El modelo de mosaico fluido membrana result ser una muy til hiptesis para explicar muchos, pero ciertamente

no todos los fenmenos, teniendo lugar en las membranas biolgicas. Nuevos datos experimentales muestran que la compartimentacin de componentes de la membrana puede ser tan importante para la transduccin de seal efectiva como es el fluidez de la membrana. En este trabajo queremos rendir homenaje a Singer-Nicolson modelo, que est cerca de su 30 aniversario, en honor a sus caractersticas bsicas, el mosaicismo'''' y difusin'','' que predicen la intercalacin de protenas y lpidos y su capacidad para experimentar reorganizacin dinmica a travs de movimiento browniano. Al mismo tiempo, modificaciones basadas en los datos cuantitativos se proponen, destacando la frecuencia genticamente predestinado, pero flexible, la estructura multinivel la aplicacin de una gran complejidad de las funciones celulares. Esta '' nuevo'' dinmicamente estructurado modelo mosaico lleva el siguiente caractersticas: el nfasis se desplaz de fluidez a mosaicismo, que, en nuestra interpretacin, significa codistribucin no aleatoria patrones de tipos especficos de protenas de membrana que forma pequea escala clusters a nivel molecular y los grandes conglomerados (grupos de los clusters, las islas) a nivel submicromtrico. La cohesin fuerzas, que mantienen estos conjuntos como elementos principales de las membranas, se originan dentro de una estructura de microdominio, donde lpido-lpido, protena-protena, y de las interacciones protena-lpido, as como sub-y supramembrane (citoesqueleto, extracelular matriz, otras clulas efectoras), muchas de ellas genticamente predestinados, desempean papeles igualmente importantes. El concepto de fluidez en el original modelo ahora se interpreta como la permisividad de la arquitectura reestructuracin continua y dinmica de la higherlevel molecular y grupos de acuerdo a las necesidades de la clula y como evocado por el medio ambiente. Dogmas cientficos, que los modelos por s solos, rara vez sobreviven ms de un cuarto de siglo sin modificaciones significativas. Alrededor de su 30 aniversario, el tiempo parece ser madura durante al menos una modificacin modesta de un viejo paradigma. El cantante-Nicolson modelo del mosaico fluido de membrana (SN modelo) (1) predice la libertad lateral y rotacional y aleatorio distribucin de los componentes moleculares en la membrana. Membranas haba sido considerado por el modelo SN como'' un bidimensional orientado a la solucin de las protenas integrales. . . en la bicapa de fosfolpidos viscoso'' (1-3). Ahora se sabe, sin embargo, que esta libertad de protena (y lpidos) movilidad est lejos de ser sin restricciones. Uno de los primeros indicios de una no aleatoria distribucin de las protenas fue proporcionada por el descubrimiento de cocapping (4). La evidencia emergente sobre jerrquicamente construida supramolecular complejos de protenas (5-7) obstaculizado difusin de protenas en la membrana (8-10), y la existencia de membrana distintas dominios de balsas denomina'''' (11) tambin contradice el modelo SN. Por lo tanto, Jacobson et al. (2) han sealado acertadamente, "La mayora de protenas de la membrana no gozan de la continua sin restricciones

difusin lateral. . . . En cambio, las protenas de difundirse en un ms complicado manera que indica una considerable heterogeneidad lateral en estructura de la membrana, por lo menos en una escala nanomtrica.'' El gran variedad de especies moleculares de fosfolpidos, las diferencias en los sus formas moleculares y propiedades fsicas, y su asimtricos distribucin en la bicapa de membrana, indican un heterogeneidad molecular y la posible formacin de membrana microdominios (12). Advanced Cell biofsica y biologa molecular Metodologa proporciona datos cuantitativos sobre la esttica y Organizacin Dinmica de Membranas Membrana dinmica, es decir, la movilidad y siempre cambiante proximidad relaciones de molculas de lpidos y protenas en el plasma membrana, tienen un impacto significativo en los procesos celulares esenciales, tal como la activacin, ligando-receptor de reconocimiento, antgeno presentacin, las interacciones intercelulares (por ejemplo, entre el objetivo y clulas asesinas), etc Las mediciones cuantitativas de la dinmica de la membrana son posibles con la recuperacin de fluorescencia despus de photobleaching (13, 14), de una partcula tcnicas de seguimiento (8, 15, 16), y captura ptica por lser pinzas (13, 17, 18). Fluorescencia espectroscopa de correlacin, un mtodo con tradicin en el estudio de los cintica de la reaccin y las interacciones moleculares en solucin (19, 20), Tambin se ha aplicado al estudio de los sistemas celulares recientemente (21, 22). El mtodo permite la determinacin de absoluta molecular concentracin, movilidad y comobility en pequeo volumen, confocal elementos de las clulas vivas (23). Lser confocal de barrido microscopio (24) en el borde de sus lmites de resolucin result ser xito en la determinacin de la desigual distribucin de la superficie celular de diversos antgenos. Escaneo microscopa de campo cercano ptico (NSOM), un mtodo ideal para evaluar la localizacin de membrana protenas en la resolucin de varias decenas de nanmetros, tambin tiene ido ganando espacio en la investigacin de la membrana citoplasmtica (25-28), aunque, como Edidin (29) seala'', mientras que NSOM promete mucho, su aplicacin a la biologa es acerca de dnde electrn microscopa fue de 40 o 50 aos atrs.'' Estas metodologas el apoyo de procesamiento de imagen digital aadir informacin valiosa a los datos dinmicos sobre la distribucin espacial y compartimentacin de constituyentes de la membrana. En general, estos enfoques aportar pruebas de la distribucin como de dominio lpidos y protenas en las membranas biolgicas (17, 30, 31). Restricciones en la movilidad lateral de ambos lpidos y protenas componentes se estudiaron extensamente utilizando la fluorescencerecoverydespus de fotoblanqueo tcnica, la medicin de la difusin de componentes de la membrana marcadas con fluorescencia de nonbleached reas en un pequeo lugar, blanqueados. Difusin lateral parmetros de molculas del MHC (9) eran altamente dependientes de la blanqueado tamao del punto. Debido a que la velocidad de difusin en una bicapa lipdica es espera que sea independiente de este tamao, una explicacin plausible

es la estructura de dominio de tipo mosaico de las membranas biolgicas que restringen el paso sin barrera de las protenas y puede ser en parte responsable de los arreglos de clster de membrana protenas. Abreviaturas: SN modelo, cantante y modelo del mosaico fluido Nicolson membrana; FRET, fluorescencia transferencia de energa de resonancia; TCR, receptor de clulas T antgeno. G.V. y J. S. contribuyeron igualmente a este trabajo. ** Para quien la correspondencia debe ser enviada a la direccin *. E-mail: dami@jaguar.dote.hu. www.pnas.org?cgi?doi?10.1073?pnas.1332550100 PNAS? 08 de julio 2003? vol. 100? no. 14? 8053-8058 EXAMEN Una sola partcula de seguimiento sigue la caminata al azar'''' de un oro partcula fija a una protena de la superficie celular. Para la transferrina receptor y E-cadherina, un camino libre de obstculos de 400 nm fue? determinado (8), mientras que para los de tipo salvaje y cytoplasmatically clase I MHC truncado mutante,? 600 y? 1.700 nm fueron medido, respectivamente (13), lo que indica que, para membranespanning protenas, el paso sin barrera est en la misma gama y que las barreras a la difusin'' libre'' estn presentes 2-3 nmbelow la membrana bicapa. Como se muestra en la figura. 1, elementos del citoesqueleto y molculas intracytosolic con conexiones funcionales a cellsurface receptores tienen la capacidad, bien sea para reducir la velocidad o a detener por completo el movimiento lateral de las protenas transmembrana. Resonancia de fluorescencia la transferencia de energa (FRET) Lo ms destacado Asociaciones de escala nanomtrica en la membrana celular Se ha sugerido que las protenas de membrana se pueden codistributed no aleatoria, y esto no aleatoria todava codistribucin dinmico patrn puede incluso ser controlado genticamente (32-35). Esta hiptesis ha sido apoyada por una cantidad significativa de los datos experimentales (36, 37). Un activo importante en el estudio de estos codistributions fue la aplicacin de FRET a los sistemas celulares. En la FRET, un colorante fluorescente excitado (donante) dona energa a un colorante aceptor si la distancia de separacin entre ellos es 1-10 nm. En la dcada de 1970, de la superficie celular lectinas fueron los primeros en ser investigado por FRET (38, 39). Desde principios de 1980, ms sistemtica y mejor establecidos de adquisicin de datos y la evaluacin mtodos de FRET se introdujeron en citometra de flujo (35, 40). Un mtodo cuantitativo se introdujo en digital de fluorescencia microscopa que explota las diferencias en photobleaching cintica de tintes donantes en presencia y en ausencia de aceptores (36, 41). Recientemente, un nuevo mtodo, basado en sistemtica y normalizado FRET mediciones entre receptor individual pares que producen un mapa receptor por triangulacin, se ha introducido para describir la exacta bidimensional topologa de receptor grupos (7, 37). El homo-y heteroassociations de MHC de clase I y II (42), el receptor de IL-2? subunidad e intercelular molcula de adhesin de 1 (43-45), molculas MHC y transferrina receptores (46), CD4 y CD8 antgenos (47, 48), el antgeno de clulas T receptor (TCR)? complejo CD3 (49), las molculas de tetraspan (CD53,

CD81, CD82) y CD20 con MHC de clase I y clase II (50), la tres subunidades de la multisubunit receptor IL-2 (37), el tumor receptor del factor de necrosis (51), Fas (CD95;. ref 52), y muchos otros han sido analizados en detalle. Muchos receptores se encontraron para ser oligmeros premontados sin unin del ligando, incluyendo de necrosis tumoral receptor del factor, Fas, y TCR. Resultados para el Receptor IL-2 se indica que sus subunidades estn preensamblados en T clulas y no requieren citoquinas inducida por agregacin. Esta colocalizacin fue significativamente modulada por la unin de relevante ILS. Adems, existe evidencia de que la IL-15 receptor ? Subunidad, que comparte el -? Alpha y subunidades-con IL-2R, tambin pueden formar estructuras supramoleculares premontado con IL-2R? y el'''' comn cadena beta (53-55). Estos datos (37) tienen desafi el paradigma aplica con frecuencia que multisubunit receptores estn montados bajo la influencia de su especfica ligandos y apoyan un modelo alternativo en el que premontado grupos receptores de facilitar ms rpidos y ms fuertes reacciones biolgicas, porque no hay necesidad de que la difusin lateral de receptores de asociacin. Microscopa electrnica y microscopa de escaneo-Force Reveal Clusters submicromtricas de receptores de membrana FRET mediciones detectar asociaciones moleculares en la 1 - a 10-nm rango. Aplicacin combinada de electrones y scanningforce microscopa hecho posible el descubrimiento de un nuevo y ms alto nivel jerrquico de agrupamiento del receptor en clulas linfoides (36). La distribucin de etiquetas inmunoelectrnica unidos a receptores mostraron un patrn no aleatorio, que difiere de la distribucin de Poisson supone para las molculas dispersas al azar. El mtodo tambin se us en condiciones prximas a las condiciones fisiolgicas, donde la partculas de oro fueron detectados con microscopa de barrido de la fuerza por usando el modo de tapping en muestras hidratadas (36). La observacin que a escala nanomtrica islotes de MHC de clase I molculas en la clula membrana se organizan en grupos de tamao micromtrico isla'''' se extendi a MHC de clase II (56) y al receptor de IL-2 ? Subunidad y el receptor de la transferrina (24). La aplicacin secuencial de etiquetas de oro de diferentes tamaos destinados a las clases I y MHC II tambin revel que sucesivamente positivo FRET datos no significa necesariamente que cada receptor era homo-o heteroassociated en una poblacin grande. El grado de asociacin con MHC clase II de MHC de clase I fue del 66%, pero slo el 25% de la clase I del MHC molculas estaban en la vecindad molecular de MHC clase II (56). Adems de establecer la distribucin no aleatoria de los receptores, Inmunomarcaje tambin se proporciona para la estimacin de la media tamao de orden superior grupos moleculares (o grupos de islas) (24). Estos fueron en el intervalo de 400-800 nm para diversos receptores, en buena correlacin con los medios sin barreras caminos se inform anteriormente (8, 13). Lser confocal de barrido microscopio de fluorescencia de etiquetado, vivir y clulas fijadas seguida de reconstruccin de la superficie

y el anlisis de autocorrelacin espacial confirm la existencia de estas agrupaciones receptor con tamaos esencialmente iguales a los deducirse de microscopa electrnica (24). Las balsas de lpidos: el equivalente funcional de los receptores de las Islas? Numerosos estudios dirigidos a la membrana plasmtica han proporcionado evidencia de la existencia de dominios distintos en la submicron rango (24-26, 36, 56-60). Paralelamente a estas observaciones, el trmino'''' balsas de lpidos fue acuado basa en estudios de popularidad de clulas epiteliales de polaridad y adquirida generalizada en la ltimos aos (11). El anlisis bioqumico sugiri que las balsas consisten de colesterol y esfingolpidos en el prospecto de la exoplasmic bicapa de lpidos y colesterol y fosfolpidos con saturada cidos grasos en el prospecto endoplsmico (61). Estn rodeados por ms dominios de membrana de fluidos, que son abundantes en cidos grasos insaturados (62). Fosfatidilcolinas poliinsaturadas y fosfatidiletanolaminas (63) como etanolamina plasmalgenos se detectaron en balsas por cuantitativos ionizacin por electrospray y espectrometra de masas (64), probablemente reflejando un mecanismo regulador que compensa la rigidez efecto del colesterol (63). Adems, fosfatidiletanolaminas 18:01 y 22:6 y plasmalgenos etanolamina son propensos a fases de formulario nonbilayer (65, 66), y la asociacin de soluble protenas (tales como las protenas G) a las membranas depende de la propensin de ida y hexagonal de fase reas (67). Esta observacin destaca el posible papel de las balsas de lpidos en la relacin seal La figura. 1. Las protenas experimentar diferentes tipos de restricciones para la traduccin difusin en la membrana plasmtica. La vista de la membrana se muestra a partir de debajo. Las protenas A, que muestran una acumulacin preferencial en un microdominio lpidos puede estar confinada a la zona de la microdominio si la energa de activacin de pasar la barrera de dominio es mayor que la energa cintica de la protena. La medida en que pasa una barrera de dominio est prohibido est determinado por la preferencia de la protena para el entorno lipdico: si la protena interacciona preferentemente y avidez con los lpidos de la microdominio, puede ser renuente para salir. B y C, El citoesqueleto es tambin importante en la restriccin lateral libre, difusin de protenas de membrana. Las protenas cuyo dominio intracelular es largo son incapaces de pasar a travs de una valla compuesto de afilament del citoesqueleto (B), mientras que las protenas con un dominio intracelular corto son libres de moverse a travs una valla (C). D, asociaciones de protenas experimentar la fuerza ms viscoso; por lo tanto, su tasa de difusin traslacional es generalmente ms pequeo que el de protenas monomricas. 8054? www.pnas.org?cgi?doi?10.1073?pnas.1332550100 Vereb et al. procesos de transduccin. Aislamiento de las balsas lipdicas como detergente resistentes dominios de la membrana, seguido de la transferencia Western, indic que balsas de hecho son eficientes concentradores de diversas protenas, muchos de ellos activos en la sealizacin celular. Entre stos se encontraban glicosilfosfatidilinositolprotenas ancladas (68), colesterol ligado-y protenas palmitoiladas tales como erizo (69), de la familia Src quinasas y? subunidades de protenas G heterotrimricas (70), una citoquina

receptores (71), y las integrinas (72). La cuestin es cmo estos bioqumicamente identificados, detergentresistant dominios de la membrana corresponde al confinamiento observado de protenas de membrana. Como Jacobson y Dietrich (73) seal,''. . . la naturaleza de la correlacin in vivo de tales detergente resistentes membranas sigue siendo enigmtica. En principio, los microscopa debe ser capaz de determinar si el postulado balsas existir''. Recientemente, se ha demostrado que en efecto microscpico equivalentes de balsas, o, mejor dicho, los agregados de balsas, puede ser detectado mediante el uso de alta resolucin de la microscopa confocal y que su desmontaje por el agotamiento o en la formacin de complejos in situ de colesterol no slo destruye su morfologa (24) pero tambin deteriora sus capacidades de sealizacin, por ejemplo, en las clulas T, impide Stat5 y Stat3 fosforilacin a travs del receptor de IL-2 (71). Basndose en la idea de que las balsas son esencialmente unidades de membrana formado a partir de la fusin de vesculas de transporte a la membrana, uno esperara que su tamao es muy pequeo (59). En vigor fotnico microscpicas experimentos, se determin que el tamao de la balsa es? 50 nm de dimetro (74), lo que representa? 3.500 molculas de esfingolpidos. Esto indica que los parches de membrana observadas en fluorescencia microscopia, teniendo balsa protenas marcadoras y? o lpidos, probablemente son agregados de estos bloques de construccin bsicos. En algunos de los casos, estos agregados mayores no se observan en que se reclina Las clulas (75, 76) y slo se pueden ver en la reticulacin de la unidad'' balsas'' (75). En otros casos, las clulas en su estado nativo presente parches superficiales de tamao submicromtrico, identificables como balsas basado en su composicin (24, 77). Las balsas son estructuras dinmicas como funcin requiere acondicionamiento del Hace unos aos, poco se sabe acerca de la estabilidad y vida til de balsas lipdicas en las clulas vivas. Parece ahora que, en comparacin con la naturaleza relativamente estable de fases en las bicapas artificiales, lpidos balsas en clulas son relativamente de corta duracin. Como Edidin seala en una revisin reciente (78),''. . . dominios son ahora piensa que es ms pequeo y menos estable que eran en 1992. sondas'' lpidos con cadenas saturadas gastan en promedio 13 ms en un dominio (79); la vida media de dominios estables se encontr que en la escala de decenas de segundos (10). Pulsadas mediciones de EPR indican un muy tasa de cambio rpido entre los dominios ricos en protenas y el volumen de la membrana, llegando a veces de residencia tan bajo como 15? s (80). Esta posibilidad de cambiar rpidamente la composicin y la ubicacin en la membrana, as como la capacidad de formar agregados de diversos tamaos, fcilmente pueden dar cuenta de la funcin reguladora de lpidos dinmico balsas desempear en los procesos de sealizacin diferentes. Tal funcin ha sido establecido para las tirosina quinasas receptoras (27) y para inmune receptores como el TCR (81) y el receptor de IgE (82, 83). El primer paso en la sealizacin se representa por inmunoreceptor dependiente de ligando del receptor de la agregacin, seguido por receptor la fosforilacin por tirosina quinasas de la familia Src. Las balsas de lpidos

han sido identificados como plataformas en las que la transduccin de seales molculas pueden interactuar con los immunoreceptors agregados. Multicadena receptores de reconocimiento inmune, tales como TCR (84) y Fc? RI (83) utilizar los mecanismos comunes por las cuales las balsas lipdicas ayudar en la iniciacin de la sealizacin. El inicio de la activacin de las clulas T est asociada con la formacin de la sinapsis llamada'''' inmunolgica (85) entre las clulas T y las clulas que se estn reconociendo. Esta sinapsis comienza con la primera agrupacin de los receptores y promueve la centralizada acumulacin de los TCR que se ha denominado la central'' activacin supramolecular'' complejo con un perifrico correspondiente anillo, que consiste en funcin de los linfocitos antgeno asociado 1 (LFA-1) ligandos (86). Los componentes de la superficie del antgeno clulas presentadoras son tambin parte integrante de estos grupos; MHCcomplejos de pptido se encuentran en el centro de supramolecular activando complejo, mientras que la molcula de adhesin intercelular 1, el contrarreceptor LFA-1, se concentra en el perifrico complejo de activacin supramolecular. Inicialmente, los TCR no son necesariamente comprometidos en el centro, pero como la interaccin clula-clula desarrolla, se translocan desde la periferia hacia el centro de la sinapsis (87, 88). De acuerdo con el modelo de serie de activacin, en esta manera, se presentan muy pocas molculas MHC-pptido puede activar un elevado nmero de TCR (89). Parece importante en trminos de la interaccin que palmitoylation del membraneproximal cistenas de CD4 y la asociacin de Lck con CD4 contribuir al enriquecimiento de CD4 en las balsas de lpidos (90) y que, Adems, K? canales tambin residen en balsas en el molecular proximidades de TCR (91). La estructura de la clula diana de CTL contacto es similar a la observada entre clulas T y antigenpresenting clula, un anillo de protenas de adhesin que rodean el interior seal de dominio de molcula. La secrecin de grnulos ltico se produce en un dominio separado dentro del anillo de adhesin (92). En cuanto a la coordinacin espacio-temporal de la sealizacin por la IgE de alta afinidad receptor Fc? RI, balsas lipdicas primera concentrar protenas quinasas Lyn excluyendo la Fc? RI de estos dominios. Tras la reticulacin Fc? RI por el antgeno, los receptores rpidamente translocan las balsas de lpidos, seguida de su fosforilacin y la posterior contratacin de Syk y PLC? en estos dominios (93). La Este ltimo proceso tambin implica una acumulacin de actina del citoesqueleto a los dominios activos (82). Un reciente intento de repetir el experimento clsico de Frye y Edidin (94) con las tecnologas actualmente disponibles siempre interesante datos que subraya el dinamismo de los dominios de la membrana. Las clulas marcadas con diferentes anticuerpos fluorescentes fueron fusionados uno con el otro. De campo prximo de exploracin ptica microscpica y Estudios paralelos FRET revel que entremezcla de micrometerscale grupos de protenas comenz justo despus de la fusin celular, pero estaba all un retraso de aproximadamente 20 min en el entremezclado de escala nanomtrica

asociaciones de protenas (28), lo que indica claramente la jerarqua de asociaciones de protenas (Fig. 2). Aunque estos experimentos corroboran la existencia de grupos de protenas, destacan su dinamismo, que puede ser importante para la rpida reorganizacin las interacciones protena. Los factores estticos y dinmicos Organizador dominios de membrana Las fuerzas fsicas y qumicas que dan lugar a membrana dominios estn bajo intensa investigacin (2, 57). Se presume que varias restricciones intracelulares y extracelulares y las fuerzas influir en el tamao y la distribucin de estos grupos, uno de ellos siendo el contenido de colesterol del rea de la membrana en cuestin (11, 95), y el cambio de la composicin de colesterol de la clula membrana altera el patrn de asociacin y propiedades de sealizacin de diversas molculas (71, 95). Recientemente, se ha propuesto que los lpidos tienden a adoptar una superretcula distribucin en los fluidos mezclados bicapas y de distribucin de fosfolpidos en estas estructuras se determina por el molecular la forma y la carga del grupo de cabeza (96, 97). Estos superred estructuras no cubren todo el rea de la membrana, sino estn en equilibrio dinmico con las reas en las que los lpidos estn distribuida al azar. La presencia de protenas puede modificar estos estructuras por agotamiento o la atraccin de ciertas especies de lpidos porque las similitudes o diferencias en las formas moleculares. Sin embargo, graso cido y la composicin polar grupo cabeza de los fosfolpidos (96), como se as como la termotrpico y lamelar-a-fase lamelar transiciones, se controlan con precisin de manera que la fluidez global se llega por debajo de la temperatura corporal. Arquitectura molecular de ciertos fosfolpidos (98) y la proporcin de formador de nonbilayer lpidos (66) puede contribuir a este fenmeno. Sorprendentemente, la lquido-lquido ordenada a los trastornos de la fase de transicin de temperatura de balsas adecuada es 13-15 C por encima de (99) la transicin principal Vereb et al. PNAS? 08 de julio 2003? vol. 100? no. 14? 8055 temperatura de las membranas (100) a causa de la colesterol alto y esfingomielina contenido. En condiciones patolgicas tales como las enfermedades neurodegenerativas, este equilibrio se rompe. Las balsas de lpidos a menudo son vistos como estructuras de origen exclusivamente de las interacciones lpido-lpido. Uno no debe, sin embargo, pasar por alto el hecho de que las protenas y de las interacciones protena-lpido puede ser igualmente importante en la formacin, el mantenimiento, y la dinmica de estos dominios. De hecho, uno puede imaginar la unidad bsica de una balsa como una nica molcula de protena rodeado por lpidos que son especialmente adecuados como su medio ambiente debido a la polaridad y complementariedad estrica. Adems de las investigaciones clsicas (101), donde las predicciones muy precisas dado sobre la que abarcan la membrana?-hlices, datos recientes tambin sugieren que la composicin exacta y la naturaleza de?-estructuras helicoidales influir en gran medida cmo y en qu entorno fosfolpido este cadena de polipptido se pueden alojar, en todo caso (102). Esto por s solo hara

ser suficiente para tener en cuenta los patrones de protenas en las membranas celulares que estn predestinados genticamente, como se ha predicho dcadas atrs (32). La estructura primaria y secundaria de las protenas recin sintetizada, junto con las funciones de ordenacin en vesicular transporte, puede determinar fcilmente qu protenas se incrustar en un cierto entorno lipdico y que otras protenas ser sus vecinos inmediatos. Por ejemplo, se ha demostrado que el dominio transmembrana de CD40 (103) y hemaglutinina de la gripe (104) determina su reparticin en balsas de lpidos. En una nota similar, pero mirando el lado dinmico, los cambios en la estructura de las protenas [un ejemplo ms evidente siendo los que ocurre despus de su interaccin con otras protenas o los generado por los cambios en el potencial de membrana (105)], as como cambios en la constitucin o el espesor del lpido diferentes regiones, puede causar fcilmente reorganizacin de los componentes de balsas de lpidos de modo que la mejor estrico? estabilidad energtica se consigue de nuevo (106). La fuerza de la interaccin entre las protenas y su inmediata entorno lipdico est bien caracterizada cuando linfoide clulas marcadas con molculas del MHC se fusionan (28). MHC de clase II molculas de las dos clulas no se entremezclan, incluso despus de 80 min y mantuvieron su comportamiento monomrico. Se propuso que el pequeo tamao de la microdominio permiti una fuerte interaccin con las partes que abarcan la membrana de la molcula proteica que las fuerzas de cohesin impide la fusin de estos microdominios. Curiosamente, las molculas de clase II hizo entremezclan con molculas de clase I de la otra clula. MHC de clase I fue probablemente acomodados en grandes balsas, que podra incorporar la pequea balsas de molculas de clase II en su totalidad. Como para el montaje y mantenimiento de grupos de protenas, los internalizacin de reciclaje de maquinaria es un candidato importante '' Fuerza'': las protenas son reclutados a los sitios de formacin endosoma, que da lugar a asociaciones de protenas (107, 108). SOS bonos entre las protenas integrales de membrana estaban implicados en el caso de asesino humana activadoras de clulas-receptores expresados en el plasma membrana de las clulas asesinas naturales como complejos multimricos (109). Compartimentacin unidos covalentemente, cadenas acilo saturados en lquido ordenadas dominios de fase es probable que sea un importante mecanismo para dirigir protenas a las balsas, mientras que prenylated las protenas tienden a ser excluidos de all (110). Por lo tanto, incluso sin directas interacciones protena-protena, una acumulacin preferencial de ciertas protenas de un dominio de lpidos puede inducir homoor heteroassociation as como la formacin de tamao micromtrico agrupaciones de protenas (Fig. 3). Necesitamos un nuevo paradigma? Los ltimos datos que no encajan en el modelo SN pueden resumirse de la siguiente manera: (i) los patrones no aleatorios codistribucin de receptores en

la membrana de plasma en diferentes niveles jerrquicos, (ii) quasipermanent contactos moleculares a los elementos del citoesqueleto y molculas de transduccin de seales, (iii) mucho ms corto sin barreras camino de lo esperado para la difusin sin restricciones; (iv) la estructura de dominio de los componentes lpidos de las membranas tiene la capacidad segregar o colocalize protenas de membrana, (v) la participacin de protenas integrales de membrana en el mantenimiento de la membrana dominios sugiere que las protenas son tan importantes como estructural elementos como los lpidos, y (vi) la reorganizacin dinmica de protenas elementos en los dominios de membrana permite aerodinmico celular respuestas y est restringido por la protena-lpido y protena-protena interacciones. Por lo tanto, la aplicacin directa de la SN como un modelo marco de los acontecimientos es imposible sin la introduccin de un nuevo concepto. Este nuevo concepto tiene los siguientes atributos haciendo hincapi en la colocalizacin, comobility, y no aleatoria de un codistribucin nmero significativo de molculas de superficie celular: (i) la movilidad de los La figura. 2. Dinmica de la asociacin jerrquica de protenas de membrana. Obtencin de imgenes de grupos de nanmetros y micrmetros de tamao en protenas dar una visin general de la asociacin jerrquica de protenas de membrana. Dos muestras de clulas previamente etiquetados con diferentes anticuerpos fluorescentes (smbolos verdes y rojos) Se fusionaron. Las balsas de lpidos (crculos azules) se sabe que se acumula una especfica conjunto de protenas. Micrmetro de tamao agrupaciones de protenas intercambiaron componentes uno con el otro, pero este proceso respetados barreras microdominio lpidos protenas: se sabe que en microdominios de membrana diferentes nunca mezclados uno con el otro. Despus de un perodo de retraso de? 20 min entremezclas de nanometersized grupos de protenas tambin se llev a cabo. Sin embargo, este proceso no era tan generalizada como la mezcla de los racimos de tamao micromtrico, porque algunos protenas (por ejemplo, MHCclass II) no mostr una significativa capacidad para moverse de un de tamao nanomtrico grupo a otro. La figura. 3. Asociacin de las protenas puede ser inducida por la acumulacin selectiva de protenas en microdominios lipdicos distintos (a) o por la protena-protena especfica interacciones (b). (A) La membrana contiene microdominios lipdicos con distinta composiciones lipdicas. Estas reas de membrana albergar diferentes conjuntos de protenas. Molculas verdes lpidos se acumulan preferentemente protenas cuya transmembrana dominio se muestra en las protenas blanco y tambin que se adjuntan a la prospecto extracelular de la membrana (glicosilfosfatidilinositol anclada protenas). El mecanismo para la acumulacin selectiva de las protenas en un dado entorno lipdico puede ser explicado por una preferencia de protenas para la qumicas (hidrofobicidad) o fsico (espesor de la membrana, microviscosidad) propiedades del microdominio de lpidos. Tamao nanomtrico asociaciones de protenas se puede considerar una interaccin mediada por lpidos en este caso. (B) protenas especficas interacciones de protenas mediada por protenas de transmembrana o ligandos la unin a ellos tambin pueden ser responsables de la generacin de protenas asociaciones. 8056? www.pnas.org?cgi?doi?10.1073?pnas.1332550100 Vereb et al. la superficie celular (transmembrana, glycosylphosphatidylinositolanchored, o cualquier otro tipo de protenas) est restringida por lipiddomain

segregacin y la longitud de la va de difusin gratuita cubiertas sin chocar con los lmites, (ii) las protenas de membrana puede colocalize uno con el otro en la 1 - a escala de 10 nm en de manera homloga o heterloga, haciendo que el mosaicismo de el modelo SN prevalente; (iii) un segundo nivel jerrquico de agrupamiento de protenas que van a varios cientos de nanmetros puede ser observado para muchas protenas de membrana, (iv) protenas o protenas grupos con frecuencia se alojan en las balsas lipdicas organizados por interacciones dbiles o fuertes arriba, dentro, o debajo de la celda membrana; (v) algunos tipos de receptores (por ejemplo, factor de necrosis tumoral y receptores IL) estn en una formacin premontado supramolecular incluso en ausencia de sus ligandos fisiolgicos y pueden formar una formacin apretada sobre la unin del ligando; (vi) ligando-evoc agregaciones (receptor por ejemplo, factor de crecimiento epidrmico familia) son claramente diferentes de oligmeros preformados, an pueden servir como factores de amplificacin igualmente importantes de transmembrana sealizacin; (vii) los ms pequeos microdominios puede considerarse mdulos que se adaptan a las protenas de membrana ya sea solos o en oligmeros funcionales premontados de subunidades, y estos pueden ser las unidades del edificio de dominios de sealizacin ms grandes (Tales como los formados en la sinapsis inmunolgica), (viii) la ?-Helicoidal membrana-que abarca partes de las protenas transmembrana se hacen coincidir en longitud y forma por las cadenas laterales alifticas de lpidos que constituyen los dominios de la membrana que preferentemente cabida a ellos, (ix) la localizacin de protenas en diferentes regiones de lpidos de la membrana plasmtica puede determinarse genticamente debido a que la secuencia de aminocidos de la transmembrana dominio y dependientes de la secuencia modificaciones covalentes definir los posibles especficos, lpido-protena interacciones; (x) las protenas es probable que tengan un papel igualmente importante en la determinacin los componentes, estructura y dinmica de los dominios de la membrana; (Xi), mientras que las bicapas lipdicas artificiales tienden a formar espontneamente estructuras segregadas, la dinmica y la especificidad de los vivos membrana celular se proporcionan por especfico protena-protena y protena-lpido interacciones, as como la especfica y sensible naturaleza regulada de los procesos de transporte vesicular, y (xii) identificacin del origen y las caractersticas de microdominios y los conjuntos de receptores de la misma puede ayudar a entender la pasado inmediato y futuro de las clulas, su estado de activacin y reactividad. Tales seales pueden llevar pronstico de diagnstico, o incluso valores teraputicos si estos patrones de receptores no aleatorias pueden ser vinculado a las enfermedades que afectan a los diferentes estados y? alterado o material gentico de la clula. A la luz de los atributos anteriores, debemos entender que detalles biolgicos son mucho ms complicada que la resolucin de poder de un modelo simple, que describe uniforme generalizada, comportamiento de las molculas en la membrana. El modelo S-N es vlida, y la difusin libre puede ocurrir dentro de las fronteras de dominio, en caso

interacciones moleculares no interfieren. Esto significa que el nfasis debe ser desplazado de la fluidez para el mosaicismo de el modelo S-N. El mosaicismo puede restringir la difusin gratuita a travs de un de las siguientes maneras: (i) la estructura del dominio lipdico, (ii) citoesqueleto u otras interacciones citoslicas, o (iii) homo-y heteroassociations con otras protenas integrales. Estas interacciones tienen capacidad para aumentar la vida til de un encuentro intermolecular, lo que aumenta las posibilidades de interacciones bilaterales o multilaterales, que a veces se les llama simplemente diafona receptor. Por lo tanto, la movilidad global de los elementos moleculares de la membrana puede ser aceptado con las restricciones antes mencionadas, por lo que la una membrana altamente compartimentalizada, cuasi-bidimensional estructura, que es ms tipo mosaico de fluido. En este bidimensional avin, difusin, las fuerzas intermoleculares, la siempre cambiando el potencial de membrana, y puede influencias extracelulares generar dinmicamente y destruir estructuras supramoleculares. Nosotros Proponemos que este nuevo modelo de la membrana celular se denomina dinmicamente estructurados modelo mosaico.