo de bacteria que se requiera sembrar, ser el tipo de medio de cultivo, esto, ya que cada bacteria requiere cierto tipo de nutrientes para subsistir y formar sus colonias, adems de que cierto tipo de medios de cultivo, nos pueden mostrar de acuerdo a su composicin ciertas caractersticas que presentan determinado tipo de bacterias, ya sea por su pH y que este sea indicado por los indicadores de los medios o por que reaccione con ciertos componentes del medio creando colores o formas.

BIBLIOGRAFIA http://www.ucv.ve/Farmaci a/Micro_web/Catedras02/m etodesteril.pdf : Mtodo estril y Medios de cultivo por la Prof. Sofa Gutirrez de Gamboa (Octubre 2001) Ctedra de Microbiologa y Parasitologa. Universidad Nacional del Comahue. http://en.scientificE.Coli.co mmons.org/8842407