Antibioticos y Antimicrobianos

2007-11-28

1900-15

Ehrlich concibe la idea de usar compuestos qumicos de sntesis como "balas mgicas" selectivas hacia microorganismos, pero inofensivas para las personas o animales superiores. En 1909 descubre que el salvarsn es efectivo contra la sfilis. Acua el trmino "quimioterapia". Domagk, siguiendo los pasos de Ehrlich, descubre la accin del rojo de prontosilo (la primera sulfamida) sobre el neumococo y otros estreptococos in vivo. Woods descubre el mecanismo de accin de las sulfamidas. Estamos en plena "Edad de oro de la Quimioterapia de sntesis". Fleming descubre la penicilina, el primer antibitico natural, pero fracasa en su intento de purificarlo. La industria farmacutica se muestra "indiferente". Chain y Florey purifican la penicilina. Waksman, un microbilogo de suelos, ha iniciado una bsqueda de microorganismos productores de antibiticos. Descubre la estreptomicina. Comienza la poca dorada de los antibiticos (quimioterpicos naturales), y la bsqueda racional rinde decenas de nuevos antimicrobianos procedentes de Actinomicetos, otras bacterias y hongos.

1932-35 1940 1929 1940 1944

Un poco de historia

Definicin de antimicrobiano Concepto: Sustancia qumica que impide el desarrollo o favorece la muerte de un microorganismo. Los antimicrobianos pueden ser de tres tipos:
1.

Desinfectantes: Son sustancias que eliminan la viabilidad microbiana. Son aplicables slo a sistemas inanimados. Ejemplo: hipoclorito de sodio
2.

Antispticos: Son sustancias que reducen y controlan la presencia de grmenes potencialmente

patgenos. Aplicables sobre la piel y/o mucosas de humanos y animales. Ejemplo: Iodopovidona.
3.

Antimicrobianos de uso clnico-teraputico: Son drogas capaces de reducir y controlar la presencia de grmenes que han invadido los tejidos de un individuo.

Existen 2 frmacos de este tipo que nos interesan en este punto: antibiticos y quimioterpicos. Antibitico: Sustancia que es sintetizada por un microorganismo vivo. Ej: penicilina Quimioterpico: Sustancia de preparacin sinttica. Ej: Sulfas. En la prctica se utiliza el trmino "antibitico" para englobar a los antimicrobianos biolgicos (sintetizados por un microorganismo vivo) y de sntesis. Ambos se caracterizan por poseer "toxicidad selectiva"; no afectan o son relativamente inocuos para las clulas del husped, a diferencia de los desinfectantes y antispticos, que afectan a ambos. La toxicidad selectiva se logra gracias a las diferencias existentes entre el husped y el microorganismo invasor; el mejor ejemplo lo constituye la penicilina, que provoca la lisis bacteriana por inhibicin de la sntesis de la pared celular, no existiendo una estructura comparable en las clulas de los mamferos. Clasificacin de los antimicrobianos

Segn su efecto Segn su espectro

Microbicidas (Bactericidas, Micocidas, etc.) Microbiostticos (Bacteriostticos, etc.) Amplio espectro Espectro limitado Espectro reducido Antibiticos que afectan la sntesis de la pared bacteriana Antibiticos que afectan la membrana plasmtica Antibiticos que afectan la sntesis proteica procariota Antibiticos que afectan la sntesis del ADN bacteriano Antibiticos que inhiben vas metablicas

Segn su mecanismo de accin

CLASIFICACIN DE LOS ANTIBITICOS SEGN SU EFECTO Efecto bactericida de los antibiticos El efecto bactericida consiste en producir la muerte del microorganismo sensible. Los antimicrobianos bacterianos actan en la fase de crecimiento logartmico bacteriano. Los antimicrobianos bactericidas deben administrarse siempre en infecciones graves, cuando se necesita la muerte rpida de los microorganismos para controlar la infeccin, y cuando no se cuenta con un sistema inmune adecuado para detener el proceso infeccioso. Ejemplos de enfermedades infecciosas donde deben utilizarse antimicrobianos bactericidas lo constituyen la meningoencefalitis purulenta y la endocarditis infecciosa, tambin se utilizan en el paciente con fiebre y neutropenia, o en casos de infeccin en el paciente con SIDA. Efecto bacteriosttico de los antibiticos El efecto bacteriosttico consiste en producir la inhibicin del crecimiento bacteriano; mientras tanto, se espera que la inmunognesis aporte los elementos defensivos necesarios para el control de la enfermedad. Por lo tanto, estos antimicrobianos no deben indicarse al paciente inmunocomprometido. Actan en la fase estacionaria de crecimiento bacteriano. Algunos antibiticos poseen efecto bactericida o bacteriosttico segn la droga acte in vivo o in vitro, y

segn la dosis administrada. Por ejemplo la Anfotericina B, tiene efecto fungisttico in vivo y fungicida in vitro; la estreptomicina y la eritromicina tienen efecto bactericida cuando se administran a altas dosis y efecto bacteriosttico si se administran a bajas dosis. CLASIFICACIN DE LOS ANTIBITICOS SEGN SU ESPECTRO Anbiticos de amplio espectro Actan sobre una amplia gama de bacterias grampositivas y gramnegativas, y tambin contra Chlamydia, Mycoplasma, Rickettsia, Espiroquetas y Actinomycetos. Ej: tetraciclinas, cloramfenicol. Anbiticos de espectro limitado Actan slo contra cocos grampositivos y gramnegativos, bacilos grampositivos y espiroquetas. Ejemplo: penicilina. Anbiticos de espectro reducido Actan slo contra un sector limitado de grmenes. CLASIFICACIN DE LOS ANTIBITICOS SEGN SU MECANISMO DE ACCIN Anbiticos que afectan la biosntesis de la pared bacteriana La pared bacteriana es una estructura que protege a la clula de los cambios osmticos del medio externo, le confiere forma y rigidez, y contiene elementos patognicos caractersticos de cada especie. La composicin qumica de la pared celular vara de una bacteria grampositiva a una gramnegativa. Sabemos que la pared de las bacterias grampositivas est formada por una capa de 50 a 100 molculas de espesor de peptidoglicano, mientras que el peptidoglicano de las bacterias gramnegativas es slo de una o dos molculas de espesor, adems de una capa externa de lipopolisacridos, que est ausente en las especies grampositivas. El peptidoglicano est formado por largas cadenas de polisacridos en las cuales se alternan en forma lineal N-acetilglucosamina (NAG) y cido N-acetilmurmico (NAM). Estas largas cadenas estn unidas en forma cruzada por puentes peptdicos mediante enlaces amida con los grupos D-alanina del cido N-acetilmurmico.

La sntesis de la pared bacteriana se ha dividido en 3 etapas: 1. La primera es intracitoplasmtica y consiste en la sntesis de las unidades NAG y NAM. 2. La segunda etapa es intramembranosa; las unidades NAM y NAG se acoplan mediante un lpido transportador que es el 1-decaprenilfosfato. 3. La ltima etapa es extramembranosa y consiste en la incorporacin del nuevo peptidoglicano al ya existente, es decir se forman los puentes peptdicos extracitoplasmticos. Los ATB que actan sobre la pared bacteriana impiden los sucesivos pasos de la sntesis de la pared bacteriana; como consecuencia de esta interferencia, la clula bacteriana sin pared no resiste los cambios osmticos, se hincha y estalla. Por eso, los ATB beta-lactmicos (penicilinas, cefalosporinas), bacitracina, vancomicina, teicoplanina y fosfomicina son bactericidas pues matan a la clula bacteriana en el momento

de la divisin por lo tanto no actan cuando la clula est esttica. Penicilina G o Bencilpenicilina (sdica o potsica) Penicilina V o Fenoximetilpenicilina Penicilina procana Penicilina benzatnica Meticilina Nafcilina Oxacilina Cloxacilina Dicloxacilina Ampicilina Amoxicilina Carbenicilina Ticarcilina Azlocilina Piperacilina Mezlocilina Amdinocilina Pivamdinocilina Temocilina Imipenem Tazobactam Aztreonam las cido clavulnico Sulbactam Cefalexina Cefadroxilo Cefradina Cefazolina Cefalotina Cefuroxima Cefoxitina Cefaclor Cefatrizina Cefotaxime Ceftazidime Ceftriaxona Cefoperazona Cefixima Cefpodoxima Ceftibuten

Penicilinas estndar

Penicilinas resistentes penicilasas

las

Aminopenicilinas Betalactmicos Penicilinas antipseudomonas Acil-uredo penicilinas

Amdinopenicilinas Derivados de la 6metoxipenicilina Carbapenems Monobactmicos Inhibidores de beta-lactamasas

1 Generacin

Cefalosporinas

2 Generacin

3 Generacin

Glucopptidos Fosfomicina Bacitracina

Vancomicina Teicoplanina

Estructura qumica de los antibiticos betalactmicos Antibiticos que afectan la membrana citoplasmtica La membrana plasmtica cumple funciones importantes para la vitalidad de la bacteria. Entre sus propiedades incluye el actuar como barrera de permeabilidad selectiva, controlando de esta forma la composicin del medio interno celular. Los antibiticos utilizados en clnica, que actan modificando la membrana celular, son las polimixinas y los polienos (nistatina y anfotericina B) Actan como detergentes o tensioactivos catinicos y provocan una grave alteracin de la membrana celular, modificando la permeabilidad y permitiendo el escape de aminocidos intracelulares, purinas, pirimidinas y otras molculas fundamentales para la vida celular. Las polimixinas actan de este modo, interactuando sobre los fosfolpidos de la membrana celular, mientras que la nistatina y la anfotericina B son activos frente a hongos, se unen a un grupo esterol de la membrana que solamente contienen los microorganismos contra los cuales se utilizan estos ATB. Las bacterias ms susceptibles son las que tienen en su membrana un mayor contenido de fosfolpidos (gramnegativas). La insensibilidad o resistencia est en relacin con la impermeabilidad de la pared celular para estos frmacos, como el caso de las grampositivas que tienen una pared celular muy gruesa. Todos estos antibiticos son lticos, incluso en bacterias en reposo y tienen cierto potencial txico,

especialmente la anfotericina B, ya que son capaces de unirse con los lpidos de membranas citoplasmticas de las clulas de los mamferos. Anfotericina B Nistatina Clotrimazol Miconazol Ketoconazol Fluconazol Itraconazol Polimixina B Colistina

IMIDAZOLES

POLIMIXINAS

Antibiticos que afectan la biosntesis proteica procariota Se pueden dividir en dos grupos, segn inhiban la transcripcin o la traduccin proteica.
A.

Inhibicin de la transcripcin: consiste en la inhibicin de la subunidad beta de la enzima ARN polimerasa ADN dependiente, que lleva a la inhibicin de la sntesis del ARN mensajero; ste transmite la informacin del ADN, que es necesaria para la formacin proteica normal. Inhibicin de la traduccin: se logra mediante la unin de la molcula del ATB a la subunidad 30S o 50S del ribosoma bacteriano.

B.

INHIBICIN DE TRANSCRIPCIN

LA

Rifampicina Rifamicina Tetraciclina Oxitetraciclina Doxiciclina Minociclina

TETRACICLINAS

UNIN A LA SUBUNIDAD RIBOSOMAL 30S

AMINOGLUCSIDOS

Estreptomicina Neomicina Kanamicina Gentamicina Tobramicina Amikacina Netilmicina Espectinomicina

INHIBICIN TRADUCCIN

DE

LA

Cloramfenicol Tianfenicol

UNIN A LA SUBUNIDAD RIBOSOMAL 50S

MACRLIDOS

Eritromicina Claritromicina Roxitromicina Azitromicina

Espiramicina Oleandomicina Miocamicina LINCOSAMINAS Clindamicina Lincomicina

Aminoglucsidos: el ms estudiado es la estreptomicina, actun unindose especficamente, de forma irreversible, con un receptor proteico de los ribosomas 30S. Esta unin causa por una lado, el bloqueo de la actividad normal del complejo de iniciacin, con lo que se detiene la sntesis proteica y, por otro, distorsiona el codn del lugar A, provocando la incorporacin del ARNt a un aminocido distinto al codificado, formndose protenas anmalas. Tetraciclinas: se unen a los ribosomas 30S y bloquean la fijacin del aminoacil-ARNt en el lugar A. Cloramfenicol y lincosamidas: se unen en el ribosoma 50S e impiden la transferencia, inhiben la peptidiltransferasa y, por ello, la transpeptidacin.. Macrlidos: actan sobre los ribosomas 50S, impidiendo la translocacin, es decir, el paso del peptidil-ARNt del lugar A al P, previa liberacin del ARNt Antibiticos que afectan la sntesis de cidos nucleicos bacterianos La biosntesis del ADN bacteriano es inhibida por dos mecanismos:
1.

Mediante la inhibicin de una topoisomerasa, llamada ADN girasa, enzima esencial para la replicacin del ADN. La ADN girasa posee dos subunidades, A y B; la subunidad B cumple la funcin de enrollar las cadenas de ADN, paso necesario para acomodar el ncleo dentro de la bacteria mediante la reduccin de su tamao. Cuando este superenrollado ha finalizado, la subunidad A sella el corte en el ADN. Por ejemplo: las quinolonas inhiben la actividad de esta enzima. Mediante la formacin de compuestos txicos para las bacterias, resultante del poder reductor de los anaerobios sobre el radical "nitro" de los ATB nitroimidazlicos. Los productos de reduccin del grupo "nitro" se conjugan con el ADN, produciendo su desestabilizacin y por lo tanto provocando la muerte celular. cido naldixico cido pipemdico Cinoxacina

2.

QUINOLONAS

ANTIGUAS QUINOLONAS

NUEVAS QUINOLONAS

Norfloxacina Ciprofloxacina Pefloxacina Ofloxacina Fleroxacina Lomefloxacina

NITROIMIDAZOLES Griseofulvina 5Fluorocitosina

Metronidazol Ornidazol Tinidazol Secnidazol

Antibiticos que inhiben vas metablicas (quimioterpicos) Ciertos ATB, como las sulfamidas y la trimetoprima, inhiben vas metablicas que impiden el crecimiento bacteriano; tienen por lo tanto accin bacteriosttica. Cuando ambas drogas se administran en forma conjunta, su accin es bactericida. Las sulfamidas inhiben competitivamente la incorporacin de cido paraaminobenzoico (PABA) por su semejanza qumica, impidiendo a partir de este precursor, la sntesis de cido flico bacteriano, factor esencial en el crecimiento de los microorganismos. Cuando la bacteria adquiere la capacidad de producir PABA o de inhibir las sulfamidas, se transforma en resistente.

Estructuras qumicas de algunas sulfas

La trimetoprima (TMP) inhibe a la dihidrofolato reductasa (enzima reductora del cido dihidroflico, con lo cual obstruye la formacin de cido tetrahidroflico, metabolito esencial para la sntesis de purinas por la bacteria. La enzima de la bacteria es 50.000 a 100.000 veces ms sensible a la TMP que la enzima humana, con lo cual se explica su accin. El ser humano no sintetiza cido flico sino que lo incorpora con su dieta, por lo tanto la TMP no afecta la sntesis de purinas en el hombre. El bloqueo secuencial de la misma va bioqumica por las sulfamidas y la TMP resulta en un alto grado de sinergismo contra un amplio espectro de microorganismos.

Esquema de la sntesis del cido flico

ANLOGOS DE METABOLITOS BACTERIANOS

SULFAMIDAS

Sulfametoxazol Sulfadiazina Sulfisoxazol Sulfametoxidiazina Sulfametoxipirazina

INHIBIDORES DE ENZIMAS BACTERIANAS

Trimetoprima

Tipos de interacciones entre los antimicrobianos Existen 3 categoras de los efectos in vitro debidos a las interacciones entre antimicrobianos.

1.

Sinergismo: cuando la actividad debida a los antimicrobianos en combinacin, es mayor que la suma de los efectos individuales de cada uno de ellos. Antagonismo: disminucin de la actividad de un frmaco en presencia de otro. Indiferencia o Adicin: cuando la accin combinada de 2 antimicrobianos no produce un efecto mayor que el predecible por las actividades individuales de cada droga.

2. 3.

Fenmenos de resistencia a drogas antibacterianas Los antimicrobianos ejercen fuertes presiones selectivas sobre las poblaciones bacterianas y favorecen a aquellos microorganismos que son capaces de resistirlas. Aclaraciones de nomenclatura: Cepa insensible: es aquella cuyo fenotipo silvestre le permite "resistir" de modo natural a un determinado antibitico. La base de esta insensibilidad suele ser alguna estructura de la bacteria que acta como barrera (como por ejemplo, la membrana externa de Gram-negativas, que dificulta el paso de muchoa agentes antibacterianos). Cepa resistente: es una variante surgida por cambios genticos a partir de un fenotipo silvestre originalmente sensible. Resistencia natural Es la que ofrecen las bacterias de una misma especie o cepa frente a un determinado antibitico; todos los integrantes de la misma especie son resistentes al frmaco. Ej: Pseudomonas aeruginosa, naturalmente resistente a las cefalosporinas. Son cepas insensibles. Resistencia adquirida Esta resistencia afecta a algunas bacterias de una misma especie o cepa pero no a la totalidad; se logra en el transcurso del tiempo por dos mecanismos bsicos: por mutacin en un gen cromosmico (resistencia cromosmica) o por la adquisicin de material gentico extracromosmico -plsmidos- (resistencia extracromosmica).
1.

Resistencia cromosmica: se origina por mutacin espontnea, hecho que lleva a un cambio gentico estable. En una primera etapa aparecen pocas bacterias resistentes, pero a medida que el antibitico selecciona los microorganismos, se desarrollan clulas resistentes hasta transformarse en un cultivo puro antibitico-resistente. La mutacin espontnea puede acelerarse por accin de agentes fsicos mutgenos o sustancias qumicas. Por ejemplo: Pseudomonas aeruginosa frente a aminoglucsidos. Resistencia extracromosmica: se produce por incorporacin de material gentico por fuera del cromosoma bacteriano. Se la llama tambin resistencia transferida o resistencia mediada por plsmidos o transposones. El rpido aumento de la diseminacin de la resistencia de un antibitico dentro de una misma especie o entre especies est relacionado con la diseminacin de plsmidos de resistencia. Los transposones son segmentos de ADN que se pueden trasladar desde una a otra zona del cromosoma bacteriano o entre el cromosoma y un plsmido o entre el cromosoma y el ADN de un bacterifago; la transposicin es un proceso siempre presente en las poblaciones bacterianas. El ingreso del material transferido puede realizarse por diferentes mecanismos denominados: Conjugacin: consiste en la transferencia de genes entre bacterias sexualmente diferentes; requiere del contacto de clula a clula a travs de pelos sexuales para la transmisin del factor R (gen extracromosmico de la resistencia). Hay un puente citoplasmtico de conjugacin entre

2.

a.

bacterias de distintas especies. La resistencia as obtenida se extiende con rapidez, pues cada bacteria infectada se transforma en donante de genes de resistencia.
b.

Transduccin: se realiza por medio de bacterifagos, que transportan ADN de una bacteria a la otra. Transformacin: se produce entre bacterias homlogas, al producirse la lisis de una bacteria resistente, una porcin de ADN penetra la pared celular de una bacteria susceptible y ambos ADN se combinan. Transposicin: consiste en el intercambio entre plsmidos, o de un plsmido hacia un cromosoma o hacia un bacterifago sin necesidad de homologa entre el donante y el receptor. Los elementos as actuantes son los denominados transposones, que seleccionan su propio sitio de insercin.

c.

d.

Mecanismos bioqumicos implicados en la resistencia

1.

Inactivacin enzimtica del ATB: la resistencia a los ATB beta-lactmicos se debe principalmente a la produccin de betalactamasas, enzimas bacterianas que rompen la unin amida del ciclo betalactmico. Existen numerosas betalactamasas, codificadas por genes cromosmicos o por genes transferibles localizados en plsmidos o transposones. Se han definido tres clases de betalactamasas: las de clase A, B y C.

La resistencia a aminoglucsidos se debe a enzimas codificadas por genes localizados en plsmidos o en el cromosoma; varias de estas enzimas son transportadas en transposones. Dichas enzimas pueden inducir Nacetilacin, O-nucleotidilacin y O-fosforilacin. La cloramfenicol acetiltransferasa (CAT) es producida por bacterias grampositivas y gramnegativas. Esta enzima intracelular inactiva el antibitico transformndolo en su deriva y est codificada por genes localizados en el cromosoma bacteriano o en plsmidos. Recientemente se ha aislado de Escherichia coli una enzima denominada eritromicina estearasa, que inactiva el ciclo lactona de la eritromicina.
2.

Disminucin de la permeabilidad celular hacia el ATB: El pasaje de los antibitico hidrfilos a travs de la pared celular est facilitado por la presencia de porinas, protenas que forman canales de difusin llenos de agua que pueden ser atravesados por los antibitico. Las bacterias producen un nmero elevado de porinas y regulan el nmero de las mismas. Cuanto ms grande es la molcula del antibitico, mayor ser el nmero de cargas negativas y por lo tanto ms elevado el grado de hidrofobicidad; por ejemplo las pequeas molculas hidrfilas del imipenem, cruzan fcilmente la pared, mientras que molculas con carga mucho mayor, como la carbenicilina (una penicilina de amplio espectro), la atraviesan en menor grado.

Alteracin del mecanismo de transporte del antibitico: cuando el antibitico accede al interior bacteriano por algn mecanismo de transporte especfico, una mutacin que afecte a dicho sistema de transporte supondr una mayor resistencia al antibitico. Por ejemplo en E. coli la cicloserina entra aprovechando el sistema de transporte de la valina o la glicocola. Determinados mutantes incapaces de transportar estos aminocidos son resistentes a la cicloserina.
3.

Produccin de flujo de ATB a travs de la membrana celular: es debido a la presencia de protenas de membrana especializadas. Se altera la produccin de energa y se disminuye no solamente la entrada del antibitico sino que a su vez las bacterias reducen la concentracin del antibitico y se promueve la extraccin activa del mismo. Tal mecanismo de resistencia ha sido demostrado para la tetraciclina en los bacilos gramnegativos y recientemente en Escherichia coli para la eliminacin de fluoroquinolonas.

4.

Alteracin de los sitios de ataques ribosomales: la falta de unin del antibitico a su receptor "blanco" en el ribosoma, anula su capacidad para inhibir la sntesis de protenas y el crecimiento celular. Esta resistencia se produce como resultado de la accin de una metilasa, que demetila los residuos de adenina en el ARN ribosomal 23S de la subunidad 50S, que interfiere con la fijacin de la estreptomicina al ribosoma. Sntesis de una nueva enzima resistente: algunas bacterias con resistencia mediada por plsmidos, elaboran enzimas evasivas que eluden el bloqueo metablico efectuado por sulfamidas o TMP mediante distintos poros secuenciales; por ejemplo pueden reemplazar a la enzima dihidrofolatoreductasa, sensible a estas drogas, por otra enzima 20.000 veces menos susceptible a la inhibicin. Las bacterias gramnegativas resisten a las quinolonas alterando la ADN girasa. Aparicin de otra va metablica alternativa: las bacterias pueden adoptar otras vas metablicas para obtener el sustrato necesario para sus requerimientos vitales; por ejemplo, pueden utilizar tiamina o metionina en lugar de cido paraaminobenzoico (PABA) para la sntesis de cido flico y as hacerse resistentes a la TMP-Sulfametoxazol.

5.

6.

Resistencia cruzada Abarca a los antibiticos de estructura qumica idntica; cuando el microorganismo adquiere resistencia a un determinado antibitico, tambin ser resistente a los dems integrantes de ese grupo de frmacos. Tal es el caso de Bacteroides para los aminoglucsidos o Staphylococcus para tetraciclinas. El conocimiento de la resistencia cruzada evita la prescripcin de antibiticos similares cuando fracasa la teraputica. ANTIBIOGRAMA Introduccin Tambin conocidas como antibioticogramas o pruebas de susceptibilidad in vitro a los antibiticos . Son mtodos de laboratorio que estudian la sensibilidad de un microorganismo a la accin de los antibiticos. El trmino sensible es muy usado como sinnimo de susceptible. Susceptible significa que un microorganismo es inhibido o muerto en las pruebas in vitro por una concentracin del antibitico accesible en la sangre, cuando ese mismo antibitico se usa in vivo. Estas pruebas pueden ser de tipo cualitativo si el resultado expresa la caracterstica de susceptibilidad o resistencia de un microorganismo frente a un antibitico; o de tipo cuantitativo si permite obtener informacin gradual de esa susceptibilidad. Para establecer el tratamiento correcto de cualquier infeccin bacteriana debemos apoyarnos, siempre que sea posible, en el conocimiento del agente etiolgico y el conocimiento de la sensibilidad de dicho agente a los antibiticos. Se debe solicitar un antibiograma cuando:
1.

El microorganismo aislado, causante de la patologa, no es uniforme en su comportamiento frente a los antibiticos usuales. En infecciones microbianas graves que comprometen seriamente la salud del paciente. Ej: endocarditis, absceso cerebral, septicemias, osteomielitis, meningitis, etc. Si se desconoce la susceptibilidad del microorganismo aislado a los antibiticos de uso frecuente. En una patologa que no responde al tratamiento antibacteriano clsico.

2.

3. 4.

Pruebas de susceptibilidad

Se clasifican en: 1. Pruebas cuantitativas 2. Pruebas cualitativas 3. Pruebas especiales:

1. 2. 3. 4.

Pruebas de Beta-lactamasa Poder inhibitorio del suero Poder bactericida del suero Interaccin sinrgica de los ATM

Pruebas cuantitativas Antibiograma por dilucin: permiten cuantificar hasta que grado un microorganismo es susceptible a la accin de un ATM. Puede realizarse en medio lquido o slido. Permite conocer la concentracin inhibitoria mnima (CIM) de un ATM necesaria para inhibir el desarrollo de un microorganismo Pruebas cualitativas Antibiograma por difusin: hay distintas tcnicas, la de mayor utilizacin es el mtodo de Kirby- Bauer, que trabaja con medio de cultivo slido en placa de Petri y discos de ATM. Si el microorganismo en estudio es susceptible a la accin del ATM, se formar un halo de inhibicin alrededor del disco, luego de haber incubados las placas a temperatura y tiempo adecuados. Pruebas especiales
1.

Pruebas de betalactamasas: permite detectar la produccin de dichas enzimas por diferentes especies bacterianas. Varias pruebas pueden utilizarse para conocer la produccin de betalactamasa bacteriana. Las ms utilizadas son: Mtodo rpido yodomtrico Mtodo acidomtrico

Estos mtodos deben usarse con cultivos puros de bacterias y no con secreciones humanas (o sea muestras). La principal ventaja de estos mtodos es la rapidez de su realizacin, la certeza de sus resultados si se tiene la cepa patgena aislada y su fcil lectura.
2.

Poder inhibitorio del suero: permite determinar la actividad antibacteriana en el suero del paciente durante la teraputica antimicrobiana para poder evaluar la eficacia de la dosis de antibitico que est recibiendo. Su aplicacin est limitada a patologas graves en inmunodeprimidos, en casos de trastornos en la absorcin, metabolismo y/o excrecin del antibitico y en control de tratamientos prolongados. Interaccin sinrgica de los antibiticos: consiste en colocar en una serie de tubos cantidades constantes de una dilucin cuatro veces menor que la CBM de una droga en combinacin con concentraciones de la segunda droga desde la CBM hasta un octavo o menos, manteniendo una concentracin constante del inculo bacteriano.

3.

(CIM) Concentracin inhibitoria mnima: Es la concentracin del antibitico requerida para impedir el

crecimiento bacteriano a partir de la incubacin de 10 bacterias en fase de crecimiento rpido, en un medio libre de protenas con pH 7,2, aerobio, durante un periodo de incubacin de una noche. Este trmino es importante porque se utiliza para determinar la sensibilidad bacteriana a un agente antibitico especfico. Es importante recordar que las condiciones in vivo son distintas a las utilizadas para esta prueba que se realiza in vitro. En un ser vivo la bacteria generalmente se encuentra un medio ms cido y anaerobio. Adems es mayor tamao del inoculo bacteriano y probablemente no est en fase rpida de crecimiento; lo cual disminuye el valor predictivo del CIM. Referencias: Basualdo Juan A.; Coto, Celia; de Torres Ramn A.(1996). Microbiologa Biomdica.

5-6