Gliclise

Prof. Leonardo M. Cruz Dpto. De Bioqumica e Biologia Molecular Universidade Federal do Paran (UFPR)

Metabolismo de carboidratos

dividido em duas partes

Catabolismo

Gliclise Gliconeognese Biossntese de carboidratos

Anabolismo

Principais vias de utilizao da glicose

Matriz extracelular Polissacardeos Sntese de polmeros estruturais Glicognio Sacarose e Amido

Estoque

Glicose
Oxidao via pentose fosfato Oxidao via gliclise

Ribose 5-fosfato

Piruvato

Viso geral da gliclise

H O H
4

H C
5

2
6

H O H
3

O H
2

H
1

O H 3C C O
piruvato (3C)

Na gliclise, uma molcula de glicose degradada para liberar duas molculas de piruvato. Durante as reaes parte da energia livre liberada conservada na forma de ATP.

C O

H O

O H

O H

glicose (6C)

Pontos importantes na gliclise: 1. Degradao do esqueleto de carbono da glicose para produzir piruvato 2. Fosforilao do ADP a ATP atravs de compostos de alta energia formados durante a gliclise 3. Transferncia de um on hidreto (H com dois e-) para o NAD+, formando NADH

A gliclise dividida em duas fases

glicose

Fase Preparatria Fase Preparatria Consumo de ATP Consumo de ATP

Energia liberada: Em animais, o principal substrato para a gliclise a glicose. C6H12O6 + 38ADP + 38Pi 6CO2 + 6H2O + 38ATP Go = 2.870 kJ/mol

Fase de Pagamento Fase de Pagamento Produo de NADH ee ATP Produo de NADH ATP

Em plantas, o principal substrato para a gliclise a sacarose. C12H22O11 + 12O2 + 60ADP + 60Pi 12CO2 + 39H2O + 60ATP Go = 5.760 kJ/mol

piruvato

As reaes consideram a oxidao completa do acar, no somente a gliclise.

Fase Preparatria

Hexoquinase
Hexoquinase de clulas do crebro

Ajuste induzido Estrutura sem a glicose Estrutura com a glicose As duas subunidades so muito parecidas, mas: - a superior especializada na regulao e no catalisa a reao - a inferior especializada na catlise

Sofre ajuste induzido quando o substrato se liga (seta)

Fosfohexose isomerase
Fosfohexose isomerase Frutose 6-fosfato

Fosfofrutoquinase-1 (PFK-1)
Stio regulador do ATP ATP acar

Mudana confornacional aps ligao do ATP

Aldolase
Aldolase do msculo com 4 subunidades

Lisina no stio ativo ligando a molcula de acar Em bactrias, um metal substitui a lisina

Triose fosfato isomerase

Glutamato responsvel por transferncia interna de tomos

Resumo fase de preparatria

5 reaes Substrato: 1 molcula de glicose

Acar Contm 6 carbonos Acar Contm 3 carbonos

Produto: 2 molculas de gliceraldedo 3-fosfato

Consumo de 2 ATP

Fase de Pagamento

Gliceraldedo 3-fosfato desidrogenase

Possui 4 subunidades

acar

PDB ID 3gpd

PDB ID 1nqo

Reao da fosfoglicerato quinase

Fosforilao em nvel do substrato

ATP glicose

PDB ID 3pgk

PDB ID 1vpe

Ajuste induzido

Fosfoglicerato mutase
Histidina carregada com grupo fosfato

Leveduras

Plantas e bactrias

ons Mg2+ No usado nas leveduras

PDB ID 1e58

O grupo fosfato ligado a histidina ligado no carbono 2 do 3-fosfoglicerato e posteriormente o grupo fosfato ligado ao carbono 3 removido

PDB ID 3pgk

PDB ID 1eqj

Enolase
Antes da remoo da H2O Aps a remoo da H2O

Duas subunidades idnticas

PDB ID 2one

PDB ID 2one

O on Mg2+ ancora a molcula enzima O on Li1+ e a His assistem na catlise

PDB ID 2one

Piruvato quinase
Fosforilao em nvel do substrato Quatro subunidades idnticas Enzima alostrica Bactria Levedura Stio regulatrio Stio ativo

PDB ID 1e0u

PDB ID 1a3w

Resumo fase de pagamento

5 reaes Substrato: 2 molculas de gliceraldedo 3-fosfato

Acar Contm 3 carbonos cido orgnico Contm 3carbonos Saldo positivo de 2 ATP

Produto: 2 molculas de piruvato

Produo de 4 ATP

Balano geral da gliclise

Equao geral: Glicose + 2ATP + 2NAD+ + 4ADP + 2Pi

2piruvato + 2ADP + 2NADH + 2H+ + 4ATP + 2H2O

Cancelando os termos em comum, a equao lquida fica: Glicose + 2NAD+ + 2ADP + 2Pi

2piruvato + 2NADH + 2H+ + 2ATP + 2H2O

Regulao da gliclise

Propriedades cinticas da glicoquinase e hexoquinase I

A hexoquinase catalisa a entrada de glicose livre na gliclise Possui 4 isoenzimas (protenas diferentes que catalisam a mesma reao) - Hexoquinase I + predomina no msculo + possui Km menor + inibida por glicose 6-fosfato - Glicoquinase + predomina no fgado + no inibida por glicose 6-fosfato Predomina no msculo Possui Km menor sigmide

Predomina no fgado

Quando a glicose sangunea aumenta acima de 5mM - atividade da glicoquinase aumenta - atividade da hexoquinase I j atingiu a Vmax (no h resposta)

Regulao da glicoquinase por sequestro no ncleo celular

Hexoquinase IV = glicoquinase

Protena do ncleo que se liga a glicoquinase, impedindo sua volta ao citosol Glicose ativa o retorno da glicoquinase ao citosol Frutose-6-fosfato ativa o sequestro da glicoquinase

Regulao da PFK-1
E. coli PFK-1 Duas de quatro subunidades so mostradas

ADP

Frutose 1,6-bifosfato ADP

Regulao da FBPase-1 e PFK-1

Fosfofrutoquinase-1 (PFK-1) Frutose 1,6-bifosfatase-1 (FBPase-1)

Regulao da PFK-1
Frutose 2,6-bifosfato

fosfofrutoquinase-1

Frutose 1,6-bifosfatase-1

Frutose 2,6-bifosfato sntese e degradao

fosfofrutoquinase-2 Frutose 2,6-bifosfatase

Regulao da piruvato quinase

[glicose] no sangue

Sinais de suprimento de energia

Protena quinase dependente de cAMP (PKA) Protena fosfatase (PP) Piruvato quinase L (isoenzima do fgado) Piruvato quinase M (isoenzima de outros tecidos)

Tambm pode formar piruvato, bloqueando sua produo pela gliclise

Entrada de outros carboidratos na gliclise

Utilizao do glicognio e da galactose na gliclise

Quebra do glicognio

Destinos do piruvato
glicose glicose
gliclise O piruvato tambm serve como precursor em muitas reaes anablicas - no mostradas.

2 Piruvato 2 Piruvato

Anaerobiose (fermentao)

Aerobiose (respirao)

2 Etanol + 2CO2 2 Etanol + 2CO2

2CO2

2 Lactato 2 Lactato

2 Acetil-CoA 2 Acetil-CoA
O2 Ciclo do cido ctrico

4CO2 + 4H2O 4CO2 + 4H2O

Respirao

Fermentao lctica
Toda fermentao possui uma reao onde o NAD+ regenerado

As reaes de fermentao no variam o estado de oxidao do carbono. A relao H : C se mantm: Glicose (C6H12O6) H : C = 12/6 = 2 cido lctico (C3H6O3) H : C = 6/3 = 2 Etanol (C2H6O) + CO2 H : C = 6/3 = 2

Lactato desidrogenase + regenerao de NAD

Fermentao alcolica