Pruebas inmunolgicas

Objetivo
Detectar infecciones a travs de las diferentes pruebas a realizar.

Reacciones Febriles
Material y equipo Placa de Haylan Pipeta de 100 microlitros Palillos Puntas amarillas Aplicador Material biologico Sangre centrifugada (suero) Reactivos Anfgenos Febriles Procedimiento

Anotar el antgeno correspondiente en la placa de vidrio.

Depositar en cada cuadro 0.02ml de suero del paciente para cada uno de los antgenos que se vayan a utiliza.

A cada gota de suero aadir una gota de cada antgeno.

Mezclar con un aplicador limpio ( utilizar un aplicador para cada antgeno.

Observar la aglutinacin con ayuda de una lmpara.

Cuando hay reaccin positiva se repite la tcnica con diluciones las cuales se obtienen con el uso de las siguientes cantidades del suero en la siguiente forma.
40 ul --------------- 1/40 20 ul---------------- 1/80 10 ul----------------1/160 05 ul----------------1/320

PROTEINA C REACTIVA Tcnica Se toman 100 microlitros de suero y se depositan en los tres crculos superiores de la placa.

A uno se le agrega una gota de ltex, al otro una gota de control positivo y al ltimo una gota de control negativo. Se revuelven bien con distintos palillos y se comparan las la muestra del ltex con las del control positivo y negativo, si presenta similitud con el positivo habr aglutinacin, y si es similar al negativo no habr aglutinacin.

FACTOR REUMATOIDE Tcnica Se toman 100 microlitros de suero y se depositan en los tres crculos superiores de la placa.

A uno se le agrega una gota de ltex, al otro una gota de control positivo y al ltimo una gota de control negativo. Se revuelven bien con distintos palillos y se comparan las la muestra del ltex con las del control positivo y negativo, si presenta similitud con el positivo habr aglutinacin, y si es similar al negativo no habr aglutinacin.

ANTIESTREPTOLISINA Tcnica

Se toman 100 microlitros de suero y se depositan en los tres crculos superiores de la placa.

A uno se le agrega una gota de ltex, al otro una gota de control positivo y al ltimo una gota de control negativo. Se revuelven bien con distintos palillos y se comparan las la muestra del ltex con las del control positivo y negativo, si presenta similitud con el positivo habr aglutinacin, y si es similar al negativo no habr aglutinacin.

PRUEVA V.D.R..L Tcnica Se toman 100 microlitros de suero y se depositan sobre un porta y se le agrega una gota de del reactivo V.D.R.L se observa a microscopio para ve4r si hay aglutinacin lo que nos indicara que es positivo.

PRUEVA INMUNOLOGICA DE EMBARAZO (PIE)

Tcnica

Se centrifuga la orina a 3500 r.p.m. durante 5min.

Despus se toman dos gotas del sobrenadante de la orina o sangre y se agregan a la cinta reactiva

Se esperan 5 min y si la cinta reactiva marco los lneas es un resultados positivo y si solo marca una 1 es negativo en caso de que no marque nada se se considera nulo y se repite la prueba

DETERMINACION DE TIPO SANGUINEO EN TUBO Material y equipo

Tubos de ensayo Pipetas pasteur Rotulador de Vidrio Centrifuga Gradillas

Material Biolgico

Reactivos

Muestra de sangre en tubo lila

Anti-A Anti-B Anti-AB Solucin salina

Tcnica El primer paso es realizar el lavado de hemates, para esto aadimos un 1ml de sangre y completamos el tubo con solucin salina y agitamos. A los hemates del tubo les aadimos una cantidad suficiente de solucin salina para obtener una suspensin al 2%.

Centrifugamos a 2000 r.p.m. durante 4 min. y decantamos el sobrenadante.

Se repite otras dos veces estos mtodos para obtener un lavado de hematies Rotular tres tubos de ensayo limpios con las letras A, B, AB y se aade a cada tubo una gota de los hemates, dos gotas de anti-A al tubo A, anti-B altuboB y anti-AB al tubo AB.

Se centrifugan los tubos durante 1 min a 1000 r.p.m.

Y se sacan y se observan los resultados

ESPERMATOBIOSCOPIA Fundamento: Suele formar parte de la investigacin cientfica completa de una prueba de infertilidad, as como las deformaciones que pueden presentar los espermatozoides como son: cabeza de alfiler, cabeza gigante, forma alargada, cabeza doble, media cabeza, etc... El anlisis se forma en varios aspectos como son medir el volumen, la viscosidad, el color, tiempo de licuefaccin el pH y observar las anormalidades que presentan. MATERIAL: Microscopio Vaso para la toma de muestra Regla Portaobjetos Caja de Neubauer Probeta Pipeta de glbulos blancos o rojos Cintas reactivas TCNICA: Se procede a que el paciente done la muestra

Se mide el volumen con ayuda de un matraz

La viscosidad se mide con ayuda de dos portas y una regla

El tiempo de licuefaccin es el tiempo que tarda la muestra en volverse lquida completamente.

Con ayuda de una cinta reactiva se medir el pH, este mtodo esta indicado en el frasco de las cintas reactivas (cmo medir el pH).

Posteriormente con ayuda de una pipeta de glbulos blancos o rojos, tomaremos un poco de la muestra y se depositar en la cmara de Neubauer y se proceder a contarlos

TIEMPOS DE COAGULACION ( TP y TPT ) MATERIAL 1.- Mechero de bunsen 2.- Cristalizadores 3.- Tripies 4.- Telas de alambre con asbesto 5.- Termmetros 6.- Conometros 7.- Reactivo para tiempos de coagulacin 8.- Pipeta automtica de 10- 100 L 9.- Pipeta automtica de 100-1000 L 10.Puntillas azules y amarillas 11.Tubos de vidrio MMATERIAL BIOLOGICO 1.- Sangre con citrato de sodio

TECNICA DE TIEMPO DE PROTROMBINA TECNICA: 1.- Centrifugar el tubo a 3500 RPM por 5 min. Marcar tubos de ensay con muestra y reactivo.

2.- Poner agua en el cristalizador y ponerla a calentar con el mechero, medir con el termmetro que la temperatura este siempre a 37C para poder incubar aqu los tubos para los tiempos de coagulacin.

3.- Colocar en el tubo de muestra 100l se suero y ponerlo a incubar a 37C por 5 min, hacer lo mismo con el reactivo pero en ves de 100l se colocara reactivo necesario para correr todas la muestras.

4.- Ya incubados los dos se colocaran 200l de reactivo de TP al suero, una vez que el reactivo entre en contacto con el suero tomar el tiempo en que dilata enformarce el coagulo en el tubo con el cronometro.

TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ( TPT) TECNICA: 1.- Ya con el suero centrifugado, marcar tubos de ensaye con, muestra y cloruro de calcio. Colocar en un tubo 100l de suero y 100m de reactivo para TPT y ponerlo a incubar a 37C por 5 min.

2.- En el tubo de cloruro de calcio colocar cloruro suficiente para todas las pruebas y incunbarlo a 37C por 5min.

3.- Una vez que el cloruro de calcio y la muestra con reactivo para TPT estn incubados se le colocaran 100l de cloruro de calcio al tubo en que esta la muestra con el reactivo, una vez que entren en contacto el cloruro de

calcio y la muestra se tomara el tiempo en que se forma el coagulo en el tubo con el cronometro.

VALORES NORMALES: TP TPT 11.5 13.5 Seg. 25 40 Seg