I.

Antecedentes Histricos LA PENICILINA

En el hospital de St. Marry, de Londres, el desordenado aspecto del laboratorio de Alexander Fleming era comparable al de los mercadillos de baratijas de Preed Street que se vean a travs de su ventana. Al bacterilogo escocs la gustaba tener al alcance de la mano todo su instrumental y cultivos de microorganismos, e incluso reprochaba a sus colaboradores el ser demasiado ordenados. Tena la costumbre, despus de realizar el primer examen de sus cultivos microbianos, de abandonar estos en sus platitos de vidrio durante una semana o varios das, para observarlos ms tarde con la esperanza de descubrir mutaciones que pudieran resultar interesantes. As, gracias a este hbito lleg el da en que tropez inopinadamente con su primer gran descubrimiento. Fleming declar posteriormente: "Si mi laboratorio hubiese estado equipado con el moderno instrumental de muchos otros que yo haba visitado, es posible que jams me hubiera topado con la penicilina." Avanzado ya el verano de 1928, trabajaba en la redaccin de un artculo sobre el estafilococo, bacteria comn que provoca furnculos y abscesos infecciosos en la piel. En los platillos de su laboratorio vivan ya cultivos de estos microorganismos. Una tarde de septiembre, Fleming conversaba animadamente con un colega cuando observ algo inusitado. Se interrumpi bruscamente y mir con extraeza uno de sus platillos de cultivo. "Que raro" dijo un instante despus observando el moho grisceo que apareca en el mismo. En derredor del moho las bacterias se haban disuelto. En lugar de las habituales masas amarillas de bacterias, surgan anillos muy definidos all donde el cultivo entraba en contacto con el moho. Fleming comprendi inmediatamente que haba descubierto algo sensacional, y emprendi la tarea de identificar el misterioso moho, Rasp una partcula del mismo, la retir del platillo y la examin al microscopio. Los copos verdosos tenan las caractersticas de un hongo del genero "penicillium": el "penicillium notatum", cuyo nombre abrevi Fleming con el trmino "penicilina". A continuacin retir la totalidad del moho y lo deposit en una vasija llena de caldo de cultivo. A los pocos das se haba formado una colonia mucho mayor de "penicillium" y el caldo claro haba adquirido un vivo tono amarillo. Fleming dedic todas sus energas a realizar experimentos con el extrao moho. Ante todo averigu que despeda una substancia antibacteriana en minsculas gotitas de color ureo. El liquido amarillo resultaba tan eficaz contra las bacterias como el propio moho. Se trataba de un simple hongo, semejante al moho que aparece comunmente en el pan o en el queso, que causaba efectos mortferos sobre los grmenes infecciosos. Adems, las primeras experiencias demostraban que era inofensivo para el organismo humano y que conservaba todas sus propiedades an disuelto millares de veces. El primer hallazgo de Fleming se produjo en 1922, algunos aos despus de su regreso a St. Mary procedente de Boulogne. Como de costumbre su laboratorio estaba atestado de platillos con cultivos de bacterias. Fleming, que padeca un resfriado, aadi su mucosidad a uno de los cultivos. Casi inmediatamente comenzaron a disolverse los microbios que la rodeaban. Al parecer, algo exista en la mucosidad que causaba un efecto mortfero sobre ciertas bacterias. Las lgrimas y la saliva producan resultados anlogos al ponerse en contacto con los cultivos de bacterias. Fleming dedujo que estas secreciones contenan una sustancia que formaba parte integrante de las defensas naturales del organismo humano. La llam lisozima, por su

similitud con las enzimas y su capacidad de disolver o aniquilar los grmenes patgenos. Desgraciadamente, no se trataba de los ms peligrosos aquellos a cuya eficacia se extenda, razn por la cual, en vida de Fleming, se estimaba que la lisozima era de escasa utilidad. Despus de la muerte del doctor Fleming, sin embargo, se hall el modo de aislar esta sustancia con el fin de utilizarla para combatir enfermedades y hoy constituya un arma importante de la microbiologa. Este descubrimiento fue para Fleming de gran valor, pues le enseo la actuacin de las sustancias antibacterianas, y le sirvi de estmulo en la bsqueda de medios ms poderosos de defensa. Cuando seis aos ms tarde hall al fin lo que buscaba, la penicilina, fueron sus conocimientos de la lisozima lo que le hicieron comprender el gran significado de su descubrimiento. Como la lisozima, la penicilina disolva la membrana de la clula de las bacterias y adems era enemigo natural de los estafilococos, de los estreptococos y de otros microbios infecciosos. Desgraciadamente, el sabio escocs no supo convencer a sus colegas de la trascendencia de su hallazgo. El 13 de febrero de 1929 ley en Londres un escrito sobre la penicilina ante el Club de Investigaciones Mdicas. Fue escuchado con cortesa, pero otros asuntos ocuparon seguidamente la atencin. La publicacin de sus descubrimientos tampoco suscit verdadero inters. Desilusionado, Fleming reanud sus ocupaciones ordinarias, pero guard cuidadosamente su cultivo de penicilina en espera de la inexorable llegada del da en que se acudiera a su poder para salvar vidas humanas. Transcurriran, no obstante, casi diez aos antes del advenimiento de ese da. En otros pases cientficos prosiguieron la bsqueda de nuevos agentes microbicidas. En los aos treinta los alemanes descubrieron las sulfamidas, productos qumicos eficaces contra las infecciones de garganta, la meningitis cerebroespinal, la blenorragia e incluso algunos virus. Al principio, los nuevos medicamentos produjeron efectos espectaculares, pero slo ante un nmero limitado de dolencias. Para muchos pacientes resultaron nocivos; algunos incluso murieron a consecuencia de las sulfamidas. Las deficiencias de las sulfamidas estimularon las investigaciones a escala mundial. A fines de 1935 Florey invit a Oxford a un notable bioqumico de 29 aos, el doctor Ernst Chain, alemn de origen judo, acept de buen grado y en 1936 inici sus experimentos inici sus experimentos con lisozimas. Intrigado por su accin antibacteriana, decidi estudiar sustancias similares. Ley adems los escritos de Fleming sobre la penicilina que, desde haca largo tiempo, haban cado en el olvido. Chain se interes vivamente por las observaciones de Fleming sobre la penicilina y en 1939 emprendi junto a Florey, la tarea de aislar una muestra para realizar experimentos. A fines del mismo ao, Chain haba conseguido aislar y depurar el medicamento en forma de polvo amarillo de consistencia parecida al almidn. En sus ensayos Florey y Chain descubrieron que el polvo amarillo conservaba su eficacia incluso diluido 30 millones de veces. Su accin era 10 veces mayor que la de la ms poderosa sulfamida y 1000 veces ms enrgica que las primitivas gotitas que el clebre doctor Alexabder Fleming haba obtenido. Adems, no pareca tener efectos txicos. A finales de la primavera de 1940, los cientficos de Oxford ensayaron las virtudes curativas del preparado en un grupo de ratones. Los resultados fueron asombrosos. Se

aplicaron inyecciones masivas de grmenes de estreptococos a 50 ratones y a continuacin se administr penicilina a la mitad de ellos. Al cabo de 16 horas murieron los 25 ratones que no haban sido inyectados con el medicamento; en cambio, de los 25 inyectados con penicilina, sobrevivieron todos excepto uno, lo cual es altamente significativo. Cuando, al hacerse pblico Fleming ley el informe de los experimentos de Oxford se dirigi inmediatamente al encuentro de los dos hombres que haban demostrado lo que el supona desde hacia tanto tiempo. A partir de las muestras suministradas por Fleming, los investigadores de Oxford lograron obtener un preparado de penicilina an ms enrgico. Sin embargo, el proceso de depuracin era laborioso y el rendimiento escaso. Paulatinamente reunieron una minscula cantidad de producto y la conservaron en fro con sumo cuidado para casos de emergencia. En febrero de 1941, un polica ingres en un hospital de Oxford, vctima de una infeccin de estafilococos y de una aguda intoxicacin en la sangre, contrada al cortarse mientras se afeitaba. Su cuerpo estaba plagado de abscesos, su fiebre era de 40.5 grados, sus pulmones se haban debilitado y la infeccin haba invadido su sistema circulatorio. Las sulfamidas no eran capaces de atajar el mal y los mdicos apenas le concedan unos das de vida. En tan extrema situacin, las autoridades del hospital permitieron a Florey y a Chain que utilizaran su nuevo medicamento. Los mdicos se acercaron al paciente con su nica provisin de penicilina, que cabra en una cucharilla de te. Inyectaron el medicamento con intervalos de tres das y, al cabo de 24, la situacin del enfermo empez a estabilizarse. A los dos das, la fiebre del doliente haba descendido y las llagas de su piel comenzaron a mejorar. El polica manifest que se senta mucho mejor e incluso reanud su alimentacin. Mientras las escassimas existencias de penicilina se agotaban, los mdicos recuperaban parte de ella de la orina del paciente. Ms con el tiempo este suministro tambin se acab. Cuando cesaron las inyecciones, la infeccin se apoder otra vez del enfermo, que muri en el lapso de pocas horas. No obstante, se abra un camino a la esperanza. Mientras dur la penicilina pudo combatirse la infeccin. Adems, el paciente no haba experimentado ninguno de los perniciosos efectos secundarios asociados a las sulfamidas. Siguieron otros casos, pero la penicilina se obtena en cantidades tan escasas que slo era posible administrarla a un pequeo nmero de enfermos. Paradjicamente, la Segunda Guerra Mundial (que entonces asolaba Europa) aport el necesario estimulo para la produccin en gran escala. Florey y Chain trataron primeramente de obtener la ayuda del gobierno y de los industriales de Gran Bretaa, pero el pas ya haba dedicado a la guerra todos sus recursos disponibles. Sin cejar su empeo, Florey se traslad en junio de 1941 a Estados Unidos, que an se mantena al margen del conflicto. All encontr el favor que buscaba y cuando Estados Unidos se incorpor a la contienda, en diciembre del mismo ao, la penicilina fue declarada producto prioritario de guerra. El departamento de Agricultura y la industria privada unieron sus esfuerzos para producir el nuevo medicamento en cantidades masivas. A finales de 1942, tres acontecimientos hicieron posible la produccin de penicilina en gran escala. El primero fue el descubrimiento de una fuente abundante y econmica de caldo de cultivo. El segundo, el hallazgo de una variedad de "penicillium" cuyo desarrollo era ms rpido. Otro moho, el "penicillium chrysogenum", descubierto en un meln putrefacto de un almacn de Peoria, aseguraba una produccin 200 veces

superior a la obtenida mediante el "penicillium notatum". En el laboratorio, los cientficos consiguieron, por mutacin gentica, otra variante de este moho, an ms productiva. El tercer paso se dio con el desarrollo de un procedimiento de aireacin para grandes depsitos de manera que el moho pudiera formarse en el interior del caldo de cultivo y no slo en la superficie. Los fabricantes comenzaron a construir enormes recipientes de casi dos pisos de altura, con capacidad de 100,000 litros de caldo de cultivo. Antes de 12 meses, un grupo de compaas estadounidenses producan penicilina a gran escala y, al terminar la guerra, suministraban ya el producto en cantidades suficientes para el tratamiento de siete millones de enfermos al ao. Los resultados eran casi increbles. Jams en pocas anteriores se haba conseguido un medicamento tan poderoso contra tan amplia gama de enfermedades y de efectos perjudiciales tan reducidos. Las muertes a consecuencia de pulmona que durante la Primera Guerra Mundial alcanzaron al 18% de quienes contrajeron la enfermedad, descendieron a finales de la Segunda a 1%. La penicilina mostr el mismo asombroso poder en la curacin de enfermedades casi siempre mortales hasta entonces, como la escarlatina, las faringitis estreptoccias, la difteria, la sfilis, y la gonorrea. Tambin result eficaz en el tratamiento de las gangrenas que eran provocadas por gases, en la cura de intoxicaciones sanguneas y en el combate de ciertas formas de endocartitis y meningitis. Entre tanto comenzaron a surgir algunos problemas. Se haban administrado ya en todo el mundo 100 millones de dosis cuando la penicilina provoc el primer desenlace fatal. Segn indagaciones posteriores, el 10% de los humanos son alrgicos al medicamento. Adems algunos tipos de bacterias adquirieron paulatinamente la facultad de resistir a la penicilina. La ciencia slo en parte ha subsanado este problema preparando diversas variedades de penicilina por mutaciones genticas o combinndola en otros antibiticos. En 1944 Alexander Fleming recibi de la Corona britnica un ttulo nobiliario y en 1945 obtuvo con Florey y Chain el premio Nobel de Medicina. Fue objeto de pblico homenaje por diversos gobiernos e instituciones acadmicas en casi todo el mundo. Al morir el 1955, a la edad de 74 aos, el mundo conservaba la imagen amable de aquel sencillo hombre de ciencia, obligado a aceptar universales elogios por su portentoso descubrimiento

a. poca ms antigua en la que dicha sustancia fue utilizada

La penicilina fue descubierta por el bacterilogo Alexander Fleming, en el St. Marys Hospital de Londres, el cual se dio cuenta de su hallazgo en una comunicacin publicada en 1929 en el British Journal of Exprimental Pathology. No fue hasta 1938 en que Ernest Chain bioqumico que trabajaba con el profesor Howard Florey en la universidad de Oxford, saco del letargo en que haba permanecido tan gran potencial cientfico y completo los trabajos antes citados con investigaciones posteriores. El primer ensayo clnico, que se hizo el 12 de enero de 1941, saco a la luz esta gran promesa y en 1943 comenz la produccin comercial en Estados Unidos.

b. Propiedades y usos
Propiedades

La penicilina que ms abunda en el comercio es la penicilina G Potsica o bencil Penicilina Potsica. Se presenta como un polvo cristalino blanco inodoro, muy soluble en agua, tambin en alcohol y glicerina, insoluble en ter y cloroformo. Se destruye por accin del calor, por cidos, lcalis y agentes oxidantes y fermentos bacterianos. Sus soluciones se deterioran a la temperatura atmosfrica, pero refrigeradas permanecen estables por algunos das. Las sales de Penicilina que se fabrican actualmente permiten conservarlas en estado slido sin necesidad de refrigeracin.

IDENTIFICACION

La actividad de la penicilina es referida en unidades biolgicas. Al tratar una solucin de penicilina al 2% con HCl diluido se forma un precipitado de cido Penicilinico que es soluble en exceso de cido, alcohol, ter o cloroformo.

ACCION FARMACOLOGICA

La Penicilina tiene efecto bacteriosttico (inhibiendo el desarrollo y reproduccin de los grmenes) o bacterioltico (provocando su destruccin) segn la dosis y tiempo de contacto.

ESPECTRO FARMACOLOGICO

La penicilina es particularmente activa contra bacterias gran positivas en especial en infecciones producidas por estafilococos, estreptococos, neumococos, algunos clostridium y lactobacillus; ejerce tambin accin contra treponema pallidum.

Usos
Es el antibitico ms usado, especialmente en infecciones estafilococias, como ntrax, en heridas y quemaduras infectadas, en el tratamiento de infecciones neumoccicas como neumona, pleuritis y endocarditis neumnicas, en enfermedades estreptoccicas como infeccin puerperal, peritonitis. En infecciones gonoccicas como gonorrea, oftalm_1. Se usa tambin en la sfilis, en la Verruga peruana, profilcticamente en obstetricia y antes de las intervenciones quirrgicas. En general la penicilina es considerada como una droga antibitica de poca toxicidad, sin embargo puede producir reacciones alrgicas como dermatitis, urticaria, etc. La penicilinaza es una enzima bacteriana que antagoniza especficamente el efecto antimicrobiano de la penicilina produciendo se destruccin por la apertura del anillo lactmico.

c. Fuente natural (planta o animal)

Es una sustancia antibitica producida por los hongos Penicillium notatum y P. chrysogenum de la familia Aspergiliaceas. Es un hongo de color verde azulado que posee delgadas hifas sumergidas como tambin areas tabicadas de las cules arrancan conideoforos ramificados.

II. Produccin Industrial

La produccin de penicilina es un ejemplo del proceso tpico de obtencin de antibiticos. El hongo utilizado industrialmente pertenece al grupo del Penicillum chrysogenum y es particularmente activo sobre el estafilococo, estreptococo y neumococo, as como sobre la mayor parte de los microorganismos gram positivos, presentando escasa accin sobre los gram negativos. A la penicilina producida comercialmente se la llama penicilina G (bencil penicilina), aunque el mismo hongo produce varios tipos ms. Estos compuestos son cidos fuertes muy inestables, razn por la que los productos que se encuentran en el mercado son las sales de sodio, de calcio, de aluminio, de potasio o de procaina. A continuacin se da la frmula de la penicilina. Otras formas de penicilina contienen grupos diversos situados en la zona entre corchetes. El sistema de produccin en 1943 era el conocido por el mtodo de superficie; el hongo creca en la superficie de una capa delgada de medio de cultivo puesto en bandejas o botellas. En 1944, con el desarrollo del mtodo comercial de la fermentacin sumergida, la disminucin de las necesidades de espacio y de trabajo determinaron una enorme reduccin del precio de coste.

a. Mtodo de obtencin
Se conocen diferentes penicilinas, las cuales derivan de una estructura qumica fundamental comn: dos anillos heterocclicos, uno de tiazolidina y otro de beta lactama, unidos por un encadenamiento emdico a un radical R variable; la penicilina es un cido orgnico, el cido penicilnico, pero por extensin se acepta el mismo nombre para sus sales. Por el radical carboxilo la penicilina forma sales con los metales alcalinos. La Penicilina se sintetiza a partir del cido 6-aminopenicillanico (6-APA) y las cefalosporinas a partir del cido 7-amino-3-metil-ceph-3-en-4-carboxlico (acid 7ADCA y adems se obtienen por fermentacin.

Tipos de penicilina Sustituyendo diferentes radicales en la posicin R se tienen las siguientes penicilinas:

Bencil-penicilina R = C6H5CH2- , es la Penicilina G. Pentenil-penicilina R = CH3CH2CH=CHCH2- , es la Penicilina F. Heptil-penicilina R = CH3(CH2)6- , es la Penicilina K. p-Hidroxibencil pnicilina R = HO-C6H5-CH2- , es la Penicilina X. Fenoximetil-penicilina R = C6H5OCH2- , es la Penicilina V.

De estas penicilinas la ms importante es la Penicilina G o bencil penicilina que se combina con el sodio, potasio, calcio y la procana para formar los compuestos: Penicilina G sdica, G potsica, G clcica y Penicilina G Procana, que es de accin prolongada. La penicilina V es activa por va oral. Actualmente existe la d-alfa-aminobencil-penicilina que es de amplio aspecto, activa Cont. Microorganismos Gram. + Y Gram. -, y activador va oral. Penicilina G Potsica NOMBRE QUIMICO 4-thia-1-azabiciclo(3.2.0)heptano-2-acido carboxlico, 3,3-dimetil-7-oxo6((fenilacetil)amino)-,monopotassium salt, (2S-(2 alfa,5 alfa, 6 beta)). FORMULA MOLECULAR: C16H17KN2O4S PESO MOLECULAR: 372.49 Penicilina G Sdica NOMBRE QUIMICO 4-tia-1-azabiciclo-(3.2.0) heptano-2-acido carboxlico, 3,3-dimetil-7-oxo-6-((fenilacetil) amino)-, (2S-(2 alfa, 5 alfa, 6 beta))-monosodium sal. FORMULA QUIMICA: C16H17N2NaO4S PESO MOLECULAR: 356.3 Penicilina G Benzatina NOMBRE QUIMICO 4-tia-1-azabiciclo (3.2.0) heptano-2-acido carboxilico, 3,3-dimetil-7-oxo-6-((fenilacetil) amino)-,(2S-(2 alfa,5 alfa, 6 beta))-, compd. With N,N- bis (fenilmetil)-1,2etanodiamina (2:1), tetrahidarto. FORMULA MOLECULAR: (C16H18N2O4S) 2.C16H20N2.4H20PESO MOLECULAR: 981.19 Sal anhidra: 909.13

b. Usos y aplicaciones La penicilina se utiliza para el tratamiento de muchas infecciones causadas por bacterias. Su accin como agente antibacterial es inhibir la biosntesis de petidoglucn (cadenas de polisacridos y polipptidos enlazados covalentemente que rodean la clula) por medio de la inactivacin especfica de la enzima que une dichas cadenas. El pptido glucn protege el citoplasma de las clulas y le da rigidez a la pared celular de las mismas. Por lo tanto, al momento de las bacterias multiplicarse, necesitan expandir sus paredes celulares para poder transferir material gentico de una a la otra, pero ya esas paredes celulares estn dbiles y el agua y la penicilina que se encuentran a su alrededor pasan dentro de la bacteria, provocando que se hinchen y exploten. Existen diferentes tipos de penicilina porque cada vez las bacterias se estn haciendo ms resistentes al medicamento y la medicina ha tenido que buscar la modificacin de la penicilina y hasta otros recursos. Las mismas varan por un grupo R, pero tienen una estructura general de una -lactama: La Penicilina acta tanto matando las bacterias como inhibiendo su crecimiento. Mata slo los organismos que estn creciendo y reproducindose. Es eficaz contra una gama amplia de enfermedades causadas por microorganismos como los pneumococos, los estreptococos, los gonococos, el meningococo, el clostridium de ttano, y la espiroqueta de la sfilis. Sus efectos secundarios se limitan generalmente a reacciones alrgicas que pueden preverse con seguras pruebas antes de su aplicacin. Millones de personas han salvado sus vidas, al tratarse con penicilina enfermedades para las que antes no existan tratamientos seguros ni curacin. En la actualidad, sin embargo, varias bacterias han desarrollado resistencia a la penicilina y a otros medicamentos y antibiticos, causando preocupacin entre mdicos y cientficos por un posible regreso a nuestra vulnerabilidad del pasado frente a las enfermedades e infecciones.

c. identificacin de grupos