Captulo: ECC

OBTENCIN Y COMPARACIN DE LOS ACEITES OBTENIDOS DE LAS MICROALGAS Dunaliella salina Y Chlorella nativa COMO MATERIA PRIMA PARA LA PRODUCCIN DE BIODIESEL
Mario R. Alvear Alayn
Estudiante Investigador, Programa de Ingeniera Qumica, Universidad de Cartagena ironsword9@hotmail.com

Carlos Castillo1, Daniela Henao 2, Lesly Tejeda 3 Resumen El presente trabajo tuvo como objetivo comparar la calidad y cantidad de aceite extrado de dos especies de microalgas, la halfila (Dunaliella salina) y una especie de agua dulce del gnero Chlorella, aislada en la Baha de Cartagena (Colombia), con el fin de evaluar su posible integracin en la produccin de biodiesel. Para el cultivo de ambas especies se utiliz la misma metodologa manteniendo condiciones ptimas para cada especie de pH, concentracin de nitrgeno, intensidad lumnica y temperatura. La extraccin del aceite se llev a cabo por el mtodo Bligh y Dyer, adems la calidad del aceite se evalu de acuerdo a la norma tcnica colombiana. A manera de resultados, se encontr que con la Dunaliella se obtuvo una mayor produccin de biomasa por da, sin embargo la cantidad de aceite encontrado en la Chlorella fue mayor. El aceite obtenido a partir de las dos especies present una calidad adecuada para la produccin de biodiesel. Palabras claves Aceite, biodiesel, cultivo, microalgas.

INTRODUCCIN

Los biocombustibles hoy da son una de las principales alternativas que la humanidad ha encontrado para mitigar y combatir los daos causados por el uso excesivo de los combustibles fsiles, los cuales han venido generando una mayor contaminacin al emplearse en actividades como las del sector transporte, comercial e industrial. En conjunto, estas actividades son fuentes en constante emanacin de gases de efecto invernadero, y por ello contribuyen a los problemas del smog fotoqumico, del
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Estudiante 9 semestre de Ingeniera Qumica, Universidad de Cartagena, carlos11a1@hotmail.com Estudiante 9 semestre de Ingeniera Qumica, Universidad de Cartagena, danielahenaoa@hotmail.com 3 Docente investigadora Programa de Ingeniera Qumica, Universidad de Cartagena, lptbenitez@gmail.com

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calentamiento global y a las lluvias cidas presentes en las diferentes metrpolis del mundo. La materia prima por excelencia para la produccin de biocombustibles es la biomasa, la cual posee en estos momentos una gran popularidad gracias a su renovabilidad, adems de generar favorables impactos econmicos, sociales y ambientales en los sectores industrial y domstico, principalmente. Entre los biocombustibles derivados de la biomasa ms comunes se encuentra el bioetanol y el biodiesel, siendo este ltimo el de mayor campo investigativo y aplicativo. Uno de los problemas que presenta el biodiesel es respecto a sus fuentes de materias primas, puesto que son productos agrcolas con un mercado muy activo y su cultivo ha empezado a generar un alarmante aumento en la deforestacin de los bosques nativos, expansin indiscriminada de la frontera agrcola, desplazamiento de cultivos alimentarios y ganadera, al igual que la destruccin de los ecosistemas y la biodiversidad adyacente al sector de siembra y produccin, sin contar con el desplazamiento de los trabajadores rurales; es por esto se han atribuido a la produccin y uso de los biocombustibles consecuencias tales como escasez alimentaria y generacin de pobreza. [1] La Tabla 1 muestra una comparacin de las producciones de aceite de algunas fuentes convencionales, el rea requerida para su cultivo y el porcentaje del rea cultivable de los Estados Unidos necesaria para abastecer la mitad de las necesidades de combustible para transporte. Usando la soja como materia prima para la produccin de biodiesel, se requiere el 326 % del rea cultivable de EE. UU. para cubrir el 50 % de las necesidades de combustible para transporte en EE. UU., en cambio las microalgas requieren hasta el 3 % del rea de cultivo para cubrir la misma necesidad. [2] Las producciones de aceite de microalga en la Tabla 1 estn basadas en la productividad de biomasa demostrada experimentalmente en foto-bioreactores.

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TABLA 1. Comparacin de algunas fuentes de Biodiesel

Rendimiento de Aceite Cultivo Maz Soya Canola Jatropha Coco Aceite de palma Microalga
a b c

rea de cultivo requerida (Mha) 1540 594 223 140 99 45 2 4.5

a

Porcentaje del rea cultivable en EE. UU.a 846 326 122 77 54 24 1.1 2.5

(Litros/hectrea) 172 446 1190 1892 2689 5950 136,900 58,700

b

Microalgac

Para abastecer el 50% de las necesidades de combustible para transporte. 70% (en peso) de aceite en biomasa 30% (en peso) de aceite en biomasa

A fin de presentar una alternativa a la problemtica generada por el cultivo y uso de aceites vegetales comestibles, se plantea la produccin de biodiesel a partir de materias primas no convencionales, como es el caso de las microalgas, las cuales presentan la ventaja de producir el mayor porcentaje de aceite en un menor terreno de cultivo, adems de absorber de CO 2 durante su crecimiento y no presentar un impacto negativo en el sector alimenticio. [3] Es por esto el objetivo planteado en el trabajo fue comparar la calidad y cantidad de aceite extrado de dos especies de microalgas, la halfila (Dunaliella salina) y una especie de agua dulce del gnero Chlorella, aislada en la Baha de Cartagena (Colombia), con el fin de evaluar su posible integracin en la produccin de biodiesel.

METODOLOGA

Durante el trabajo de experimentacin se utilizaron las cepas de Chlorella nativa aislada en el Centro Internacional Nutico Fluvial y Portuario del SENA (Bolvar) y la cepa de Dunaliella salina, que se obtuvo del laboratorio de biotecnologa de la Universidad de Antioquia. Ambas cepas actualmente se mantienen activas en el Centro Internacional Nutico Fluvial y Portuario del SENA.
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Todos los ensayos se llevaron a cabo en un cuarto acondicionado a una temperatura promedio de 26 2C, con una intensidad lumnica de 3000 lux generada por lmparas de luz (Blanca) da y un foto periodo de mantenimiento de las cepas de 24 horas Luz. Se usaron lmparas de tubo fluorescente (Semejante en calidad a la luz del sol), las cuales proporcionan menos calor y promueven mximas tasas de crecimiento y divisin. [4] La Dunaliella salina fue cultivada en agua de mar, la cual fue colectada en las playas de bar y pasada por un filtro de 0.5 m de poro, y, envejecida por tres semanas. El medio de cultivo sinttico utilizado fue el Medio Johnson (J/1) modificado, elaborado con agua destilada ms la adicin de sales macro y micronutrientes de grado analtico. El cultivo se mantuvo con un pH de 7.5, salinidad del 35% y se agit constantemente por medio de aireacin. La Chlorella nativa fue cultivada en agua destilada, con adicin del medio enriquecido de Walne (Conwy), agitacin constante (Aireacin) y pH 7.5. Al alcanzar la mxima densidad celular, las microalgas fueron colectadas por medio de un proceso de centrifugacin a 3000 RPM por 15 minutos, lavadas dos veces con agua desionizada. La masa de clulas fue colocada en un plato de aluminio y calentada en horno a 105C hasta su secado completo. La biomasa microalgal obtenida se guardo en bolsas hermticas (Ziploc) para evitar la humedad, y se guardaron en el refrigerador. Los aceites totales fueron extrados de la biomasa microalgal empleando el mtodo modificado de Bligh y Dyer. Luego de pasar por la centrifuga a temperatura ambiente por un tiempo de 10 minutos y 1000 RPM, se dividi el sistema en dos fases (acuosa en la cima y orgnica en el fondo), la fase orgnica fue extrada por medio de una pipeta Pasteur, para un posterior lavado con NaCl al 5%, y una evaporacin hasta secar. La cantidad de aceites totales fue medida gravimtricamente.

Los aceites extrados fueron caracterizados mediante los siguientes anlisis: NTC 336. Grasas y Aceites Vegetales y Animales. Mtodo de la Determinacin de la Densidad Masa por Volumen Convencional. NTC 218.Grasas y Aceites Vegetales y Animales. Determinacin del ndice de Acidez. NTC 5478. Grasas y Aceites Vegetales y Animales. Determinacin del Punto de Humo
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NTC 289. Grasas y Aceites Vegetales y Animales. Determinacin del ndice de Refraccin. NTC 236. Grasas y Aceites Vegetales y Animales. Determinacin del ndice de Perxido. NTC 283. Grasas y Aceites Vegetales y Animales. Determinacin del ndice de Yodo.

ANLISIS Y DISCUSIN DE RESULTADOS

FIGURA 1. Concentracin de biomasa de los cultivos por das

En la Figura 1 se muestran las curvas de crecimiento de los cultivos de las microalgas. Se observa claramente una mayor densidad celular en el cultivo de Dunaliella Salina, y un pico mximo superior a 26 millones de clulas por mililitro. La Chorella Nativa alcanza un valor mximo superior a 20 millones de clulas, un poco ms bajo que la Dunaliella Salina, pero igualmente un valor positivo segn la literatura. Se corrobora entonces el elevado crecimiento que tienen estas dos especies de microalgas, y su factibilidad para un cultivo a grande escala.

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FIGURA 2. Gramos de microalga por litro de cultivo En la Figura 2 se observa la produccin de biomasa (en g) de cada cultivo (en L) de microalgas, lo cual es acorde a la Figura 1, mostrndose una mayor productividad de biomasa microalgal en los cultivos de Dunaliella Salina en comparacin al de Chorella Nativa.

FIGURA 3. Mililitro de aceite por gramo de microalga En la Figura 3 se observa una situacin my llamativa, y es el hecho de encontrar un mayor rendimiento de aceite (en mL de Lpidos) en la biomasa (en g) de Chorella Nativa que en el de Dunaliella Salina. Este hallazgo nos conlleva a analizar la microalga ms favorable para una posible obtencin de aceite a gran escala
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FIGURA 4. Mililitro de aceite por litro de cultivo Con esta ultima Figura nos damos cuenta que ambas especies de microalgas tienen unos rendimientos de mL lpidos / L cultivo muy semejantes, aunque la Chorella Nativa presenta una leve ventaja. TABLA 3. Caracterizacin del aceite extrado
ndice de acidez (mg NaOH/gr) 0.39 0.16 Punto de humo C 232 225 ndice de refraccin (n D ) 1459 1468 ndice de perxido 2.5 1.62 ndice de yodo (Wijs) 73.5 62 Densidad (a 20C) 0.8912 0.898

Dunaliella salina Chorella nativa

La Tabla 3 nos muestra los valores obtenidos de los anlisis de los aceites de los cultivos de microalgas, los cuales se encuentran en los rangos ptimos de calidad de aceite para Biodiesel. CONCLUSIONES

De acuerdo a los resultados obtenidos de las experiencias, se tiene que la microalga Dunaliella salina crece satisfactoriamente a las condiciones de cultivo seleccionadas, salinidad alrededor de 35% con agitacin continua y empleando el medio (J/1) modificado, logrando valores superiores a los 26 millones de clulas por ml, pero esta
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productividad en biomasa no es suficiente para conseguir un elevado contenido en lpidos lo que si se obtiene con la Chlorella nativa, la cual por medio de una alta velocidad de agitacin por aireacin y un valor de pH inicial de 7,5 se logr inducir un ambiente donde se present un factor de estrs en su crecimiento, lo que se tradujo en una mayor produccin de lpidos, como se pudo apreciar en Figura 3 del anlisis anterior. En base a lo anterior se plantea la posibilidad de evaluar diferentes estreses que aumenten el contenido de lpidos en la microalga Dunaliella Salina, y diferentes condiciones de cultivo que incrementen la densidad celular de los cultivos de Chorella Nativa. Con relacin a las propiedades de los aceites obtenidos se puede resaltar los bajos niveles de cidos grasos libres, lo cual nos permite predecir un mayor rendimiento de biodiesel al presentarse una menor produccin de glicerol en el proceso de transesterificacin.

REFERENCIAS
[1] Cardona, W., "Son los biocombustibles una alternative energtica para Chile?", Blog,2007. http://www.atinabiotec.cl/content/view/85881/Son-los-Biocombustibles-una-alternativa-energetica-para-Chile.html Heredia, T., OIL ACCUMULATION VIA Chlorella species USING CARBON SOURCES FROM WAS", 2009. Parra, O., Alzate, S, Biocombustibles con Chlorella sp, Feria Explora y Cuidamundos. 2009. [Online]: http://www.medellin.edu.co/sites/Educativo/Docentes/feriaexplora/Ciencias%20Ambientales%20y%20Gestin%20Ambiental/ Biocombustible%20con%20Chlorella%20SP.pdf Fermn A, Seronay G. Effects of different illumination levels on zooplakton abundace, feeding periodicity, growth and survival of the Asian sea bass, Lates calcarifer (Bloch), and fry in illuminated floating nursery cages. Aquaculture 1997; 157:227-237 [Online]:

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Copyright 2010. Mario Alvear: The author assigns to UADI/CAI a license to reproduce this document for the congress purpose provided that this article is used to publish in full or in an abbreviated or edited form in the congress Internet website, on CD and in printed form within World Congress and Exhibition: ENGINEERING 2010-ARGENTINAs proceedings.

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