06/02/2013

UNIVERSIDADE FEDERAL DE VIOSA Campus Florestal

Introduo
No sculo XIX, os bilogos descobriram que na ausncia de ar, as clulas produzem etanol ou cido lctico; enquanto na presena de ar, as clulas consomem O2 e produzem CO2 e H2O. O piruvato formado na gliclise oxidado a CO2 e H2O - fase aerbia do catabolismo respirao. A respirao celular ocorre em 3 estgios: 1. Produo do acetil-CoA; 2. Oxidao do acetil-CoA; 3. Transferncia de eltrons e fosforilao oxidativa.
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Ciclo do cido Ctrico

Pollyanna Amaral Viana

Introduo
1. Produo do acetil-CoA: molculas de combustveis orgnicos (aminocidos, cidos graxos, glicose) so oxidadas para formar acetil-CoA;

Introduo
2. Oxidao do acetil-CoA: ciclo do cido ctrico produzindo CO2; a energia liberada nas reaes de oxidao conservada nas coenzimas reduzidas (NADH e FADH2);

Introduo
3. Transferncia de eltrons e fosforilao oxidativa: as coenzimas reduzidas so oxidadas e os eltrons so conduzidos ao longo da cadeia de transporte de eltrons at o O2, o qual reduzido para formar H2O. Durante este processo de transferncia de eltrons, uma grande quantidade de energia liberada e conservada na forma de ATP (fosforilao oxidativa).
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Introduo

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Introduo
Os 3 estgios da respirao celular:

Ciclo do cido Ctrico

Ciclo do cido Ctrico, ou Ciclo de Krebs, ou Ciclo dos cidos Tricarboxlicos. Proposto pelo pesquisador Hans Adolf Krebs em 1937.

Ciclo do cido Ctrico

uma regio central do metabolismo com vias degradativas chegando at ele e com vias anablicas principiando dele.

Via anfiblica
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Ciclo do cido Ctrico

Principais funes do Ciclo do cido Ctrico, ou Ciclo de Krebs ou Ciclo dos cidos Tricarboxlicos: 1. Manter a clula em atividade constante; 2. Produzir CO2 e energia; 3. Produzir compostos importantes para a sntese de outros compostos.

Ciclo do cido Ctrico

Todas as enzimas associadas ao Ciclo de Krebs so encontradas na matriz mitocondrial.

As mitocndrias so semi-autnomas: possuem ribossomos, RNA, DNA e codificam protenas mitocondriais.

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Ciclo do cido Ctrico

O Ciclo do cido Ctrico (CAC) uma srie de 8 reaes que resulta na oxidao de um grupo acetil do acetil-CoA formando duas molculas de CO2.

Ciclo do cido Ctrico

Primeiro estgio: Produo do acetil-CoA Irreversvel

Reao de descarboxilao oxidativa catalisada por 3 enzimas distintas organizadas em um complexo de alta massa molecular. Envolve 5 coenzimas.
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Produo do acetil-CoA
Complexo da piruvato desidrogenase (PDH): localizado na mitocndria (eucariotos) e citosol (procariotos). Constitudo de 5 coenzimas- 4 derivadas de vitaminas: - TPP (tiamina pirofosfato) derivada da tiamina; - FAD (flavina adenina dinucleotdeo) riboflavina; - NAD (nicotinamida adenina dinucleotdeo) niacina; - CoA (coenzima A) pantotenato; - Lipoato tem 2 grupos tiis (-SH).
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Produo do acetil-CoA
Coenzima A (CoA):

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Produo do acetil-CoA
Lipoato:

Produo do acetil-CoA
Constitudo de 3 enzimas: - Piruvato desidrogenase (E1) se liga o TPP; - Diidrolipoil transacetilase (E2) se ligam o lipoato e a CoA; - Diidrolipoil desidrogenase (E3) se ligam o FAD e o NAD.
TPP E1 E2 E3 NAD CoA
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FAD

Lipoato
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Produo do acetil-CoA
Complexo da piruvato desidrogenase (E.coli):

Produo do acetil-CoA
Deficincia de tiamina (arroz): causa o beribri perda parcial das funes neurais acmulo de piruvato no sangue. Deficincia da piruvato desidrogenase: acmulo de lactato acidose ltica congnita.

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Ciclo do cido Ctrico

Segundo estgio: Oxidao do acetil-CoA Ciclo do cido Ctrico. Via cclica (8 passos): Ocorre nas mitocndrias de eucariotos no fotossintticos e citosol de procariotos.

Ciclo do cido Ctrico

1. Formao do citrato: condensao do acetil-CoA com o oxaloacetato.

Irreversvel Enzima: citrato sintase

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Ciclo do cido Ctrico

2. Formao do isocitrato via cis-aconitato:

Ciclo do cido Ctrico

Enzima: aconitase (aconitato hidratase) Contm um centro ferro-enxofre, que atua na ligao do substrato no stio ativo quanto na catlise da adio ou remoo da gua.

Enzima: aconitase (aconitato hidratase)

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Ciclo do cido Ctrico

3. Oxidao do isocitrato a -cetoglutarato:

Ciclo do cido Ctrico

4. Oxidao do -cetoglutarato a succinil-CoA:

Irreversvel
Enzima: isocitrato desidrogenase - Enzima dependente de NAD+ encontrada na matriz mitocondrial e atua no Ciclo do cido ctrico. - Isoenzima: dependente de NADP+ matriz e citosol atua na gerao de NADPH (reaes anablicas). 23

Irreversvel
Enzima: Complexo da -cetoglutarato desidrogenase - Formado por 3 enzimas: . E1 liga o TPP; E2 - liga o lipoato e E3 liga o FAD. Reao de descarboxilao oxidativa (libera CO2).
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Ciclo do cido Ctrico

5. Converso do succinil-CoA em succinato:

Ciclo do cido Ctrico

6. Oxidao do succinato a fumarato:

Enzima: Succinil-CoA sintetase: requer GTP.

- Fosforilao a nvel de substrato.

Enzima: Succinato desidrogenase

- Enzima dependente de FAD nica enzima do CK ligada membrana mitocondrial interna (eucariotos).

Nucleotdeo difosfato quinase

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- Inibidor competitivo: malonato (semelhante ao succinato).

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Ciclo do cido Ctrico

7. Hidratao do fumarato a malato:

Ciclo do cido Ctrico

8. Oxidao do malato a oxaloacetato:

Enzima: Fumarase (fumarato hidratase): adiciona gua. - O fumarato produzido no ciclo da uria, sntese de purinas e catabolismo de aminocidos (Phe e Tyr).
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Enzima: Malato desidrogenase requer NAD+ - O oxaloacetato produzido pela transaminao a partir do aspartato.
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Resumo: Enzimas Ciclo do cido Ctrico

Sintases: catalisam reaes de condensao e no requerem ATP/GTP como fonte de energia; Sintetases: catalisam reaes de condensao e requerem ATP/GTP como fonte de energia; Citrato sintase x Succinil-CoA sintetase Ligases: catalisam reaes de condensao na presena de ATP as sintetases so ligases. Liases: catalisam reaes de clivagem. DNA ligase x Piruvato desidrogenase
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Resumo: Enzimas
Quinases: transferem grupo P do ATP para outras molculas receptoras reao de fosforilao. Piruvato quinase Fosforilases: catalisam reaes de fosforlise. Fosfatases: catalisam reaes de defosforilao. Fosforilase do glicognio x Fosforilase a fosfatase

Ciclo do cido Ctrico

A energia de oxidao eficientemente conservada

no ciclo na forma de NADH, FADH2 e GTP (ATP). Cada volta no ciclo: - 3 NADH - 1 FADH2 - 1 GTP (ATP) - 2 CO2

Ciclo do cido ctrico

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Rendimento da oxidao completa da glicose

Ciclo do cido Ctrico

Nos organismos aerbios este ciclo uma via anfiblica funciona no catabolismo e anabolismo.

NADH: 2,5 ATP FADH2: 1,5 ATP

32 x 30,5 KJ/mol = 976 KJ/mol

Eficincia real do processo: 65 %

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Ciclo do cido Ctrico

Reaes anaplerticas: reaes que repem os intermedirios do ciclo do cido ctrico quando em baixa concentrao. 4 reaes:

Regulao do Ciclo do cido Ctrico

As

enzimas-chaves das vias metablicas so reguladas para assegurar a produo de intermedirios e de produtos nas velocidades necessrias para manter a clula em um estado estacionrio estvel e evitar a superproduo (desperdcio de intermedirios).

As reaes anaplerticas so tambm reguladas para

manter o nvel de intermedirios alto o suficiente para suportar a atividade do ciclo do cido ctrico.
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Complexo da piruvato desidrogenase; Citrato sintase; Isocitrato desidrogenase e -Cetoglutarato desidrogenase.

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Regulao do Ciclo do cido Ctrico

1. Complexo da piruvato desidrogenase:

Regulao do Ciclo do cido Ctrico

1. Complexo da piruvato desidrogenase

Regulada por mecanismos alostricos e covalentes.

Regulada por mecanismos alostricos e covalentes. - Inibido pela fosforilao reversvel de um resduo de serina em uma das subunidades de E1 protena quinase. - Ativado pela fosfoprotena fosfatase

P
Ser

- Inibidores alostricos: ATP, acetil-CoA, NADH e cidos graxos (de cadeia longa). - Ativadores alostricos: AMP, CoA, NAD+ e Ca+2.
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Ser E1 E2 E3

E1

E2

E3

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Regulao do Ciclo do cido Ctrico

Reaes exergnicas: liberam energia.

Regulao do Ciclo do cido Ctrico

Reaes exergnicas: liberam energia.

2. Citrato sintase

Inibio por acmulo de produtos.

3. Isocitrato desidrogenase

Inibio por acmulo de produtos.

- Inibidor: ATP. - Inibidores: ATP, succinil-CoA, NADH e citrato. - Ativador alostrico: ADP.
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- Ativadores: ADP e Ca+2.

Regulao do Ciclo do cido Ctrico

Reaes exergnicas: liberam energia.

4. -Cetoglutarato desidrogenase

Regulao do Ciclo do cido Ctrico

Inibio por acmulo de produtos. - Inibidores: Succinil-CoA e NADH. - Ativador: Ca+2.

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Regulao do Ciclo do cido Ctrico

Trs fatores governam a velocidade do fluxo atravs do ciclo do cido ctrico: 1 - Disponibilidade de substratos; 2 - Inibio por acmulo de produtos; 3 - Inibio alostrica retroativa das primeiras enzimas do ciclo. As concentraes de substratos e intermedirios do CK regula o fluxo atravs desta via em uma velocidade que fornece concentraes timas de ATP e NADH.
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Regulao do Ciclo do cido Ctrico

Piruvato, lactato e acetil-CoA so normalmente mantidos nas concentraes do estado estacionrio. Controle respiratrio da produo de energia: [ADP].[P] [ATP] ATP ADP + P

[NADH] e [FADH2] Depleo das formas oxidadas Inibio da oxidao do acetil-CoA pelo CK.
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Ciclo do Glioxalato
Organismos no vertebrados so capazes de converter cidos graxos ou o acetato deles derivado em carboidratos pelo Ciclo do Glioxalato. Porque os vertebrados no conseguem?

Ciclo do Glioxalato
Pois as reaes de converso do PEP em Piruvato e a do Piruvato em Acetil-CoA so to exergnicas, que so essencialmente irreversveis.
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Ciclo do Glioxalato

Ciclo do Glioxalato
Os vertebrados no possuem as enzimas especficas do ciclo do glioxalato (isocitrato liase e malato sintase).

Oxaloacetato - CK
GTP PEP carboxiquinase GDP

PEP Glicose (gliconeognese)

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No podem realizar a sntese lquida da glicose a partir de lipdeos.

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Ciclo do Glioxalato
Nos vegetais as enzimas do Ciclo do Glioxalato esto em organelas chamadas glioxissomos (peroxissomos especializados).

Ciclo do Glioxalato
As enzimas comuns aos ciclos do cido ctrico e do glioxalato existem como isozimas, uma especfica da mitocndria e a outra especfica do glioxissomo. Os glioxissomos no esto presentes em todos os tecidos da planta e em todos os momentos. Os glioxissomos se desenvolvem em sementes ricas em lipdeos durante a germinao, antes que o vegetal em desenvolvimento adquira a capacidade de sintetizar glicose por fotossntese.
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Ciclo do Glioxalato
Os glioxissomos tambm contm todas as enzimas necessrias para a degradao dos cidos graxos armazenados nos leos das sementes oleaginosas.

Ciclo do Glioxalato

Convertem lipdeo em carboidrato As plantas em germinao so, portanto, capazes de sintetizar molculas de glicose com os carbonos presentes nos lipdeos das sementes.
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Ciclo do Glioxalato
Quatro vias distintas participam da converso de lipdeos em carboidratos: 1. Quebra de cidos graxos em acetil-CoA nos glioxissomos; 2. Ciclo do glioxalato para formar succinato nos glioxissomos; 3. Ciclo do cido ctrico para formar malato na mitocndria; 4. Gliconeognese para formar carboidrato citosol.
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Ciclo do Glioxalato
O ciclo do glioxalato e o ciclo do cido ctrico so regulados de forma coordenada. Intermedirio crucial: isocitrato Isocitrato liase Isocitrato desidrogenase

Ciclo do glioxalato

Ciclo do cido ctrico

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Ciclo do Glioxalato
Isocitrato desidrogenase: regulada por modificao covalente (fosforilao / desfosforilao). Isocitrato desidrogenase
Fosfoprotena Fosfatase Protena quinase

Ciclo do Glioxalato
Intermedirios do ciclo do cido ctrico e da gliclise, AMP, ADP. Nveis reduzidos dos indicadores de energia celular.

Ativa

Inativa

Isocitrato vai para

Fosfoprotena Fosfatase

Protena quinase P

Ciclo do cido ctrico ATP

Ciclo do glioxalato
Isocitrato desidrogenase Isocitrato desidrogenase

Glicose
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CK

CG

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