Quim. Nova, Vol. 29, No.

1, 46-51, 2006 DETERMINAO DAS FORMAS DE NITROGNIO E NITROGNIO TOTAL EM ROCHAS-RESERVATRIO DE PETRLEO POR DESTILAO COM ARRASTE DE VAPOR E MTODO DO INDOFENOL

Artigo

Llian Irene Dias da Silva, Manuel Castro Carneiro, Vanessa dos Santos Emdio, Srgio de Souza Henrique Junior e Maria Ins Couto Monteiro* Centro de Tecnologia Mineral, Coordenao de Anlises Minerais, Av. Ip, 900, Ilha da Cidade Universitria, 21941-590 Rio de Janeiro-RJ Recebido em 28/10/04; aceito em 20/5/05; publicado na web em 25/11/05

DETERMINATION OF NITROGEN FORMS AND TOTAL NITROGEN IN PETROLEUM RESERVOIR ROCKS BY STEAM DISTILLATION AND THE INDOPHENOL METHOD. Several extraction procedures are described for the determination of exchangeable and fixed ammonium, nitrate + nitrite, total exchangeable nitrogen and total nitrogen in certified reference soils and petroleum reservoir rock samples by steam distillation and indophenol method. After improvement of the original distillation system, an increase in worker safety, a reduction in time consumption, a decrease of 73% in blank value and an analysis without ammonia loss, which could possibly occur, were achieved. The precision (RSD 8%, n = 3) and the detection limit (9 mg kg-1 NH4+-N) are better than those of published procedures. Keywords: nitrogen; rock; soil.

INTRODUO Nitrognio geolgico, termo que se refere ao nitrognio incorporado na matriz da rocha durante a diagnese ou atravs de alterao secundria1, um dos componentes das rochas-reservatrio de petrleo que participam de reaes microbianas2. A determinao das formas desse nitrognio extremamente importante para subsidiar projetos na rea de ecologia de reservatrios petrolferos. Entretanto, na literatura no h mtodos para determinao das formas de nitrognio em tais matrizes. O nitrognio apresenta-se nas rochas, solos e sedimentos em diferentes formas, quais sejam: NH3, NH4+, NOx ou N ligado quimicamente a molculas orgnicas ou inorgnicas3. Os ons NH4+ nos solos e sedimentos podem estar fracamente adsorvidos na superfcie (NH4+trocvel) ou fixos nos espaos interlamelares dos minerais argilosos (NH4+fixo). As formas envolvidas nos equilbrios dependem da concentrao de Ntotal, atividade bacteriana, condies redox e qualidade da fase aquosa associada. A quantidade de amnio fixo depende da disponibilidade do on NH4+ durante a formao dos minerais argilosos e da capacidade de fixao desses minerais4. Nas rochas, a maior parte do nitrognio est provavelmente presente como on amnio5. Os mtodos mais utilizados para a determinao de Ntotal so mtodo Kjeldahl (mtodo TKN), que essencialmente um procedimento de oxidao mida6 e mtodo de Dumas, que basicamente uma tcnica de oxidao seca (combusto)7. De acordo com Wang et al.8, ambas as tcnicas so adequadas e comparveis quando a concentrao de nitrognio de aproximadamente 200 mg kg-1. Para concentraes menores, o mtodo mais adequado o TKN que, entretanto, em concentraes menores que 25 mg kg-1 N, apresenta altos coeficientes de variao. Bremner6 apresenta uma ampla discusso sobre o mtodo TKN aplicado aos solos, utilizado para determinao de nitrognio total (Ntotal) desde 18839. O mtodo apresenta como principais vantagens o uso de uma aparelhagem extremamente simples e pouco
*e-mail: mmonteiro@cetem.gov.br

onerosa, e satisfatrio para a anlise de Ntotal para a maioria dos compostos nitrogenados que ocorre nos solos e plantas (Norgnico e N-NH4+trocvel). No apresenta resultados satisfatrios quando esto presentes compostos com ligaes N-N e N-O. Uma frao das formas N-NO3- e N-NO2- pode ser determinada, sendo que o resultado muito varivel, dependendo da quantidade de gua e de matria orgnica presente no solo. Altas recuperaes podem ser obtidas com solos orgnicos6. As formas N-NH4+fixo7 e Norgnico6 retidas nas camadas interlamelares das amostras superficiais de minerais argilosos e de solos orgnicos so determinadas quantitativamente pelo mtodo TKN, porm para subsolos contendo altas concentraes de N-NH4+fixo este mtodo no fornece resultados exatos de NNH4+fixo nativo. O mtodo clssico TKN compreende duas etapas: digesto da amostra para converter Norgnico a on amnio (N-NH4+) e determinao do N-NH4+, obtido em meio cido, aps destilao da amnia com arraste de vapor. O on NH4+ ento, determinado por espectrofotometria, eletrodo on seletivo ou titulao com soluo padro cida. O mtodo titrimtrico comumente utilizado para anlise de solos6,10, e consiste na determinao do H2BO3-, atravs da titulao com soluo-padro de cido mineral6,9,11,12. Entre os mtodos espectrofotomtricos mais sensveis, o mtodo do indofenol utilizado principalmente para anlise de guas13. O mtodo do indofenol baseia-se na formao do composto azul intenso de indofenol (reao de Berthelot), resultante da reao do on amnio com um composto fenlico, na presena de um agente oxidante e de um catalisador12-19. um mtodo que apresenta valores altos e variveis de branco8,20, e na faixa de concentrao micromolar, a preciso raramente melhor que cerca de 10% 20. A determinao dos ons inorgnicos trocveis de nitrognio N-(NH4+trocvel, NO3-, NO2-) em solos geralmente consiste de duas etapas: extrao dos ons em fase aquosa e anlise do extrato21,22. Na literatura, so apresentados diferentes extratores para as formas N-(NH4+trocvel, NO3-, NO2-) presentes nos solos21,23, rochas11 e sedimentos4,22,24. Entretanto, o on mais favorvel para a troca com o on amnio o on potssio4 e, conseqentemente, a soluo extratora de KCl tem sido muito utilizada para extrao de todas as

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formas de N-(NH4+trocvel, NO3-, NO2-)4,21,23-25. O extrato tem sido analisado por tcnicas colorimtricas24,26-28, destilao com arraste de vapor11,21 ou eletrodo on seletivo4,23,29,30. Os mtodos mais utilizados para a determinao de N-NH4+fixo em folhelhos, rochas11,25,31, solos e argilas32 baseiam-se na extrao com HF, aps um pr-tratamento da amostra com KOH e aquecimento, e posterior determinao do on NH4+. Para evitar o ataque do vidro do tubo de destilao pelo extrato de HF, foram propostos vrios procedimentos: Dhariwal e Stevenson32, adicionaram previamente ao tubo de destilao a soluo de NaOH e, em seguida, o extrato; Stevenson25 aqueceu o extrato at prximo secura e Stevenson11 neutralizou o extrato com soluo de NaOH vrias horas antes da destilao. Este trabalho tem como objetivo a implementao de mtodos simples, precisos e exatos para determinao das formas de nitrognio e de nitrognio total em amostras de rocha-reservatrio de petrleo. PARTE EXPERIMENTAL Equipamentos Para determinao de nitrognio total, foi utilizado um bloco digestor TE-008/25 com capacidade para 8 provas micro, fornecido pela Tecnal (Piracicaba - SP, Brasil). Foi construdo um sistema em vidro Pyrex, para suco por vcuo do SO3 produzido durante a digesto das amostras. Para extrao das formas trocveis de nitrognio, foi utilizada uma mesa agitadora orbital Marconi MA 141 na velocidade mxima, e para separao das fases slida e lquida foi utilizada uma centrfuga CELM, modelo LS-3 plus, na velocidade de 3200 rpm, durante 30 min. Para destilao da amnia, foi utilizado um destilador modelo TE 036/1 tambm da Tecnal, semi-automtico acoplado a um banho termostatizado Nova tica, contendo gua Milli-Q entre 16 e 20 C. Para determinao de nitrognio total, foi utilizado o tubo original de destilao. Para determinao de N-NH4+fixo, foi utilizado um tubo de destilao modificado de polipropileno, para evitar ataque do vidro pelos extratos de HF. Para destilaes seqenciais de NNH4+ e N-(NO3- + N-NO2-), foi utilizado um tubo de destilao modificado de vidro com um volume maior (300 mL) que o original (100 mL) e com uma vlvula especial, que mantm o sistema de destilao sempre fechado durante a adio da liga de Devarda. As determinaes colorimtricas do N-NH4+ foram realizadas em espectrofotmetro Perkin-Elmer Lambda 12/1.0 nm (1.3) com detector UV-Vis, utilizando celas de 1 cm de caminho ptico. A temperatura dos poos do bloco digestor foi monitorada utilizando um termopar CONTEMP, Indstria, Comrcio e Servios LTDA, modelo IM-01, entrada K(IPTS). Os difratogramas de raios X das amostras, obtidos pelo mtodo do p, foram coletados em um equipamento Bruker-AXS D5005 equipado com espelho de Goeble para feixe paralelo de raios X, nas seguintes condies de operao: radiao Co K (35 kV/40 mA); velocidade do gonimetro de 0,02o 2 por passo com tempo de contagem de 1,0 s por passo e coletados de 5 a 80 2. A interpretao qualitativa foi efetuada por comparao com padres contidos no banco de dados PDF02 (ICDD, 1996) em software Bruker DiffracPlus. Reagentes, solues e amostras Foram utilizados cido sulfrico, hidrxido de sdio e cido

fluordrico fornecidos pela Vetec Qumica Fina Ltda; sulfato de cobre, sulfato de potssio, cloreto de amnio, fenol e nitroprussiato de sdio fornecidos pela Merck e hipoclorito de sdio da Isofar. Todas as solues foram preparadas utilizando reagentes de grau analtico (P.A.) e gua destilada e deionizada purificada em um sistema Milli-Q. Na etapa de digesto das amostras para determinao de nitrognio total, foi utilizada uma soluo cida digestora, constando de 10 g da mistura de sulfato de potssio + sulfato de cobre (na proporo de 3:1 m/m e triturados em um gral de gata), 100 mL de gua e 100 mL de H2SO4 concentrado. Para extrao das formas trocveis de nitrognio, foi utilizada uma soluo extratora de cloreto de potssio 0,4 mol L-1 em pH 2,5 (ajustado com HCl). Na etapa de destilao da amnia, foram utilizadas as solues de hidrxido de sdio 10 mol L-1 e de cido sulfrico 0,9 mmol L-1. Para determinao colorimtrica do on NH 4+ pelo mtodo do indofenol, foram utilizadas as seguintes solues: soluo-padro estoque de amnio 100 mg L-1 N-NH4+, a partir do NH4Cl anidro; soluo-padro intermediria de amnio 10 mg L-1 N-NH4+; solues-padro de amnio 0,05 a 0,5 mg L -1 N-NH 4+ em H 2SO 4 0,036 mM; soluo-padro estoque mista de 100 mg L-1 N-NO3- + 100 mg L-1 N-NO2-, a partir do nitrato de potssio e nitrito de sdio, respectivamente; soluo-padro intermediria mista de 10 mg L-1 N-NO3- + 10 mg L-1 N-NO2-; soluo de fenol (5% m/v) + nitroprussiato de sdio (0,025% m/v); soluo de hipoclorito de sdio (contendo aproximadamente 0,21% de cloro ativo) + hidrxido de sdio (2,5% m/v). Foram analisados trs materiais de referncia certificados de solo, NCS DC 73319, 73321, 73326, com valores certificados de nitrognio total de 1870 54, 640 40 e 370 43 g g-1, respectivamente, fornecidos pelo China National Analysis Center for Iron and Steel (Beijing - China), e duas amostras de rocha de reservatrio petrolfero 7 e 9. Amostras de referncia de rocha-reservatrio de petrleo no so disponveis no mercado. Pr-tratamento das amostras de rocha-reservatrio Uma massa de aproximadamente 300 g de cada amostra contendo leo, foi transferida para bquer de 1000 mL. Foram adicionados 500 mL de n-hexano, o bquer foi tampado com vidro de relgio, e a mistura foi agitada manual e ocasionalmente por 2 h. Em seguida, a mistura foi filtrada em papel de filtro de filtrao rpida. Foram adicionadas pores individuais de 300 mL de nhexano at a completa remoo do leo. Finalmente, a amostra foi seca ao ar por um perodo de 12 h, homogeneizada e pulverizada em gral de porcelana, para passar em peneira de 150 mesh. Determinao de nitrognio total A determinao de nitrognio total foi baseada no procedimento descrito na literatura8,13. O bloco digestor foi previamente aquecido a 150 C. Cerca de 0,2 g de amostra foram transferidos para o tubo digestor e adicionados 5 mL da soluo cida digestora, contendo K2SO4 para aumentar a temperatura de ebulio do H2SO4 e do catalisador CuSO4. O tubo foi agitado manualmente para melhorar o contato da amostra com a soluo e, ento colocado no poo, sendo a temperatura mantida a 150 C por 1 h. Em seguida, o boto do termostato foi levado a 400 C e, quando a temperatura foi atingida, foi mantida por 2 h. Aps o arrefecimento do tubo contendo o digerido temperatura ambiente (cerca de 30-40 min), foram adicionados cuidadosamente 20 mL de gua e o tubo foi conectado ao destilador Kjeldahl. Foi adicionado, cuidadosamente, um excesso (10 mL) de NaOH 10 mol L-1 atravs do funil de

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adio, para transformar NH4+ em NH3, fechando-se imediatamente o sistema de destilao. Em seguida, foi ligado o aquecimento da caldeira de vapor, j previamente aquecida at a ebulio, e o destilado foi recolhido. Determinao das formas inorgnicas trocveis de nitrognio Os procedimentos para extrao e determinao das formas inorgnicas trocveis de nitrognio foram adaptados da literatura21. Para implementao do mtodo para determinao do N-NH4+trocvel nas amostras, foram estudados diversos parmetros, quais sejam: tempo de extrao, (t = zero, t = 30 min e t = 1 h), utilizando a soluo de KCl 0,2 mol L-1, concentrao do extrator (0,2 e 0,4 mol L-1) e tipo de extrator (KCl 0,4 mol L-1 e NaCl 0,4 mol L-1), usando nos dois ltimos estudos, o tempo de extrao de 30 min. O procedimento foi semelhante ao descrito no mtodo otimizado. Mtodo otimizado para extrao das formas inorgnicas trocveis de nitrognio Cerca de 5 g de amostra foram transferidos para um frasco de polipropileno de 250 mL. Foram adicionados 140 mL de extrator KCl 0,4 mol L-1, e a mistura foi agitada mecanicamente por 30 min, mantendo-se o frasco fechado e em posio vertical. Ao trmino da agitao, a mistura foi mantida em repouso por 30 min e, em seguida, as fases foram separadas atravs de centrifugao por 30 min. Foram retiradas trs alquotas de 20 mL do sobrenadante com uma pipeta, para determinao do nitrognio trocvel total (Ntrocvel total), amnio trocvel (N-NH4+trocvel) e nitrato + nitrito N(NO3- + NO2-). Determinao de nitrognio trocvel total Para determinao de Ntrocvel total, foram adicionados 0,2 g de MgO e 0,2 g de liga de Devarda ao tubo de destilao original. A adio de MgO teve como finalidade garantir um meio bsico sem promover a liberao do nitrognio orgnico, enquanto que a liga de Devarda foi utilizada para reduo de nitrato e nitrito ao on amnio. Uma alquota de 20 mL do extrato foi submetida destilao. Determinao das formas inorgnicas trocveis de nitrognio Para determinao de N-NH4+trocvel e N-(NO3- + NO2-), foram realizadas duas destilaes seqenciais. Primeiramente, foram adicionados 0,2 g de MgO ao tubo de destilao modificado de vidro, e uma alquota de 20 mL do extrato foi submetida destilao para determinao de N-NH4+trocvel. Em seguida, a soluo restante no tubo de destilao modificado foi submetida destilao, aps a adio de 0,2 g de liga de Devarda, atravs da vlvula especial, para determinao de N-(NO3- + NO2-). Determinao de amnio fixo A determinao de N-NH4+fixo foi baseada no procedimento descrito por Dhariwal e Stevenson32. Cerca de 0,2 g de amostra foram transferidos para um tubo de centrfuga de polipropileno de 50 mL, seguido da adio de 25 mL de KOH 1 mol L-1 e aquecimento em banho-maria a 80 C por 8 h. O tratamento com KOH teve como finalidade evitar interferncias resultantes da desaminao de materiais orgnicos nitrogenados. Aps arrefecimento temperatura ambiente, a mistura foi centrifugada, o sobrenadante (contendo N-NH4+trocvel + Norg.) descartado, e o resduo lavado trs vezes com pores de 5 mL de KOH 1 mol L-1 e finalmente com 5 mL de gua. Ao resduo foram adicionados 10 mL de uma mistura contendo HF 7,5 mol L-1 e HCl 1,0 mol L-1. A mistura foi aquecida em banho de areia a 80 C por 12 a 16 h, at prximo secura.

Aps arrefecimento temperatura ambiente, a mistura foi transferida para o tubo de destilao modificado de polipropileno, com ajuda de HCl 0,1 mol L-1, e submetida destilao, aps a adio de um excesso (10 mL) de NaOH 10 mol L-1. Recolhimento do destilado para determinao das formas de nitrognio e de nitrognio total O destilado foi recolhido em um frasco erlenmeyer de 125 mL, contendo 20 mL de H2SO4 0,9 mmol L-1, at o volume prximo de 50 mL (o tempo total de destilao foi aproximadamente de 3 min) e reservado para determinao espectrofotomtrica do on NH4+. Determinao espectrofotomtrica do on amnio pelo mtodo do indofenol O mtodo do indofenol foi baseado no procedimento descrito na literatura13. O destilado foi transferido para um balo volumtrico de 50 mL e avolumado com gua. Uma alquota de 2,5 mL do destilado (para determinao de N total e N-NH4+ fixo) foi transferida para um balo volumtrico de 25 mL; no caso das formas trocveis, foi pipetada uma alquota de 20 mL do destilado. Foram adicionados 2 mL de nitroprussiato de sdio + fenol e, aps homogeneizao, foram adicionados 2 mL da soluo de hipoclorito de sdio + hidrxido de sdio. O volume foi completado com gua e a mistura novamente homogeneizada. A mistura foi mantida em repouso por 30 min para desenvolvimento da cor. Estudo da estabilidade do nitroprussiato-fenol e do indofenol A estabilidade do reagente nitroprussiato-fenol foi estudada atravs da preparao diria do composto indofenol em soluespadro de NH4Cl em H2SO4 0,036 mmol L-1, contendo 0,1, 0,3 e 0,5 mg L-1 N-NH4+, diluindo-se adequadamente a soluo-padro intermediria de 10 mg L-1 N-NH4+, recm preparada. O reagente nitroprussiato-fenol foi estocado em um balo volumtrico, recoberto com papel de alumnio, para evitar a incidncia da luz, e mantido em refrigerador (4 C). O reagente foi utilizado aps atingir a temperatura ambiente. O estudo da estabilidade do composto indofenol foi realizado com solues-padro de NH4Cl em H2SO4 0,036 mmol L-1, contendo 0,1, 0,3 e 0,5 mg L-1 de N-NH4+, diluindo-se adequadamente a soluo-padro estoque de 100 mg L-1 de N-NH4+. As solues coloridas foram mantidas em bales volumtricos de vidro transparente e temperatura de cerca de 4 C, em refrigerador. As medidas da absorvncia das solues foram realizadas aps as solues atingirem a temperatura ambiente. Construo das curvas de calibrao Foram construdas curvas analticas com concentraes finais de 0,05 a 0,5 mg L-1 de N, pipetando-se inicialmente alquotas de 0,25 a 2,5 mL da soluo-padro de 100 mg L-1 de N-NH4+ para determinao de Ntotal, N-NH4+trocvel e NH4+fixo, e da soluo-padro de 100 mg L-1 N-NO3- + 100 mg L-1 NO2- para determinao de N-(NO3- + NO2-). Em seguida, as solues foram submetidas aos procedimentos descritos para as amostras. Todas as medidas de absorvncia foram diminudas daquelas dos brancos. Determinao de nitrognio orgnico A concentrao de nitrognio orgnico foi calculada atravs da diferena entre Ntotal e de Ntrocvel total + N-NH4+fixo6,7.

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RESULTADOS E DISCUSSO Estudo do efeito da adio do catalisador de Se mistura digestora Foram realizados experimentos em nosso laboratrio33 para estudo do efeito da adio do catalisador de Se na etapa de digesto das amostras de rocha-reservatrio e de referncia certificadas, para determinao de nitrognio total. Foi observado que no houve necessidade da adio desse elemento txico. Estudo da estabilidade do nitroprussiato-fenol e do indofenol As estabilidades do reagente nitroprussiato-fenol e do composto indofenol foram avaliadas atravs da comparao das cinco primeiras medidas de absorvncia com as cinco ltimas, aplicando-se o teste t de Student a um nvel de confiana de 95%. Observou-se que o reagente nitroprussiato-fenol permaneceu estvel at pelo menos 29 dias, enquanto que as solues contendo indofenol (0,1 e 0,3 mg L-1) permaneceram estveis at 8 dias, com exceo da soluo mais concentrada (0,5 mg L-1), que se manteve estvel por apenas 48 h. Otimizao do mtodo de extrao das formas inorgnicas trocveis de nitrognio Efeito do tempo na extrao de amnio trocvel A Tabela 1 apresenta o efeito do tempo na extrao da forma N-NH4+trocvel, utilizando a soluo de KCl 0,2 mol L-1. Foram observadas baixas concentraes de N-NH4+trocvel quando a separao das fases slida/lquida foi realizada imediatamente aps a mistura do extrator com a amostra (t = zero). A maior concentrao de N-NH4+trocvel para a amostra certificada de solo foi obtida com o tempo de extrao de 30 min. Em se tratando da amostra de arenito (amostra 9), no se observou diferena significativa, para um nvel de confiana de 95%, das concentraes de N-NH4+trocvel nos tempos de 30 min e 1 h. Portanto, o tempo recomendado para extrao de nitrognio trocvel foi de 30 min. Tabela 1. Efeito do tempo de extrao na concentrao de NNH4+trocvel utilizando o extrator KCl 0,2 mol L-1 Concentrao de N-NH4+ Amostra Zero 73319 73321 73326 7 9 n.d. 1,5 0,1 (n=3) n.d. n.d. 1,3 0,5 (n=3) Tempo 30 min 43 15 (n=3) 13 1 (n=3) 15 1 (n=3) 24 4 (n=3) 11 2 (n=4) 1h n.d. 6,9 0,9 (n=3) n.d. n.d. n.d.
trocvel

Tabela 2. Efeito da concentrao do extrator KCl na concentrao de N-NH4+trocvel (tempo de extrao = 30 min) Amostra Concentrao de KCl 73319 73321 73326 7 9 n - no de determinaes Efeito do tipo de ction do extrator na determinao de amnio trocvel A Tabela 3 apresenta o efeito do tipo do ction na extrao da forma N-NH4+trocvel, utilizando o tempo de extrao de 30 min. Foram observadas maiores concentraes de N-NH4+ com os extratos em NaCl 0,4 mol L-1 na maioria das amostras (com exceo da amostra de referncia certificada de solo 73321), indicando a presena de N-NH4+fixo. De acordo com Stevenson25, o on sdio expande o espaamento d (001) dos minerais silicatos, permitindo aos ons NH4+fixo escaparem, enquanto que o on potssio contrai o espaamento d (001), prevenindo a sada das formas fixas. Tabela 3. Efeito do tipo de ction do extrator na concentrao de N-NH4+trocvel (tempo de extrao = 30 min) Concentrao de N-NH4+ Amostra Extrator NaCl 0,4 mol L-1 73319 73321 73326 7 9 70 5 (n=3) 12 2 (n=3) 24 3 (n=3) 38 2 (n=3) 23 3 (n=3) KCl 0,4 mol L-1 53 3 (n=3) 17 2 (n=3) 18 1 (n=3) 30 2 (n=4) 15 1 (n=3)
trocvel

Concentrao deN-NH4+ 0,2 mol L-1 43 15 (n=3) 13 1 (n=3) 15 1 (n=3) 24 4 (n=3) 11 2 (n=4)

trocvel

(g g-1)

0,4 mol L-1 53 3 (n=3) 17 2 (n=3) 18 1 (n=3) 30 2 (n=4) 15 1 (n=3)

(g g-1)

n - no de determinaes Caractersticas analticas do mtodo de destilao com arraste de vapor/indofenol As caractersticas analticas do mtodo de destilao por arraste com vapor/indofenol foram determinadas submetendo-se massas definidas de NH4Cl s etapas de digesto, destilao e desenvolvimento de cor (Tabela 4). Os altos valores de desvio-padro relativo (> 10%) e de branco (absorvncia mdia de 0,112 0,008), obtidos nos primeiros experimentos, nos levaram a propor a utilizao de um banho termostatizado contendo gua Milli-Q, com a finalidade de estabilizar a temperatura do condensador do destilador, garantindo a condensao total da amnia, e fornecer gua para caldeira, isenta de contaminao, para diminuio do branco. Sendo assim, os valores do branco e do limite de deteco (LOD) diminuram em cerca de 73% (0,030 0,006) e 65% (9 mg kg-1), respectivamente. Tambm, houve melhoria do desvio-padro relativo para valores 8%, n = 3. O valor do LOD obtido em nosso laboratrio (27 mg kg-1), sem a utilizao do banho termostatizado, foi concordante com o valor relatado na literatura (25 mg kg-1)8. O limite de deteco foi calculado pela equao LOD = 3 x Sb/b, onde Sb o desvio-padro de 10 medidas do branco e b a sensibilidade da curva analtica. Foi verificada obedincia lei de Beer (R2 = 0,9974 0,0009) na faixa de concentrao testada (0,05 a

(g g-1)

n.d. - no determinado; n - no de determinaes Efeito da concentrao de KCl na extrao de amnio trocvel A Tabela 2 apresenta o efeito da concentrao de KCl na extrao da forma N-NH4+trocvel, utilizando o tempo de extrao de 30 min. Observa-se que para a maioria das amostras no houve diferena significativa entre os resultados obtidos com as duas concentraes testadas, exceto para as amostras 73326 e 9, que apresentaram maiores concentraes de N-NH4+trocvel nos extratos em KCl 0,4 mol L-1, sendo esse, portanto, o extrator selecionado.

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0,5 mg L-1 N-NH4+). A absortividade molar de (2,3 0,2) x 104 L mol-1 cm-1 comparvel quela relatada na literatura (cerca de 2 x 104 L mol-1 cm-1)16. Tabela 4. Caractersticas analticas do mtodo de destilao com arraste de vapor/indofenol Absortividade molar (L mol-1 cm-1) (n = 4) Coeficiente de correlao (R2) (n = 3) Limite de deteco (mg kg-1 N-NH4+) sem banho termostatizado Limite de deteco (mg kg-1 N-NH4+) com banho termostatizado Faixa de concentrao da curva de calibrao (mg L-1 N-NH4+) Medida da absorvncia do branco (n = 10) sem banho termostatizado Medida da absorvncia do branco (n = 10) com banho termostatizado Desvio-padro relativo (%) (n = 3) n - n de determinaes
o

(2,3 0,2) x 104 0,9974 0,0009 27 9 0,05 - 0,5 0,112 + 0,008 0,030 + 0,006 8

e 56%, respectivamente). Esse resultado semelhante ao relatado na literatura5 para rochas. A segunda forma mais abundante Norgnico (concentraes relativas de 37 e 39%, respectivamente). A forma Ntrocvel total est presente em menor concentrao (concentraes relativas de 5 e 13%, respectivamente). A amostra certificada de solo 73326 tambm apresentou um comportamento semelhante (concentraes relativas de N-NH4+total, Norgnico e Ntrocvel total de 60, 44 e 6%, respectivamente). As demais amostras de referncia certificadas de solo (73319 e 73321) apresentaram Norgnico como forma predominante (concentraes relativas de 87 e 79%, respectivamente), seguida da forma N-NH4+total (concentraes relativas de 12 e 19%, respectivamente) e em menor concentrao, Ntrocvel total (concentraes relativas de 3 e 4 %, respectivamente). Em todas as amostras analisadas, a maior parte do Ntrocvel est presente na forma de N-NH4+trocvel (concentraes relativas de 65 a 100%). A forma determinada como N-(NO3- + NO2-) nas amostras de rocha-reservatrio, provavelmente, estaria presente nas condies originalmente anxicas, como nitrito2. Correlao entre as formas de nitrognio e a composio mineralgica da amostra As amostras 7, 9 e 73326 que contm N-NH4+fixo como forma predominante de nitrognio apresentaram, na anlise de difratometria de raios X34, picos indicativos da presena dos minerais muscovita/illita e feldspatos. A amostra 73326 ainda apresentou pico indicativo de clorita. As amostras 73319 e 73321, que apresentaram Norgnico como forma predominante de nitrognio, apresentaram picos indicativos da presena de feldspatos. De acordo com a literatura32,35, os minerais illita, muscovita, clorita e feldspatos so potencialmente fixadores de nitrognio, sendo que a illita um dos principais minerais responsveis pela fixao do on N-NH4+. Portanto, os resultados indicam que provavelmente a forma de nitrognio est relacionada composio mineralgica da amostra. A Figua 2 apresenta os difratogramas das amostras 7 e 73321.

Aplicao dos mtodos A Figura 1 apresenta os resultados das concentraes das formas de nitrognio, de nitrognio total e valores certificados. As recuperaes de nitrognio total, obtidas para as amostras certificadas, variaram de 99 a 108%, sendo consideradas satisfatrias. Para efeito de comparao, os somatrios das concentraes das formas trocveis [N-(NO3- + NO2-) + NH4+trocvel] foram avaliados com os resultados das concentraes de Ntrocvel total, considerado como 100%, obtendo-se recuperaes satisfatrias (94 a 120%) para todas as amostras analisadas. A maior parte do nitrognio est presente na forma de N-NH4+ (trocvel + fixo) nas amostras 7 e 9 (concentraes relativas de 63

Figura 1. Concentrao das formas de nitrognio e de nitrognio total em amostras de solo certificadas e amostras de rocha-reservatrio (n=3)

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Determinao das Formas de Nitrognio e Nitrognio Total

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relacionadas com as composies cristalinas das amostras de solo e de rocha-reservatrio. Os mtodos propostos tambm podem ser aplicados a solos. AGRADECIMENTOS Este trabalho foi desenvolvido com o financiamento e incentivo do Projeto CT-PETRO/Rocha, convnio N 2.1.01.0700.00 firmado em parceria com a PETROBRAS/CENPES, FINEP e REQARJ. Agradecemos ao Dr. C. H. de Oliveira pelas anlises de DRX. REFERNCIAS
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Figura 2. Difratogramas de raios X das amostras de rocha-reservatrio e de referncia certificada de solo (A) amostra 7; (B) amostra 73321

CONCLUSES A utilizao de um banho termostatizado alimentado com gua Milli-Q e acoplado ao sistema de destilao diminuiu os brancos em cerca de 73% e aumentou a sensibilidade em cerca de 65%. O mtodo proposto para determinao das formas de nitrognio e nitrognio total nas amostras de rocha-reservatrio de petrleo apresentou melhores valores de LOD (9 mg kg-1) e preciso (RSD 8%) que aqueles apresentados na literatura. O frasco de destilao modificado, proposto para determinao de N-NH4+trocvel e N(NO3- + NO2-), apresentou as seguintes vantagens: maior volume que o frasco original, permitindo a realizao das destilaes seqenciais; simplicidade no manuseio do sistema de destilao; maior segurana para o analista; menor tempo de anlise e eliminao de possvel perda de amnia na etapa de adio da liga de Devarda. O frasco de destilao de polipropileno modificado, proposto para determinao de N-NH4+fixo, apresentou a vantagem de simplificar a neutralizao dos extratos de HF e, portanto, reduo do tempo de anlise. As formas de nitrognio esto provavelmente