MEIOSIS 1. INTRODUCCIN.

Los ciclos reproductivos sexuales de los organismos incluyen dos fases alternantes en las cuales el nmero de cromosomas en una fase es el doble del que corresponde a la otra fase. Tpicamente, un ciclo vital consta de una fase Diploide y una fase Haploide.

La primera fase se inicia con la fusin de los gametos haploides; la segunda fase comienza, con la meiosis de un meiocito diploide, pero cada uno de estos eventos puede estar separado por extensos perodos extendidos de divisin celular mittica y diferenciacin. En los animales, los productos de la meiosis son los gametos mismos, que se fusionan para restaurar la fase diplode predominante. En algunas formas inferiores, la meiosis del cigoto sigue inmediatamente a la fusin de los gametos, y la mayor parte del ciclo de vida est representada por la fase haploide. En las plantas vasculares ms evolucionadas las estructuras haploides (gametfitos) estn contenidas y protegidas dentro del esporofito diploide que es predominante en el ciclo de vida. Slo los meiocitos son capaces de realizar la meiosis, y estas clulas nicas estn presentes en las gnadas, rgano que producen y albergan los gametos o los sistemas generadores de stos.

En la meiosis, cada meiocito diploide se divide dos veces en sucesin para generar cuatro clulas de las cuales una o todas pueden ser funcionales. Las divisiones meiticas son iniciadas despus de la replicacin del ADN en la interfase, de modo que inicialmente cada cromosoma replicado consiste de dos cromtidas, y cada cromtida corresponde a una macromolcula de ADN. En la primera divisin meitica, los cromosomas homlogos se aparean y posteriormente se separan, de ah que las clulas resultantes contienen un solo cromosoma replicado (haploide). En la segunda divisin meitica, las cromtidas hermanas de cada cromosoma replicado se separan para integrar clulas hijas con una copia cromtida no replicada de cada cromosoma. La primera divisin produce ncleos cuyo nmero cromosmico es la mitad del meiocito, y en la segunda divisin se retiene este nmero haploide, pero se reduce el contenido de ADN al nivel haploide en cada ncleo hijo. Estas clulas hijas se pueden dividir mitticamente como esporas

o dar lugar a estructuras somticas o, sin divisin posterior, pueden diferenciarse como gametos, fusionarse con gametos complementarios y restablecer en el cigoto el nmero cromosmico diploide. Una ventaja clave de la reproduccin sexual es la oportunidad para crear regularmente nuevas combinaciones de genes progenitores en cada generacin.

La primera divisin meitica

no es igual a la mitosis y puede durar un largo periodo.

Es

precedida por una interfase en la que pueden participar pocos replicones activos. Entonces los cromosomas entran en la profase I, en la que se pueden reconocer varias subetapas:

a) Leptonema, en la cual la cromatina est dispersa como una maraa de hilos con cuentas. b) Cigonema, en la que los cromosomas homlogos realizan el apareamiento estrecho o sinapsis, estabilizada en un complejo sinaptonmico. c) Paquinema, en la cual los bivalentes condensados pero no con sus cromtidas individuales son distinguibles pudiendo ocurrir el entrecruzamiento y la recombinacin gentica. d) Diplonema, en la que los bivalentes se abren y separan excepto en los puntos donde se produjo entrecruzamiento (quiasmas). e) Diacinesis, se alcanza el estado ms condensado de los cromosomas, la membrana nuclear se rompe, los cromosomas homlogos unidos por quiasmas de sus cromatdas no hermanas se adhieren a las fibras del huso y los nuclolos se dispersan.

En la prometafase I los cromosomas se desplazan y alinean sobre el huso para empezar la metafase I. A diferencia de lo que ocurre en la mitosis, en la metafase meitica I los

extremos de los cromosomas estn en el ecuador y los centrmeros homlogos estn tan separados como es posible. En cada dada (par de cromatidas), las cromtidas hermanas

permanecen asociadas estrechamente al centrmero. Los homlogos replicados (dadas), se separan en la anafase I, y los ncleos nuevos tienen un grado variable de reorganizacin en la telofase I. La citocinesis puede ocurrir ahora, o bien puede seguir la meiosis II. La segunda divisin meitica es semejante a una divisin mittica. Las dadas en ambos ncleos se alinean en ambos husos en la metafase II, los dos centrmeros de cada dada se desacoplan en la anafase II, y las cromtidas hermanas de cada par son atradas a los polos opuestos de sus

husos respectivos. Durante la telofase II, los cromosomas se desdoblan, surge una membrana nuclear alrededor de cada uno de los cuatros productos, y se presenta la citocinesis. An si la nica redistribucin de genes en este proceso proviniera de combinaciones al azar de los cromosomas paternos en el ncleo de cualquier gameto, la reproduccin sexual dara pie a una variabilidad genotpica inmensamente aumentada: dos elecciones para cada uno de n cromosomas en un genoma permite 2n diferentes combinaciones cromosmicas. Adems, existe la posibilidad de la recombinacin incluso de los genes de un solo cromosoma (genes ligados). La recombinacin gentica es el resultado de intercambios fsicos de segmentos de cromosomas homlogos. El entrecruzamiento en eucariontes y procariontes implica la ruptura y reunin de molculas homlogas de ADN o cromosomas, ms que la conexin de plantillas durante la replicacin (eleccin de copia). En los meiocitos, el entrecruzamiento se produce en bivalentes en sinapsis durante el paquinema en la profese I e implica la introduccin por endonucleasas de rupturas de cadenas sencillas en cromtidas no hermanas, la reasociacin de cadenas y el sellado de los cortes con ADN ligasa, de ah que las dos dadas de un bivalente poseen una cromtida paterna y una cromtida entrecruzada. Los ADN no hermanos existen como heterodplex. Un proceso anlogo sucede en bacterias y virus; implica cortes de una sola cadena, intercambio de cadenas, emigracin de la ramificacin y resolucin por dos o ms cortes de cadenas sencillas. Los bivalentes se mantienen juntos en el paquinema por efecto de una estructura especializada, el complejo sinaptonmico. Comienza a ensamblarse despus de que el

apareamiento estrecho se ha iniciado en el cigonema y se completa cuando se inicia el paquinema. Sin su influencia estabilizadora continua no podra darse el intercambio efectivo de recombinacin. Los ndulos de recombinacin abarcan el complejo sinaptonmico en sitios que posteriormente se ha visto que contienen quiasmas. En ausencia de formacin del complejo sinaptonmico, la meiosis procede como es usual, pero la recombinacin no se lleva a cabo. La recombinacin mittica suele ser mucho menos frecuente que la recombinacin meitica y se presenta en las clulas somticas, las cuales no desarrollan complejos sinaptonmicos.

2.

OBJETIVOS.

Identificar morfolgicamente ncleos en diferentes estados meiticos. Aprender un modelo generalizado de meiosis que incluya fenmenos como: apareamientos de los cromosomas homlogos, recombinacin gentica y segregacin de los cromosomas homlogos. Interferir la importancia biolgica de la meiosis.

3.

CUESTIONARIO.

Cules son las caractersticas de la profase I de la meiosis?. Realice una comparacin con la profase mittica. Qu es el crossing over?. Qu importancia tienen la reaccin de Feulgen en el estudio de la meiosis?. Cul es la importancia biolgica de la meiosis?. Mediante un esquema compare una metafase I meiotica y una metafase mittica. Considere una dotacin cromosmica 2n=6. En que clulas se lleva a cabo la meiosis?. En forma resumida explique cules seran las consecuencias genticas de la meiosis.

4.

ACTIVIDADES

Meiosis en clulas vegetales. Observe al microscopio ptico placas de antera de lirio (Lilium sp.) teidas con Hematoxilina-Safranina. Identifique y esquematice clulas en profase I (leptonema,

paquinema y diplonema), metafase I y metafase II

Preparacin: Propsito: Tincin: Aumento: Descripcin:

Preparacin: Propsito: Tincin: Aumento: Descripcin:

Observacin de Meiocitos en testculos de roedor. Observe y esquematice una preparacin de testculo de rata, teido con la reaccin de Feulgen. En la preparacin se observan numerosos tbulos seminiferos en corte transversal y longitudinal y en los cuales se distinguen diferentes elementos celulares con distinta intensidad de coloracin fucsia debido a la reaccin de Feulgen. A qu se debe esa diferente intensidad de coloracin?. Qu importancia tiene?.

Preparacin: Propsito: Tincin: Aumento: Descripcin:

GAMETOGENESIS

1.

INTRODUCCIN.

Las clulas sexuales masculinas y femeninas, se originan a partir de las clulas germinales primordiales. A medida que ocurre el proceso de desarrollo embrionario, se inicia la formacin de estructuras bsicas que culminan con la formacin de la gnada. El esbozo de la gnada se forma con un componente somtico, lugar al que llegan las clulas germinales primordiales y que constituirn el componente germinal. En conjunto ambas partes estructuran una gnada

indiferenciada que, dependiendo de la dotacin cromosmica resultante de la fecundacin, xx xy, originar, ovarios o testculos respectivamente. La divisin de las clulas germinales primordiales que llegan a la futura gnada generan otros tipos celulares denominados gonocitos. Como resultado de la divisin de los gonocitos, se

forman las gonias, ovogonias o espermatogonias, las que deben atravesar por tres etapas: multiplicacin, crecimiento y maduracin, para originar finalmente los gametos. En mamferos y en vertebrados en general, el proceso que tienen lugar en las gnadas, por el cual se forman los gametos, vulos o espermios, se denomina gametognesis y en ambos sexos las etapas o perodos que se mencionan precedentemente se caracterizan como sigue:

1.1

Multiplicacin o proliferacin de gonias.

Por mitosis sucesivas, las gonias (clulas troncales), se dividen en determinadas etapas de la vida pre y post natal, cronolgicamente diferentes en el macho y en la hembra. En la hembra de la mayora de los mamferos, la multiplicacin de ovogonias sucede slo en el perodo pre natal, mientras que en los machos, la existencia de clulas troncales en los tbulos seminferos le permite tener una poblacin de clulas germinales que se multiplican

activamente en toda la poca reproductiva.

1.2

Crecimiento.

Las continuas mitosis producen un desequilibrio ncleo-citoplasma y la clulas tienden a restablecerlo mediante activo crecimiento, que dan como resultado la formacin de espermatocitos u ovocitos primarios. Tanto el momento de inicio, como la duracin y magnitud de este crecimiento presenta diferencias entre el macho y la hembra. Durante el perodo embrionario los ovocitos I entran en la profase de la primera divisin meitica, evolucionando hasta el estado de diploteno, con posterioridad, se detienen en un estado transicional denominado dictioteno, hasta alcanzar la pubertad. Paralelamente, clulas prefoliculares planas rodean a los ovocitos para constituir folculos primordiales. En este

estado se producen modificaciones en el volumen del ovocito, por un incremento importante de vitelo, o material nutritivo, que ser utilizado en el desarrollo embrionario posterior. En los machos, a medida que los espermatocitos I, se alejan de la membrana basal del epitelio germinal de los tbulos seminferos, se produce un aumento de volumen, tanto del ncleo como del citoplasma, lo cual se lleva a cabo en un perodo muy corto de tiempo, no obstante persiste durante toda la poca reproductiva.

1.3

Maduracin o etapa reduccional.

En esta etapa se producen dos divisiones sucesivas de los espermatocitos y ovocitos primarios. En la primera divisin meitica, se produce la reduccin de la dotacin cromosmica a la mitad, mantenindose en dotacin haploide hasta el final de la segunda divisin meitica. Esta etapa coincide con la pubertad y, por accin de gonadotrofinas hipofisiarias FSH y LH, se produce, en las hembras, el crecimiento del folculo y la maduracin del ovocito. A partir de estos dos eventos es que en 1968 Pedersen y Peters propusieron una terminologa, para la

clasificacin de ovocitos y folculos, que no solo ha sido aceptada sino que su uso se ha generalizado, aunque en algunos casos con algunas variantes. Esta clasificacin se basa en: a) tamao del ovocito en los folculos en distinto estado del desarrollo; b) tamao del folculo, definido por la forma y el nmero de clulas que forman la envoltura folicular, y c) morfologa del folculo mismo.

Por su parte, el ovocito contenido en el folculo sale de su estado de reposo (dictioteno), no obstante contina en la primera divisin meitica, obtenindose, despus de la reduccin cromosmica, dos clulas denominadas, ovocito II y el primer corpsculo polar,

respectivamente, las que presentan una dotacin haploide de cromosomas. La segunda divisin ecuacional se produce slo en caso de fecundacin del ovocito. En los machos, los espermatocitos estimulados por presencia de gonadotrofinas, inician la meiosis entrando en la profase de la primera divisin meitica y despus de pasar por los estadios de metafase I, Anafase I y Telefase I, dan origen a dos espermatocitos II, que poseen la mitad del nmero de cromosomas. El significado funcional de esta etapa es igual para machos y hembras, pero hay diferencias importantes en cuanto a la duracin, siendo en las hembras un perodo que puede durar semanas, meses o aos, como ocurre en la mujer. Tambin el nmero de clulas germinales es diferente, producindose por cada cito I que entra en divisin meitica, 4 clulas funcionales en los machos y slo una en las hembras. Al trmino de la espermatognesis existe un perodo de transformacin morfolgica post

meitica de los espermtidas (clulas redondeadas), en espermatozoides (clulas flageladas), caractersticas de la especie. Esta etapa se conoce como Espermiohistognesis o

Citodiferenciacin. En esencia la diferenciacin de las espermtidas se relaciona con la evolucin del material nuclear (forma del ncleo, organizacin de la cromatina), de los centrolos y del aparato flagelar, y con el desarrollo del acrosoma, verdadero producto de secrecin de la zona de Golgi, entre otros muchos procesos morfogenticos que son comprensibles slo al conocer en forma exacta la morfologa del espermio maduro para cada especie. El proceso de la espermiohistognesis en rata ha sido estudiado en detalle y, como se expone a continuacin, pueden reconocerse las siguientes fases: i. Fase de Golgi: En esta, los grnulos proacrosmicos ( grnulos PAS +), se hacen visibles en la zona de Golgi, coalesciendo hasta formar un grnulo mayor, rodeado de una vescula grande, que se adhiere a la membrana nuclear en lo que ser el polo anterior del ncleo del espermio. En el polo opuesto, uno de los dos centrolos da origen al flagelo. ii. Fase de Capuchn: La vescula acrosmica se aplasta y expande sobre la superficie del ncleo, visualizndose dos zonas, grnulo y casquete, ambas rodeadas por membranas de

origen Golgiano. Los centrolos migran, quedando el proximal situado en el polo posterior del ncleo y el distal es el corpsculo basal del flagelo. iii. Fase Acrosmica: Se caracteriza por transformaciones mltiples del acrosoma, ncleo y flagelo. El ncleo se hace excntrico, se alarga y deforma y la cromatina se condensa. El acrosoma se adapta a la forma del ncleo y comienza a adquirir la forma que es especfica para el espermatozoide de cada especie. El citoplasma y los organoides residuales se desplazan caudalmente a lo largo del flagelo. iv. Fase de Maduracin: En este perodo se completa la transformacin a espermatozoide. La cromatina se condensa y el acrosoma adquiere la forma propia de la especie. Se

diferencian los constituyentes y/o segmentos propios del flagelo. El exceso de citoplasma, que pende como apndice de la espermtida madura, se elimina en el lmen del tubo seminfero (cuerpo residual de Regaud), o es fagocitado por las clulas de Srtoli. Poco despus, las espermtidas se desprenden al lumen del mismo tbulo, durante la espermiacin.

2.

OBJETIVOS.

2.1 2.2

Conocer las bases biolgicas del proceso de gametognesis. Identificar microscpicamente algunas clulas de las lneas germinales masculinas y femeninas.

2.3 2.4

Identificar y clasificar foliculas ovricos, de acuerdo con el esquema adjunto. Identificar clulas somticas del testculo que participan en el proceso de

espermatognesis. 2.5 Comparar los procesos de ovognesis y espermatognesis en las etapas de Proliferacin, Crecimiento y Maduracin. 2.6 Completar las observaciones microscpicas con la informacin anexada en las pginas siguientes.

3.

CUESTIONARIO.

3.1

Qu es el estado de dictioteno? Qu ventajas representa este estado para la clula germinal femenina?.

3.2 3.3

Qu semejanza y diferencia existen entre un ovocito I y primer corpsculo polar?. Haga un cuadro comparativo entre el proceso de ovognesis y espermatognesis que considere los siguientes aspectos: divisin o proliferacin gonial; duracin del crecimiento, duracin de la meiosis, nmero de clulas funcionales.

3.4

Qu caracteriza la intercinesis entre la meiosis I y II.?

ACTIVIDADES.

4.1

Espermatognesis en Testculo de roedor. Observe un corte de testculo de roedor. Identifique los tres compartimentos

fundamentales que constituyen el testculo. Reconozca clulas germinales y somticas. Utilice el esquema anexo.

Preparacin: Propsito: Tincin: Aumento: Descripcin:

Preparacin: Propsito: Tincin: Aumento: Descripcin:

4.2

Ovognesis en ovario de mamfero Observe una placa de un corte transversal de ovario teido con hematoxilina-eosina. Identifique los ovocitos I y los diferentes tipos de folculos ovricos de acuerdo con la clasificacin anexa.

Preparacin: Propsito: Tincin: Aumento: Descripcin:

4.3

Diferenciacin del ovario y estudio temprano de la ovognesis en mamferos. Observe una placa de un corte de ovario de gatita de un da de edad teido con hematoxilina frrica. primordiales. Identifique Ovogonias, ovocitos I, (Dictiotnicos), y folculos

Preparacin: Propsito: Tincin: Aumento: Descripcin:

a) b) c) d) e) f) g) h) i)

Plexo de Haller Conducto epididimario Albugnea Tabique fibroso radiado Lbulo testicular Tbulo seminifero Conducto eferente Epiddimo Conducto deferente

Estructura anatmica y citomorfolgica del testculo humano.

Las diversas etapas de la espermatognesis de mamferos.

Diagrama de un ovario de mamfero, en el cual se han esquematizado los estados progresivos del crecimiento y desarrollo folicular

Clasificacin de los folculos ovricos durante su crecimiento y desarrollo

Estructura anatmica y citomorfolgica del ovario de mamferos.

Etapas de la Oognesis de mamferos.

5.

CONCLUSIONES.

BIBLIOGRAFIA

ALBERTS, B., BROWN, D., LEWIS, J., ROSE, M., ROBERTS, K.,WATSON, J. Molecular

Biology Of The Cell. Garland Publishing. 1998

AVERS, CHARLOTTE, Biologa Celular. Edit Iberoamericana 3a Ed. 1995

DE ROBERTIS, E., DE ROBERTIS, E. Biologa Celular y Molecular Edit. El Ateneo. 1998

FULLER, G. M., SHIELDS D. Molecular Basis Of Medical Cell Biology. Ed. Appleton-Lange.1998

GOODMAN, S. Medical Cell Biology Lippincott- Raven. 1998

JUNQUEIRA, L., CARNEIRO, J. Biologa Celular y Molecular Mcgraw-Hill. 1998

KARP, G. Biologa Celular y Molecular, McGraw-Hill Interamericana. 1998

LADISH, H., DARNELL, J. Molecular Cell Biology New York Scient American Books. 1995

SMITH, C., SMITH, E. Molculas Orgnicas. Addison-Wesley Iberomaericana. 1997

SPOTORNO, A., HOECKER, G. Elementos de Biologa Celular y Gentica. Depto. Biologa Celular y Gentica. Facultad de Medicina. Universidad de Chile.1993