CONTROLE BIOLGICO DE Dolops carvalhoi (CRUSTACEA:BRANCHIURA) EM JUVENIS DE PACU (Piaractus mesopotamicus)

Lara Wichr GENOVEZ 1; Fabiana PILARSKI 1, 3; Rberson SAKABE 1; Maurcio Pires do Amaral MARQUES 1; Flvio Ruas de MORAES 1, 2
RESUMO Este ensaio avaliou a eficincia de juvenis de piauu (Leporinus macrocephalus) no controle de Dolops carvalhoi em pacus (Piaractus mesopotamicus) artificialmente infestados. Trinta pacus foram igualmente distribudos em seis aqurios e aclimatados durante sete dias. Aps esse perodo, os pacus foram artificialmente infestados por Dolops carvalhoi, num total de 20 parasitos por peixe, permanecendo nestas condies durante quatro dias. No quinto dia, quatro aqurios foram acrescidos com cinco piauus por aqurio isentos de parasitos. Durante o perodo aps a adio dos piauus, os peixes foram observados para verificar o nmero de parasitos na superfcie corporal dos pacus e tambm na parede dos aqurios. Aps 24 horas de observaes, nos aqurios onde os piauus foram acrescentados, os nmeros de D. carvalhoi foi significativamente menor que nos aqurios somente com pacus, constatando-se que estes foram predados pelos piauus. Este nmero foi reduzido 15 minutos aps a adio dos piauus chegando eliminao total do parasito da superfcie corporal dos peixes e tambm das paredes dos aqurios aps 24 horas, recomendando a utilizao de alevinos de piauu para controlar branquiros em peixes de outras espcies. Palavras chave: Dolops carvalhoi, Leporinus macrocephalus, Piaractus mesopotamicus, controle biolgico

BIOLOGICAL CONTROL OF Dolops Carvalhoi (CRUSTACEA:BRANCHIURA) IN PACU JUVENILES (Piaractus mesopotamicus)

ABSTRACT This work evaluated piauu juveniles (Leporinus macrocephalus) efficiency on the control of Dolops carvalhoi in pacu (Piaractus mesopotamicus) under artificial infestation. 30 fish were equally distributed in six aquarium and acclimated for seven days. After this period the pacus were unnaturaly infested with 20 D. carvalhoi per fish to four days. On the fifth day, for aquaria were added with five uninfected piauus each and the fish were checked eight times to evaluted the total number of parasites in fish body and aquarium wall. After 24 hours in the aquarium with piauus the total number of Dolops was significant lower than only pacus suggesting that piauu preyed the parasite. The parasite number was reduced 15 minutes after the addition of piauus and after 24 hours, no parasites was found in pacu body and aquarium walls, suggesting that piauu fingerling may be used to branchiurans infestations in other species of fish. Key words: Dolops carvalhoi, Leporinus macrocephalus, Piaractus mesopotamicus, biological control

Artigo Cientfico: Recebido em: 22/08/2006; Aprovado em: 02/08/2007

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Centro de Aqicultura, UNESP, Jaboticabal, SP, Brasil Departamento de Patologia Veterinria, UNESP, Jaboticabal, SP, Brasil 3 Endereo/Address: Universidade Estadual Paulista, Faculdade de Cincias Agrrias e Veterinrias, Centro de Aqicultura Caunesp, Rod. de Acesso Paulo Donato Castellane, km 0,5, CEP: 14884-900, Jaboticabal, SP, Brasil. e-mail: fabianap@caunesp.unesp.br

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INTRODUO Com o avano da piscicultura no Brasil a partir da dcada de 80 comearam a surgir novas tcnicas de criao e tambm alternativas quanto s espcies de peixes a serem criadas como o pacu (Piaractus mesopotamicus) e o piauu (Leporinus macrocephalus). A regio sudeste do Brasil encontra-se em franca expanso, notadamente com o surgimento de pesque-pagues e a possibilidade da criao de peixes em tanques-rede (CECCARELLI et al., 1990; MARTINS et al., 2002). Analisando a situao das perspectivas da produo comercial de pescado no Brasil, destacase o potencial do pas em tornar-se um importante fornecedor de pescado mundial de gua doce, a partir da criao de espcies nativas, tais como o pacu, o qual uma das principais espcies da fauna aqutica brasileira (FONSECA e SILVA, 2004). Caractersticas como rusticidade, crescimento rpido e facilidade na aceitao de rao, bem como potencial para a pesca e carne muito bem aceita pelo mercado consumidor tornaram esta espcie uma das mais importantes para a aqicultura brasileira (CASTAGNOLLI, 1992; CEMIG, 2000). Todavia, a intensificao da produo aqucola contribui a cada ano com a disseminao de vrias doenas em peixes, decorrentes de problemas sanitrios relacionados ao manejo inadequado e ms condies ambientais (ROBERTS e BULLOCK, 1980; PICKERING e RICHARDS, 1980; SCHALCH et al.; 2005). As parasitoses so uma das maiores causas de perdas nas pisciculturas industrial ou esportiva, sendo de maior relevncia no neotrpico, pelas caractersticas climticas pertinentes regio, as quais propiciam sua rpida e constante propagao (THATCHER e BRITES NETO, 1994). Tambm o ambiente aqutico facilita a reproduo, disperso e sobrevivncia dos parasitos (CARVALHO et al., 2003). Dentre as parasitoses, os crustceos exercem papel relevante no nmero de prejuzos econmicos e perdas na piscicultura, provocando srios danos a seus hospedeiros, atravs de aes espoliadoras e traumatizao de tecidos com seus rgos de fixao, favorecendo o aparecimento de infeces secundrias provocadas por fungos e bactrias oportunistas ou indiretamente, atuando como vetores para enfermidades, principalmente as ocasionadas por vrus (OLDEWAGE-AVENANT, 1994, MARTINS,
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1998; MALTA e VARELLA, 2000; EIRAS et al., 2000; CARVALHO et al., 2004). Existem mais de 2590 espcies de crustceos parasitos de peixes. Crustceos da subclasse Branchiura so ectoparasitos pequenos, com 2 a 3 mm de comprimento, facilmente visveis a olho nu e muito conhecido como piolho ou carrapato de peixe. Todas as espcies de branquiros conhecidas pertencem famlia Argulidae e so divididas em trs gneros, Argulus, Dolops e Dipteropeltis. Podem ser encontradas parasitando a superfcie corporal, nadadeiras, boca e brnquias de vrias espcies de peixes selvagens e de criao (KINKELIN et al., 1985; THATCHER, 1991; EIRAS, 1994). Dolops carvalhoi (Lemos de Castro, 1949) foi primeiramente descrito na regio amaznica. Possui baixa especificidade parasitria e pode ser encontrado parasitando tanto espcies de couro como de escamas. Sua respirao realizada atravs de toda superfcie corporal, mas principalmente pelas vias respiratrias situadas nos lbulos da carapaa. Quando fixos sobre os hospedeiros, no cessam os movimentos das patas e flagelos que promovem um fluxo contnuo de gua atravs de seus corpos, facilitando assim as trocas gasosas (MALTA e VARELLA, 1983; ONAKA, 2005). Os crustceos parasitos esto amplamente disseminados pelos criatrios de vrias regies do pas, causando srios prejuzos aos produtores, devido seu aparelho bucal, o qual apresenta maxbulas robustas, dilatadas na base e dotada de forte gancho quitinoso utilizada para fixao, os quais perfuram a pele do hospedeiro e injetam substncias anti-coagulantes, como as citolticas e secrees digestivas para se alimentar de sangue e clulas epiteliais, debilitando o hospedeiro atravs de anemia, degenerao linfoctica ou por infeces secundrias. A superfcie ventral da carapaa e do trax frequentemente provida de espinhos retrteis, utilizados como ferramenta adicional de fixao (THATCHER, 1991). Nos stios de agresso os peixes apresentam hemorragia puntiforme, produo excessiva de muco e, em algumas espcies, pode ser observado hiperpigmentao da pele e focos de necrose (SHIMURA et al., 1983). Quando parasitam a cavidade bucal e branquial diminuem a capacidade respiratria, com a retirada de sangue, destruio dos tecidos, interrupo da circulao sangunea, ocluso dos vasos aferentes,

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formao de cogulos e hipertrofia dos filamentos (LEMOS DE CASTRO, 1950; MALTA e VARELLA, 2000). ndices elevados de parasitismo pelos gneros Argulus sp. e Dolops sp. esto relacionados com alta densidade populacional de peixes e condies de gua inadequadas (TOMEC, 1995; CARVALHO et al.; 2004). O tratamento para enfermidades ocasionadas por crustceos parasitos constitudo basicamente por organofosforados, inseticidas e outras substncias qumicas altamente txicas para os peixes, meio ambiente e seres humanos. Deve-se salientar ainda que at o momento nehuma das drogas utilizadas no tratamento de enfermidades de peixes, pricipalmente para crustceos, possui registro ou permisso para utilizao no ambiente aqutico. A busca por produtos ecologicamente corretos no tratamento de enfermidades ocasionadas por crustceos ou o estudo de espcie de peixes ou parasitas que sejam competidores naturais dos crustceos so alternativas para erradicar a utilizao de produtos qumicos na aquicultura e minimizar o impacto econmico provocado pela enfermidade. Devido escassez de trabalhos relacionados com controle biolgico de parasitos de peixes, pelo menos na literatura que foi possvel compilar, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a eficcia da utilizao de alevinos de piauu (Leporinus macrocephalus) no controle de D. carvalhoi em pacu artificialmente infestados. MATERIAL E MTODOS O ensaio foi conduzido no Laboratrio de Patologia de Organismos Aquticos (LAPOA), do Centro de Aqicultura da Unesp na cidade de Jaboticabal, SP (2114 495S, 4817751W). Foram utilizados 30 pacus ( Piaractus mesopotamicus ) provenientes da mesma desova, oriundos do Centro de Aqicultura da Unesp, com comprimento total mdio de 11,75 2,32 cm e peso mdio de 34,12 4,83 g. Os peixes foram igualmente distribudos aleatoriamente em seis aqurios com capacidade de 60 L, contendo 40 L de gua, em sistema fechado com aerao contnua, sem filtrao, com trocas parciais de gua (25%) a cada trs dias. Antes de serem infestados, os peixes foram mantidos nessas condies durante um perodo de aclimatao, com durao de sete dias. Durante este perodo, os peixes receberam rao comercial com 32% de protena

bruta administrada duas vezes ao dia. Dolops carvalhoi foram obtidos de piauus (L. macrocephalus) adultos naturalmente infestados, oriundos de uma piscicultura. Os parasitos jovens, com aproximadamente 3 mm de dimetro foram separados por meio de raspagem suave com esptula da superfcie corporal dos peixes com altas infestaes numa vasilha com gua rasa, de onde os parasitos foram colhidos com o auxlio de pipeta Pasteur e acondicionados em potes plsticos de 300 mL at serem adicionados aos aqurios experimentais. Aps o perodo de aclimatao, os peixes foram artificialmente parasitados pelo crustceo Dolops carvalhoi de diversos tamanhos, em nmero de 20 parasitos jovens por peixes, ou seja, 100 parasitos por aqurio. Os peixes permaneceram parasitados durante quatro dias. No quinto dia, foram acrescentados em cada aqurio cinco juvenis de piauu com comprimento mdio total de 6,85 1,35 cm e peso mdio de 4,8 2,91g. Os parmetros fsico-qumicos da gua foram aferidos diariamente e mantiveram-se em: temperatura 28,0 1,8C; potencial hidrogeninico 7,6 0,5 oxignio dissolvido 6,24 0,35 mg/L. Durante o perodo aps a adio dos piauus, os peixes foram observados aps 15, 30, 45 e 60 minutos, 12, 17 e 24 horas, a fim de verificar o nmero de parasitos na superfcie corporal dos peixes e na parede dos aqurios. Aps 24 horas da adio dos piauus, os peixes foram avaliados quanto ao ndice de parasitismo pelo crustceo, atravs de exame macroscpico e contagem dos mesmos. Os peixes foram previamente anestesiados por imerso em soluo de 0,1 g/L de benzocana para coleta dos parasitos na superfcie corporal, os quais foram imediatamente fixados em lcool 70% para serem quantificados. O delineamento utilizado foi o inteiramente casualizado em esquema de parcela subdividida, com presena e ausncia de piauus, com oito tempos de coleta e trs repeties. Aps a obteno dos dados, estes foram submetidos anlise de varincia a 1% de probabilidade. Sendo F significativo, realizou-se o teste de Tukey (P<0,05) para comparao das mdias. Os dados que no obtiveram distribuio normal foram transformados em arcsen x/100. As anlises estatsticas foram realizadas pelo sistema SAS 6.01 (SAS INSTITUTE, 1989).
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RESULTADOS E DISCUSSO A anlise estatstica dos valores referentes aos parmetros da gua no revelou diferena entre as variveis no decorrer dos ensaios, estando de acordo com os valores recomendveis para manuteno da homeostase, apresentando-se prprio para ambientes de criao de peixes, segundo o preconizado por BOYD (1990) e SIPABA-TAVARES (1994). Desta forma pode-se inferir que as caractersticas fsicoqumicas da gua dos aqurios no interferiram nos resultados. Durante o processo de infestao dos pacus, estes se mostraram agitados e debatiam-se constantemente contra a parede dos aqurios. Todavia, as patogenias esperadas pela adio dos parasitos no foram expressas, como hemorragias puntiformes e anorexia, em decorrncia do curto perodo de tempo a que os pacus permaneceram em contato com os parasitos e pela eficincia na predao dos mesmos pelos piauus. Dados compilados da literatura demonstram que peixes parasitados por crustceos mostram-se mais agitados, raspam-se freqentemente contra as paredes dos tanques ou substrato. Na superfcie corporal podem ser observadas hemorragias puntiformes, conseqncia da mudana constante de local no mesmo peixe, onde atravs de afiados estiletes, o parasito espolia e suga o sangue, deixando uma leso aberta, a qual pode ser foco de uma subseqente invaso bacteriana e fngica (NOGA, 1996; MARTINS, 1998;

PAVANELLI et al., 2002). H ainda vrios relatos de perda de peso nos hospedeiros e reduo do fator de condio (MARTINS e SOUZA JR, 1995). Especula-se que este parasito tenha sido introduzido em guas desta regio por meio da introduo de matrizes de tambaquis amaznicos nas pisciculturas sem a realizao de medidas sanitrias. A sua ampla ocorrncia na regio sudeste provavelmente deve-se sua grande capacidade de adaptao aos mais variados ambientes, aliados sua baixa especificidade parasitria (ONAKA, 2005). Embora os crustceos sejam parasitos em potencial de peixes, principalmente no Estado de So Paulo, poucos trabalhos foram encontrados na literatura a respeito da interao parasito-hospedeiro e formas de erradicao do mesmo, principalmente em peixes de criao. Os resultados da eficcia do piauu no controle do parasito Dolops carvalhoi em alevinos de pacu esto apresentados na Tabela 1. Atravs de anlise estatstica, pode-se verificar que nos aqurios onde os piauus foram acrescentados, o nmero de D. carvalhoi foi significativamente menor que nos aqurios somente com pacus (Figura 1). Constatou-se tambm que este nmero foi reduzido 15 minutos aps a adio dos piauus chegando quase que a eliminao total do parasito da superfcie corporal dos peixes e tambm da parede dos aqurios (P<0,05) no decorrer das 24 horas de observao (Tabela 2).

Tabela 1. Mdia do nmero de parasitos nos dois tratamentos e da porcentagem de permanncia de parasitos em decorrncia do tempo de atuao dos piauus

Variveis Com Piau Sem Piau 0 15 30 45 60 12 h 17 h 24 h Com Piauu (A) Sem Piauu (B) Interao AxB Desvio Padro CV

Mdias 23,2131,09B 80,5814,47A 100,00a 62,50b 54,33bc 48,83cd 43,50de 40,17def 35,33ef 30,50f

Valor de F 116,75 * * 23,31** 0,00ns 241,99 ** 285,56** 304,54** 246,93** 208,82 ** 220,38** 190,96 * 1477,89** 108,45** 31,61** 5,17 9,96

Letra maiscula: diferena significativa entre os fatores. Letra minscula: diferena significativa para tempo (P< 0,05).

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Nmero de parasitos

100 80 60 40 20 0

P re se na d e p ia uus S o m e nte p a cu

Figura 2. Nmero de Dolops carvalhoi em alevinos de pacu na presena ou ausncia de piauus. Tabela 2. Efeito da interao entre os tratamentos e os tempos de observao no controle do parasito Dolops carvalhoi em pacu

Com piauu Sem piauu

1 100A 100A

m 15 in m 30 in m 45 in m 60 in 12 min ho 17 ras ho 24 ras ho ra s

Tempo

2 29,66B 95,33A

3 18,66B 90,00A

4 12,00B 85,66A

5 10,33B 76,66A

6 9,66B 70,66A

7 4,00B 66,66A

8 1,33B 59,66A

Na mesma linha valores seguidos de letras diferentes diferem entre si pelo teste de Tukey (P<0,05)

Assim nota-se que o crustceo foi predado pelo piauu, fato este constato em observaes da predao nos tempos propostos, onde o parasito foi ingerido pelo piauu diretamente da superfcie corporal de um pacu prximo ou da parede do aqurio. Sabe-se que o piauu uma espcie de peixe de hbito alimentar onvoro, cuja alimentao em ambiente natural consiste basicamente de frutos, vegetais e pequenos crustceos, o que justificaria a introduo de alevinos de piauu em viveiros ou tanques de piscicultura para controlar crustceos parasitos de peixes, como o Dolops, evitando a utilizao de produtos qumicos ou inseticidas, altamente txicos e nocivos ao meio aqutico, peixes e seres humanos. Vrios pesquisadores sugerem a existncia de fatores, como alta densidade de estocagem e grande quantidade de material em suspenso nos viveiros relacionados com a susceptibilidade natural s infeces por diferentes intensidades de parasitismo por crustceos (MARTINS e SOUZA JR, 1995; ONAKA, 2005). ONAKA (2005) relatou a susceptibilidade natural de vrias espcies de peixes s infestaes por diferentes intensidades de parasitismo por Dolops carvalhoi, e dentre elas, a susceptibilidade

de juvenis de piauu, sendo ligeiramente, mas no significativamente mais susceptvel do que pacus quando infestados com 20 parasitos/peixe. CARVALHO et al. (2003) estudaram na regio do Pantanal o comportamento de piranhas em ambiente natural, e observaram que estas so capazes de remover ectoparasitas da superfcie corporal de outras piranhas, resultando em baixa infestao parasitria em rios, o que ainda no foi constatado em peixes de criao, provavelmente pelo fato de que em ambiente de criao a turbidez elevada o que suprime ou minimiza a predao de parasitas pelos peixes, resultando em alto nvel de infestao parasitria. Outra justificativa para a utilizao de juvenis de piauu no controle de Dolops carvalhoi em pacus que a maioria dos ectoparasitas de peixes tem sido abundantemente relatada em peixes grandes (CLOUTMAN e BECKER, 1977; RAWSON, 1977; BORTONE et al., 1978; HANEK e FERNANDO, 1978, POULIN, 1991), e poucos relatos de infestao por este ectoparasita em peixes menores. Trabalhos realizados por alguns pesquisadores sugerem que h uma correlao entre o comprimento do peixe e a prevalncia e distribuio de branquiros,
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onde um peixe adulto, ou seja, com superfcie corporal maior possui maior probabilidade de infestao por este parasito do que alevinos (CARVALHO et al., 2003). O controle deste parasito atravs da adio de juvenis de piauu nos tanques ou viveiros de criao seria capaz de reduzir substancialmente os danos provocados aos peixes durante todo o ano, principalmente pelo fato deste peixe predar o parasito na superfcie corporal do pacu e tambm na coluna dgua, o que imprescindvel em um viveiro de piscicultura, pois em infestaes, o mesmo capaz de nadar e permanecer livre na coluna dgua por um longo perodo de tempo (PAVANELLI et al., 2002), o que facilitaria a predao do parasito pelo piauu. Outra grande vantagem da utilizao do controle biolgico no tratamento de ectoparasitoses em peixes a maneira ecologicamente correta, a qual no provoca danos aos peixes e ao meio ambiente. Atualmente, tratamentos base de produtos qumicos como o permanganato de potssio, sulfato de cobre e inseticidas tm sido utilizados. Entretanto, esses produtos quando aplicados de maneira indiscriminada e sem critrios, como vem ocorrendo no Brasil, provocam alteraes ambientais catastrficas e muitas vezes irreversveis (PILARSKI e CECCARELLI, 2004). Este trabalho primeiro registro de piauus alimentando-se de Dolops carvalhoi diretamente no hospedeiro e tambm fora dele, o que contribui muito para pesquisas com o objetivo de minimizar os danos provocados por ectoparasitas em peixes de criao atravs do controle biolgico e de maneira ecologicamente correta. Agradecimentos Os autores agradecem ao Prof. Dr. Rodrigo Yudi Fujimoto, do Departamento de Aqicultura da Universidade Federal do Par, Campus de Bragana, PA, pelo auxlio nas anlises estatsticas. Referncias Bibliogrficas
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