PRACTICA 3.

MANIPULACION DE LA AUTOCLAVE Introduccin Existen varios procedimientos de esterilizacin, los ms extendidos son a base de vapor (de agua) o tambin llamado hmedo, en este caso se usan las autoclaves, a base de aire caliente, para lo cual se usan los hornos esterilizadores y esterilizacin en frio (a base de vapores o gases de formaldehdo o etileno), para lo cual se utilizan dispositivos especiales. El calor hmedo en forma de vapor saturado bajo presin, es el mtodo ms confiable conocido, para la destruccin de todas las formas de vida microbiana. El poder destructor de microbios esta compuesto de dos factores, los cuales son ambos esenciales: humedad y calor. El vapor atmosfrico (que fluye) no tiene valor para la esterilizacin quirrgica. Tambin el agua hervida no es microbicida adecuada y su uso no debe de ser recomendado cuando hay vapor bajo presin. El vapor saturado tiene algunas caractersticas, las cuales se convierten en ventajas, estas son: Calentamiento y penetracin rpida de los textiles o telas La destruccin de las esporas bacterianas ms resistentes en un breve intervalo de exposicin El control fcil de calidad y letalidad para los materiales y suministros No deja residuo toxico en los materiales despus del proceso de esterilizacin El agente esterilizador ms econmico Objetivos Dar a conocer algunos cuidados que el operador debe tomar en cuenta al hacer uso del autoclave Dar a conocer algunas ventajas del mtodo de esterilizacin por calor hmedo, as como la importancia del proceso de esterilizacin Describir los pasos para usar un autoclave en forma general, as como el mantenimiento preventivo que podra proporcionrsele.

Materiales Autoclave Incubadora Cinta adhesiva

Marcador indeleble Asa bacteriolgica Mechero Fisher

Algodn Papel de estraza Cajas Petri

Abatelengua Agua destilada

Mtodo 1 Remueva la tapa del esterilizador haciendo girar las mariposas de baquelita en sentido contrario a las manecillas del reloj. Siempre aloje dos mariposas opuestas a la vez Remueva el recipiente interno del esterilizador Adicione agua limpia (preferiblemente agua destilada) no menos de 5.08cm y no mas de 7 cm de profundidad Ponga la parrilla del recipiente interno en el fondo con el borde hacia abajo Ponga los artculos que se van a esterilizar en el recipiente Este seguro que el canal del tubo del aire des escape esta en su posicin al lado derecho del recipiente cuando es puesto en la unidad. Esto es necesario, as que cuando la tapa esta puesta en la unidad puede guiar el aire del tubo de escape dentro del canal Ponga la tapa del esterilizador en la unidad, asegrese que la flecha de seal en la tapa esta alineada con la lnea de marca aun lado del fondo Este seguro tiene que ser insertado en la gua del canal en la pared interna del recipiente de aluminio Apriete parejo las mariposas en la tapa, siempre apriete dos mariposas opuestas a un tiempo (esto aprieta la tapa hacia abajo en una forma pareja y asegura el sello apropiadamente), Nunca use una llave o cualquier aparato mecnico para apretar las mariposas Enchufe el cordn al tomacorriente apropiado Ponga el interruptor elctrico de palanca ON/OF en posicin ON. En este momento la luz del piloto rojo se enciende indicando que la unidad tiene corriente y que el calentador esta trabajando Si el agua que verti esta fra, requiere aproximadamente 35 minutos antes de que vapor empiece a escaparse de la vlvula de control Como el tiempo requerido para calentar el agua fra tiene un periodo largo se puede reducir el tiempo si:

Verter agua cliente en vez de agua fra, o Verter agua fra y entonces prender la unidad de tal manera que el agua se empiece a calentar antes de empezar el procedimiento de esterilizacin. En ambos casos observe el nivel del agua. Es importante que el vapor se deje escapar vigorosamente de la unidad por lo menos de cinco a siete minutos o hasta que vea un flujo de vapor y despus cierre la vlvula de control. (de 10 a 5 atm) Para el periodo de esterilizacin: empieza cuando la guja del manmetro del vapor a presin, se registra en la banda verde de esterilizacin la cual se puede ver en la cara del manmetro. En este momento se puede cronometrar el tiempo de esterilizacin el cual va ha ser de 15 minutos. Al final del periodo de esterilizacin ponga el conmutador en OFF y la vlvula hacia arriba en posicin vertical para que escape el vapor. Mtodo 2 El agar que ha sido preparado por el personal de laboratorio y esterilizado, se utiliza para realizar los cultivos. En una caja Petri se ponen aproximadamente 5 ml de agar, y dejar solidificar Despus de solidificado se realiza lo siguiente: Se abre con cuidado, por un extremo, el depresor de madera, sin tocar el otro extremo para mantenerlo estril Distribuido por parejas, uno de los miembros de la pareja sujeta con el depresor la lengua del otro, colocndola pegada al suelo de la boca manteniendo despejada la abertura bucal, observe la figura

Figura 1. Toma de exudado farngeo Con cuidado, se introduce la torunda y se tocan las amgdalas, en donde se encuentran las bacterias, intentando evitar el contacto con la lengua u otras zonas A continuacin se toma una placa de agar y se procede a la siembra del material recogido con la torunda. Se pasa suavemente por la superficie, cubriendo el rea sealada en el dibujo

Sin tocar el interior de las zonas se tapa y se sella la placa con cinta adhesiva Se rotula la tapa indicando el nombre del donante, su grupo-clase la fecha y al F (de farngeo) Incubacin y observacin: se llevan las placas a 37C (temperatura corporal), este material se utilizara la siguiente clase para observar el crecimiento bacteriano.