REPLICAO DO DNA

WATSON E CRICK: replicao do DNA semiconservativa. Uma das fitas serve de molde para a fita filha. Trs modos: conservativa,

semiconservativa e dispersiva. MESELSON-STAHL (1958): testaram essas possibilidades. Experimento: cultivaram E. coli em meio contendo N15 ao invs de N14. N inserido nas bases

nitrogenadas que foram incorporadas nos filamentos recm sintetizados. Aps vrias multiplicaes celulares, as clulas foram removidas do meio com N15 e inseridas em meio contendo N14 e aps multiplicaes foram colhidas amostras. DNA foi extrado e centrifugado num grandiente de ClCs. 1 gerao (N15 N14): uma faixa intermediria entre os controles pesado e leve. 2 gerao (N14): duas faixas (uma intermediria e uma leve).

Modelo semiconservativo

A FORQUILHA DE REPLICAO
WATSON E CRICK: um zper replicao ou uma

acontece

como

forquilha de replicao. CAIRNS (1963): estudou a replicao em bactria usando timidina tritiada. Experimento: uma molcula fria foi mantida em meio contendo timidina tritiada. Molcula recm sintetizada: um filamento quente e um filamento frio (QF) (a). (QF) + meio quente: uma fita marcada e uma fita hbrida (b). No segundo ciclo de replicao que as forquilhas foram observadas e em todos os tamanhos.

MECANISMO DE REPLICAO DE DNA

Replicao: fundamental o pareamento complementar das bases para a fidelidade da replicao. E. coli: sistema de replicao do DNA mais bem estudado. Trs tipos de DNA polimerases: DNApol I, DNApol II e DNApol III. DNApol I: atividade de polimerase no sentido 5 3; atividade exonuclease no sentido 3 5 que remove as bases mal pareadas e atividade exonuclease no sentido 5 3 que degrada os primers de RNA.

DNApol II: pode reparar DNA danificado, no tem nenhum papel particular, sua funo no completamente conhecida. DNApol III: principal enzima envolvida na replicao do DNA de E. coli. No possui atividade exonuclease no sentido 5 3 (no retira primer), atividade exonuclease no sentido 5 3. ORIGENS DE REPLICAO E. coli: uma origem fixa e progride bidirecionalmente. Origem denominada ori C. Eucariotos: vrias origens. Ori C: seqncia de 13 pb quase idnticas dispostas em tandem e conjuntos de pontos de ligao da protena helicase que permite a deselicoidizao do DNA. Detalhes so similares a procariotos E. coli = 40 min Levedura = 1,4 horas Cultura de clulas animais = 24 horas Algumas clulas = 100 a 200 horas Eucariotos

Eucariotos: detalhes da replicao similares a procariotos. tem que coordenar a replicao de mais de um cromossomo. DNApol: 5 tipos (, , , e ). e ncleo, igual DNApol I. reparo de DNA e preenchimento de espaos e mitocndrias, replicao do DNA mitocondrial.