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Seminarios de Microbiologa - Primer Bloque Profesora responsable: Dra.

Elena Garca-Valds

Seminarios de Microbiologa 1er Bloque Medios de cultivo - Prof. Antonio Domnech

Caractersticas de los medios de cultivo

Definicin
Un medio de cultivo es un conjunto de componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los microorganismos.

Prof. Antonio Domnech

Composicin
Macronutrientes. Micronutrientes o elementos traza. Factores de crecimiento.

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Macronutrientes
Elemento
Carbono (C) Hidrgeno (H) Oxgeno (O) Nitrgeno (N) Fsforo (P) Azufre (S) Potasio (K) Magnesio (Mg) Sodio (Na) Calcio (Ca) Hierro (Fe)

Micronutrientes
Forma suministrada en el medio de cultivo
Glucosa, malato, acetato, piruvato, aminocidos, extractos compuestos H2O, compuestos orgnicos H2O, O2, compuestos orgnicos Inorgnico: NH4Cl, (NH4)2SO4, KNO3, N2 KH2PO4, Na2HPO4 Na2SO4, Na2S2O3 Na2S, cistena y otros compuestos orgnicos azufrados KCl, KH2PO4 MgCl2, MgSO4 NaCl CaCl2 FeCl3, FeSO4, varias soluciones de hierro quelado (Fe3+ EDTA, Fe3+ citrato, etc.)

Forma normal del nutriente en el ambiente


CO2, compuestos orgnicos H2O, compuestos orgnicos H2O, O2, compuestos orgnicos NH3,NO3-, N2, compuestos orgnicos nitrogenados PO43H2S, SO42-,compuestos orgnicos con S, sulfuros metlicos (FeS, CuS, ZnS, NiS, etc.) K+ en solucin o como varias sales de K Mg2+ en solucin o como varias sales de Mg Na+ en solucin, NaCl o como otras sales de Na Ca2+ en solucin, CaSO4 o como otras sales de Ca Fe2+ o Fe3+ en solucin, FeS, Fe(OH)3 o como otras sales de Fe

Elemento
Cromo (Cr) Cobalto (Co) Cobre (Cu) Manganeso (Mn) Molibdeno (Mo) Nquel (Ni) Selenio (Se) Tungsteno (W) Vanadio (V) Zinc (Zn) Hierro (Fe)

Funcin celular
Requerido en los mamferos para el metabolismo de la glucosa. Se desconoce si los microorganismos lo requieren Vitamina B12; transcarboxilasa (bacterias del cido propinico) En la respiracin, citocromo c oxidasa; en fotosntesis, plastocianina y en algunas superxido dismutasas Activador de muchas enzimas; presente en algunas superxido dismutasas y en la enzima que rompe el agua en fototrofos oxignicos Algunas enzimas que contienen flavinas; nitrogenasas, nitrato reductasa, sulfito reductasa, DMSO-TMAO reductasas y algunas formato deshidrogenasas La mayora de las hidrogenasas; coenzima F430 de metangenos, deshidrogenasa del monxido de carbono y ureasa Formato deshidrogenasa; algunas hidrogenasas y el aminocido seleniocistena Algunas formato deshidrogenasas y oxotransferasas de los hipertermfilos Vanadio nitrogenasa; bromo peroxidasa Anhidrasa carbnica, alcohol deshidrogenasa, ARN y ADN polimerasa, y muchas protenas que se unen al ADN Citocromos, catalasas, peroxidasas, protenas con hierro y azufre, oxigenasas y todas las nitrogenasas

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Factores de crecimiento
Vitamina
cido p-aminobenzoico cido flico Biotina Cobalamina (B12) cido lipoico cido nicotnico (niacina) cido pantotnico Riboflavina Tiamina (B1) Vitaminas B6 Grupo Vitamina K Hidroxamatos

Constituyentes habituales
Agentes gelificantes: agar. Extractos: levadura, carne, hgado, semillas... Peptonas: soja, carne, gelatina, casena... Sistemas amortiguadores: fosfatos... Indicadores de pH: rojo neutro, cristal violeta, rojo de fenol... Agentes reductores: microaerofilia o anaerofilia. Agentes selectivos: sales biliares, antibiticos...

Funcin
Precursor del cido flico Metabolismo de compuestos de un carbono; transferencia de grupos metilo Biosntesis de cidos grasos; -descarboxilaciones; algunas reacciones de fijacin de CO2 Reduccin y transferencia de restos monocarbonados; sntesis de desoxirribosa Transferencia de grupos acilo en la descarboxilacin del piruvato y -cetoglutarato Precursor del NAD+; transferencia de electrones en reacciones de oxido-reduccin Precursor de la coenzima A; activacin del acetilo y derovados acilados Precursor del FMN, FAD en flavoprotenas implicadas en transporte de electrones -descarboxilaciones; transcetolasa Transformaciones de aminocidos y cetocidos Transporte de electrones; sntesis de esfingolpidos Compuestos que unen hierro; solubilizacin y transporte del hierro al interior celular

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Tipos de medios de cultivo

Medio definido y medio complejo

Slidos y lquidos. Medio definido (sinttico) y medio complejo. Medio mineral o basal: compuestos inorgnicos. Medio mnimo: medio basal + 1 fuente de carbono. Medio rico: todos los requerimientos nutritivos. Medio de enriquecimiento. Medio selectivo. Medio diferencial.

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Manuales de medios de cultivo

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Manuales de medios de cultivo

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Manuales de medios de cultivo

Actividad 1 Medios de cultivo


Metodologa
Actividad individual. Consulta del material disponible. Anotar en la plantilla correspondiente las caractersticas de los microorganismos seleccionados.

Plantilla 1
Microorganismo Escherichia coli Salmonella spp. Vibrio cholera Clostridium perfringens Campylobacter jejuni Staphylococcus aureus Anaerobio Aerobio (facultativo) Microaerfilo Oxgeno Gram Morfologa celular Oxidasa Catalasa Motilidad

+ -

Cocos Bacilos

+ -

+ -

+ -

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Actividad 1 Medios de cultivo


Plantilla 2
Medio de cultivo Citrato de Simmons McConkey Hierro de Kliger Baird Parker TriptosaSulfitoCicloserina (TSC)

Actividad 1 Medios de cultivo


Recursos
Manuales de medios de cultivo 1. http://www.panreac.es/pdf/ManualCultimed_completo.pdf 2. http://www.scharlab.com/docs/ebooks/descargarpdf.php?i d=6 3. http://www.condalab.com/ Manual de anlisis microbiolgico

Escherichia coli Salmonella spp. Klebsiella pneumoniae Clostridium perfringens Staphylococcus aureus

1. http://www.cfsan.fda.gov/~ebam/bam-toc.html Libros y artculos Madigan, M. T. y otros (2003): Brock: Biologa de los Microorganismos. 10 edicin. Prentice Hall Inc, Madrid.

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Actividad 1 Medios de cultivo


Imagen de microscopa electrnica y placa de cultivo
Organismo Escherichia coli Salmonella spp. Klebsiella pneumoniae Pseudomonas aeruginosa Clostridium perfringens Staphylococcus aureus Medio Mc Conkey Mc Conkey Citrato de Simmons Cetrimide TSC Baird Parker Grupo 1 2 3 4 5 6

Actividad 1 Medios de cultivo


Plantilla 3 www.condalab.com
Medio Acetate differential Agar BCP Glucose Agar Fecal Coliforms Broth Base Koser Citrate Broth Mannitol Nitrate Motility Medium Mio Medium MR-VP Medium Sim Medium Tryptone Byle Salts Agar TTC Chapman Agar Urea Indol Broth VRBG Water & Beverages Meat & Fish Industry Dairy products Bakery Processed Foods Beer industry Waste Water Cosmetic Industry Pharmaceutical industry

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