OFICINA GENERAL DE INVESTIGACIN DE LA U.N.

ICA

UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS GONZAGA DE ICA

FACULTAD DE INGENIERIA DE MINAS Y METALURGIA
DIRECCIN DE INVESTIGACIONES DE LA ESCUELA DE INGENIERIA METALURGICA.

TRABAJO DE INVESTIGACION

ESTUDIO DE LA CONTAMINACION DE SUELOS POR EMISION DE POLVOS DE PROCESAMIENTO DE MINERALES EN POROMA NAZCA
REALIZADO POR: ING. DAVALOS CALDERON, Angel Gustavo ING. ALARCON ESPINOZA, Alcajer Miguel

NASCA PERU 2012

1

INTRODUCCION En esta zona de Poroma, como consecuencia del incremento de los precios de los metales en el mercado internacional han impulsado la explotacin y el beneficio de minerales, trayendo consigo la instalacin de muchas plantas de tratamiento, que da a da van acumulando minerales de diversas partes del la zona sur chico en su mayora minerales cuprferos que son concentrados por flotacin, aprovechando las propiedades hidrofbicas e hidrofilicas, para el cual son reducidos de tamao de partculas en tamaos de liberacin en las etapas de chancado y molienda, de las cuales al no existir formas de captar partculas son emitidos a la atmsfera, en diferentes circunstancias tales como al momento de descargar el mineral de los volquetes provenientes de mina a las canchas de almacenamiento, luego son cargados por palas mecnicas a volketes para su transporte a las tolvas de almacenamiento, producindose perdidas de polvos, en el circuito de chancado que son tres etapas, adems de ser transportados por fajas y zarandeados en las zarandas vibratorias y el material particulado son elevados y desplazados por los vientos, al momento de ser depositados el material chancado a las tolvas de finos, luego pasan a ser reducidos en pulpa a tamaos de 50 60 % menos malla 200 y flotados obtenindose dos productos uno el concentrado y las colas o material no valioso, del cual la acumulacin de residuos slidos en las relaveras, con el tiempo stos secos al calor del clima de Nazca y son elevados con el viento desplazndose largas extensiones. En la zona de Poroma Nasca existen plantas de tratamiento desde hace mas de 20 aos cuya labor a acumulado miles de toneladas de relaves que han sido depositados directamente en los suelos sin haber realizado un adecuado estudio para su deposicin y manejo. Es esta la razn que nos lleva a realizar este trabajo de investigacin para buscar alternativas de solucin y ms an determinar las prdidas por emisin de polvos y sus efectos en el suelo que es el ecosistema principal.

RESUMEN En el presente trabajo de investigacin se ha realizado un estudio de la zona de influencia, siendo Poroma la principal, debido fundamentalmente a existir muchas plantas de tratamiento de minerales, cuyas emisiones de material particulado y polvos finos son generados en la etapa de chancado y descargados en tolvas de almacenamiento que al no existir en ninguna de las plantas mangas de extraccin, estas son transportadas por las corrientes de aire o viento producidos como consecuencia de los cambios de temperatura en Nazca y su entorno, y su repercusin, adems el producto de los tratamientos al que se le denominan relaves que van a constituir los pasivos ambientales, dichos polvos y material particulado son desplazados y se depositan en las plantas vegetales de la zona agrcola aledaa al entorno y los suelos, por ser parte fundamental del ecosistema, por lo que se hace necesario conocer el % de los contaminantes con el fin de eliminar o atenuar ya que trae como consecuencias, enfermedades respiratorias y cardiovasculares, incluso riesgo de muertes en las personas. Los contenidos de metales pesados acumulados en la superficie del suelo con especial relevancia para el caso de Ag, Cu, Pb, Zn, As, Bi, Sb, Cd, B, Fe y SiO2

CAPITULO I

I.- TITULO DEL TRABAJO DE INVESTIGACION: ESTUDIO EMISION DE LA CONTAMINACION DE SUELOS POR DE POLVOS DE PROCESAMIENTO DE

MINERALES EN POROMA NAZCA 1.1.- OBJETIVOS:

1.1.1.- OBJETIVO GENERAL: 3

 Determinar el grado de contaminacin de los suelos en la zona de Poroma como consecuencia de las emisiones de polvos de las plantas de procesamiento de minerales. 1.1.2.- OBJETIVOS ESPECIFICOS: Realizar un minucioso estudio de las caractersticas de los minerales procesados en la zona de investigacin. Determinar el porcentaje de prdidas por emisin de polvos en los minerales procesados. Determinar los elementos nocivos en la composicin de los suelos por efecto de la emisin de polvos. 1.2.- IMPORTANCIA DEL ESTUDIO: 1.2.1.- PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA: Al ser los suelos parte importante del ecosistema y de la vida misma del ser humano, por lo que se debe proteger debido a su implicancia en la calidad de vida, la salud y bienestar de los seres vivos de la zona de influencia. En la zona de Poroma, hace aproximadamente 30 aos se asent una pequea planta de procesamiento de minerales por flotacin Concentradora San Jos, posteriormente el estado peruano mediante el Banco Minero decide establecer una planta de lixiviacin de cobre con la finalidad de incentivar la minera en la zona. Estas dos plantas trabajaron durante muchos aos sin generar mayores impactos en los suelos de la zona. En la actualidad como consecuencia del incremento de los precios de los metales fundamentalmente del cobre en el mercado internacional, se han establecido mas de 20 plantas de procesamiento de minerales por flotacin y un par de plantas dedicada a la lixiviacin de cobre oxidado y otra que

cuenta con los tres circuitos flotacin, lixiviacin acida y cianuracion. Dado el volumen de mineral que se procesa por da, pasando por operaciones unitarias de chancado, clasificacin y molienda, sin contar con captadores de polvos; consideramos que las emanaciones de polvos estn generando impacto en los suelos que en un futuro podran haber servido de tierras productivas para la agricultura. 1.2.1.1.- PROBLEMA GENERAL: Es posible determinar cul es el grado de

contaminacin de los suelos, en la zona de influencia de las plantas de procesamiento de minerales en Poroma Nasca? 1.2.1.1.- PROBLEMAS ESPECIFICOS: a. Cules son los principales metales componentes de los minerales que se procesan en las plantas situadas en Poroma Nazca? b. Cules son los porcentajes de prdida por emisin de polvos en los procesos de tratamientos? c. Es posible la presencia de elementos nocivos, tales como Pb, As, Bi, Sb, Ag, Zn, Hg, Cd, B, Cu, Fe, SiO 2 en los suelos de la zona de influencia? 1.2.2.- HIPOTESIS Y VARIABLES: 1.2.2.1.- HIPOTESIS GENERAL: Es posible que las emisiones de polvos al medio por parte de las plantas procesadoras de minerales estn produciendo contaminacin en los suelos de la zona de Poroma Nazca. 1.2.2.2.- HIPOTESIS ESPECFICAS: 5

a. Existen metales componentes de los minerales que se procesan en las plantas situadas en Poroma Nazca, que vienen alterando la composicin natural del suelo. b. Existen perdidas por emisin de polvos mayores a 2 % del peso total de mineral tratado por campaa. c. Es posible la presencia de elementos nocivos, tales como Pb, As, Bi, Sb, Ag, Zn, Hg, Cd, B, Cu, Fe, SiO 2 en los suelos de la zona de influencia, como consecuencia del procesamiento. 1.2.2.3.- VARIABLES DEL PROCESO: VARIABLE INDEPENDIENTE: Emisin de polvos en las plantas procesadoras. VARIABLE DEPENDIENTE: Contaminacin de los suelos de la zona de Poroma Nazca.

CAPITULO II
II.- MARCO TEORICO
2.1.- ANTECEDENTES: Segn estudios realizados en otros lugares del planeta, como el caso de Europa, respecto a la calidad del medio ambiente, por ende de los 6

suelos, que est intrnsecamente ligado a la calidad de la vida de los seres vivos, y las emanaciones de polvos son uno de los grandes problemas que repercute en la contaminacin. Dentro de los contaminantes, en general el azufre a demostrado tener gran capacidad irritativa y a desarrollado episodios de obstruccin bronquial en el ser humano, que son los que aumentan el riesgo de desarrollar conjuntivitis agudas y crnicas, ya que en las plantas de tratamiento de concentracin por flotacin lo que ms se trata, son minerales sulfurados con presencia de azufre en su composicin. Ante la evidencia de emisiones de material particulado, estos pueden deteriorar causando daos materiales en la construccin, generando deterioro qumico en pinturas en las fachadas, corrosin de aleaciones, incluso las partculas de nitratos y sulfatos; tambin el material particulado pueden daar directa o indirectamente en los vegetales ya que al caer sobre las hojas de las plantas, obstaculizando el proceso de fotosntesis y reduciendo la produccin de las cosechas, adems del dao esttico sobre el follaje, y al ingresar los metales pesados a los vegetales a travs de los estmas y como el caso de Nazca no existe precipitaciones fluviales que puedan limpiar, generando aumento de enfermedades, deterioro celular de las hojas, incrementando hasta los niveles peligrosos para las plantas, que incluso pueden generar la muerte. Tambin en el caso de los animales se han encontrado la perdida de la capacidad productiva, mayor tasa de morbilidad y mortalidad por la presencia de metales pesados, estudios recientes han determinado genotoxicidad en las clulas de algunos mamferos expuestos a atmosferas de material particulado, aunque la zona de influencia no es zona ganadera. Por otro lado, uno de los tipos de polvo ms peligrosos que se puede inhalar es el oxido de silicio; presente como ganga en casi la totalidad de minerales que se tratan; la exposicin a este oxido ocurre al descargar el mineral chancado o molido en seco; que es la operacin que se realiza en todas las plantas de tratamiento con el fin de reducir 7

de tamao para liberar las partculas de minerales valiosas, ocasionando polvo presumiblemente contaminando los suelos, vegetales, animales y humanos. Peligros: En los pulmones, el oxido de silicio puede producir silicosis: unas cicatrices en los alveolos que impiden que el oxigeno llegue a la sangre. La silicosis puede dificultar la respiracin y a veces, incluso puede ocasionar la muerte. Adems, aumenta el riesgo de padecer de tuberculosis y de cncer pulmonar. La silicosis por lo general se desarrolla en unos 20 aos, aunque a veces aparece a los 5 o 10 aos de haberse expuesto al agente nocivo, todo depende del grado de exposicin y el uso discontinuo del equipo de proteccin personal con la que el trabajador labora. Sin embargo, la silicosis puede aparecer tambin a las pocas semanas de haber trabajado en medio de nubes de polvo de minerales, si no se protegi. El peligro no desaparece por el hecho de que no se vea el polvo. La silicosis puede empeorar aunque hayan pasado aos desde que se alejo del polvo daino. En las plantas concentradoras referidas en la investigacin cuenta con tres etapas definidas de procesos, de las cuales las operaciones de chancado y molienda permiten liberar las menas de la ganga que son la mayor parte del mineral; para ello se lleva a tamaos de partculas del orden 74 (65-70%) -200M; en el chancado hay partculas de mineral fcil de reducirse de tamao que una vez llegado a este tamao se procede a la descarga del material en la siguiente etapa; es precisamente en esta operacin que ocurre la emisin de polvos finos al medio ambiente, por su bajo peso en radios bastante amplios; es de mencionar que estos polvos contienen partculas de minerales y en gran cantidad slice que es uno de los polvos mas txicos para el ser humano y todo ser vivo pues produce la enfermedad de la silicosis y en la naturaleza cambia la constitucin qumica de esta volvindola en muchos casos improductiva.

2.2.- MARCO TEORICO: METALES Segn podemos clasificar de manera sencilla a los elementos metlicos en: los metales pesados y los metales ligeros, de las cuales los primeros tienen sus densidades cinco veces mayores que el agua, o sea cuya densidad es igual o superior a 5 gr/cm 3 cuando est en estado elemental o cuyo nmero atmico sea superior a 20 y los segundos ms ligeros. Segn Fergusson, 1990, considera que los metales pesados diez de ellos Se, Cd, In, Sb, Te, Hg, Tl, Pb, Bi, al basar su clasificacin en tres condiciones: 1.- Ser relativamente abundante en la corteza, 2.- Txico para los seres humanos, 3.- Que su ciclo biogeoqumico haya tenido que ser significativamente modificado. Si observamos la lista antes expuesta, no se consideran los elementos metlicos pesados calcfilos de mayor masa atmica, los cuales muchos de ellos son los considerados de inters en geoqumica ambiental como son los: As, Co, Cr, Cu, Ni, V, Zn que se encuentran como elemento traza termino que en las distintas disciplinas cientficas definen de manera diferente, pero se denomina elemento traza a aquellos elementos cuya abundancia en la corteza terrestre es inferior a 1000 ug g-1 (1000 ppm, 0.1%) y que presenta una especial importancia ambiental, ya sea por su toxicidad, por ser nutrientes esenciales de las plantas, o por su capacidad de bioacumulacin, etc. Normalmente se reconocen como elementos esenciales al Fe, Mn, Zn, Cu, Co y Mo, como elementos benficos al Ni y Cr, y se considera que no tienen ninguna funcin biolgica elementos como el Cd, Hg, Pb y As (Bowen, 1979; Brady & Weil, 2002). Los metales pesados, ya sean esenciales o no, pueden llegar a ser txicos cuando su aporte es excesivo y afectar negativamente al crecimiento y reproduccin de los organismos, pudindoles causar incluso la muerte. El incremento de

metales pesados en los suelos inhibe adems la actividad enzimtica microbiana y reduce la diversidad de las poblaciones de flora y fauna, provocando infertilidad e incrementando los procesos erosivos. La transferencia de metales al hombre puede ocurrir a travs del suelo (inhalacin e ingestin de polvo), alimentos, agua, aire o piel (resultado de la absorcin drmica de contaminantes del suelo y el agua) (Chang et al., 1993; Ryan & Chaney, 1997). Los efectos toxicolgicos de los metales hacia los humanos, particularmente de Cd, Zn, Hg y Pb y de metaloides como el As, que representan algunos de los ms peligrosos, han sido bien documentados y existen referencias donde se puede obtener informacin al respecto (Adriano, 2001; Rubio et al., 2007). ARSENICO.- Es un elemento altamente txico, aunque es esencial en pequeas cantidades para muchos organismos, favorece el desarrollo de animales por lo que se usa en granjas avcolas. Pese a su alta toxicidad es necesario determinar las fuentes que puedan ocasionar contaminacin del medio ambiente; el Arsnico presenta gran afinidad por el azufre por el que se asocia formando minerales, tales como la Arsenopirita (FeSAs), rejalgar (As4S4), arsenolita (As2O3), que son constituyentes de los minerales que se procesan en las plantas al que hacemos referencia. Las propiedades txicas del arsnico (provoca enveneenamientos mortales) son bien conocidas desde la Antigedad. Sin embargo, se trata de un elemento necesario para el correcto funcionamiento de nuestro organismo, ya que su carencia provoca una inhibicin del crecimiento. En la industria se emplea en la elaboracin de insecticidas, fungicidas y medicamentos, as como en la elaboracin de pinturas, vidrio y aleaciones de metales. En electrnica, para la produccin de elementos semiconductores. COBRE.- Es un elemento esencial para el organismo, siendo solo toxico a concentraciones elevadas. En la corteza terrestre lo encontramos como minerales: Calcopirita (CuFeS 2), Calcosita (Cu2S), 10

Covelina (CuS), bornita (Cu5FeS4), malaquita (Cu2CO3(OH)2), cuprita (Cu2O), azurita (Cu3(CO3)2(OH)2), etc El Cobre tiene una tenacidad frgil. Se presenta en muchos yacimientos cuprferos y burbujas de rocas volcnicas. De su origen podramos decir que el cobre hidrotermal primario se relaciona con rocas gneas bsicas. CADMIO.- Es un metal pesado de alta toxicidad y presenta un alta peligrosidad por ser bioacumulable en las races, la toxicidad es muy perjudicial en la reduccin de la produccin de suelos a partir de concentraciones de 5 mg/Kg; las fuentes de contaminacin pueden ser por la presencia mnima como elemento relativamente raro en la corteza terrestre, representa el 1,5x10-5% en peso de la corteza terrestre, formando minerales como: Greenockita o blenda de cadmio(CdS), Otavita (CdCO3), monteponita (CdO), Es necesario hacer referencia de las propiedades txicas del cadmio en caso de que los trabajadores estn expuestos sin saberlo a vapores peligrosos. La soldadura de plata, por ejemplo, que contiene cadmio, debera manejarse con cuidado: se produce xido de cadmio; la inhalacin de pequeas cantidades produce fiebre continua y edema pulmonar en grandes concentraciones. Largas exposiciones, como las que se producen en los baos de recubrimiento de metales con cadmio presentan graves problemas de toxicidad. La exposicin a polvo de cadmio no debe exceder de 0,01 mg/m 3 (8 horas diarias). La concentracin lmite (mximo), durante un perodo de 15 minutos no deber exceder de 0,14 mg/m3. Para el humo de xido de cadmio (es tan peligroso como el fsforo), la exposicin no debe exceder (8 horas diarias) de 0,05 mg/m3, y la concentracin mxima no debe exceder de 0,05 mg/m3. Puede que estos valores sean demasiados altos y haya que rebajar la exposicin. COBALTO.- Es un elemento txico para el ser humano cuando las concentraciones por ingesta supera los 25 mg/da, fundamentalmente en polvo, porque se le atribuyen propiedades cancergenas; cuando 11

las concentraciones son inferiores a 5 mg/Kg se considera suelos deficientes que afecta el desarrollo de las plantas, sin embargo el exceso de cadmio puede generar deficiencia de elementos de Cu y Fe; las fuentes de minerales como: Linneita (Co3S4) 57.96% Co y 42.04%S, Cobaltita o Cobaltina (CoAsS) 3441%Co, 19.3%S y 45.2% As, Eritrina (3CoO.As2O3.8H2O) Hasta el 29% Co25% As, arseniato (Co3(AsO4)28H2O), Saflorita (CoAs2) 28.23% Co y 71.77% As Heterogenita (CoO. Co2O3. 6H2O) 57 - 64.1 % CROMO.- Es un elemento esencial, para el ser humano, al estar en relacin el cromo con la insulina, a menudo se emplea para controlar el azcar en sangre debido a que las personas con Diabetes del tipo II absorben mejor la glucosa en las clulas; sin embargo es de cuidado, porque algunos de los compuestos del Cr(VI) son altamente txicos debido a su carcter cancergeno, por lo que es necesario realizar controles peridicos si se trabaja en la fabricacin de cemento, explosivos, cristales, pulido de muebles, procesamiento de pieles y limpieza de metales o si reparas locomotoras Diesel, ya que a menudo se encuentran niveles muy exagerados de Cromo en estas personas. Las formas ms frecuentes en la naturaleza que son inofensivos se presentan formando compuestos como. Cromita (FeCr 2O4), Cracoita (PbCrO4). MERCURIO.- Es un elemento altamente toxico, en el suelo las formas qumicas como: Hg0, Hg+2, Hg2+2, del cual la actividad biolgica que pueden sufrir metilacin como el CH3Hg+ que son mucho ms toxico que el mercurio. Los minerales de mercurio que se suelen extraer contienen cerca de 1 % de Hg, aunque los estratos que se explotan contienen generalmente hasta 12 o 14% de mercurio.

El Mineral ms importante del mercurio es el cinabrio, cuyas mayores reservas mineras se encuentran en Espaa, En la poca del Virreinato del Per, la mina ms importante de mercurio fue la mina 12

Santa Brbara en Huancavelica, ciudad hermanada con Almadn. Durante siglos el cinabrio extrado en Almaden ha suministrado la mayor parte del mercurio consumido en el mundo. PLOMO.- Es un elemento txico para organismos del suelo, siendo ms tolerantes las plantas, tiene gran afinidad por el azufre El plomo se presenta formando minerales como: la galena (PbS), la cerusita, (PbCO3), anglesita (PbSO4), fosfatos la piromorfita, (Pb5Cl(PO4)3), vanadinita (Pb5Cl(VO4)3), mimelita (Pb5Cl(AsO4)3),

crocoita (PbCrO4) y vulferita (PbMoO4), la stolzita (PbWO4) son mucho menos abundantes. Tambin se encuentra plomo en varios minerales de uranio y de torio, ya que proviene directamente de la desintegracin radiactiva (decaimiento radiactivo). ZINC.- Es un elemento esencial para los organismos, su toxicidad es baja, PLATA.- Las mineralizaciones aurfero argentferas de vetas

consisten en filones hidrotermales generalmente acompaados de cuarzo, sulfuros de hierro, cobre, zinc, plomo, antimonio y azufre; La plata no es txica pero la mayora de sus sales son venenosas y pueden ser carcingenas. Los compuestos que contienen plata pueden ser absorbidos por el sistema circulatorio y depositarse en diversos tejidos provocando argiria, afeccin consistente en la coloracin griscea de piel y mucosas que no es daina.

Contacto con los ojos: Puede causar graves daos en la crnea si el lquido se pone en contacto con los ojos. Contacto con la piel : Puede causar irritacin de la piel. Contacto repetido y prolongado con le piel puede causar dermatitis alrgica. Peligros de la inhalacin: Exposicin a altas concentraciones del vapor puede causar mareos, dificultades para respirar, dolores de cabeza o irritacin respiratoria. Concentraciones extremadamente altas pueden causar somnolencia, espasmos, confusin, inconsciencia, coma o muerte. 13

El lquido o el vapor pueden irritar la piel, los ojos, la garganta o los pulmones. El mal uso intencionado consistente en la concentracin deliberada de este producto e inhalacin de su contenido puede ser daino o mortal. Peligros de la ingestin: Moderadamente txico. Puede causar molestias estomacales, nuseas, vmitos, diarrea y narcosis. Si el material se traga y es aspirado en los pulmones o si se produce el vmito, puede causar neumonitis qumica, que puede ser mortal. La sobre-exposicin crnica a un componente o varios

componentes de la plata tiene los siguientes efectos en los animales de laboratorio:

Daos renales Daos oculares Daos pulmonares Daos hepticos Anemia Daos cerebrales La sobre-exposicin crnica a un componente o varios

componentes de la plata se supone que tiene los siguientes efectos en los humanos, efectos que an deben ser corroborados mediante ulteriores investigaciones:

Anormalidades cardiacas Se ha informado de la relacin entre sobre-exposiciones repetidas y prolongadas a disolventes y daos cerebrales y del sistema nervioso permanentes. La respiracin repetida o el contacto con la piel de la metil-etilcetona puede aumentar la potencia de las neurotoxinas tales como el hexano si la exposicin tiene lugar al mismo tiempo.

14

SUELO

CONTAMINADO.-

Macas

(1993)

define

un

suelo

contaminado como aquel que ha superado su capacidad de amortiguacin para una o ms sustancias y, como consecuencia, pasa a actuar como un sistema protector a ser causa del problemas para el agua, la atmsfera y/o los organismos. Al mismo tiempo se modifican sus equilibrios biogeoqumicos y aparecen cantidades anmalas de determinados componentes que causan cambios en sus propiedades fsicas, qumicas y/o biolgicas. FITOCORRECCION CONTAMINADOS La fitocorreccin de reas o suelos contaminados, engloba la aplicacin de un grupo de tcnicas emergentes basadas en el uso de especies vegetales y sus microorganismos asociados para extraer, acumular, inmovilizar o transformar los contaminantes del suelo (Barcel & Poschenrieder, 2003; Ghosh & Singh, 2005; Pilon-Smits, 2005). Sin embargo la fitoestabilizacin consiste en la inmovilizacin y reduccin de la biodisponibilidad de los contaminantes mediante la revegetacin de los espacios contaminados con especies vegetales tolerantes, reduciendo el riesgo para el medio ambiente y la salud humana. El contaminante no es extrado del medio, pero el proceso implica una mejora mecnica de las propiedades fsicas del suelo y su proteccin frente a la erosin y el transporte de contaminantes (Vangronsveld & Cunningham, 1998). El proceso se completa con la adicin de enmiendas al suelo que provocan una adsorcin o precipitacin del contaminante, y en ocasiones se habla de fitoinmovilizacin y biomineralizacin para designar los procesos biogeoqumicos naturales de formacin de depsitos minerales (Kalin, 2002). 2.3.- MARCO CONCEPTUAL CONTAMINACIN DEL SUELO Un suelo puede degradarse al acumularse en l sustancias a unos niveles tales que repercuten negativamente en el comportamiento de 15 Y FITOESTABILIZACION DE SUELOS

los suelos. Las sustancias, a esos niveles de concentracin, se vuelven txicas para los organismos del suelo, una degradacin qumica que provoca la prdida parcial o total de la productividad del suelo. Hemos de distinguir entre contaminacin natural, frecuentemente endgena, y contaminacin antrpica, siempre exgena. Aparicin natural de una anomala de alta concentracin de una forma txica se produce en la evolucin acidificante de los suelos por la accin conjunta de la hidrlisis, lavado de cationes, presin de CO2 y cidos orgnicos que, progresivamente, conducen a una mayor concentracin de Al disuelto y a un predominio de especies nocivas como Al+3 o las formas Al-OH escasamente polimerizadas (Macias, 1993). VULNERABILIDAD. Representa el grado de sensibilidad (o debilidad) del suelo frente a la agresin de los agentes contaminantes. Este concepto est relacionado con la capacidad de amortiguacin. A mayor capacidad de amortiguacin, menor vulnerabilidad. El grado de vulnerabilidad de un suelo frente a la contaminacin depende de la intensidad de afectacin, del tiempo que debe transcurrir para que los efectos indeseables se manifiesten en las propiedades fsicas y qumicas de un suelo y de la velocidad con que se producen los cambios secuenciales en las propiedades de los suelos en respuesta al impacto de los contaminantes. Permite diferenciar los riesgos potenciales de diferentes actividades o predecir las consecuencias de la continuacin en las condiciones actuales. En muchas ocasiones, resulta difcil obtener los grados de sensibilidad de los suelos frente a un determinado tipo de impacto, debido a la fuerte heterogeneidad de los suelos, incluso para suelos muy prximos. PODER DE AMORTIGUACIN.

16

El conjunto de las propiedades fsicas, qumicas y biolgicas del suelo lo hacen un sistema clave, especialmente importante en los ciclos biogeoqumicos superficiales, en los que acta como un reactor complejo, capaz de realizar funciones de filtracin, descomposicin, neutralizacin, inactivacin, almacenamiento, etc. Por todo ello el suelo acta como barrera protectora de otros medios ms sensibles, como los hidrolgicos y los biolgicos. La mayora de los suelos presentan una elevada capacidad de depuracin. Esta capacidad de depuracin tiene un lmite diferente para cada situacin y para cada suelo. Cuando se alcanza ese lmite el suelo deja de ser eficaz e incluso puede funcionar como una "fuente" de sustancias peligrosas para los organismos que viven en l o de otros medios relacionados. Un suelo contaminado es aqul que ha superado su capacidad de amortiguacin para una o varias sustancias, y como consecuencia, pasa de actuar como un sistema protector a ser causa de problemas para el agua, la atmsfera, y los organismos. Al mismo tiempo se modifican sus equilibrios biogeoqumicos y aparecen cantidades anmalas de determinados componentes que originan modificaciones importantes en las propiedades fsicas, qumicas y biolgicas del suelo. El grado de contaminacin de un suelo no puede ser estimado exclusivamente a partir de los valores totales de los contaminantes frente a determinados valores gua, sino que se hace necesario considerar la biodisponibilidad, movilidad y persistencia (Calvo de Anta, 1997). BIODISPONIBILIDAD Se entiende la asimilacin del contaminante por los organismos, y en consecuencia la posibilidad de causar algn efecto, negativo o positivo. 17

MOVILIDAD Es la que regular la distribucin del contaminante y por tanto su posible transporte a otros sistemas. LA PERSISTENCIA Es la que regular el periodo de actividad de la sustancia y por tanto es otra medida de su peligrosidad. CARGA CRTICA. Representa la cantidad mxima de un determinado componente que puede ser aportado a un suelo sin que se produzcan efectos nocivos, en l cambios qumicos que originen efectos nocivos sobre la estructura y funcin del ecosistema (hetterlingh etal, 1991). Como el caso de los efectos de la lluvia cida en cuerpos mineralizados o suelos pobres en valores de cationes bsicos. DEGRADACIN DE SUELOS Para determinar el tipo de proceso de degradacin se emplea una determinada propiedad, expresada en unidades especficas y se analiza cmo va cambiando en el tiempo. Degradacin fsica de la fertilidad: aumento anual de la densidad aparente, en gr/cm3; o bien por disminucin anual de la permeabilidad, en cm/hr. DEGRADACIN QUMICA DE LA FERTILIDAD:

ACIDIFICACIN, disminucin anual de la saturacin en bases, en SALINIZACIN, aumento anual de la conductividad elctrica en

%;

pasta saturada a 25C en dS/m (dS=deciSiemens) o en mmhos/cm, siendo ambas medidas equivalentes (1 dS/m = 1 mmhos/cm);

SODIFICACIN, incremento anual del sodio cambiable, en %; 18

TOXICIDAD, aumento anual de los elementos txicos, en ppm.

DEGRADACIN BIOLGICA DE LA FERTILIDAD : disminucin anual del humus, en %. EROSIN HDRICA Y ELICA: prdida anual de suelo, en t/ha/ao. CONTAMINACIN: aumento anual de contaminantes, en %/ao o en ppm. 2.4.- MARCO LEGAL.Del Estndar de Calidad Ambiental El Estndar de Calidad Ambiental ECA, es la medida que establece el nivel de concentracin o del grado de elementos, sustancias o parmetros fsicos, qumicos y biolgicos, presentes en el aire, agua o suelo, en su condicin de cuerpo receptor, que no representa riesgo significativo para la salud de las personas ni al ambiente. Segn el parmetro en particular a que se refiera, la concentracin o grado podr ser expresada en mximos, mnimos o rangos. El ECA es obligatorio en el diseo de las normas legales y las polticas pblicas. Es un referente obligatorio en el diseo y aplicacin de todos los instrumentos de gestin ambiental. No se otorga la certificacin ambiental establecida mediante la Ley del Sistema Nacional de Evaluacin del Impacto Ambiental, cuando el respectivo EIA concluye que la implementacin de la actividad implicara el incumplimiento de algn Estndar de Calidad Ambiental. Los Programas de Adecuacin y Manejo Ambiental tambin deben considerar los Estndares de Calidad Ambiental al momento de establecer los compromisos respectivos. Ninguna autoridad judicial o administrativa podr hacer uso de los estndares nacionales de calidad ambiental, con el objeto de sancionar bajo forma alguna a personas jurdicas o naturales, a menos que se demuestre que existe causalidad entre su actuacin y 19

la transgresin de dichos estndares. Las sanciones deben basarse en el incumplimiento de obligaciones a cargo de las personas naturales o jurdicas, incluyendo las contenidas en los instrumentos de gestin ambiental. Del Lmite Mximo Permisible El Lmite Mximo Permisible LMP, es la medida de la concentracin o del grado de elementos, sustancias o parmetros fsicos, qumicos y biolgicos, que caracterizan a un efluente o una emisin, que al ser excedida causa o puede causar daos a la salud, al bienestar humano y al ambiente. Su determinacin corresponde al Ministerio del Ambiente. Su cumplimiento es exigible legalmente por el Ministerio del Ambiente y los organismos que conforman el Sistema Nacional de Gestin Ambiental. Los criterios para la determinacin de la supervisin y sancin sern establecidos por dicho Ministerio. El LMP guarda coherencia entre el nivel de proteccin ambiental establecido para una fuente determinada y los niveles generales que se establecen en los ECA. La implementacin de estos instrumentos debe asegurar que no se exceda la capacidad de carga de los ecosistemas, de acuerdo con las normas sobre la materia.

CAPITULO III
3.1.- DESARROLLO EXPERIMENTAL El suelo es un cuerpo natural que conforma el hbitat de bacterias, hongos, levaduras, virus y plantas superiores, entre otros, que sirve para la alimentacin de los animales y del hombre a travs de los ciclos trficos. El suelo y los microorganismos mantienen los sistemas ecolgicos, ya que le aportan componentes qumicos y minerales (como resultado de la biodegradacin); y complejos orgnicos como cidos hmicos y flvicos, enzimas, vitaminas, hormonas y antibiticos; adems, albergan una rica reserva gentica. 20

Por la gran importancia que representa el suelo para la vida del hombre y de todos los seres vivos, este recurso se debe conservar. Sin embargo, en la actualidad est seriamente amenazado por la prctica de sistemas de produccin inadecuados o mal aplicados, que incluso han acelerado los procesos de erosin y desertificacin de grandes zonas. De igual forma, la industrializacin y urbanizacin han generado una gran cantidad de desechos que son incorporados al suelo, lo cual ocasiona tanto la reduccin de su fertilidad como la modificacin de sus procesos naturales. Por lo anterior, es necesario estudiar las caractersticas particulares del suelo de la zona de Poroma Nasca que es el lugar donde se han concentrado las plantas de procesamiento de minerales, para determinar su grado de contaminacin. Para elegir la tecnologa adecuada es necesario considerar una serie de procesos y fenmenos fisicoqumicos y microbiolgicos que ocurren en la zona de influencia de estas plantas de procesamiento. Por esta razn, la evaluacin o determinacin de las propiedades fsicas, qumicas y microbiolgicas del suelo presumiblemente contaminado contribuir al seguimiento del proceso de remediacin; adems de ser til para tomar acciones pertinentes en el mejoramiento de dichos procesos.

21

22

23

3.2.- TOMA DE MUESTRAS Y ALMACENAMIENTO

Las muestras de suelo por analizar han sido recolectadas del sitio presumiblemente contaminado, mediante el diseo de muestreo de las guas y mtodos estndares de la ASTM (D5730-95a, 1995; E1219-98, 1998; E1391-94, 1994) Para tomar una muestra representativa de suelos de un sitio contaminado, se han considerado los siguientes elementos: Descripcin del sitio. Estrategia de muestreo. Plan de muestreo. Informe. Material y equipo Frascos de vidrio color mbar de 40, 450 y 990 ml. Jeringas de plstico de 20 ml acondicionadas: recortadas en la punta hasta la parte volumtrica de la jeringa, dejando libre el mbolo. Esptulas. Hielera. Tapas con una contratapa de tefln del mismo dimetro que la tapa del frasco. Tapn de hule estril del dimetro de la abertura de la jeringa. Parafilm. Hielo.

3.2.1. PROCEDIMIENTO

1) Una vez colectado el suelo, se homogeniza; posteriormente, las muestras se transfieren a dos tipos de frascos, uno de vidrio color mbar, limpio y con tapa cubierta de tefln (450 y 990 ml), para la determinacin de hidrocarburos 24 totales del petrleo (HTPs) e

hidrocarburos policclicos aromticos (HPAs), y otro de vidrio color mbar, estril (40 ml) para las muestras microbiolgicas. Las muestras de microbiologa anaerobia se toman con jeringas acondicionadas pues la punta es recortada, de tal manera que cuando se toman las muestras el mbolo se empuja hacia arriba y posteriormente es sellada con un tapn de hule para vial estril del mismo dimetro que la abertura de la jeringa, con el fin de conservar la anaerobiosis o, en su defecto, en frasco mbar estril, llenando el frasco al mximo para evitar la presencia de aire. Las muestras se conservan dentro de una hielera durante el transporte al laboratorio. Si la muestra no va a ser procesada de inmediato deber almacenarse a 4C hasta la realizacin del anlisis. El tiempo mximo de almacenamiento en funcin del anlisis por realizar se establece en la NOM-138-SEMARNAT/SS-2003. 2) Segn se indica en cada una de las tcnicas descritas en el manual, algunos anlisis se llevan a cabo con muestras hmedas, tal y como provienen del sitio, y otras requieren de una muestra seca, lo cual se puede realizar colocando la muestra de suelo a temperatura de 30C durante 48 horas, considerando el peso inicial y el peso final de la muestra para determinar por diferencia el contenido de humedad. Despus de 48 horas, a la muestra seca tambin se le debe realizar el anlisis de humedad. 3.3. ANLISIS FSICOS Y QUMICOS DE LAS MUESTRAS 3.3.1. DETERMINACION DE pH El pH es una propiedad qumica del suelo que tiene un efecto importante en el desarrollo de los seres vivos (incluidos microorganismos y plantas). La lectura de pH se refiere a la concentracin de iones hidrgeno activos (H+) que se da en la interfase lquida del suelo, por la interaccin de los componentes slidos y lquidos. La concentracin de iones hidrgeno es fundamental en los procesos fsicos, qumicos y biolgicos del suelo. 25

El grado de acidez o alcalinidad de un suelo es determinado por medio de un electrodo de vidrio en un contenido de humedad especfico o relacin de suelo-agua, y expresado en trminos de la escala de pH. El valor de pH es el logaritmo del recproco de la concentracin de iones hidrgeno, que se expresa por nmeros positivos del 0 al 14. Tres son las condiciones posibles del pH en el suelo: la acidez, la neutralidad y la alcalinidad. 3.3.2. MTODO PARA LA DETERMINACIN DEL PH SE UTILIZA EL MTODO POTENCIOMTRICO (WILLARDET AL., 1974; BATES, 1983). 3.3.2.1. FUNDAMENTO El mtodo potenciomtrico o electroqumico es el usado para medir pH de las muestras. Con este mtodo se mide el potencial de un electrodo sensitivo a los iones H+ (electrodo de vidrio) presentes en una solucin problema; se usa como referencia un electrodo cuya solucin problema no se modifica cuando cambia la concentracin de los iones por medir, que es generalmente un electrodo de calomelano o de Ag/AgCl. El electrodo, a travs de sus paredes, desarrolla un potencial elctrico. En la prctica se utilizan soluciones amortiguadoras, de pH conocido, para calibrar el instrumento y luego comparar, ya sea el potencial elctrico o el pH directamente de la solucin por evaluar. 3.3.2.2. INTERFERENCIAS Debido a que el pH del suelo es medido en una matriz acuosa como agua o una solucin de sales diluidas, es dependiente del grado de dilucin (relacin suelo-dilucin). Cuando se mide en agua es importante controlar el agua adicionada, ya que un aumento causar un incremento en pH; por ello es necesario mantener la relacin constante y tan baja como sea posible. Sin 26

embargo, la solucin sobrenadante puede no ser suficiente para sumergir el electrodo apropiadamente, sin causar mucho estrs cuando se inserta dentro del suelo. Los suelos con alta cantidad de materia orgnica tienden a formar una gruesa pasta seca, por lo que una relacin menor de muestra en agua puede ser aceptable (1:5 o 1:10) (Karma A, 1993). En suelos contaminados con hidrocarburos la interferencia va a depender de la concentracin y tipo de hidrocarburo, se puede producir desde una simple iridiscencia sin afectar la determinacin, hasta un impedimento de la determinacin por la alta concentracin y viscosidad del contaminante. Material y equipo Muestra suelo. Balanza analtica. Vasos de precipitado de 25 ml. Pipeta de 10 ml. Piceta con agua destilada. Potencimetro HI8424 Agua destilada. Solucin amortiguadora de pH 7 y 4. Agitador magntico de

3.3.2.3. PROCEDIMIENTO 1) Se Pesa 1 g de suelo y coloca en un vaso de precipitado de 25 ml. 2) Se agrega 10 ml de agua destilada. 3) Se agita y deja reposar 10 minutos. 4) Se ajusta el potencimetro con las soluciones amortiguadora. 27

5) Pasados 10 minutos, medir el pH con el potencimetro. 3.3.2.4. CRITERIOS DE EVALUACIN Tabla 4.1 Criterios de evaluacin de un suelo con respecto a su pH (NOM-021-REC- NAT-2000).

Resultado:

Medianamente alcalino: 8.3 para la muestra natural.

Moderadamente acido para los afectados por polvos. 3.4. HUMEDAD 3.4.1. INTRODUCCIN El agua es esencial para todos los seres vivos porque en forma molecular participa en varias reacciones metablicas celulares, acta como un solvente y portador de nutrimentos desde el suelo hasta las plantas y dentro de ellas. Adems, intemperiza las rocas y los minerales, ioniza los macro y micronutrientes que las plantas toman del suelo, y permite que la materia orgnica sea fcilmente biodegradable. El contenido de agua en el suelo puede ser benfico, pero en algunos casos tambin per- judicial. El exceso de agua en los suelos favorece la lixiviacin de sales y de algunos otros compuestos; por lo tanto, el agua es un regulador importante de las actividades fsicas, qumicas y biolgicas en el suelo (Topp, 1993). Aunque es recomendable determinar la humedad a la capacidad de campo de los suelos, es decir, la cantidad de humedad que un suelo retiene contra la gravedad, cuando se deja drenar libremente; en 28

algunas ocasiones, cuando se trata de suelos contaminados con hidrocarburos, por ejemplo, es difcil llevar a cabo esta medicin por la dificultad de rehidratar suelos secos con estas caractersticas. Por lo que la medicin de humedad se realiza slo en funcin del porcentaje de agua que retiene este tipo de suelos. 3.4.2. MTODO El mtodo utilizado para esta medicin es el gravimtrico, para determinar nicamente la cantidad de agua de los suelos. 3.4.3. FUNDAMENTO La humedad del suelo se calcula por la diferencia de peso entre una misma muestra hmeda, y despus de haberse secado en la estufa hasta obtener un peso constante. 3.4.3.1. Materiales y equipos Muestras de suelo. Balanza analtica. Esptula. Charolas o papel aluminio a peso constante. Estufa.

3.4.3.2. Procedimiento 1) Se p e so 1 ki l o de muestra sobre un papel d en tro d e un a charola de aluminio a peso constante. 2) Se coloca la muestra dentro de la estufa a 100 +/- 5C durante 2 horas. 3) Se saca la muestra de la estufa y se coloca desecador para que se enfre. 4) Se pesa la muestra con todo y papel. 5) Calcular los porcentajes de humedad en el suelo por la diferencia de pesos. dentro de un

29

% Humedad del suelo = (Peso inicial Peso final)/ Peso inicial * 100 Resultados: 0.4% en ambos casos. 3.5. CONDUCTIVIDAD ELCTRICA 3.5.1. Introduccin La conductividad elctrica es la capacidad de una solucin acuosa para transportar una corriente elctrica, que generalmente se expresa en mmhos/cm o en mSiemens/m; la NOM-021-RECNAT2000 establece dSiemens/m a 25C. Es una propiedad de las soluciones que se encuentra muy relacionada con el tipo y valencia de los iones presentes, sus concentraciones total y relativa, su movilidad, la temperatura del lquido y su contenido de slidos disueltos. La determinacin de la conductividad elctrica es por lo tanto una forma indirecta de medir la salinidad del agua o extractos de suelo. De acuerdo con los valores de conductividad elctrica, pH y porcentaje de sodio intercambiable, los suelos se pueden clasificar en las siguientes categoras: a) Suelos salinos. Se caracterizan porque su extracto de saturacin tiene un valor de conductividad elctrica igual o superior que 4 mmhos/cm a 25oC y la cantidad de sodio intercambiable es menor de 15%. Por lo general tienen una costra de sales blancas, que pueden ser cloruros, sulfatos y carbonatos de calcio, magnesio y sodio. b) Suelos sdicos. Presentan un color negro debido a su contenido elevado de sodio. Su porcentaje de sodio intercambiable es mayor que 15, el pH se encuentra entre 8.5 y 10.0, y la conductividad elctrica est por debajo de 4 mmhos/cm a 25C.

30

c) Suelos salino-sdicos. Poseen una conductividad elctrica de 4 mmhos/cm a 25C, una concentracin de sodio intercambiable de 15% y el pH es variable, comnmente superior a 8.5 (Muoz et al., 2000). La conductividad elctrica se puede complementar con la determinacin de Na+ o bases intercambiables (K+, Ca++, Mg++, Na+). Principalmente si los suelos fueron contaminados con aguas congnitas. 3.6. MTODO El mtodo de la conductividad elctrica se realiza por medio de un Conductimetro sobre una muestra de agua o extracto de suelo. 3.7. FUNDAMENTO Este mtodo se basa en la teora de la disociacin electroltica. Es aplicable a aguas o extractos de suelo. El equipo para medir la conductividad elctrica es un Conductimetro, que consiste en dos electrodos colocados a una distancia fija y con lquido entre ellos. Los electro- dos son de platino y en ocasiones pueden llevar un recubrimiento de platino negro o grafito; estos se encuentran sellados dentro de un tubo de plstico o vidrio (celda), de tal manera que este aparato puede ser sumergido en el lquido por medir. La resistencia elctrica a travs de los electrodos se registra a una temperatura estndar, generalmente 25C. 3.8. INTERFERENCIAS La temperatura afecta la conductividad y vara alrededor de 2% por cada grado Celsius. Para esta determinacin no se permite la preservacin qumica de las muestras. 3.8.1. Material y equipo Muestra de suelo seco y molida en un mortero. Balanza analtica. Frascos de plstico de boca ancha de 250 ml. Vaso de precipitado de 100 ml. 31

 Bureta. Esptula. Papel filtro. Embudo Buchner. Pipeta de 10 ml. Matraz Kitazato. Piceta con agua destilada. Bomba de vaco. Probeta. Conductmetro Russel RL060C Frascos. Agua destilada. Matraz aforado de 100 ml. 3.8.2. Soluciones Solucin estndar de cloruro de potasio (KCl) 0.1 N. Disolver 0.7455 g de KCl en agua destilada y aforar a 100 ml. Solucin estndar de cloruro de potasio (KCl) 0.01 N. Tomar una alcuota de 10 ml de la solucin estndar de KCl 0.1 N y aforar a 100 ml. 3.8.3. Procedimiento A. Preparacin de la pasta de saturacin. 1) Pesar 40 g de suelo seco y colocarlo en un recipiente de plstico, si el suelo es arenoso o arenomigajoso pesar 600 g. 2) Agregar agua destilada con la bureta y mezclar con la esptula hasta saturacin. 3) Golpear el recipiente con cuidado sobre la mesa de trabajo para asentar el suelo. 4) La pasta estar lista cuando se observe un brillo en su superficie (formacin de un espejo), esto no sucede en el caso de suelos con alto con- tenido de arcilla. 5) Anotar el volumen de agua gastado (ml). 6) Dejar reposar la pasta durante una hora y comprobar a criterio su 32

saturacin. 7) Tapar el recipiente y dejarlo reposar por tres horas, excepto suelos arcillosos que deben dejarse reposar 24 horas. B. Obtencin del extracto del suelo. 1) Colocar papel filtro sobre el embudo, humedecerlo con agua destilada, dejando drenar el exceso. Conectar el sistema de filtracin al vaco. 2) Mezclar nuevamente la pasta y colocarla en el embudo y aplicar vaco. 3) Obtener un extracto de aproximadamente 50 ml. C. Determinacin de la conductividad elctrica. 1) Calibrar el conductmetro. Antes de usar el medidor de conductividad debe calibrarse con una solucin estndar. Para esto se requiere de dos soluciones de KCl, 0.1 N y 0.01 N, con cada una se ajusta el equipo a la conductividad indicada en la tabla 4.2. Tabla 4.2 Ajuste de conductividad en funcin de la solucin de KCl.

Cuando no se sabe la conductividad de la muestra se recomienda calibrar primero con una de las dos soluciones y tomar la lectura de la muestra, despus volver a calibrar con la segunda solucin y tomar nuevamente la lectura. Para calibrar finalmente el equipo, se debe elegir la solucin con la que se aproxime ms la conductividad de la muestra. 2) Leer la conductividad elctrica y la temperatura del extracto. Si la lectura 33

se toma en mhos, transformar los resultados a mmhos o dS dividiendo entre 1000. 3) Si es necesario, hacer correccin consultando la tabla de factores de correccin para diferentes temperaturas (tabla 4.3), se multiplica el resultado de conductividad elctrica por el valor correspondiente.

3.8.4. Clculos La unidad estndar de conductividad elctrica es el siemens/metro (S/m = Ohm/m), pero para evitar la expresin de resultados en pequeas fracciones decimales se usa generalmente una unidad ms pequea: el miliSiemens/metro (mS/m). Aunque la conductividad generalmente es reportada en mhos/cm. 1 mS/m = 10 mhos/cm. Para convertir la conductividad elctrica en unidades de salinidad (tabla 4.4), se toma el valor de referencia de una solucin de NaCl 0.05 N con una conductancia de 604 mhos/cm a 25C como el factor, que al multiplicarlo por la conductividad expresa la salinidad. Salinidad = mhos / cm X 604. En la tabla 4.4 se muestran los criterios para evaluar la salinidad de un suelo, con base en su conductividad. 34

Resultados: Moderadamente salino 7.8 para la muestra Poco salino 3.8 para la muestra contaminada. 3.9. CARBONO ORGNICO TOTAL El carbono orgnico es uno de los principales componentes de los seres vivos: aproximadamente 50% del peso seco de la materia orgnica (m.o.) es carbono. En el medio ambiente su ciclo est estrechamente ligado al flujo de energa, debido a que las principales reservas de energa de los organismos son compuestos de carbono reducidos que han derivado de la fijacin del CO2 atmosfrico, ya sea por medio de la fotosntesis o, con menor frecuencia de la quimiosntesis (Tiessen y Moir, 1993). Las plantas y los animales que mueren son desintegrados por los microorganismos, en particular bacterias y hongos, los cuales regresan el carbono al medio en forma de bixido de carbono (Baker y Herson, 1994). La m.o. del suelo es la fraccin orgnica que incluye residuos vegetales y animales en diferentes estados de descomposicin; tejidos y clulas de organismos que viven en el suelo; y sustancias producidas y vertidas por esos organismos. Esta definicin es muy amplia pues incluye tanto a los materiales poco alterados como a aquellos que s han experimentado cambios de descomposicin, transformacin y resntesis dentro del suelo. Adems se pueden incluir compuestos orgnicos txicos, provenientes de 35

las actividades industriales del hombre, como la contaminacin de suelos por hidrocarburos del petrleo, que tambin constituye parte de la materia orgnica del suelo (Etchevers, 1988). 3.10. Mtodo Para la cuantificacin de carbono orgnico total se utiliza un analizador de carbono con una cmara de combustin y un detector de infrarrojo. 3.11. Fundamento La muestra de suelo es colocada dentro de la cmara de combustin a una temperatura de 900C, proceso que provoca la liberacin de CO 2 proveniente de todo el carbono presente en el suelo. El CO2 es cuantificado con un detector de infrarrojo. El lmite de deteccin de la tcnica va de 0 a 25 mg de C. Considerando que no todo el suelo es m.o., se recomienda utilizar muestras de 0.1 a 0.3 g, pero mientras ms m.o. se tenga, se debe tomar menor cantidad de suelo para realizar esta tcnica. 3.11.1. Material y equipo Muestra de suelo seco y molido en mortero. Cpsulas de porcelana especiales para el equipo de carbono total. Esptulas. Analizador de carbono con detector de infrarrojo y accesorio para muestras slidas. Balanza analtica. Pinzas. 3.11.2. Reactivos Biftalato de potasio (C6H4(COOK)). 3.12. Procedimiento Esta tcnica puede realizarse con muestras de suelo hmedo, pero se 36

recomienda utilizar suelo seco y molido para homogeneizar la muestra, ya que se utilizan cantidades muy pequeas (menores que 0.3 g). 1) Pesar suelo seco (0.1 a 0.3g) dentro de una cpsula de porcelana. 2) Encender el analizador de carbono y esperar a que la temperatura del horno llegue a 900oC. Una vez que el equipo est estabilizado a esta Temperatura, se procede a analizar las muestras. 3) El mtodo utilizado para hacer los anlisis en este equipo debe indicar que se est utilizando el accesorio para muestras slidas; y en caso de contar con un software para la integracin de los datos se debe incluir la curva patrn, para que el resultado de la medicin se proporcione con base en sta. 4) Colocar la muestra dentro de la cmara de slidos y proceder a la medicin. 5) El tiempo de corrida de cada muestra es aproximadamente de cinco minutos. Al final el software presenta la cantidad de carbono (mg kg-1 Suelo o en porcentaje) contenido en el suelo. 6) El resultado debe ser ajustado por la humedad de la muestra, para indicarlo en mg de C/kg suelo completamente seco. Curva patrn. Se realiza con biftalato de potasio (C6H4(COOK)) en un rango de concentraciones de 0 a 25 mg (0 a 0.025 g) de carbono contenido en este compuesto. El biftalato debe secarse en la estufa durante 12 horas a 60C antes de ser analizado. Pesar la cantidad necesaria del reactivo para obtener la concentracin deseada (de 0 a 25 mg de carbono en la muestra), como se indica en la tabla 4.5, y hacer la medicin de carbono orgnico total en el analizador, como se indic para las muestras.

37

Tabla 4.5 Concentracin de biftalato para la curva patrn de carbn orgnico.

Nota: en caso de que el equipo slo proporcione el rea del pico obtenido, proceder al clculo del carbono orgnico total como se indica en el apartado correspondiente. 3.13. Clculos Calcular la cantidad de carbono orgnico total (COT) contenido en el suelo con la ecuacin lineal de la curva estndar. CO (mg) = (A b) / m). Donde: CO A b = carbono orgnico (mg) contenido en el suelo. = rea del pico obtenido. = ordenada al origen. m = pendiente.

Calcular la concentracin final de COT de la muestra de suelo mediante la siguiente ecuacin: COT (mg / kg de suelo seco) = CO (mg) * 1 000 / P * FH COT = carbono orgnico total (mg / kg de suelo seco). 38

CO P

= carbono orgnico (mg). = cantidad de suelo (0.1 g a 0.5 g).

1 000 = factor de correccin de concentracin (1 000 g = 1 kg). FH = factor de correccin de humedad = (1-(%humedad/100)). A partir del contenido total d carbono orgnico se puede estimar el contenido de materia orgnica (tabla 4.6); suponiendo de forma convencional que la materia orgnica contiene 58% de carbono. As, el contenido de carbono orgnico se multiplica por el factor 1.724 para obtener el contenido de materia orgnica (Len y Aguilar, 1987). Tabla 4.6 Interpretacin del contenido de materia orgnica en suelo.

Resultados: Dado que el lugar de influencia esta caracterizado como suelo no volcnico, el % de materia orgnica en ella es bajo 0.62 en la muestra normal y 0.6 en la contaminada por polvos. 3.15. FSFORO SOLUBLE El fsforo elemental (P) no se encuentra en estado libre en la naturaleza porque se oxida muy fcilmente; sin embargo, son muy comunes los compuestos orgnicos y principalmente minerales que contienen fsforo. En trminos generales, el fsforo del suelo se clasifica en fsforo orgnico e inorgnico, dependiendo de la naturaleza de los compuestos 39

que forme. La forma orgnica se encuentra en el humus y la materia orgnica, y sus niveles en el suelo pueden variar desde 0 hasta mayores que 0.2%. La fraccin inorgnica est constituida por compuestos de hierro, aluminio, calcio y flor, entre otros, y normalmente son ms abundantes que los compuestos orgnicos. Solo una pequea parte del P aparece en solucin en suelo (< 0.01-1 mg L-1). El P es un macronutrimento esencial para las plantas y los microorganismos, junto con el nitrgeno y el potasio. Puede ser un nutrimento limitante, ya que es un componente de los cidos nucleicos y de los fosfolpidos. Los anlisis de P sirven fundamentalmente para el control de la dosificacin de productos qumicos en tratamientos de agua o suelos, o como un medio para determinar que un sistema presenta contaminacin por exceso de este compuesto (Muoz et al., 2000). 3.15.1. Mtodo Para la medicin del P soluble se utiliza el mtodo de Bray (desarrollado por Bray y Kurtz, 1945), el cual fue modificado en la parte de extraccin del P. La cuantificacin se lleva a cabo por colorimetra. Este mtodo se emplea como ndice del P aprovechable en suelos con pH neutro y cido (NOM-021-RECNAT2000). Para suelos neutros y alcalinos se utiliza el mtodo Olsen. 3.15.2. Fundamento Este mtodo se basa en la extraccin de las formas de fsforo fcilmente solubles, principalmente fosfatos de calcio y una fraccin de los fosfatos de aluminio y fierro, con la combinacin de cido clorhdrico y fluoruro de amonio. El fluoruro de amonio disuelve los fosfatos debido a la formacin de un in complejo con estos compuestos, cuando se encuentran en solucin cida. Este mtodo ha dado buenos resultados en suelos cidos y aceptables en suelos con pH neutros.

40

El lmite de deteccin de la tcnica va de 1 a 10 ppm de P y en caso de tener extractos ms concentrados se recomienda hacer las diluciones necesarias para obtener mediciones de absorbancia entre 0.02 y 0.5. 3.15.3. Interferencias Los detergentes que contienen fosfatos pueden interferir en la cuantificacin del P, por lo que se recomienda no utilizarlos para lavar el material. 3.15.4. Materiales y equipos Muestra de suelo (1 g) seco y molido en un mortero. Vasos de precipitado. Pipetas de 1, 5 y 10 ml. Matraces aforados de 0.5 y 1 L. Espectrofotmetro visible. Probeta de 250 ml. Botellas de polipropileno 1 L. Tubos de ensayo de 10 ml. Tubos de plstico para centrfuga de 15 ml. Gradillas. Vrtex. Centrifuga. Matraz Erlenmeyer de 1 y 2 L. Frascos de vidrio mbar con tapa esmerilada. Nota: Para llevar a cabo esta determinacin deber utilizarse material de vidrio Pirex, y guardar el agua y los reactivos en frascos neutros o de Nalgene. El agua empleada deber ser libre de fsforo, ya sea bidestilada o desmineralizada. Es recomendable vaciar el agua del garrafn a envases de Nalgene neutros. Previamente a la realizacin de esta tcnica, todo el material que se utilice para preparar los reactivos y realizar los anlisis deber dejarse por lo menos cinco minutos en mezcla crmica y despus enjuagar con agua bidestilada. No usar 41

ningn tipo de detergente para el lavado del material de cristalera o bien utilizar jabn libre de fosfatos. En caso de usar este ltimo ya no es necesario lavar el material con mezcla crmica. 3.15.5. Soluciones y reactivos 1) Mezcla crmica: Pesar 100 g de dicromato de potasio (2Cr2O7) y disolver en 1 L de agua destilada. Calentar hasta la completa disolucin del reactivo. Dejar enfriar la solucin y agregar gota a gota 100 ml de cido sulfrico concentrado (H2SO4). 2) Solucin madre de fluoruro de amonio (NH4F) 1 N: Pesar 37 g de fluoruro de amonio, disolver en agua destilada y aforar a 1 L. Guardar en un recipiente de polipropileno. 3) cido clorhdrico (HCl) 0.5 N: Diluir 20.2 ml HCl concentrado hasta completar un volumen de 500 ml con agua destilada. 4) Solucin extractora: Agregar 460 ml de agua destilada a 15 ml de solucin madre de fluoruro de amonio y 25 ml de solucin de cido clorhdrico 0.5 N. Esto nos da una solucin 0.03 N de fluoruro de amonio y 0.025 N de cido clorhdrico. La solucin final debe ser almacenada en un recipiente de polipropileno perfectamente tapado, de esta forma se conserva hasta un ao. 5) Solucin de cido clorhdrico (HCl) 10 N: En un matraz aforado de 500 ml colocar 80 ml de agua destilada y adicionar lentamente y por las paredes del matraz 404 ml de cido clorhdrico concentrado (HCl), al final completar un volumen de 500 ml con agua destilada. Nota: tener mucho cuidado al preparar esta solucin, se debe hacer en una campana de extraccin y sobre un bao de hielo. 6) Solucin de molibdato de amonio-cido clorhdrico: Pesar 15 g de molibdato de amonio tetrahidratado ((NH4)6Mo7O24.4H2O) y disolver en 350 ml de agua destilada. Aadir lentamente y con agitacin constante 300 ml de cido clorhdrico 10 N. Enfriar a 42

temperatura de laboratorio y aforar a 1 L con agua destilada. Mezclar bien y guardar en frasco mbar con tapn esmerilado. Esta solucin debe ser preparada cada dos meses. . 7) Solucin madre de cloruro estaoso: Pesar 5 g de cloruro estaoso dihidratado (SnCl2 2H2O) y disolver en 12.5 ml de cido

clorhdrico concentrado (HCl). Calentar a bao Mara hasta que se disuelva bien. Guardar en el refrigerador en frasco mbar con tapn esmerilado, pues de esta forma se conserva seis semanas mximo. 8) Solucin de cloruro estaoso diluida: Agregar 33 ml de agua destila- da a 0.1 ml de solucin madre de cloruro estaoso o 0.3 por 99 ml de agua. Esta solucin debe ser preparada cuatro horas antes de su uso. 9) Solucin tipo de fosfato (100 mg/ml): Pesar 0.4389 g de fosfato de potasio monobsico (KH2PO4), disolver en agua destilada y aforar a 1L. Un mililitro de esta solucin contiene 100 ppm de fsforo. 10) Agua bidestilada o desmineralizada. 3.15.6. Procedimiento 1) Pesar 1 g de suelo previamente seco y molido, y colocarlo en un tubo para centrfuga de 15 ml. 2) Agregar 7 ml de solucin extractora, agitar con vrtex de tal manera que se mezcle bien el suelo y la solucin extractora. 3) Centrifugar las muestras durante 10 minutos a 6 000 rpm. 4) Del sobrenadante tomar 1 ml y colocarlo en un tubo de vidrio, agregar 6 ml de agua destilada y 2 ml de la solucin de molibdato y mezclar bien. 5) Agregar 1 ml de solucin de cloruro estaoso diluido (que debe pre- pararse al momento) y nuevamente mezclar. 6) Pasados 10 minutos leer la absorbancia en el espectrofotmetro a una longitud de onda de 640 nm. Todas las lecturas debern terminarse antes de 20 minutos. 43

Nota: En caso de que las muestras tengan un alto contenido de fsforo deben hacerse las diluciones apropiadas con el extracto (sobrenadante), de tal manera que los valores de absorbancia estn dentro de la curva de calibracin. O bien se puede iniciar la extraccin con 0.5 g de suelo. 7) Cada vez que se lea un lote de muestras realizar un blanco de la siguiente manera: Poner 1 ml de H2O destilada y 1 ml de solucin extractora, agregar 5 ml de agua destilada y 2 ml de solucin de molibdato de amonio, mezclar bien y agregar 1 ml de la solucin de cloruro estaoso, finalmente mezclar otra vez. 8) Para construir la curva patrn hacer las diluciones correspondientes de la solucin tipo de fosfato, llevando el volumen a 100 ml, y considerar las proporciones de la tabla 4.7. Curva patrn. Colocar 1 ml de cada una de las diluciones (ppm) de la solucin tipo de fosfato en los tubos. Agregar 1 ml de la solucin extractora, 5 ml de agua destilada y 2 ml de solucin de molibdato de amonio. Posteriormente 1 ml de solucin de cloruro estaoso diluido y mezclar bien. Finalmente hacer las lecturas y terminarlas antes de 20 minutos. Tabla 4.7 Concentracin de fosfato para realizar la curva patrn de fsforo.

44

En la tabla 4.8 se muestran valores de fsforo que determinan la calidad de un suelo. Tabla 3.8 Criterios para determinar la calidad de un suelo en cuanto a su contenido de fsforo. (NOM-021-RECNAT-2000).

Resultados: Medio 8.2 para la muestra normal. Medio 8.6 Para la muestra contaminada por polvos. 3.16. NITRGENO TOTAL 3.16.1. Introduccin 45

El nitrgeno es un elemento indispensable para la vida, forma parte de las principales biomolculas de todos los seres vivos. Es tambin uno de los elementos ms abundantes de la Tierra, pues en su forma gaseosa (N2) constituye 78% de la atmsfera. Sin embargo, la cantidad de nitrgeno presente en muchos suelos es escasa, debido a su propia dinmica y a su ciclo biogeoqumico. El nitrgeno puede llegar al suelo gracias a los aportes de materia orgnica y a la fijacin bacteriana a partir del aire. Dentro del suelo es aprovechado por las plantas, animales y microorganismos que lo incorporan a sus tejidos. Cuando dichos organismos se mueren, el nitrgeno reingresa al suelo completando el ciclo. Este ciclo es complejo e involucra una serie de reacciones y organismos con diferentes metabolismos. comienza con compuestos orgnicos sencillos En los microorganismos la carencia de nitrgeno puede afectar el crecimiento, por lo que la poblacin microbiana no tendr un desarrollo ptimo. En contraste, demasiado nitrgeno permite el crecimiento microbiano rpido y acelera la descomposicin; pero puede crear problemas de olor en condiciones anaerobias. Adems, el exceso de nitrgeno puede ser liberado como amoniaco; en tanto que el nitrgeno aprovechable escapar en forma de gas. Para la mayora de los materiales una relacin C/N cercana a 10:1 mantendr estos elementos en equilibrio aproximado. En los suelos normalmente el contenido de nitrgeno vara de 0.05 a 2% en sus diferentes formas. 3.16.2. Mtodo La determinacin de nitrgeno total se realiza con el mtodo MicroKjeldahl (Modificado por Bremner, 1965). 3.16.3. Fundamento El mtodo Kjeldahl comprende tres fases fundamentales: 1) Digestin de la muestra. La muestra de suelo se somete a una digestin por calentamiento con cido sulfrico y por una mezcla de sales que aceleran y facilitan tanto la oxidacin de la materia 46 Siempre

orgnica como la conversin de todas las formas de nitrgeno en N+3, que en medio cido se encuentran en forma de radical amonio (NH4+); es decir, se llevan las formas orgnicas a formas minerales de nitrgeno. 2) Destilacin. Una vez transformado el nitrgeno en NH4+, se expone a una base fuerte como el hidrxido de sodio para formar hidrxido de amonio, que por la accin del calor se descompone en amoniaco (NH3) y agua. 3) Valoracin. El amoniaco desprendido por la reaccin se recoge en unvolumen conocido de solucin valorada de cido brico y por compa- racin con un blanco se determina la cantidad de cido que reaccion con el NH3.

3.16.4. Materiales y equipos Muestra de suelo seco y molido con un mortero. Balanza analtica. Matraces Kjeldahl. Vasos de precipitados. Probetas. Digestor. Matraz aforado de 1 L. Matraces Erlenmeyer de 1 L. Perlas de ebullicin.

Pipeta. Destilador. Bureta. Soporte universal con pinza.

3.16.5. Soluciones y reactivos 1) Solucin de cido brico con indicador. Pesar 20 g de cido brico 47

(H3BO3) y disolver en 750 ml de agua destilada. Calentar para la completa disolucin del cido. Dejar enfriar y agregar 20 ml de la siguiente mezcla de indicadores: 0.099 g de verde de bromocresol y 0.066 g de rojo de metilo disueltos en 100 ml de alcohol etlico al 96%. El pH de la mezcla debe de ser de 5.0, si es ms cido agregar algunas gotas de solucin de hidrxido de sodio 0.1 N, hasta que la solucin adquiera una coloracin prpura o alcance el pH indicado. Completar el volumen a 1 L con agua destilada y mezclar. 2) Solucin de hidrxido de sodio 0.1 N: Pesar 4 g de hidrxido de sodio (NaOH), disolver en agua destilada y aforar a 1 L. 3) Mezcla de catalizadores: pesar 62.5 g de sulfato de potasio . (KSO4) y 6.25 g de sulfato de cobre pentahidratado (CuSO4 5H2O). Homogenizar la mezcla. 4) Solucin de hidrxido de sodio 10 N: Pesar 200 g de hidrxido de sodio (NaOH), disolver en agua destilada y aforar a 500 ml. El agua para preparar la solucin debe ser hervida previamente para eliminar el CO2, dejndola enfriar antes de agregarla. 5) Solucin de cido sulfrico 0.01 N: Diluir 0.28 ml de cido sulfrico concentrado (H2SO4) hasta completar un volumen de 1 L con agua destilada. La concentracin del cido debe ser estandarizada con la solucin valorada de carbonato de sodio. 6) Solucin valorada de carbonato de sodio: Pesar 0.25 g de carbonato de sodio (NaCO3), previamente secado en la estufa durante 2 horas a 105oC, disolver en agua destilada y aforar a 50 ml. 7) Solucin de anaranjado de metilo: Pesar 0.1 g de anaranjado de metilo, disolver en agua destilada y aforar a 100 ml. Valoracin de la normalidad del cido sulfrico 0.01 N:

48

Tomar 3 alcuotas de 10 ml de la solucin de NaCO3. Agregar 5 o 6 gotas de anaranjado de metilo como indicador. Titular con la solucin de cido sulfrico 0.01 N. Calcular la normalidad real sustituyendo en la siguiente frmula:

Normalidad del H2SO4 = (0.050 g/ 53) X (1/ Promedio de ml gasta- dos en las tres alcuotas). 8) cido sulfrico concentrado (H2SO4). 9) Granallas de zinc.

3.16.6. Procedimiento A. Digestin. 1) Pesar una muestra de suelo de 0.25 a 1 g, que depender de la materia orgnica contenida en el suelo, entre ms materia orgnica tenga un suelo menos sern los gramos de muestra. 2) Colocar la muestra de suelo en un matraz Kjeldahl seco. 3) Adicionar 2 g de mezcla de catalizadores. 4) Agregar 5 ml de cido sulfrico concentrado. 5) Poner a calentar en el digestor a una temperatura media, hasta que la muestra se torne clara. La temperatura debe ser regulada de modo que los vapores de cido sulfrico se condensen en el tercio inferior del cuello del matraz Kjeldahl. 6) Hervir la muestra por una hora a partir de ese momento. 7) Una vez terminada la digestin, apagar el digestor y tapar con un frasco los matraces para dejar enfriar.

B. Destilacin. 1) Aadir al matraz Kjeldahl fro 25 ml de agua destilada y mezclar vigorosamente hasta una disolucin completa. 2) Transferir el lquido a un matraz Erlenmeyer de 500 ml. Colocar de 5 a 6 perlas de ebullicin. 49

3) Adicionar 3 granallas de zinc. Aadir 15 ml de la solucin de hidrxido de sodio 10 N, sosteniendo el matraz inclinado de modo que se deposite en el fondo. 4) Colocar en la salida del aparato de destilacin un vaso de precipita- dos de 50 ml, que contenga 10 ml de la solucin de cido brico ms indicador. 5) Conectar el flujo de agua e iniciar la destilacin. Destilar hasta que el volumen alcance la marca de 20 ml en el vaso de precipitados de 50 ml. Una vez alcanzado dicho volumen, retirar el matraz y apagar el aparato. 6) Titular el nitrgeno amoniacal con la solucin de cido sulfrico 0.01 N hasta que vire de verde a rosado fuerte. 7) Realizar un blanco siguiendo los pasos del 3 al 15. 3.16.7. Clculos Calcular la concentracin de nitrgeno, sustituyendo en la siguiente frmula:

Donde: T = ml de cido sulfrico valorado gastados en la muestra. B = ml de cido sulfrico valorado gastados en el blanco. N = normalidad exacta del cido sulfrico. S = peso de la muestra de suelo. En la tabla 4.9 se presentan valores de nitrgeno que sirven para evaluar la calidad de un suelo. Tabla 4.9 Criterios para evaluar un suelo con base en su contenido de nitrgeno total (Moreno, 1978).

50

3.17. AMONIO INTERCAMBIABLE 3.17.1. Introduccin Los microorganismos participan de forma importante en el ciclo del nitrgeno en el suelo, debido a que realizan la fijacin del nitrgeno, nitrificacin y desnitrificacin, as como su inmovilizacin. Se reportan como fracciones predominantes al amonio y nitratos (Foster, 1995; Maynard y Kalra, 1993). En el caso de los derrames de hidrocarburos, la relacin C/N aumenta significativamente; la adicin de nitrgeno inorgnico permite balancearla y estimular la biodegradacin al satisfacer los requerimientos de sntesis de aminocidos, protenas, purinas, cidos nucleicos, aminoazcares y vita- minas que en conjunto representan el contenido de nitrgeno en alrededor de 10% del peso celular seco de los microorganismos (Graham et al., 1999; Smith et al., 1998). Sin embargo, en la literatura existen discrepancias sobre el efecto de la estimulacin, que se pueden atribuir a la variabilidad y compleja composicin de los suelos y a otros factores como altas reser- vas de nitrgeno o adiciones excesivas (Bossert y Bartha, 1984; Leahy y Colwell, 1990; Walworth et al., 1997). Comnmente se evala al amonio intercambiable por representar la fuente de nitrgeno ms directamente disponible para su incorporacin en aminocidos, sin requerir ser oxidado o reducido (Gaudy y Gaudy, 51

1981).

Adicionalmente,

se

recomienda

cuantificar

nitratos

para

complementar la fraccin de nitrgeno inorgnico susceptible de ser empleado por los microorganismos. El amonio intercambiable se define como el amonio que puede extraerse con una solucin neutra de in potasio a temperatura ambiente. Las sales de potasio utilizadas comnmente son K2SO4 0.05 M y KCl de 0.1 a 2 M; la capacidad de extraccin depende del tipo de sal y su concentracin. Posteriormente se cuantifica el amonio en el extracto, para lo cual se emplea una gran variedad de mtodos: tcnicas colorimtricas manuales, microdifusin, destilacin con arrastre de vapor, anlisis de inyeccin de flujo y electrodo de in selectivo (Maynard y Kalra, 1993). 3.17.2. Mtodo Determinacin de amonio intercambiable en suelo por extraccin con cloruro de potasio (KCl 1M) y determinacin por electrodo de in selectivo. 3.17.3. Fundamento Se recupera el amonio extrable con KCl 1 M y se cuantifica por medio de un electrodo de in selectivo, que consta de una membrana hidrofbica permeable al gas, permitiendo separar la solucin de la muestra de la solucin interna del electrodo (el lquido no penetra la membrana). El amoniaco de la muestra en solucin se difunde a travs de la membrana, hasta que la presin parcial del amoniaco es la misma en ambos lados de la membrana. As, para las muestras la presin parcial del amoniaco es proporcional a su concentracin y sta a su vez se encuentra en equilibrio con el in amonio. 3.17.4. Material y equipo Estufa. Mortero. Balanza. 52

 Centrfuga. Potencimetro con electrodo in selectivo. Tubos Falcon para centrfuga o equivalente. Vrtex. Pipetas. Matraces volumtricos. 3.17.5. Reactivos y soluciones Cloruro de potasio (KCl) 1M. Solucin extractora. Pesar 74.56 g de KCl disolver en agua destilada y aforar a volumen de 1 L. Hidrxido de sodio (NaOH) 10N. Disolver 400 g de NaOH en agua. Enfriar y diluir a 1 L. Solucin patrn. 1 000 mg NH4/L. Secar NH4Cl 100oC. Pesar 3.027 g, disolver en agua y diluir a 1 L. por una hora a

3.17.6. Procedimiento A.Extraccin. 1) Secar el suelo a temperatura ambiente (25-30oC) y moler en un mortero. 2) Pesar 10 g del suelo molido, colocarlos en un tubo (Falcn para centrfuga o equivalente); posteriormente, agregar gradualmente 30 ml de KCl 1M, mezclando intensamente en vrtex durante un minuto. Centrifugar a 8 000 rpm por 10 minutos y recuperar el sobrenadan- te. Aproximadamente 25 ml sern utilizados para el anlisis del amonio.

Nota: La determinacin de amonio intercambiable en el presente mtodo permite tambin extraer con la solucin extractora (KCl 1M) a los iones nitrito y nitrato. Con la diferencia que el amonio se cuantifica por electrodo de in selectivo y los iones nitrito y nitrato por electroforesis capilar (EIC). B.Cuantificacin. 53

1) Tomar 25 ml del sobrenadante de la extraccin, adicionar 0.45 ml de NaOH 10N; bajo agitacin llevar a cabo la medicin de mV mediante electrodo de in selectivo para amonio. Calcular de la curva estndar (de elaboracin reciente) la concentracin mg NH4/L.

Curva patrn. Preparar por lo menos tres estndares segn rango de concentracin esperada en muestras. Es importante preparar siempre estn- dares nuevos. Debern prepararse estndares entre 0.1 a 100 mg NH4/L en un volumen de por lo menos 25 ml, usando la

solucin patrn 1 000 mg NH4/L y como medio de disolucin KCl 1M. Para estndares de 1, 10 y 100 mg NH4/L medir 0.05, 0.5 y 5 ml de solucin patrn y aforar a 50 ml con KCl 1M. Al igual que las muestras, medir la diferencia de potencial en milivolts (mV). Construir grfica semilogartmica. Poner en el eje (x) logartmico la concentracin NH4/L y en el eje lineal (y) el potencial del electrodo. 3.17.7. Clculos Para convertir el resultado a concentracin en peso (mg NH4/kg suelo), en este caso se utiliza la siguiente relacin. Adems es necesario corregir con la humedad. mg NH4/ kg suelo = mg NH4/L * 3. 3.17.8. Interpretacin En la tabla 4.10 se proporciona la clasificacin de fertilidad de suelos por el contenido de nitrgeno inorgnico (nitrato y amonio).

Tabla 3.10 Clasificacin de fertilidad de suelos en funcin del nitrgeno inorgnico (NOM-021-RECNAT-2000).

54

Resultados: bajo en ambos caso 11.5 Nota: La solucin extractora propuesta, as como las otras definidas para fertilidad de suelos, son representativas de la fraccin de amonio biodisponible para plantas. Esta misma metodologa, en cuanto a extraccin y cuantificacin, se aplica en la remediacin de suelo. Sin embargo, no se ha establecido la solucin extractora que sea la ms adecuada de la fraccin biodisponible a los microorganismos, tampoco se ha generalizado un rango de concentraciones ptimas para la remediacin de suelos. 3.18. NITRITOS Y NITRATOS INTERCAMBIABLES 3.18.1. Introduccin Las fracciones minerales de nitrgeno son predominantemente amonio y nitratos, mientras que los nitritos son rara vez detectados en el suelo, incluso su determinacin es normalmente injustificada excepto en suelos neutros y alcalinos que reciben amonio o fertilizantes liberadores de amonio (Foster, 1995; Maynard y Kalra, 1993). Al igual que el amonio, los nitritos se pueden emplear para estimular la biodegradacin de hidrocarburos contaminantes al balancear la relacin C/N (Brook et al., 2001; Walworth y Reynolds, 1995). Diferencindose por lixiviarse ms fcilmente por su carga negativa, especialmente en suelos arcillosos. Los 55

nitratos, adems de ser una fuente de nutrientes, son aceptores de electrones en condiciones limitadas de oxgeno. En la determinacin analtica de nitratos en suelos, varias soluciones extractoras se han empleado para su separacin del suelo. Entre stas se encuentra el agua; KCl de 1 a 2 M; CaCl2 0.01 M; NaHCO3 0.5 M; solucin de CaSO4.2H2O al 0.35% con 0.03 M de NH4F y 0.015 M H2SO4; CuSO4 0.01 M; y CuSO4 0.01 M con Ag2SO4. De todas stas la solucin ms comn es el KCl. Para la determinacin de las concentraciones de nitritos y nitratos en el extracto se utilizan diferentes mtodos que incluyen tcnicas colorimtricas, microdifusin, vapor de destilacin, anlisis de inyeccin de flujo, cromatografa de iones y electrodo de in selecti- vo (Maynard y Kalra, 1993). 3.18.2. Mtodo Determinacin de nitritos y nitratos intercambiables en suelo por ex- traccin con cloruro de potasio (KCl 1M) y determinacin por electroforesis in capilar (EIC). 3.18.3. Fundamento Los nitritos y nitratos solubles se extraen del suelo con una solucin de KCl 1 M y se cuantifican por electroforesis capilar, previa filtracin del extracto a travs de una membrana de 0.45 m, para proteger el equipo de precipitados y material slido. La mayora de los instrumentos (EIC) emplean como detector primario al UV, pero la mayora de aniones y todos los cationes no son activos al UV. En el analizador in capilar se emplea un electrolito a base de cromato de sodio y la deteccin es por absorcin UV indirecta (ASTM D1498-00, 2000; Krol et al., 2000; US EPA 6500, 1998; US EPA 4140, 1998). 3.18.4. Materiales y equipos 56

 Estufa. Mortero. Balanza. Centrfuga. Analizador in capilar. Tubos Falcon para centrfuga o equivalente. Vrtex. Pipetas. Matraces volumtricos. Filtro con membrana de 0.45 m. 3.18.5. Reactivos y soluciones Solucin extractora. Cloruro de potasio (KCl) 1M. Pesar 74.56 g de KCl disolver en agua destilada y aforar a volumen de 1 L. Medio de dilucin de estndares. Cloruro de potasio (KCl) 0.0037M. Medir 0.915 ml de la solucin KCl 1M y aforar a 0.25 L. Solucin para lavado de columna. Hidrxido de sodio (NaOH) 0.1N. Pesar 0.4 g de NaOH disolver en agua desionizada y diluir a 100 ml. Solucin patrn de nitrato (NO3) 1 000 mg L-1. Pesar 1.37 g de NaNO3, disolver en agua desionizada en un volumen de 1 L. Solucin patrn de nitrito (NO2) 1 000 mg L-1. Pesar 1.5 g de NaNO2, disolver en agua desionizada en un volumen de 1 L.

57

 Electrolito. Base de cromato de sodio 0.1 M. 4.6 ml de solucin OFM anin-BT (Water CIA-pak), 9.2 ml de cromato de sodio 0.1 M en 200 ml de agua desionizada grado MiliQ. 3.18.6. Procedimiento A. Extraccin. 1) Secar el suelo a temperatura ambiente (25-30oC) y moler en un mortero. 2) Pesar 10 g del suelo molido, colocarlos en un tubo (Falcn para centrfuga o equivalente), posteriormente agregar gradualmente 30 ml de KCl 1M, mezclando intensamente en vrtex durante un minuto. Centrifugar a 8 000 rpm por 10 minutos y recuperar el sobrenadante. Aproximadamente 1 ml ser utilizado para el anlisis de nitrato y nitrito. Nota: Este procedimiento de extraccin permite la obtencin de sobrenadante para la determinacin de amonio intercambiable, con la diferencia de requerirse 25 ml para la determinacin del amonio con otro protocolo de cuantificacin (ver seccin 4.7). B. Cuantificacin. 1) Realizar una dilucin inicial 0.5/5 (0.5 ml de sobrenadante en 4.5 ml de agua desionizada); a partir de sta hacer una segunda dilucin 0.2/5 (0.2 ml de la primera en 4.8 ml de agua desionizada). Esta ltima se debe filtrar a travs de una membrana de 0.45 m y, posteriormente, colocar 0.5 ml del filtrado en viales para el anlisis por electroforesis capilar. 2) Condiciones del equipo (CIA). Temperatura:25. Voltaje: 15kV con fuente de poder negativa. Deteccin: UV indirecta a 254 nm. 58

Columna: Capilar de 75 m (di) x 375 m (de) x 60 cm (largo). Curva patrn. Elaboracin de la curva estndar para nitrato (NO 3). Deber preparar estndares entre 5 a 80 mg NO 3/L a partir de la solucin patrn 1 000 mg NO3/L y como medio de disolucin KCl 0.0037M. El tiempo de corrida durante el anlisis debe ajustarse a 4.5 minutos. Elaboracin de la curva estndar para nitrito (NO 2). Deber preparar estndares entre 5 y 80 mg NO 2/L, a partir de la solucin patrn 1 000 mg NO 2/L y como medio de disolucin KCl 0.0037M. El tiempo de corrida durante el anlisis debe ajustarse a 4.5 minutos. 3.18.7. Clculos Para calcular la concentracin final en mg L-1 deber tomarse en cuenta la relacin de diluciones. Finalmente, para convertir el resultado mg L-1 a concentracin en peso (mg kg1), se utiliza la siguiente relacin. Adems es necesario corregir con la humedad. mg anin/kg suelo = mg anin /L * 3. 3.18.8. Interpretacin La clasificacin de fertilidad de suelos por el contenido de nitrgeno inorgnico (nitrato y amonio) se muestra en la tabla 3.11.

Tabla 3.11 Clasificacin de fertilidad de suelos por el contenido de nitrgeno inorgnico.

59

Resultados: Muy bajo en ambos casos 5.8 Nota: Los valores de la tabla 4.11 corresponden a fertilidad de suelos del nitrgeno biodisponible para plantas; por lo que junto al amonio se debe interpretar el contenido de nitrgeno inorgnico en funcin a la capacidad extractiva de la solucin empleada, y evaluar si es un parmetro que permita definir los requerimientos nutricionales de los microorganismos en los procesos de biodegradacin de hidrocarburos. 3.19. Sulfato 3.19.1. Introduccin El sulfato es la principal forma inorgnica de azufre en la mayora de los suelos, aunque pueden estar presentes las formas elementales y en sulfuro bajo condiciones predominantemente anaerobias. Otras formas oxidadas como tiosulfatos, tetrationato o sulfito tambin pueden estar presentes en el suelo, pero slo como intermediarios durante la oxidacin o reduccin del sulfuro. Los sulfatos pueden estar presentes en formas solubles, adsorbidos en la superficie del suelo o como sales insolubles (yeso o asociados con carbonato de calcio). Tericamente el sulfato biodisponible en fertilidad de suelos es el adsorbido y el soluble, mientras que el insoluble no se considera directamente disponible (Kowalenko, 1993). Diferentes soluciones extractoras se han empleado en las 60

determinaciones de sulfato en suelo, entre ellos se reportan el agua, acetatos, carbonatos, cloruros, fosfatos, citratos y oxalatos. Para cuantificar slo el sulfato soluble, la eleccin terica es el agua; sin embargo, comnmente se emplea una solucin salina dbil en bajas concentraciones, como el cloruro de calcio para flocular el suelo y para poder disminuir materia orgnica coloreada; o el cloruro de litio que presenta el efecto benfico adicional de inhibir la actividad microbiana. Para recuperar todo el sulfato adsorbido se recomienda una alta relacin extractante: suelo, e incrementar el pH por arriba de 6.5 para neutralizar las cargas positivas que establecen la adsorcin del sulfato al suelo, y a su vez evitar una extraccin cida de porciones de yeso o sulfato asociado a carbonatos. Sin embargo, a pH altos tambin se extrae materia orgnica coloreada (Kowalenko, 1993). Se han desarrollado varios mtodos para la cuantificacin de iones: turbidimtricos, volumtricos, gravimtricos o colorimtricos despus de precipitar al sulfato como sulfato de bario o despus de la reduccin cida a sulfuro. Otros mtodos emplean cromatografa de iones, plasma inductivamente acoplado y flourescencia de rayos X. El mtodo que se describe a continuacin emplea la electroforesis in capilar (EIC), que es una tecnologa de separacin relativamente nueva (1990) para el anlisis de iones inorgnicos y orgnicos en solucin acuosa (ASTM D6508, 2000; Krol et al., 2000; US EPA 6500, 1998; US EPA 4140, 1998b). 3.19.2. Mtodo Determinacin de sulfatos extrables en suelo con bicarbonato de sodio (NaHCO3) 0.5 M y determinacin por electroforesis in capilar (EIC). 3.19.3. Fundamento 61

Se extrae al sulfato que se encuentra en suelo en forma soluble y adsorbido con NaHCO3 0.5 M y se cuantifica por electroforesis capilar. La mayora de los instrumentos (EIC) emplean al detector UV como prima- rio, pero la mayora de aniones y todos los cationes no son activos al UV. En el analizador in capilar se emplea un electrolito a base de cromato de sodio, y la deteccin por absorcin UV indirecta (ASTM D6508, 2000; Krol et al., 2000; US EPA 6500, 1998; US EPA 4140, 1998). 3.19.4. Materiales y equipos Estufa. Mortero. Balanza. Centrfuga. Analizador in capilar. Tubos Falcon para centrfuga o equivalente. Vrtex. Pipetas. Matraces volumtricos. Filtros de membrana de 0.45 m. 3.19.5. Reactivos y soluciones 1) Solucin extractora. Bicarbonato de sodio (NaHCO3) 0.5 M. Secar NaHCO3 por una hora a 100oC. Pesar 42 g, disolver en agua y diluir a 1 L. 2) Medio de dilucin de estndares. Bicarbonato de sodio

(NaHCO3) 0.004 M. Medir 8 ml de la solucin NaHCO3 0.5 M y diluir en 1 L. 3) Solucin para lavado de columna (CIA). Hidrxido de sodio (NaOH) 0.1N. Pesar 0.4 g de NaOH disolver en agua desionizada y diluir a 100 ml.

62

4) Solucin patrn de sulfato (SO4) 1 000 mg L-1. Sulfato de sodio (Na2SO4). Pesar 1.479 g de Na2SO4, disolver en agua des ionizada en un volumen de 1 L. 5) Electrolito. Base de cromato de sodio 0.1 M. 4.6 ml de solucin OFM anin-BT (Water CIA-pak), 9.2 ml de cromato de sodio 0.1 M en 200 ml de agua desionizada grado MiliQ. 3.19.6. Procedimiento A. Extraccin. 1) Secar el suelo a temperatura ambiente (25-30oC) y moler en un mortero. 2) Pesar 1g del suelo, colocarlo en un tubo (Falcon para centrfuga o equivalente), agregar gradualmente 3 ml de NaHCO3 0.5M, mezclando intensamente en vrtex durante un minuto. Centrifugar a 8 000 rpm por 10 minutos y recuperar el sobrenadante. B. Cuantificacin. 1) Realizar una dilucin inicial 2:5 (2 ml de sobrenadante y 3 ml de agua desionizada), a partir de sta hacer una segunda dilucin 0.2:5 (0.2 ml de la primera dilucin y 4.8 ml de agua desionizada). Esta ltima se filtra a travs de una membrana 0.45. Transferir 0.5 ml en viales para el electroforesis capilar (MeEC). 2) Condiciones del equipo (CIA). Temperatura: 25oC. Voltaje: 15kV con fuente de poder negativa. Deteccin: UV indirecta a 254 nm. Columna: Capilar de 75 mm (di) x 375 mm (de) x 60 cm (largo). Curva patrn. Deber preparar estndares entre 5 a 80 mg SO4/L a partir de una solucin patrn de 1 000 mg SO4/L de HCO30.004 M. Los estn- dares deben de filtrarse a travs de una membrana 0.45 m, agua de purga y electrolito. El tiempo de corrida durante el anlisis debe ajustar- se a 4.5 minutos. 63 anlisis por

3.19.7. Clculos Para calcular la concentracin final en mg L-1 se debe considerar la relacin de diluciones. Finalmente, para convertir el resultado mg SO4/L a concentracin en peso (mg SO4/kg suelo), en este caso, se utiliza la siguiente relacin: mg SO4/ kg suelo = mg SO4/L * 3.

3.19.8. Interpretacin. Las concentraciones de sulfato en suelos no contaminados comnmente no son altas, se cuenta slo con una referencia de umbral tentativo del Reino Unido de 100 a 200 mg kg -1 (ASTM DS64, 1996). Se debe tener cuidado especial en la interpretacin de suelos contaminados con residuos y recortes de lodos de perforacin impregnados con hidrocarburos, por la presencia de barita (BaSO4).

Los mtodos de cuantificacin del sulfato, as como otros aniones, por lo general estn asociados a estudios de fertilidad de suelos, relacionando a los aniones como biodisponibles para el crecimiento de plantas (sulfato soluble y adsorbido) (Kowalenko, 1993). Aunque es razonable considerar que la fraccin soluble en agua est biodisponible para los microorganismos, poco se puede intuir sobre la fraccin adsorbida y la insoluble, para poder establecer qu fuerza extractante es la adecuada para la extraccin del sulfato disponible. Algunos estudios realizados en laboratorios del IMP (datos no proporcionados) muestran una mayor cuantificacin en la extraccin de sulfato con NaHCO3 0.5 M que con KCl 1M y agua destilada durante cinticas de biodegradacin. 3.20. Fe+2 y Fe+3 64

3.20.1. Introduccin El hierro est presente en la biosfera en dos estados de oxidacin, Fe+2 y Fe+3, los cuales son termodinmicamente estables bajo condiciones anxicas y xicas, respectivamente. El Fe+3 se

encuentra en una amplia variedad de formas qumicas, como minerales altamente cristalinos: magnetita (Fe3O4), geotita (FeOOH), hematita (Fe2O3), vivianita (Fe3(PO4)2.8H2O) o rrihidrita (Fe(OH)3), y

minerales con poca o ninguna estructura cristalina: oxihidrxidos amorfos (Hacher et al., 2001). Las bacterias reducen preferentemente los oxihidrxidos amorfos de Fe+3 (Lovley y Phillips, 1987). El mtodo ms comnmente utilizado para medir la concentracin de estos compuestos amorfos de Fe+3 en suelos y sedimentos es la tcnica de extraccin con oxalato cido de amo- nio. Sin embargo este mtodo puede catalizar la disolucin de las formas cristalinas que no son biodisponibles para las bacterias reductoras de Fe, y no distingue entre la fraccin cristalina y la amorfa. Un mtodo ms selectivo para la extraccin de los oxihidrxidos amorfos de Fe+3 es la tcnica de extraccin con hidroxilamina hidroclorada (Lovley y Phillips, 1987; Byong-Hun et al., 2001). 3.20.2. Mtodo Este mtodo es aplicable para extraer Fe+2 y Fe+3 de muestras de suelo con una solucin cida y su cuantificacin por colorimetra. 3.20.3. Fundamento La prueba se basa en la extraccin de Fe+2 y Fe+3 en muestras de suelo con una solucin cida, y la medicin indirecta de los iones Fe+2, Mediante la cuantificacin del complejo colorido

formado por Fe+2 con o-fenantrolina, que absorbe a 510 nm. Fe (II) + 3 [(o-fenantrolina)H+] [Fe(o-fenantrolina)3]2+ + 3H+.

Para determinar la concentracin de Fe+3, inicialmente el Fe+3 65

extrado debe ser reducido a Fe+2 con hidroxilamina hidroclorada, que Puede ser cuantificado como Fe+2 con o-fenantrolina.

El lmite de deteccin de la tcnica va de 1 a 50 ppm de Fe +2, y en caso de tener extractos ms concentrados se recomienda hacer las diluciones necesarias para obtener mediciones de absorbancia entre 0.1 y 0.8. 3.20.4. Interferencias Valores de pH> de 6, provocan una recuperacin ineficiente de Fe+2. La presencia de NaNO3 a concentraciones mayores de 0.01M provoca una recuperacin variable y a pH 7 el Fe+2 puede ser oxidado de forma abitica por nitratos o nitritos. La presencia de sulfato provoca que slo sea extrable aproximadamente 15% del Fe+2 total entre un pH de 4 y 5. 3.20.5. Material y equipo Probetas de 100 ml. Matraces volumtricos de 1L. Tubos de ensayo de vidrio con tapa de rosca de 20 ml. Pipetas graduadas de 1 y 10 ml. Vasos de precipitados de 25, 50 y 100 ml. Vrtex. Tubos de centrfuga de 15 ml. Centrfuga. Espectrofotmetro visible. 3.20.6. Reactivos y soluciones 1) cido clorhdrico (HCl) 0.5 M. En un matraz volumtrico de 1L con 100 ml de agua destilada, adicionar lentamente 41.82 ml de HCl y finalmente aforar con agua destilada. 66

2) Hidroxilamina hidroclorada (NH2OH.HCl) 0.25 M en HCl 0.25 M. Adicionar 17.37 g de hidroxilamina en un matraz volumtrico de 1L, disolver con 100 ml de una solucin de HCl 0.5M y posteriormente aforar con la misma solucin. 3) Etanol 10%. Disolver 10 ml de etanol 98% en 90 ml de agua destilada. 4) o-fenantrolina (C12H8N2.H2O) 0.25%. Pesar 0.25 g de ofenantrolina y llevar a 100 ml con una solucin de etanol al 10%. 5) Buffer2de acetato (C2H3O .Na) al 10%. Pesar 10 g de acetato de sodio y disolver en 100 ml de agua destilada. Ajustar a pH 4 con cido actico.
2 6) Solucin estndar de sulfato ferroso amoniacal (Fe(NH4)2(SO4) .

6H O) (50 ppm de Fe). Pesar 0.3512 g de sulfato ferroso amoniacal y transferir a un matraz volumtrico de 1L, disolver y aforar con solucin de HCl 0.5 M. 3.20.8. Procedimiento A. Extraccin. 1) En un tubo de centrfuga de 15 ml pesar 0.1 g de suelo hmedo bajo condiciones anaerobias y adicionar 5 ml de solucin de HCl 0.5 M. Agitar en forma intermitente durante una hora en vrtex. 2) Centrifugar por 10 minutos a 6 000 rpm. 3) Utilizar el sobrenadante para la determinacin de Fe+2 y Fe+3. Nota: Si es necesario, diluir la muestra para poder hacer una lectura dentro del rango de 0.1 a 0.8 de absorbancia. B. Cuantificacin. 1) Para la cuantificacin de Fe+2, tomar 0.2 ml del sobrenadante de la centrifugacin, adicionar 1 ml de solucin de ofenantrolina, 1 ml de solucin buffer, completar a 10 ml con agua destilada y 67

agitar vigorosamente en vrtex. Permitir el desarrollo del color (15 a 20 minutos) y leer la absorbancia a 510 nm. 2) Para la cuantificacin de Fe total, tomar 0.2 ml de sobrenadante de la centrifugacin, adicionar 1 ml de solucin de hidroxilamina y esperar una hora. Posteriormente, adicionar 1 ml de solucin de ofenantrolina, 1 ml de solucin buffer, completar a 10 ml con agua destilada y agitar vigorosamente en vrtex. Permitir el desarrollo del color (15 a 20 minutos) y leer absorbancia a 510 nm. Curva patrn. Preparar una curva patrn con la solucin estndar de sulfato ferroso amoniacal (50 ppm de Fe) de acuerdo con la tabla 3.12. Tabla 3.12 Preparacin de la curva patrn para determinar sulfatos.

Adicionar 1 ml de solucin de hidroxilamina hidroclorada y esperar una hora. Posteriormente adicionar 1 ml de solucin de ofenantrolina, 1 ml de solucin buffer, completar a 10 ml con agua destilada y agitar vigorosamente en vrtex. Permitir el desarrollo del color (15 a 20 minutos) y leer la absorbancia a 510 nm.

68

3.20.9. Clculos Calcular la concentracin de Fe +2 y Fe total en el extracto, con la ecuacin lineal de la curva estndar. CE (ppm) = ((Abs b) / m ) * (FD). Donde: CE = concentracin del extracto. b = ordenada al origen. m = pendiente. FD = factor de dilucin. Calcular la concentracin final de Fe+2 y Fe total de la muestra de suelo mediante la siguiente ecuacin: CS (g / g de suelo seco) = (CE * V) / (P * FH). CS = concentracin de Fe en suelo. V = volumen de solucin extractora (5 ml). P = cantidad de suelo hmedo (0.1 g). FH = factor de correccin de humedad (1-(%humedad/100)).

La concentracin de Fe+3 se calcula con la siguiente ecuacin: Fe+3 = Fe total - Fe+2.

3.21. SULFURO DE HIDRGENO Y METANO 3.21.1. Introduccin La actividad microbiana sulfato-reductora y metanognica de los microorganismos presentes en un suelo, agua o sistemas de cultivo en laboratorio, se puede determinar con la presencia de sulfuro (H2S) y metano (CH4) (Salminen et al., 2004; Tiehm y Schulze, 2003; Atteia y Franceschi, 2002; Lors et al., 2001; Loser et al. 1998 ). Esta determinacin puede realizarse por cromatografa de gases, por ser un mtodo sensible a bajas concentraciones. La determinacin de la actividad metablica, anaerobia o aerobia, a travs de los metabolitos 69

liberados (CH4, H2S, CO2), permite relacionar la prdida de hidrocarburos con la actividad microbiana; factor esencial principalmente en el seguimiento de la atenuacin natural y en estudios de biodegradacin de hidrocarburos. El detector de ionizacin de flama (FID) es no selectivo, emplea la combustin de hidrgeno para la ionizacin de los compuestos orgnicos. Este tipo de sistemas es utilizado para la separacin y deteccin de compuestos orgnicos en muestras ambientales. El detector de quimioluminiscencia (SCD) es selectivo para compuestos azufrados. La operacin se basa en la reaccin de ozono con monxido de sulfuro producido por la combustin del analito. La luz producida por la combustin es detectada con un fotomultiplicador sensible a la luz azul. Compuesto azufrado SO + H2O + otros productos.

SO + O3 3.21.2. Mtodo

SO2 + O + hv (<400 nm)

Este mtodo es aplicable para medir simultneamente CH 4 y H2S por cromatografa de gases con detectores FID y SCD. El alcance del mtodo es de 10 a 70 mg/m3 de H2S y 6 000 a 32 000 mg/m3 de CH4. 3.21.3. Fundamento La prueba se basa en la cuantificacin simultnea de CH4 y H2S en la atmsfera de muestras lquidas o slidas por cromatografa de gases con detectores de ionizacin de flama (FID), para la deteccin de metano, quimioluminiscencia de sulfuro (SCD) y sulfuro de hidrgeno conecta- dos en serie. 3.21.4. Material, equipo, reactivos y gases 70

 Cromatgrafo de gases con detector FID y SCD. Columna para separar metano y sulfuro de hidrgeno (por ejemplo: (HP-1). Jeringa para muestras gaseosas de 100 l. Jeringa para muestras gaseosas de 250 l. Helio de ultra alta pureza (99.999%). Aire extraseco. Hidrgeno de ultra alta pureza (99.999%). Gases de calibracin, 2.5% CH4, 50 ppm CO, 25 ppm H2S, 12% O2, balance en N2. 3.21.5. Procedimiento Inyectar 100 l de la atmsfera de la muestra de inters, y determinar la concentracin de H2S y CH4 con base en el rea bajo la curva de cada pico, y a la curva de calibracin correspondiente a cada compuesto. Para realizar las curvas de calibracin de H 2S y CH4, tomar alcuotas directas del tanque de los gases. En la tabla 4.13 se presentan las alcuotas y las concentraciones (p/v) para cada compuesto.

Tabla 3.13

Volmenes de gases para realizar curva

patrn de CH4 y H2S.

71

3.22. Potencial xido-reduccin. Determinacin en laboratorio y campo 3.22.1. Introduccin El potencial xido-reduccin puede definirse como una medida cuantitativa de la energa de oxidacin o de la tendencia del electrn de escaparse o fugarse de un sistema reversible xido-reduccin (redox). Esta medicin refleja qu tan oxidado o reducido est el sistema con referencia a un estndar. Cuando el potencial redox est referido con respecto al hidrgeno, se expresa como Eh en unidades de milivolts; E es la diferencia de potencial entre el electrodo estndar de hidrgeno y el sistema en el cual el potencial redox es medido. Debido a que el estado redox es una medida cuantitativa del estado de oxidacin y reduccin de las sustancias en el sistema, sta permite representar el estado de oxidacin de los compuestos susceptibles de ser empleados como principal aceptor de electrones para los microorganismos. As, los microorganismos emplean a los aceptores de electrones ms oxidados que les permitan obtener ms energa, disminuyendo de manera secuencial de aceptores bajo condiciones aerobias (potencial redox positivo) a anxica y anaerobia (potencial redox ms negativos). 3.22.2. Mtodo Determinacin del potencial xido reduccin en suelos, procedimientos en laboratorio y campo. Este protocolo se basa en los mtodos estndares para la determinacin del potencial redox en soluciones (ASTM D1498-00, 2000; US GS, 1998; APHA, 1995), adecuado para suelos y lodos (ISO11271, 2002; NRES 381, 2002; Patrick et al., 1996; Benada, 1995; Zausig, 1995; ZoBell, 1946). El mtodo se modific para su aplicacin en muestreos a distintas profundidades durante la caracterizacin de suelos. 3.22.3. Fundamento Debido a que las reacciones de oxidacin o reduccin son movimiento 72

de electrones que involucran cambios en las cargas elctricas, las intensidades de las reacciones redox pueden medirse en trminos de diferencias potenciales elctricas (emf por sus siglas en ingls). Cuando un electrodo no atacable (como el platino o el oro metlico) se sumerge en un sistema reversible redox, una diferencia de potencial se establece en el electrodo, la cual puede medirse potenciomtricamente. Esta diferencia de potencial se crea debido a que el electrodo no participa en la reaccin redox, por lo que la concentracin o tendencia de escape de electrones en el electrodo es diferente a la concentracin en el sistema reversible de reaccin redox. Este electrodo no atacable puede ser considerado como un almacn de electrones actuando como un conductor inerte de electrones desde o para un sistema. As tambin se observa que cuanto ms oxidado est el sistema, ms alto ser el potencial del electrodo. 3.22.4. Interferencias Si el electrodo se expone a altas concentraciones de sulfuro de hidrgeno por varias horas, puede producirse una pelcula en el electrodo de platino que interfiere con la medicin. La materia orgnica, aceite y el sulfuro pueden causar contaminacin de la superficie del electrodo, del puente salino o del electrolito interno. Esto puede provocar un funcionamiento errtico cuando se emplean electrodos de referencia. Se debe limpiar y calibrar el equipo para verificar su funcionamiento. Los electrodos de redox combinados y simples de platino pueden producir lecturas inestables en soluciones que contienen iones cromo, uranio, vanadio o titanio, y otros iones que son agentes reductores ms fuertes que el hidrgeno o el platino. No inserte directamente electrodos redox en soluciones ricas en hierro, despus de estar el electrodo en contacto con la solucin ZoBell. Un precipitado azul insoluble puede cubrir la superficie del 73

electrodo debido a una reaccin inmediata entre los iones de hierro y cianuro frrico en la solucin ZoBell con los iones ferrosos y frricos en la muestra de agua, causando lecturas errticas. 3.22.5. Material y equipo Potencimetro con electrodos ORP. Termmetro. Balanza porttil. Muestra de suelo (10 g mnimo). Pipetas de 10 ml. Viales de vidrio de 40 ml. Vasos de precipitados. Papel suave para secado del electrodo. Nota: El potencimetro con un rango de +/- 1 000 mV, resolucin de 1 mV y precisin de +/- 1 mV es adecuado. Los arreglos de electrodos comerciales deben estar especificados para evaluar el potencial xidoreduccin, comnmente compuestos de un electrodo de un metal inerte (platino u oro) en forma de botn o anillo y un electrodo de referencia de calomelano (Hg/HgCl2) o Ag/AgCl. Estos electrodos deben tener una solucin de inmersin de referencia especificada de KCl (3, 3.5, 3.8,4 y 4.7 M o saturada), para permitir el clculo de potencial referido al electrodo de hidrgeno. 3.22.6. Reactivos y soluciones 1) Agua desionizada. 2) Solucin ZoBell (solucin estndar redox). Consiste en 0.1 M KCl con cantidades equimolares de K4Fe(CN)6 y K3Fe(CN)6: Pesar de 1.4080 g K4Fe(CN)6.3H2O, 1.0975 g K3Fe(CN)6 y 7.4557 g KCl, disolver en agua desionizada y aforar a 1 L. Los reactivos deben 74

estar secos antes de su uso, mantenerlos en un desecador una noche. La solucin final debe ser almacenada en un recipiente de polietileno de alta densidad (HDPE) oscuro que no permita el paso de la luz, perfectamente tapa- do, refrigerado a 4C. Se conserva hasta seis meses. Se pueden emplear soluciones comerciales que se reconstituyen antes de su uso. 3) Agua regia. Mezcle un volumen de cido ntrico concentrado (HNO3, sp gr 1.42) con tres volmenes de cido clorhdrico (HCl, sp gr 1.18). 4) Detergente libre de fosfatos. Nota: Algunas guas recomiendan la solucin estndar redox de quinhidrona. Se prefiere la ZoBell debido a que es ms estable a temperaturas mayores a 30C y a que su dependencia con la temperatura no est tan bien definida como en la solucin ZoBell. 3.22.7. Procedimiento A.1 Preparacin de la muestra en laboratorio. Para la determinacin del potencial redox en pruebas de biodegradacin o tratabilidad en laboratorio, en los cuales no sea factible la toma de muestras, se puede introducir el electrodo directamente en el sistema (suelo), extremando cuidados de limpieza. En el caso de muestras anaerobias, se debe realizar el anlisis en una campana anaerobia para evitar la penetracin de oxgeno. Si es posible tomar una muestra del suelo o lodo, se recomienda verterlo en un vial de 40 ml de boca ligeramente ms ancha que el electrodo, para reducir el volumen de la muestra. Por ltimo, si el poco volumen de muestra no permite la inmersin del electrodo se puede adicionar agua (recientemente hervida pero enfriada a temperatura ambiente para eliminar el oxgeno) hasta desplazar todo el aire y agitar el vial para dispersar el suelo, con ayuda opcional de perlas de vidrio (ZoBell, 1946). Las muestras deben estar siempre saturadas de agua, por lo que se recomienda 75

este ltimo procedimiento si la muestra no est totalmente hmeda. A.2 Preparacin de la muestra en campo. 1) De acuerdo con el diseo del muestreo se pueden realizar las siguientes adecuaciones para los distintos tipos de muestreos: a) Superficial: Se introduce el electrodo en el nivel de superficie (Patrick, 996). b) In situ. Se hace un agujero en el suelo con una profundidad adecua- da para el electrodo, dejando 2 o 3 cm de menor profundidad para introducir el electrodo (ISO, 2002). c) Ncleo o muestra de suelo. Se submuestrean 10 g de suelo y se depositan en un vial cerrado para evitar la influencia del oxgeno. Se adiciona agua (recientemente hervida pero a temperatura ambiente para eliminar el oxgeno), hasta desplazar todo el aire y se agita el vial para dispersar el suelo. Se pueden emplear perlas de vidrio (ZoBell, 1946). En caso de suelos en los que se dificulta la humectacin por la "repelencia al agua" por hidrocarburos, por el alto contenido de arcilla o por el contenido de otros residuos, se recomienda pesar 10 g de suelo en el vial, adicionar 20 ml de agua y medir el potencial redox (NRES 381, 2002). La preparacin es semejante al procedimiento para medir pH (US EPA 9045D, 2004), se recomienda al menos saturar el suelo (Brown, 1934). Este ltimo procedimiento permite evaluar el potencial redox en muestras de suelo, a distintas profundidades provenientes de ncleos inalterados, para caracterizar la contaminacin a travs de muestreadores tipo nucleadores, penetrmetros y tubos Shelby. Se recomienda la determina- cin en campo inmediatamente despus de recuperar el ncleo y con anterioridad a su homogeneizacin. B. 1 Cuantificacin. 1) Introducir el electrodo verificando que est en contacto ntimo 76

con el suelo. Esperar a que se alcance un equilibrio trmico y registrar los milivolts y la temperatura inicial1. 2)Esperar a que se estabilice la lectura hasta +/- 5 mV. La estabilizacin puede ocurrir hasta 30 minutos despus; tomar la lectura. Calibracin diaria. A diferencia de los sistemas pH, los electrodos de potencial de xido reduccin (ORP) no pueden ser estandarizados con amortiguadores (buffers). Incluso los equipos ORP son muy sensibles a interferencias, por lo que su calibracin debe ser ms continua. 1) Encender el equipo y esperar a que se estabilice de acuerdo con las recomendaciones del fabricante. Verificar, el contenido de la solucin de inmersin de referencia (KCl), al menos una pulgada por arriba del nivel en que se tomar la lectura. Agitar el electrodo para remover burbujas especificaciones del fabricante. 1Esta lectura sirve slo como referencia para verificar el buen funcionamiento del equipo. 2) Enjuagar el electrodo y el termmetro con agua desionizada y secar- los con un papel suave. 3) Verter la solucin ZoBell, introducir el electrodo y el termmetro y registrar la temperatura y el potencial despus de 15 a 30 minutos de estabilizacin (+/- 5 mV). 4) Enjuagar el electrodo y el termmetro con agua desionizada y secarlos con un papel suave. Se recomienda conservar la solucin ZoBell para futuras verificaciones. y reemplazar la solucin de ser necesario, de acuerdo con las

Nota: En caso de observar una respuesta dudosa o se considere 77

adecuado, limpiar el electrodo con detergente y un cepillo de dientes. Sumergir en agua regia caliente (70C) por un minuto, no ms tiempo porque el agua regia disuelve el metal noble y genera respuestas errticas. Enjuagar el electrodo en agua varias horas antes de usarlo (verificar las recomendaciones del fabricante). Clculo del potencial xido reduccin con respecto al

hidrgeno (Eh)

Eh = E medido + E ref. Eh E ref = potencial relativo al electrodo de hidrgeno = potencial redox de referencia.

(mV). E medido = potencial redox medido en milivolts.

El potencial redox de referencia (E ref) se obtiene de acuerdo con la tabla 3.14. Se debe considerar el tipo de electrodo de referencia (orion, calomelano o Ag/AgCl); la concentracin de la solucin de inmersin de referencia especificada de KCl; y la temperatura. En caso de estar evaluando el buen funcionamiento del equipo y del electrodo con la solucin de referencia ZoBell, se puede comparar el valor Eh calculado con la siguiente compensacin de la temperatura. La diferencia entre el valor observado y el de la tabla 4.15 no debe ser mayor que 5 mV; en caso contrario considerar la limpieza del electrodo. Tabla 3.14 Potencial estndar de media celda de algunos electrodos de referencia seleccionados en funcin de la temperatura y la concentracin de la solucin de referencia de KCl.

78

Tabla 3.15 Potencial relativo al electrodo de hidrgeno de la solucin ZoBell en funcin de la temperatura.

Reproducibilidad No es posible alcanzar reproducibilidad de milivolts en sistemas tan complejos como los suelos, lodos y sedimentos. La fluctuacin de Eh en los primeros 5 a 10 minutos despus de la insercin de los electrodos se debe a un fenmeno de equilibrio; sin embargo, en lodos y suelos que con- tienen materia orgnica, organismos o enzimas, estos no permiten que se alcance el equilibrio. Se ha observado que en 30 minutos las lecturas son estables, pero ms de 120 minutos despus se puede registrar actividad bacteriana que evita que la reaccin redox sea reversible (ZoBell, 1946). Este 79

efecto

puede en en de de de

presentarse corto muestras reactores pruebas biodegradabilidad o tratabilidad. Interpretacin

un tiempo ms

La escala de Eh no presenta lmites tericos ni neutralidad; sin embargo, se observa que el potencial redox es cero (Eh = 0) para un electrodo de hidrgeno normal estndar (H2, 1 atm, 25C y pH = 0). Tambin como referencia se establecen los lmites de reduccin a 410 mV para el caso de hidrgeno (pH = 7) y oxidado a +810 mV para oxgeno (pH = 7), aun- que pueden existir sistemas con agentes ms oxidantes o reductores. Algunos aceptores de electrones para microorganismos, con respecto a los potenciales redox, se muestran en la tabla 4.16.

En el caso de suelos contaminados con metales pesados (Al, As, Ba Cd, Cr, Cu, Fe, Hg, Ni, Pb, Se, V y Zn), el estado redox altera su 80

solubilidad, movilidad y por ende su efecto txico, variando para cada metal. Los solventes clorados modifican el potencial redox del suelo, hasta condiciones reductoras que favorecen su biodegradacin. Las determinaciones en experimentos en laboratorio permiten dar seguimiento de procesos y para el caso de determinaciones en campo, se prefiere el procedimiento en el sitio. Debido a la naturaleza compleja del suelo y a que varios sistemas biolgicos no estn en equilibrio, as como a los cambios puntuales en el suelo, se recomienda la interpretacin de los Eh junto con otras determinaciones, como la cuantificacin directa de los principales aceptores de electrones, e interpretar los resultados comparndolos con la informacin del sitio, especialmente los controles (US EPA 600/R-02, 2002). Determinacin de textura (tamao de las partculas de los suelos) Introduccin La textura del suelo es la proporcin relativa por tamaos de partculas de arena, limo y arcilla; las cuales al combinarse permiten categorizar al suelo en una de las 12 clases texturales. Mtodo La determinacin del tamao de partculas del suelo puede realizarse entre otros mtodos por el procedimiento de la pipeta. Interferencias En el caso de suelos contaminados con hidrocarburos, si no se realiza una buena eliminacin de la materia orgnica (que incluye a los hidrocarburos), sta puede interferir con la determinacin. Principio y aplicacin 81

El mtodo de la pipeta es un procedimiento de muestreo directo que consiste en tomar una submuestra (alcuota) de una suspensin de suelo en agua, donde se est llevando a cabo un proceso de sedimentacin, determinando el tipo de partcula en funcin de su velocidad de sedimentacin. La submuestra es tomada a una profundidad h y a un tiempo t, en el que todas las partculas con dimetro mayor o igual que 0.002 mm han sedimentado, tenindose en las alcuotas nicamente partculas pertenecientes a la fraccin arcillosa. El mtodo se basa en la Ley de Stokes. Material y equipo Hexametafosfato de sodio 1 N. Agua destilada. Agua oxigenada al 6%. Pipeta lowy. Botellas de 250 ml. Tamices de 300 mallas. Botes de aluminio. Cpsulas de porcelana. Estufa de aire forzado. Suelo sin materia orgnica. Agitador elctrico. Agitador de vidrio. Plancha elctrica graduable. Procedimiento Pretratamiento de la muestra, digestin de la materia orgnica (m.o.). 1) Tomar 100 g de suelo seco, tamizarlo a travs de una malla de 2 mm y colocarlo en un vaso de precipitado de 1 L, agregar agua 82

destilada hasta cubrir el suelo. 2) Adicionar 10 ml de agua oxigenada al 6% y con el agitador de vidrio revolver durante 10 minutos. 3) Agregar otros 10 ml de agua oxigenada y observar si se da una reaccin violenta con produccin de espuma; si esto sucede agregar 10 ml de agua oxigenada cada 15 minutos, hasta que no se produzca espuma. 4) Colocar el vaso en la parrilla o plancha elctrica ubicada dentro de la campana de extraccin, y calentar hasta 90C. 5) Verter 10 ml ms de agua oxigenada y observar la intensidad de la reaccin. Si la reaccin es violenta (mucha espuma) aadir una dosis ms de 10 ml de agua oxigenada hasta que no se forme espuma. 6) Despus de la ltima adicin de agua oxigenada, continuar calentando para eliminar el posible exceso de agua oxigenada. Se recomienda un tiempo mnimo de 45 minutos. 7) Pasar el suelo a un recipiente de aluminio, usando agua destilada si es necesario. 8) Introducir el recipiente a la estufa para secar a 105C hasta tener peso constante. 9) Vaciar la muestra en un mortero, moler y tamizar a travs de una malla de 2 mm. Determinacin de la textura 1) Pesar 5 g de suelo seco, sin materia orgnica, molerlo y posteriormente tamizarlo a travs de una malla de < 2 mm. 2) Colocar la muestra en una botella de 250 ml. 3) Agregar a la botella con suelo 10 ml del dispersante hexametafosfato de sodio. 4) Llevar a aproximadamente 50 ml con agua destilada. 5) Agitar la botella con suelo, agua y dispersante por 5 minutos, y dejar reposar por 12 horas. 6) Despus del periodo del reposo agitar la suspensin por 30 minutos con un agitador elctrico. 83

7) Pasar la suspensin por el tamiz de 300 mallas, recogiendo el filtrado en cpsulas de porcelana. Usar la menor cantidad de agua para separar la arena que quedar en el tamiz; la arcilla y el limo quedarn en la suspensin. 8) Pasar el filtrado a la botella de 250 ml y agregar agua destilada hasta que se tenga un volumen de 200 ml. 9) Agitar la suspensin durante 2 minutos y dejar reposar por 1 hora 21 minutos 40 segundos, despus se toma una alcuota de 25 ml a la profundidad de 2 cm. 10) Colocar la alcuota de 25 ml en un bote de aluminio previamente pesado y secar en estufa a 105C hasta peso constante. Poner la muestra a enfriar en el desecador y pesar. 11) Las arenas retenidas en el tamiz de 300 mallas pasarlas a un recipiente de aluminio previamente pesado y poner a secar en la estufa a 105C hasta peso constante.

84

Determinacin de la capacidad de intercambio catinico y bases intercambiables Introduccin Todas las molculas, en mayor o menor medida, tienen minsculas car- gas elctrico, positivo y/o negativas. Por ello, en el suelo actan como pequeos imanes, formando entre ellas estructuras que pueden ser muy simples, como la atraccin entre una partcula de arcilla cargada negativamente y una partcula de un fertilizante cargada positivamente; o muy complejas, como cuando hay la materia orgnica, con infinidad de car- gas elctricas de ambos signos. La CIC o capacidad de intercambio catinico es la capacidad del suelo para retener e intercambiar diferentes elementos minerales. Esta capacidad aumenta notablemente con la presencia de materia orgnica, y podra decirse que es la base de lo que llamamos fertilidad del suelo. Catin, in cargado positivamente (NH4+, K+, Ca2+, Fe2+, Na+, H+, Al3+) o anin, in cargado negativamente (NO3-, PO42-, SO42-, etc...).

La CIC depende de la textura del suelo y del contenido de materia orgnica. En general, entre ms arcilla y materia orgnica en el suelo, la capacidad de intercambio es mayor. El contenido de arcilla es importante, debido a que estas pequeas partculas tienen una relacin alta de rea superficial a volumen. Los diferentes tipos de 85

arcillas presentan diferentes valores de la CIC. Las esmectitas tienen una mayor capacidad de intercambio catinico (80-100 miliquivalentes 100 g-1), seguida por ilitas (15-40 meq 100 g-1) y caolinitas (3-15 meq 100 g-1).

Algunos ejemplos de valores de capacidad de intercambio catinico para diferentes texturas de suelo se mencionan a continuacin:

En general, en la mayora de los suelos la CIC aumenta cuando se pre- sentan incrementos en el pH. Mtodo Determinacin de la capacidad de intercambio catinico (CIC) y bases intercambiables (Ca2+, Mg2+, Na+ y K+) de los suelos, empleando ace tato de amonio. Principio y aplicacin El mtodo para la determinacin consiste en la saturacin de la superficie de intercambio con un catin ndice, el in amonio; lavado del exceso de saturante con alcohol; desplazamiento del catin ndice con potasio y determinacin del amonio mediante destilacin. El amonio se emplea como catin ndice debido a su fcil determinacin, poca presencia en los suelos y porque no precipita al entrar en contacto con el suelo. La concentracin normal que se usa asegura una completa saturacin de la superficie de intercambio, y como est amortiguada a pH 7.0, se logra mantener 86

un cierto valor de pH. El lavado con alcohol pretende desplazar el exceso de saturante y minimizar la prdida del amonio adsorbido. Material y equipo Tubos de centrfuga de 50 ml con fondo redondo. Agitador mecnico. Centrfuga con capacidad para 8 o 16 tubos. Matraces volumtricos de 100 ml. Matraces Erlenmeyer de 125 ml. Aparato de destilacin. Soluciones Los reactivos que a continuacin se mencionan deben ser grado analtico a menos que se indique otra cosa. Cuando se hable de agua se debe entender agua desionizada o destilada. Las soluciones para este anlisis deben almacenarse en recipientes de polietileno. 1) Solucin de acetato de amonio 1.0 N, pH 7.0. Diluir 57 ml de cido actico glacial (99.5%) con agua a un volumen de aproximadamente 500 ml. Agregar 60 ml de hidrxido de amonio concentrado, diluir con agua a un volumen de 990 ml, mezclar, ajustar a pH 7.0 y diluir a un volumen final de 1 L con agua. Una alternativa consiste en pesar y disolver 77 g de acetato de amonio (NH4C2H3O2) en 900 ml de agua y de ser necesario ajustar a pH 7.0 y entonces completar a 1 L con agua. 2) Alcohol etlico grado industrial. 3) Solucin de cloruro de sodio al 10%. Pesar 100 g de cloruro de sodio grado analtico y disolver en 1 L de agua, empleando un matraz aforado. 4) Solucin de cloruro de amonio 1N. Pesar 53.50 g de NH4Cl y disolver en agua. Ajustar a pH 7.0 con hidrxido de amonio y diluir a 1 L empleando un matraz aforado. 5) Solucin de cloruro de amonio 0.25N. Pesar 13.38 g de NH4Cl y 87

disolver en agua. Ajustar a pH 7.0 con hidrxido de amonio y diluir a 1 L empleando un matraz aforado. 6) Indicador mixto. Mezclar volmenes iguales de rojo de metilo al0.66% y de verde de bromocresol al 0.99%. Ambos disueltos en etanol al 95%. 7) Solucin de cido brico. Usar H 3BO3 al 2% en agua destilada que contenga 10 ml del indicador por litro. 8) Acido clorhdrico 0.01 N, valorado. 9) Hidrxido de sodio al 40%. Disolver 400 g de NaOH en agua destila- da y llevar a 1 000 ml. 10) Nitrato de plata 0.1 N. Disolver 16.98 g de AgNO 3 en agua destila- da y llevar a 1 000 ml. 11) Solucin de lantano acidificada. Pesar 7.742 g de La(NO 3)6H2O en un matraz volumtrico de 250 ml con agua destilada aadir 17.5 ml de HNO3 concentrado y aforar. 12) Solucin diluida de lantano acidificada. Tomar 50 ml de la solucin de lantano acidificada en un matraz volumtrico de 500 ml y aforar con agua destilada. 13) Solucin de cloruro de cesio acidificada. Disolver 11.12 g de CsCl y 250 ml de Al(NO3)39H2O en 500 ml de agua en un matraz volumtrico de 1 000 ml, aadir 20 ml de HNO3 2 M y aforar con agua. 14) Solucin de cido ntrico 2 M. Diluir 7 ml de HNO 3 concentrado en agua, aforar a 100 ml en un matraz volumtrico.

Procedimiento 1) Pesar 5 g de suelo secado al aire y tamizado por malla de abertura de 2 mm y transferirlo a un tubo de centrfuga de 50 ml. Agregar 33 ml de solucin de acetato de amonio. Tapar y agitar en posicin 88

horizontal durante 10 minutos. Luego, centrifugar hasta que el lquido sobrenadante centrifugando a 2 500 rpm. Decantar el lquido en un matraz de 100 ml y repetir la extraccin otras dos veces; aforar con acetato de amonio y guardarlo para la posterior determinacin de las bases intercambiables (solucin A). 2) Agregar 30 ml de la solucin de cloruro de amonio 1 N; agitar duran- te 10 minutos y luego centrifugar hasta que el lquido sobrenadante est claro y desecharlo. Adicionar 30 ml de la solucin de cloruro de amonio 0.25 N, agitar durante 10 minutos, centrifugar y desechar el sobrenadante. Lavar la muestra con porciones de alcohol de 30 ml agitando durante 10 minutos, centrifugar y eliminar el sobrenadante cada vez. El lavado termina cuando la prueba de cloruros en el decantado es negativa. 3) Prueba de cloruros. Pipetear 10 ml del sobrenadante alcohlico en un tubo de ensaye y agregar 4 o 5 gotas de nitrato de plata, si se observa un ligero precipitado blanco, la reaccin es positiva y se debe continuar el lavado hasta que la prueba de cloruros sea negativa. 4) Reemplazar el amonio adsorbido con tres porciones de 33 ml de cloruro de sodio al 10%, agitando durante 10 minutos y centrifugando cada vez. Decantar cada reemplazo en un matraz volumtrico de 100 ml y completar al volumen. Determinar el amonio a partir de una alcuota de 10 ml, la cual se transfiere a un matraz Kjeldahl de 300 ml, se le agregan aproximadamente 8 ml de NaOH al 40% y se conecta al aparato de destilacin micro kjeldahl. Recoger el producto de la destilacin en un matraz Erlenmeyer que contenga 10 ml de mezcla de indicador y cido brico. Determinar por titulacin con HCl 0.01N. est claro. Esto se logra fcilmente

89

Determinacin de Ca y Mg intercambiables 1) Pipetear 0.5 ml de la solucin A en un tubo de ensaye. 2) Aadir 9.5 ml de la solucin diluida de lantano y mezclar. 3) Medir la concentracin de Ca y Mg en las series estndar, el blanco y la muestra por espectrofotometra de absorcin atmica a una longitud de onda de 422.7 y 285.2 nm, respectivamente, usando una flama de aire-acetileno. Clculos

Donde: 90

a = concentracin de Ca o Mg medida en la muestra (mg L-1). b = concentracin de Ca o Mg medida en el blanco (mg L-1). w= peso del suelo seco (g). Determinacin de Na y K intercambiables 1) Pipetear 1.0 ml de la solucin A en un tubo de ensaye. 2) Aadir 1.0 ml de la solucin de cloruro de cesio acidificada. 3) Aadir 8 ml de agua y mezclar. 4) Medir la concentracin de Na y K en las muestras, el blanco y las series estndar por espectrofotometra de emisin de flama.

Clculos

Donde: a = concentracin de Na o K medida en la muestra (mg L-1). b = concentracin de Na o K medida en el blanco (mg L-1). w= peso del suelo seco (g). Comentarios La CIC no deber expresarse como meq/100 g, ya que las unidades aceptadas por el Sistema Internacional (SI) son cmol(+) kg-1, pero para que los valores de la CIC sean familiares se dividirn entre 100. Por lo tanto, la CIC es expresada como cmol (+) kg-1. El signo (+) es aadido para indicar que la CIC deber ser expresada como moles de cationes monovalentes; por lo tanto, los iones divalentes cuentan el doble. 91

Interpretacin de resultados de la capacidad de intercambio catinico (CIC) La capacidad de intercambio catinico (CIC) es una propiedad qumica a partir de la cual es posible inferir acerca del tipo de arcilla presente, de la magnitud de la reserva nutrimental y del grado de intemperismo de los suelos. El resultado numrico de la determinacin sirve adems como base en el clculo del porcentaje de saturacin de bases, que es un dato amplia- mente usado en los estudios de fertilidad. Para poder inferir sobre los minerales arcillosos presentes en los suelos hay que considerar la medicin hecha por Grim (1953) en los silicatos laminares del tipo 1:1 y 2:1, empleando acetato de amonio 1 N, pH 7.0. Con respecto al grado de intemperismo, se considera que un valor de CIC inferior que 10 cmol (+) kg-1 de suelo en un horizonte B con ms de 30 a 40% de arcilla indica tanto la ausencia de minerales primarios intemperizables, como la acumulacin de minerales secundarios del grupo caolintico y xidos libres. Por lo que respecta a la reserva nutrimental se considera que sta es abundante cuando la CIC es mayor que 25 cmol (+) kg-1 de suelo. La fertilidad de los suelos se puede clasificar de acuerdo con los resultados analticos obtenidos con mtodos apropiados tanto en suelos cidos como alcalinos (tabla 4.17).

Resultados: baja en ambos casos 12 Los niveles de calcio, magnesio y potasio (Ca, Mg y K) obtenidos de 92

los anlisis de las bases intercambiables pueden interpretarse como se indica en la tabla 4.18.

Determinacin de la capacidad de intercambio catinico en suelos cidos y calcreos y bases intercambiables Mtodo La determinacin de la capacidad de intercambio catinico en suelos ci- dos y calcreos y bases intercambiables se realizar a travs del mtodo AS-13, con tiourea de plata. Principio y aplicacin Mtodo para determinar la capacidad de intercambio catinico (CIC) y bases intercambiables (Ca, Mg, Na y K) de los suelos cidos y calcreos, empleando tiourea de plata (Ag TU) 0.01 M como solucin saturante. El procedimiento consiste en equilibrar una muestra de suelos con una solucin de Ag TU 0.01M. La afinidad de este reactivo por las cargas negativas de las partculas del suelo permite una completa saturacin, aun cuando el suelo contenga relativamente altas concentraciones de otras sales. Esto requiere de una sola etapa, o sea la extraccin y centri- fugacin para que el intercambio sea completo. Por lo tanto, el sobrena- dante contendr todos los cationes intercambiables. Material y equipo Material comn de laboratorio. 93

 Tubos de centrfuga de polipropileno de 50 ml de capacidad con tapn de rosca. Agitador mecnico de agitacin recproca. Centrfuga. Espectrofotmetro de absorcin atmica. Soluciones Los reactivos que a continuacin se mencionan deben ser grado analtico cuando se hable de agua se debe entender agua desionizada o destilada. Las soluciones para este anlisis deben almacenarse en recipientes de polietileno. 1) Solucin de nitrato de plata 0.04M. Disolver 3.4 g de AgNO3 en 500 ml de agua. 2) Solucin de tiourea de plata 0.01M. Disolver 15.0 g de tiourea en un litro de agua y filtrar a travs de papel Whatman 42 o su equivalente, recibiendo el filtrado de un frasco volumtrico de 2 000 ml. Agregar mientras mezcla la solucin de nitrato de plata 0.04 M y aforar con agua. Almacenar en la oscuridad. 3) Solucin de tiourea 0.1 M. Disolver 7.5 g de tiourea en un litro de agua y filtrar a travs de papel Whatman 42 o su equivalente. 4) Solucin estndar de Ag de 500 mg L-1. Disolver 0.3937 g de AgNO3 en agua en un matraz volumtrico de 500 ml y aforar el volumen con agua. Almacenar en la oscuridad. 5) Solucin estndar diluida de Ag de 100 mg L-1. Pipetear 20 ml de la solucin estndar en un matraz volumtrico de 100 ml y diluir al volumen con agua. Almacenar en condiciones de oscuridad. 6) Solucin de cido ntrico 1 M. Diluir 70 ml de HNO 3 concentrado en agua aforando a 1 000 ml en un matraz volumtrico. 7) Series estndar. Pipetear en matraces volumtricos de 100 ml: 0, 2.0, 4.0, 6.0, 8.0 ml, respectivamente, de la solucin diluida estndar 94

y agregar 0.5 ml de la solucin de tiourea 0.1 M; adicionar 10 ml de la solucin de HNO3 1 M a cada uno, y aforar el volumen con agua. La concentracin de Ag en esta serie estndar es de 0, 2, 4, 6, 8 mg L-1. 8) Solucin de lantano acidificada. Pesar 7.742 g de La(NO3)3 6H2O en un matraz volumtrico de 250 ml, aadir agua y 17.5 ml de HNO 3 concentrado, aforar con agua. 9) Solucin estndar de 1 000 mg L -1 de Ca. Pesar 2.5 g de CaCO3 en un vaso de precipitado de 250 ml, aadir aproximadamente 100 ml de agua y 12.5 ml de HCl 4 M; hervir para eliminar el CO 2 (si permanecen partculas de CaCO3 aadir 2 ml ms de HCl 4 M). Enfriar y transferir la solucin a un matraz volumtrico de un litro y aforar con agua. 10) Solucin estndar de 100 mg L-1 de Mg. Pesar 1.013 g de MgSO47H2O en un matraz volumtrico de un litro y aforar con agua. 11) Solucin estndar mezclada, 100 mg L-1 de Ca y 10 mg L-1 de Mg tomar 10 ml de la solucin estndar de 1 000 mg L-1 de Ca y 10 ml de la solucin estndar de 100 mg L-1 de Mg en un matraz volumtrico de 100 ml y aforar con agua. 12) Solucin diluida de lantano acidificada. Tomar 50 ml de la solucin de lantano acidificada en un matraz volumtrico de 500 ml y aforar con agua. 13) Series estndar. Pipetear 0, 2.0, 3.0, 4.0 y 5.0 ml, respectivamente, de la solucin estndar mezclada en seis matraces volumtricos de 100 ml; agregar 5.0 ml de tiourea 0.1 M y 9.5 ml de la solucin diluida de lan- tano y aforar. La concentracin de las series estndar es de 0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4 y 0.5 mg L-1 de Mg y 0, 1, 2, 3, 4 y 5 mg L-1 de Ca y Mg. 14) Solucin de cloruro de cesio acidificada. Disolver 11.12 g de CsCl y 95

250 g de Al(NO3)3 9H2O en aproximadamente 500 ml de agua en un matraz volumtrico de 1 000 ml, aadir 20 ml de HNO3 2M y aforar con agua. 15) Solucin de cido ntrico 2 M. Diluir 7 ml de HNO 3 concentrado en agua aforando a 100 ml en un matraz volumtrico. 16) Solucin estndar de potasio de 1 000 mg L-1 y de sodio de 400 mg L-1. Disolver 1.9068 g de KCl y 1.0168 g NaCl en agua en un matraz volu- mtrico de 1 000 ml y aforar con agua. 17) Solucin estndar diluida de potasio de 100 mg L -1 y de sodio de 40 mg L-1. Pipetear 25 ml de la solucin estndar en un matraz volumtrico de 250 ml, aforar con agua. 18) Serie estndar de Na y K. Pipetear 0, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0 y 5.0 ml de la solucin estndar diluida en seis matraces volumtricos de 100 ml, respectivamente, aadir un poco de agua, 10 ml de tiourea 0.1 M y 9 ml de la solucin de CsCl, y aforar con agua y mezclar. Esta serie estn- dar tiene concentraciones de 0, 1, 2, 3, 4 y 5 mg L-1 de K y 0,0.4, 0.8, 1.2, 1.6 y 2 mg L-1 de Na.

Procedimiento para determinar CIC 1) Pesar 1 g de muestra pasada por un tamiz de 0.5 mm de abertura. 2) Pasarlo a un tubo de centrfuga de polietileno de 50 ml. 3) Aadir 30 ml de la solucin de tiourea de plata 0.01 M. 4) Preparar un blanco, es decir, a un tubo de centrfuga sin suelo, aadir 30 ml de la solucin de tiourea de plata 0.01 M. 5) Tapar y agitar en posicin horizontal durante cuatro horas. 6) Centrifugar a 2 500 rpm durante 10 minutos. 7) Filtrar a travs de papel filtro No. 41 o equivalente (solucin A). 8) Pipetear 0.5 ml de esta solucin a matraces volumtricos de 100 ml, diluir aproximadamente a 50 ml con agua, aadir 10 ml de HNO3 1 M mezclar y aforar con agua. 9) Medir la concentracin de Ag en las series estndar, la muestra y el 96

blanco por espectrofotometra de absorcin atmica a 328.1 nm de longitud de onda, usando una flama de aire-acetileno. Clculos

Donde: a = concentracin de Ag medida en la muestra (mg L-1). b = concentracin de Ag medida en el blanco (mg L-1). w= peso de suelo seco (g). Determinacin de Ca y Mg intercambiables 1) Pipetear 0.5 ml de la solucin A en un tubo de ensaye. 2) Aadir 9.5 ml de la solucin diluida de lantano y mezclar. 3) Medir por espectrofotometra de absorcin atmica, la concentracin de Ca y Mg en las series estndar, el blanco y la muestra a una longi- tud de onda de 422.7 y 285.2 nm, respectivamente, usando una flama de aire-acetileno. Clculos

Donde: a = concentracin de Ca o Mg medida en la muestra (mg L-1). b = concentracin de Ca o Mg medida en el blanco (mg L-1). w = peso del suelo seco (g). Determinacin de Na y K intercambiables 97

1) Pipetear 1.0 ml de la solucin A en un tubo de ensaye. 2) Aadir 1.0 ml de la solucin de cloruro de cesio acidificada. 3) Aadir 8 ml de agua y mezclar. 4) Medir por espectrofotometra de emisin de flama la concentracin de Na y K en las muestras el blanco y las series estndar. Clculos

Donde: a = concentracin de Na o K medida en la muestra (mg L-1). b = concentracin de Na o K medida en el blanco (mg L-1). w = peso del suelo seco (g). Comentarios La CIC no deber expresarse como meq/100 g, ya que las unidades preferidas por el SI son mol kg-1, pero para que los valores de la CIC sean familiares se dividir entre 100. Por lo tanto, la CIC es expresada como cmol kg-1. El signo (+) es aadido para indicar que la CIC deber ser expresada como moles de cationes monovalentes; por lo tanto, los iones divalentes cuentan el doble. Determinacin de la acidez y el aluminio intercambiables Introduccin El trmino pH define la relativa condicin bsica o cida de una substancia. La escala del pH cubre un rango de 0 a 14. Un valor de pH+ de 7.0 es neutro. Los valores por debajo de 7.0 son cidos. Aquellos que estn sobre 7.0 son bsicos. Cuando un suelo se satura con H+ acta como un cido dbil. Mientras mayor sea el H+ 98

retenido por el complejo de inter- cambio, mayor ser la acidez del suelo. El aluminio (Al) tambin acta como un agente acidificante y activa el H+.

El pH del suelo mide la actividad de los iones H+ y se expresa en trminos logartmicos. El significado prctico de la expresin logartmica del pH es que cada cambio de una unidad en pH representa un cambio de una magnitud 10 veces mayor en la acidez o alcalinidad del suelo. As, por ejemplo, un suelo con pH de 6.0 tiene 10 veces ms actividad de iones H+ que uno de pH 7.0. La necesidad de cal se incrementa rpidamente a medida que el pH del suelo se reduce. En el pH del suelo tienen influencia varios factores, entre los que se incluyen: material de origen y profundidad del suelo, precipitacin, inundacin, vegetacin natural, cultivos sembrados y fertilizacin nitrogenada. En los suelos rojos tropicales los minerales arcillosos son estables hasta un pH tan bajo como 5.0. El Al y el Fe se encuentran atrapados dentro de las estructuras de las arcillas; se tornan txicos para la planta, sola- mente cuando la caolinita y los xidos e hidrxidos se disuelven; es decir, cuando el pH llega a un rango entre 5.0 y 5.3, liberando Al a la solucin del suelo. En estos casos la toxicidad del Al puede corregirse si se encala el suelo hasta llegar a un pH de 5.5 a 6.0, lo cual logra la precipitacin del Al txico como hidrxido de aluminio Al(OH)3, y causa al mismo tiempo un incremento apreciable en la CIC (suelos de carga variable). La toxicidad del Al es probablemente el factor que ms limita el crecimiento de las plantas en suelos fuertemente cidos (pH menor

99

que 5.5 en la mayora de los suelos). El H + solamente es txico a un pH menor que 4.2. Como se mencion anteriormente, el pH del suelo es una expresin de la actividad del H+. La principal fuente de H + en la mayora de los sue- los de pH menor que 5.5 es la reaccin de Al con el agua, como se demuestra en la siguiente ecuacin: Al+3 + H2O Al (OH)+2 + H+.

Esta reaccin libera H+ (acidifica) y a su vez incrementa la cantidad de Al+3 listo para reaccionar nuevamente.

A medida que los iones bsicos como Ca +2, Mg+2 y K+ son removidos por la absorcin de las plantas o se pierden por lixiviacin, pueden ser reemplazados por Al+3. Este proceso incrementa la actividad de H+ y por lo tanto reduce el pH del suelo en forma constante. El pH influye en la actividad microbiana del suelo. Las bacterias se desarrollan mejor en pH neutro y los hongos filamentosos en pH cidos; as, la degradacin de hidrocarburos es mejor en condiciones de pH neutro y alcalino que en pH cidos (Maier et al., 1999). Mtodo Determinacin de la acidez y el aluminio intercambiables por el procedimiento de cloruro de potasio. Principio y aplicacin Metodologa para la determinacin de la acidez intercambiable por el mtodo de Barnhisel y Bertsch que utiliza cloruro de potasio. 100

Adems de las bases (Ca, Mg, Na y K) tambin hay una cantidad de acidez que puede ser desplazada del complejo intercambiable del suelo. La cantidad de acidez est en funcin del pH y de la capacidad de intercambio catinico del suelo. En la mayora de los suelos la acidez est compuesta por el H+, el Al3+ y los cidos orgnicos. Material y equipo Material comn de laboratorio. Tubos de polietileno para centrfuga (100 ml). Agitador mecnico de oscilatorio. Centrfuga. Procedimiento 1) Pesar 5 g de suelo en un tubo de polietileno. 2) Adicionar 50 ml de la solucin de KCl 1 M. 3) Tapar el tubo y agitar mecnicamente durante 30 minutos. 4) Destapar los tubos y centrifugar durante 10 minutos a 2 500 rpm. 5) Filtrar el sobrenadante a travs de papel Whatman nmero 42 o su equivalente, recoger el filtrado en un vaso de precipitado de 100 ml. 6)Tomar una alcuota de 40 ml con una pipeta volumtrica, y transvasarla en un matraz Erlenmeyer de 125 ml. 7) Agregar cinco gotas de fenolftalena a 0.5% y titular con hidrxido de sodio 0.1 M valorado, hasta un punto final de rosa permanente. 8) Titular un blanco (igual volumen que muestra, de cloruro de potasio 1 M) de la misma forma. 9) Despus de registrar el gasto de NaOH, agregar 2 ml de fluoruro de potasio 1 M a la misma solucin problema y titular con HCl 0.1 M valorado, hasta la desaparicin del color rosa. 10) Despus de 30 minutos agregar HCl 0.1 M valorado adicional, hasta un punto final claro. Clculos El aluminio e hidrgeno extrados son calculados como sigue: 101

Donde: M = muestra. t = testigo. M = molaridad.

III.-MATERIALES, HERRAMIENTAS, EQUIPOS Y REACTIVOS PARA LABORATORIO QUIMICO-METALURGICO:

Tcnicas y procedimientos para la recoleccin de la informacin: Las tcnicas a ser utilizadas en el presente trabajo de investigacin sern: Observacin: para ello haremos visitas a los centros de molienda de minerales que nos permitirn determinar: cual es la frecuencia de descarga de minerales durante el da; que porcentaje de mineral se pierde en polvos finos; cual es la distancia que recorren estos polvos; que tipo de protectores utilizan los trabajadores; que volumen de mineral se muele mensualmente. Durante este periodo de la investigacin, se tomaron de muestras representativas , las cuales para que sean fiel representante de las condiciones del suelo tanto antes y despus de iniciado las instalaciones de las plantas y el tiempo de funcionamiento de ellas, se tienen que tomar en cuenta, las condiciones atmosfricas del lugar, fundamentalmente la direccin de los 102

vientos; y se ha determinado que los vientos, fundamentalmente corren de oeste a este y de sureste a noroeste, por lo que la muestras tendrn que ser tomadas en ese sentido. TOMA DE MUESTRAS La toma de muestras, que est en funcin primordial a la densidad de muestreo y la amplitud del rea, topografa, cuya representatividad debe estar acorde con la estandarizacin paramtrica, tal como una densidad de muestreo de 1 muestra/km2 puede ser adecuada bajo determinadas circunstancias o catastrfica bajo otras, ya que las variables a considerar son numerosas, como el caso del. Tipo de actividad minera (metlicos?, sulfuros?), duracin de la misma (pocos aos?, dcadas?), Tipo de contaminante asociado (catin?, anin?), caractersticas del medio afectado (suelo?, de qu tipo?, acuferos?) Los puntos de muestreo, que est en funcin a la determinacin del horizonte de suelo para el estudio, la consideracin de puntos que permite obtener la densidad requerida, para considerar la red definitiva de muestreo, sino fuera el caso y la densidad fuera menor de la prevista se han definido los puntos intermedios de los cauces, a intervalos aproximadamente constantes, hasta obtener la densidad requerida. Se han tomado alrededor de 10 muestras segn el universo y poblacin estimados de acuerdo al rea de influencia y arrastre de los polvos, por el viento, muestras que sern posteriormente analizadas fundamentalmente por metales pesados. Preparacin de muestras para anlisis para la marcha analtica de las muestras tomadas del entorno de las Plantas Concentradoras de Najach SAC, Alonso SAC y Poroma SAC, etc., cuyas plantas concentran minerales provenientes de diferentes zonas del pas, principalmente de Ayacucho, Arequipa, Abancay, Apurimac, etc. que en su mayora son minerales cuprferos, con contenidos de plomo, zinc, oro, plata, etc.

103

El anlisis qumico de los mismos tienen en su procedimiento marchas analticas que previamente deben ser preparadas las muestras a tamao de partculas 100% - M100 o en funcin a malla 150 serie ASTM. Dentro de los mtodos analticos para determinar contenidos de metales se siguen volumtricamente por yodometria ion con Acido, para tal fin se prepararon las muestras, siendo reducidos de masa por homogenizado y reduccin por coneo y cuarteo, en nuestro caso fue el mtodo por incrementos, luego sometido a secado en estufa sobre bandejas de acero, luego se pulverizaron a 100 malla 100 serie ASTM que posee nuestra Facultad. El pulverizado se realiz con el pulverizador de anillos de modo que fueron limpiados para evitar la contaminacin de las diferentes muestras con aire a presin con la ayuda de la compresora de aire que cuenta la FIMM y colocados las muestras en sobres de prolipropileno hermticamente cerrado. Para la determinacin de Plomo en las muestras de mineral para la presencia de Plomo. La muestra es disgregada con acido ntrico, adicin de acido sulfrico y generacin de humos blancos por calentamiento. Despus se disuelve las sales solubles con agua posterior filtracin del sulfato de plomo. Disolver el precipitado con una solucin mezclada de acetato de amonio y acido actico, remover el residuo insoluble, regular el pH de la solucin 5.5 a 5.7 y titular la solucin con una solucin estndar de EDTA utilizando como indicador Xylenol Orange.

CONCLUSIONES:
1.- Existen metales pesados componentes de los minerales que se procesan en las plantas situadas en Poroma Nazca, que vienen alterando la composicin natural del suelo. 2.- Existen perdidas por emisin de polvos mayores a 2 % del peso total de mineral tratado por campaa. 3.Es posible la presencia de elementos nocivos, tales como Pb, As, Bi, Sb, Ag, Zn, Hg, Cd, B, Cu, Fe, SiO 2 en los suelos de la zona de influencia, como consecuencia del procesamiento. 104

RECOMENDASIONES:
1. De acuerdo a los resultados obtenidos, existe un ligero grado de contamiminacion de los suelos por lo que se hace necesario un mayor control en los sistemas de trabajo, monitoreo por parte de los entes correspondientes y mayor seguridad por parte de los operadores. 2. Los minerales procesados efectivamente, contienen elementos pesados, como plomo, plata, arsnico y antimonio; esto a pesar que es en pequeo porcentaje, definitivamente afectara la composicin qumica de los suelos del rea de influencia con el transcurrir del tiempo. 3. Como podr notarse por los caractersticos vientos que corren en la zona el porcentaje de prdidas de material particulado en muchos casos supera el 2% por lo que definitivamente las plantas debieran proteger y encapsular el sistema de transporte fundamentalmente las fajas de transmisin del mineral. 4. Como es de conocimiento en la metalurgia los elementos nocivos en concentraciones altas estn considerados el plomo, arsnico, antimonio que en muchos casos estos minerales los contienen ya que en esta zona se procesan minerales que provienen de distintas zonas del pas.

105

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

1.- MANUEL SIERRA ARAGON. Tesis Niveles de Metales pesados y elementos asociados a suelos de la provincia de Almeria, Parametros que los afectan y Riesgos de contaminacin. 2005 2.- OSCAR MEDINA BELTRAN. Apuntes de clase. 3.-DE MINERIA, METALURGIA Y COMERCIO DE METALES - Julio Snchez Gmez 4.- METALURGIA DEL ORO Y LA PLATA - Juan Vargas Gallardo 5.- METALURGIA DEL ORO Y LA PLATA - Ernesto Diez Canseco 6.- FCO. JAVIER DIEZ LZARO Tesis Fitocorreccin de suelos contaminados con metales pesados: Evaluacin de plantas tolerantes y optimizacin del proceso mediante prcticas agronmicas - 2008

Nasca, 18 de octubre de 2011

........................................................ ING. GUSTAVO DVALOS C. DOCENTE AUXILIAR T.C.

........................................................ ING. MIGUEL ALARCN ESPINOZA DOCENTE ASOCIADO T.C.

106

ANEXO:
ENCUESTA HA ESTUDIANTES DE LA FIMM Informacin Datos de actividades de la planta metalrgica. Informes de produccin. Datos de variables operativas y de control de procesos que dependen de los anlisis qumicos. Insumos y sus especificaciones. Normas. Reglamento. Guas.

107