Prof.

Augusto Dinis

Biologia Celular

VIAS SECRETORA E ENDOCTICA

O Retculo Endoplasmtico a porta de entrada de protenas e outras molculas na via da secreo. Alguns componentes da via da secreo integram tambm a via da endocitose , atravs da qual a clula internaliza molculas vindas do exterior. Em ambas as vias, a comunicao entre os compartimentos feita atravs de vesculas transportadoras e, na maioria dos casos ( ), bidireccional.

Biologia Celular

VIAS SECRETORA E ENDOCTICA

O transporte intracelular atravs de vesculas pode ser: Transporte Antergrado ou Dianteiro Transporte Retrgrado ou de Retorno

Lodish et al., 2008

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Prof. Augusto Dinis

Biologia Celular

TRFEGO VESICULAR
Carga

Carga
Cooper & Hausman, 2009

Formao de uma vescula transportadora no Compartimento Dador e fuso com o Compartimento Alvo

Biologia Celular

TRFEGO VESICULAR Qual o mecanismo de formao de uma vescula transportadora? Como se explica o transporte selectivo de protenas solveis (do lmen) e protenas membranares atravs das vesculas? Porque razo uma determinada vescula se funde apenas com um determinado compartimento alvo? Qual o mecanismo de fuso duma vescula com o seu compartimento alvo?

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Biologia Celular

O trfego vesicular feito por vesculas de 50-100 m de dimetro, que apresentam uma cobertura ou revestimento proteico na face citoslica da membrana

Vesculas Franjadas ou Revestidas

Microfotografias TEM da formao de vesculas franjadas ou revestidas

Biologia Celular

Vesculas Franjadas ou Revestidas

Microfotografias TEM de diferentes tipos de Vesculas Franjadas Diferentes tipos de protenas de cobertura ou revestimento

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Biologia Celular

Vesculas Franjadas ou Revestidas

Alberts et al., 2008

Vesculas de Clatrina

medeiam o transporte a partir da membrana plasmtica e da rede transGolgiana para o endossoma tardio.

Vesculas COPI medeiam o transporte retrgrado nas cisternas dictiossmicas e da rede cisGolgiana para o retculo endoplasmtico.

Vesculas COPII medeiam o transporte do retculo endoplasmtico para a rede cis-Golgiana.

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Vesculas Franjadas ou Revestidas

Constituio de uma vescula transportadora durante o seu processo de formao (budding brotamento) no Compartimento Dador:

Protenas de cobertura

(incluindo protenas adaptadoras de receptores de cargo)

Protenas membranares cargo e receptores membranares de protenas cargo solveis Protenas ligantes de GTP

(GTPases reguladoras da polimerizao e despolimerizao da cobertura e GTPases reguladoras da acostagem da vescula membrana do compartimento alvo)

Protenas v-SNAREs
Lodish et al., 2008

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Biologia Celular

Vesculas Franjadas ou Revestidas

Funes das protenas de cobertura:
Induo de uma curvatura numa poro especializada da membrana, que molda a formao da vescula. Seleco das molculas que tm de ser transportadas pelas vesculas, atravs do reconhecimento e ligao directa, ou indirecta (com mediao de protenas adaptadoras adaptinas), a sequncias sinalizadoras (sinais de distribuio).

Alberts et al., 2008

Biologia Celular

Vesculas Franjadas ou Revestidas

Para no desequilibrar o trfego vesicular, as protenas da cobertura s so montadas quando necessrio efectuar o transporte de um compartimento para outro. Este controlo efectuado por GTPases de recrutamento da cobertura interruptores moleculares que regulam a polimerizao e despolimerizao da cobertura:

ARF vesculas de Clatrina e COPI Sar1 vesculas COPII

GEFs factores de troca da guanosina (induze m a troca de GDP por GTP).

GAPs protenas activadoras da GTPase (estimulam a GTPase a hidrolisar o GTP). GDIs protenas inibidoras da GTPase (inibem a GTPase de hidrolisar o GTP).

Lodish et al., 2008

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Biologia Celular

Papel da GTPase Sar1 na montagem e desmontagem da cobertura COPII

Lodish et al., 2008

Biologia Celular

Vesculas Franjadas ou Revestidas

Antes de se fundirem com a membrana alvo, a cobertura das vesculas desmontada Vescula de transporte nua. Deste modo, Marcadores de Superfcie asseguram o encaminhamento especfico das vesculas para o compartimento alvo, onde se encontram os respectivos receptores complementares.

Protenas Rab:
Regulam a acostagem e fixao da vescula membrana alvo

Protenas SNAREs:
Especificam a atracagem e fuso de uma vescula com a membrana alvo

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Biologia Celular

As protenas Rab e a especificidade do trfego vesicular

GTPases monomricas, que diferem entre si nos segmentos adjacentes aos extremos N e C.
Lodish et al., 1995

Conhecem-se hoje mais de 60 protenas Rab diferentes. Cada compartimento das vias secretora e endoctica possui, pelo menos, uma Rab especfica na sua superfcie membranar citoslica.

Alberts et al., 2002

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As protenas Rab e a especificidade do trfego vesicular

Alberts et al., 2008

Papel da protena Rab na acostagem e fixao da vescula transportadora no compartimento alvo

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As protenas SNAREs e a especificidade do trfego vesicular

Nos animais conhecem-se mais de 35 SNAREs diferentes, cada uma localizada num
determinado compartimento das vias secretora e endoctica. Estas protenas transmembranares existem em conjuntos complementares v-SNAREs na membrana das vesculas e t-SNAREs na membrana dos compartimentos alvo.

Aquando da acostagem da vescula

membrana alvo (mediada pelas Rab e seus efectores) as v-SNAREs formam complexos estveis com as t-SNAREs complementares, assegurando que apenas as vesculas correctamente endereadas que se fundem. Estes complexos catalisam tambm as reaces de fuso membranar para que a vescula descarregue a sua carga.
Complexo SNARE

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As protenas SNAREs e a especificidade do trfego vesicular

Vesculas com diferentes SNAREs

podem formar-se a partir do mesmo compartimento dador, desde que possuam carga diferente destinada a compartimentos alvo distintos. A atracagem no compartimento alvo correcto feita pela ligao das v-SNAREs s t-SNAREs complementares. Aps a atracagem e fuso membranar, as protenas SNAREs permanecem emparelhadas (inactivadas) at necessitarem de ser reutilizadas dissociao.

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Papel das SNAREs na fuso membranar

A fuso membranar requer o contacto

entre as duas membranas para que as bicamadas lipdicas se possam misturar. Neste processo, os complexos SNAREs aproximam as duas superfcies membranares, ao mesmo tempo que as molculas de gua so expelidas da interface das duas membranas. Julga-se que os complexos SNAREs catalisam a fuso membranar usando a energia libertada durante o entrelaar das suas cadeias helicoidais.

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Papel das SNAREs na fuso membranar

As molculas lipdicas dos dois folhetos externos fluem de um para o outro de modo a formar uma haste conectora ou canal de ligao. Os lpidos dos folhetos internos de uma e outra membrana contactam tambm entre si e misturam-se formando uma nova bicamada lipdica, que alarga a zona de fuso (hemifuso). A ruptura da nova bicamada lipdica (resultante apenas dos folhetos internos) completa o processo de fuso.

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