UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHIHUAHUA FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS

Practica 20 -GT

Laboratorio de qumica clnica Q. B. P. Beatriz Portillo Arroyo

Michelle A. Quezada Piceno 235891 Silvia delgado Rodarte 185586

5 de noviembre de 2012

RESUMEN INTRODUCCION Es una enzima que interviene en la transferencia del residuo gamma-glutamilo de pptidos de gamma-glutamilo a aminocidos, el agua y otros pptidos pequeos. En la mayor parte de los sistemas biolgicos, el glutatin sirve como donador de gamma-glutamilo. La funcin fisiolgica especifica de la GGT no ha sido establecida con claridad, pero al parecer la GGT interviene en la sntesis de pptido y protena, la regulacin de las concentraciones de glutatin tisular y el transporte de aminocidos por membranas celulares. En el hgado, la GGT se localiza en los canalculos de las clulas hepticas, y en particular en las clulas epiteliales que revisten los canalillos biliares. Debido a estas localizaciones, la GGT aumenta en casi todos los trastornos hepatobiliares, lo que la convierten en uno de los ensayos enzimticos mas sensibles en estas condiciones. Las concentraciones mas altas se observan por lo general en obstruccin de la va biliar. OBJETIVO Determinar la concentracin srica de -GT en un paciente, as como aprender la metodologa para su determinacin. MATERIALES Y METODOS -Centrifuga -Tubos de ensaye -Bata de seguridad -Guantes -Tubo vacutainer rojo/amarillo -Sistema vacutainer para puncin venosa -Ligadura -Torundas

-Micropipetas -Puntas para pipeta -Buffer pH 8.25 -Sustrato L- -glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida) -Tartrato sdico -Acido actico (50l en 1ml de suero) -Incubadora -Genesis, espectrofotmetro

-GT 1. Tomar muestra de paciente en ayuno de seis horas en tubo rojo. 2. Ajustar el espectrofotmetro a cero con agua destilada a 405nm. 3. Realizar las siguientes preparaciones:

Reactivo de trabajo suero

Muestra (total) 2ml 200l

4. Mezclar, incubar 1 minuto a temperatura ambiente. 5. Leer absorbancia de muestra total contra el blanco de agua destilada a 405nm a los tiempos 0, un minuto, dos minutos y tres minutos. RESULTADOS

[ - GT ] = abs tiempo

Muestra total

1190

-GT

Valor 6.34

Valor de referencia 4-18 UI/L

CONCLUSION

BIBLIOGRAFIA Bishop M. Qumica Clnica. Principios, procedimientos y correlaciones. Quinta edicin. Mac Graw Hill. 2007. Pginas 223-224 APENDICE Principio qumico de la determinacin de -GT por el mtodo cintico uv La gamma glutamil transferasa, cataliza la transferencia de un grupo gamma-glutamilo, desde el sustrato gamma-glutamil-3-carboxi-4nitroanilida al receptor glicilglicina, con formacin de gamma glutanil glicilglicina y 5-amino-2nitrobenzoato. El sustrato es incoloro, mientras que el 5-amino-2nitrobenzoato absorbe luz a 405nm, siendo la velocidad de formacin, proporcional a la velocidad de la gamma GT de la muestra. RPBI -Bote rojo -Aguja -Suero de muestra (refrigeracin) -Bolsa roja -Guantes -Torunda -Tubo rojo