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El tiempo que tardan la enzima y el sustrato en encontrarse se conoce como estado preestacionario.

TCNICAS EXPERIMENTALES En los ltimos aos se han diseado muchos sistemas /tcnicas para estudiar reacciones rpidas. A continuacin se presentarn tres de ellas: Mtodos de flujo En los primeros, denominados mtodos de flujo, veremos dos modelos, de flujo continuo y de flujo retenido. En ambos los reactivos son introducidos, generalmente, por medio de jeringas hipodrmicas acopladas mecnicamente, y despus se mezclan en una cmara de mezclado. Una de las jeringas contiene el sustrato y la otra la enzima. Seguidamente la mezcla pasa por un tubo de observacin, donde se mide espectrofotomtricamente la concentracin del reactivo o producto en diferentes puntos del tubo (se suele media la absorbancia del complejo ES). En flujo continuo se utilizan grandes cantidades de las soluciones en cada experimento (volmenes grandes) y el aparato tiene un tiempo muerto de 1 ms, necesario para que la enzima y el sustrato se mezclen; siendo ambas lo que constituye su desventaja principal. Adems, con este mtodo podemos distinguir dos tipos de flujo: flujo laminar, cuando la mezcla se produce en el centro y no en las paredes; y flujo turbulento, cuando el proceso de mezcla es ms homogneo.

Con el modelo de flujo retenido, esta desventaja se elimina debido a la presencia de otra jeringa que recibe la solucin efluente y est dispuesta de tal forma que cuando su mbolo tope con una barrera, se interrumpe el flujo repentinamente. Dejamos que la enzima y el sustrato se mezclen y cuando el sistema es homogneo es cuando empezamos a medir el cambio de absorbancia. Adems, los volmenes usados son muchos menores. Esta tcnica resulta muy apropiada para reacciones bioqumicas y ha sido ampliamente empleada en cintica enzimtica.

Esta tcnica tiene el inconveniente del tiempo que se requiere para hacer la mezcla, teniendo en cuenta que muchas reacciones se completan en tiempos inferiores a 1s y a menudo mucho menores. Salto de temperatura El salto de temperatura es una tcnica de relajacin, que estn basadas en someter a una pequea perturbacin un sistema que inicialmente se encuentra en equilibrio y midiendo la velocidad a la que la mezcla de reaccin se acomoda a su nuevo equilibrio (tiempo de relajacin) podremos calcular las constantes de velocidad directa e inversa de la reaccin. La tcnica que nos atiene es muy simple. Partimos de una mezcla en equilibro de enzimas y sustratos. A esta mezcla la sometemos a un lser infrarrojo que va a aumentar la temperatura de nuestra mezcla unos 5/10 0C, desplazndola del equilibrio. Midiendo el tiempo que tarda la mezcla en volver al equilibrio podremos calcular la velocidad de la reaccin. El inconveniente de esta tcnica es que no se puede aplicar a reacciones irreversibles, porque con estas se llega a un estado diferente del equilibrio cuando desplazamos este ltimo.