Travaux pratiques de chimie analytique Chimistes et Biochimistes 3eme anne

2004-2005

SPECTROPHOTOMETRIE D'EMISSION ATOMIQUE DOSAGE DE Na+ ET K+ PAR EMISSION DE FLAMME

INTRODUCTION Cette exprience permet de mettre en vidence les caractristiques distinctes de techniques d'mission de flamme. L'tude portera sur des chantillons d'eau de l'Arve pour montrer l'intrt de cette techniques dans l'analyse d'chantillons complexes. L'mission de flamme est une technique spcifique (ne permettant l'tude que d'un seul lment la fois) o les phnomnes d'mission interviennent au niveau des lectrons des couches de valence (nergies UV-visible), qui ncessite de transformer les composs molculaires en leurs atomes constitutifs avant de mesurer leur rayonnement. L'excitation des atomes (transfert d'un lectron d'une couche de valence vers une orbitale d'nergie suprieure) a lieu au sein de la flamme. APPAREILLAGE ET SOLUTIONS n Spectrophotomtre (Perkin-Elmer 430). n Installation de filtration, avec membranes de porosit 0,45 m en nitrate de cellulose (diamtre 90 mm). n Solutions stock de NaCl 0,01 M et de KCl 0,01 M. n Eau de l'Arve frachement prleve. DOSAGE DU SODIUM ET DU POTASSIUM DANS L'EAU DE L'ARVE Filtrez l'eau de l'Arve brute sur une membrane de porosit 0,45 m (diamtre 90 mm) et rcuprez le filtrat. Prparez, pour chaque lment mesurer, six solutions talon (10 ml) de concentration comprise entre 10-5 mol/L et 10-3 mol/L. Optimisez les rglages du spectrophotomtre (lmission, dbit d'actylne, hauteur du brleur, sensibilit du photomultiplicateur) avec de l'eau de l'Arve filtre (voir la notice d'utilisation sur l'instrument). Mesurez ensuite l'mission des talons et de l'chantillon en utilisant de l'eau bidistille comme blanc. Effectuez les rglages pour chacun des deux lments doser. Tracez les courbes de calibration externe pour le sodium et pour le potassium, et calculez la concentration de ces deux lments dans l'eau de l'Arve filtre. Comparez vos rsultats aux valeurs prsentes dans le tableau synoptique des Services Industriels de Genve. REFERENCES UTILES Tableau synoptique de l'analyse des eaux de l'Arve ; Services Industriels de Genve (1989).

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C. Bergerioux, W. Haerdi ; Coprecipitation of dissolved trace elements with combined organic precipitating reagent for use in X-ray fluorescence analysis ; Analusis 8 (1980), 169-173. J.A. Cooper ; Interpretation of energy-dispersive X-ray spectra ; Int. Lab. (may-june 1977), 51-66.

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SPECTROPHOTOMETRIES D'ABSORPTION ATOMIQUE: ETUDE DE Ca2+ PAR ABSORPTION ATOMIQUE AVEC FLAMME DOSAGE DE Cd2+ DANS L'EAU DE L'ARVE ET DU Pb2+ DANS LE SANG PAR ABSORPTION ATOMIQUE SANS FLAMME

INTRODUCTION Les deux techniques utilises dans cette exprience sont bases sur le mme principe : l'absorption, par les atomes doser, de radiations lectromagntiques d'nergie caractristique produites par une lampe cathode creuse, cathode constitue de l'lment que l'on dsire doser. Seule la manire de transformer les constituants des solutions, en leurs atomes respectifs (sous forme d'un nuage gazeux l'tat lectronique fondamental), diffre entre les deux techniques; cette diffrence dans le mode d'atomisation fait de l'absorption atomique sans flamme une technique beaucoup plus sensible. En spectrophotomtrie d'absorption atomique avec flamme, la solution est aspire en continu dans un nbuliseur, qui transforme la solution en un brouillard fin. Ce brouillard est alors aspir vers le brleur, o la flamme va rapidement vaporer l'eau et casser les molcules en leurs atomes individuels. L'instrument utilis dans cette exprience fonctionne sur le principe du double faisceau, ce qui permet de s'affranchir des fluctuations du faisceau de la lampe. Par cette technique, les problmes inhrents la mesure du signal (optimisation des paramtres instrumentaux, tude des interfrences) seront mis en vidence, puis le calcium prsent dans un srum sera dos par talonnages externe et interne. En spectrophotomtrie d'absorption atomique sans flamme, un faible volume de solution est inject dans un four de graphite chauff lectriquement. Par paliers de temprature, l'eau de l'chantillon est lentement vapore, puis la matire organique ventuellement prsente est lentement carbonise, avant que les sels minraux soient instantanment atomiss en leurs lments individuels. Le signal d'absorption est mesur durant cette courte tape d'atomisation. Le cadmium total prsent dans l'eau de l'Arve, seront dtermins par cette technique au moyen de schmas analytiques dj optimiss.

ABSORPTION ATOMIQUE AVEC FLAMME

APPAREILLAGE ET SOLUTIONS
n n n n n

Spectrophotomtre. Solution stock de HCl 1 mol/L. Solution stock (10 ml) de Ca2+ 1000 ppm contenant 1.10-2 mol/L d'HCl. H3PO4, La(NO3)3, NaCl, CH3CH3OH. Srum de contrle lyophilis.

Travaux pratiques de chimie analytique Chimistes et Biochimistes 3eme anne OPTIMISATION DES PARAMETRES INSTRUMENTAUX

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Rglez le spectrophotomtre (tension et alignement de la lampe cathode creuse, longueur d'onde du monochromateur, amplification du photomultiplicateur ; voir la notice d'utilisation sur l'instrument). Prparez 100 ml d'une solution contenant 5 ppm de Ca2+ et 10-2 mol/L d'HCl ainsi que 250 ml d'une solution d'HCl 10-2 mol/L. Allumez la flamme du spectrophotomtre, en rglant les dbits d'air 30 u (unit arbitraire) et d'actylne 20 u. Mesurez l'absorbance de la solution de Ca2+ 5 ppm pour des hauteurs de brleur allant de 1 tour 10 tours (depuis le minimum), en prenant soin de rgler A=0 chaque hauteur avec la solution d'HCl 10-2 mol/L Tracez la courbe A=f(hauteur du brleur), et dterminez la hauteur optimale. Discutez l'opportunit de cette valeur. A la hauteur optimale dtermine ci-dessus, mesurez l'absorbance de la solution de Ca2+ 5 ppm pour des dbits d'actylne allant de 10 u 22 u, en prenant soin de rgler A=0 chaque dbit de carburant avec la solution de HCl 10-2 mol/L. Tracez la courbe A=f(dbit d'actylne) et dterminez le dbit optimal. Discutez l'opportunit de ce dbit. Prparez 100 ml d'une solution contenant 5 ppm de Ca2+, 10-2 mol/L d'HCl et 50% (v/v) de CH3CH2OH, ainsi que 100 ml d'une solution d'HCl 10-2 mol/L contenant 50% (v/v) de CH3CH2OH. A la hauteur optimale dtermine prcdemment, mesurez l'absorbance de la solution de Ca2+ 5 ppm dans l'thanol pour des dbits d'actylne allant de 10 u 22 u, en prenant soin de rgler A=0 chaque dbit de carburant avec la solution d'HCl 10-2 mol/L et 50% de CH3CH2OH. Sur le graphique prcdent tracez la courbe A=f(dbit d'actylne), et dterminez le dbit optimal. Comparez ce dbit au dbit optimal dtermin prcdemment, et discutez le rle de l'thanol. ETUDE DES INTERFERENCES Prparez 5 solutions de 10 ml comme suit : 2+ -2 n 1) Ca 5 ppm + HCl 10 mol/L. 2+ 3-2 n 2) Ca 5 ppm + PO4 10 ppm + HCl 10 mol/L. 2+ 3-2 n 3) Ca 5 ppm + PO4 10 ppm + 50 mg de La(NO3)3, + HCl 10 mol/L. 2+ -2 n 4) Ca 5 ppm + 50 mg de La(NO3)3 + HCl 10 mol/L. 2+ -2 n 5) Ca 5 ppm + 10 mg de NaCl + HCl 10 mol/L. Mesurez l'absorbance de ces 5 solutions, en utilisant une solution de HCl 10-2 mol/L comme blanc. Comparez et discutez clairement les rsultats obtenus. DOSAGE DE Ca2+ DANS LE SERUM Reconstituez le srum de contrle en ajoutant 5 ml d'eau bidistille dans le flacon. Agitez trs doucement afin de solubiliser le srum. Prparez 5 tubes de 10 ml contenant chacun 100 l de srum. Ajoutez aux 4 derniers tubes des volumes croissants (50-500 l) d'une solution de Ca2+ 100 ppm (prpare par dilution de la solution 1000 ppm). Mesurez l'absorbance des 5 chantillons en utilisant l'eau bidistille comme blanc. Etablissez la droite d'talonnage interne, et dterminez la concentration de Ca2+ dans le

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srum. Comparez cette valeur avec celle obtenue lors de l'exprience "Electrodes slectives" et discutez la diffrence. Discutez le choix d'une calibration interne plutt que d'un talonnage externe.

ABSORPTION ATOMIQUE SANS FLAMME

APPAREILLAGE ET SOLUTIONS
n Spectrophotomtre (Perkin-Elmer 2380). n Installation de filtration, avec membranes de porosit 0,45 m en nitrate de

cellulose (diamtre 90 mm).

n Solutions stock de conc. HNO3 suprapur 2+ n Solutions stock de Cd 1000 ppm. n Eau de l'Arve frachement prleve

CONDITIONNEMENT DE LA VERRERIE En raison des faibles concentrations de Cd2+ (0-2,5 ppb) mesures au cours de cette exprience, il est ncessaire de conditionner toute la verrerie que vous allez utiliser. La veille ! de la prparation des chantillons et de la mesure par absorption atomique sans flamme, faites une liste de toute la verrerie dont vous aurez besoin (ballons jaugs, tubes de 10 ml, erlen Meyer vide ...). Remplissez-la d'une solution de HNO3 p. a. 0.1%, et laissez tremper toute une nuit. Le jour de l'exprience, rincez abondamment la verrerie avec de l'eau bidistille. CADMIUM TOTAL DANS L'EAU DE L'ARVE Aprs avoir lav le filtre avec 100 ml d'eau bidistille, filtrez l'eau de l'Arve. Acidifiez le filtrat avec de l'HNO3 suprapur pour obtenir une concentration finale d'acide dans les chantillons de 0.1%, volume des chantillons : 10 ml. CADMIUM PROVENANT DE LA CONTAMINATION A la fin de la premire journe de manipulation, prparez une solution (10 ml) d'HNO 3 suprapur 0.1%. Laissez cet chantillon ouvert sur votre table de travail. Notez bien le nombre d'heures entre la prparation de l'chantillon et son analyse. Discutez l'importance de techniques "propres" lors du dosage de "parties par milliard" de cadmium. D'o provient cette contamination? DOSAGE DE Cd2+

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Prparez 6 solutions (10 ml) contenant du Cd2+ entre 0.5 et 5 ppb et 0.1% dHNO3 suprapur (20l dHNO3 conc. pour 10 ml de volume total). Toutes les solutions doivent tre prpares par pesage (voir avec l'assistant(e)). Rglez le spectrophotomtre d'absorption atomique sans flamme dans les conditions optimales pour le dosage du cadmium (voir la notice d'utilisation de l'instrument). Mesurez les absorbances des talons de Cd2+ et des diffrents chantillons (chaque mesure doit tre rpte 2-3 fois afin de vrifier la reproductibilit du dosage). Tracer une courbe de calibration externe pour le dosage du Cd2+ en milieu HNO3 suprapur 0.1% et dterminez les concentrations de Cd2+ des chantillons. Comparez galement la concentration de Cd2+ dans l'eau de l'Arve filtre la valeur indique dans le tableau des Services Industriels de Genve. Programme de temprature pour le four graphite : Etapes Cadmium Ramp time Hold time Temp. (C) (sec) (sec) Schage Calcination Atomisation Nettoyage 15 15 0 1 20 20 3 1 120 300 1700 2500 X -5 50 Read Baseline Int flow (ml/min)

N.B. Ne pas oublier d'introduire "3 t" sur le spectrophotomtre! A NOTER 1 ppb = partie par milliard. Penser au got de 50 ml d'alcool dans 4000 camions citernes d'eau. (= 1 ppb d'alcool). Alors, il faut videmment faire attention la contamination!

DOSAGE DU PLOMB DANS UN ECHANTILLON DE SANG Prparation de l'chantillon : A FAIRE LA VEILLE DU JOUR DU DOSAGE ! Peser exactement dans un Erlenmeyer de 25 ml environ 2 ml de sang. Ajouter 5 ml d'acide nitrique suprapur Merck ou Instra Baker. Laisser environ 1 heure la temprature ambiante, puis chauffer, sur une plaque chauffante thermostatise, d'abord vers 80 C, puis vers 100 - 110 C (temprature de la plaque), jusqu' ce que la solution devienne jaune claire (plusieurs heures !). Laisser refroidir, puis transvaser dans un tube en plastique gradu de 10 ml. Complter au trait de 10 ml avec de l'eau distille. Dosage :

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Prparer 5 solutions standards de plomb dans le domaine de concentration de 5 - 50 g/l et contenant 0.1% dHNO3 suprapur dans des tubes en plastiques de 10 ml. Le programme de temprature pour le dosage est indiqus dans le tableau suivant : Etapes Plomb Ramp time Hold time Temp. (C) (sec) (sec) Schage Calcination Atomisation Nettoyage 15 15 0 1 30 30 2 1 150 500 1500 2500 X -5 50 Read Baseline Int flow (ml/min)

N.B. Ne pas oublier d'introduire "2 t" sur le spectrophotomtre! Valeurs normales : Plomb dans le sang : 70 230 g/L

REFERENCES UTILES Tableau Synoptique de l'Analyse des Eaux de l'Arve; Services Industriels de Genve, (1989). Ordonnance sur les Polluants du Sol, (9 juin 1986) 1-4. Ordonnance sur la Protection de l'Air, (16 dcembre 1985) 1-68.