Regulacin de la frecuencia cardiaca en el corazn de la rana

Aguilar-Snchez Sandra Ivette; Cruz-Olvera Gabriela; Galindo-Solano Rosa Nuria; Martnez-Rea Karla 1 Fernanda y Pacheco-Alba Ivonne. 1 Facultad de Ciencias, Universidad Nacional Autnoma de Mxico. Av. Universidad 3000, Circuito Exterior s/n. Delegacin Coyoacn, C.P. 04510, A.P. 70-399. Cuidad Universitaria, D.F., Mxico.
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Comment [CJ1]: Calificacin: 9.5

Introduccin El msculo del corazn es un msculo de tipo estriado que forma envolturas alrededor de las cavidades cardacas. De esta forma se puede hablar de un msculo auricular y de un msculo ventricular, figura 1a. El msculo auricular rodea las aurculas, estando separado del msculo ventricular por el tabique fibroso, conocido como tabique aurculo ventricular; (Estrada, 1999). El corazn de rana se encuentra en posicin torcica, figura 1b, tiene un funcionamiento similar al del corazn humano, incluso siendo un corazn con tres cmaras; (Donnersberger y Lesak, 2002).

a)

b)

Figura 1. Corazn de anuros, a) anatoma del corazn; b) localizacin del corazn. Figura tomada de??

Las fibras musculares cardiacas se disponen como una red con fibras que se entrecruzan unas con otras. Las fibras estn constituidas por la unin de clulas musculares separadas unas de otras por los denominados discos intercalares que son membranas plasmticas modificadas que no oponen resistencia al paso de los iones, lo que permite la comunicacin estrecha entre una y otra clula; (Estrada, 1999).

El latido del corazn se genera de manera autnoma en el nodo senoauricular por lo que el origen de la contraccin del msculo cardiaco es miognico; (Barrios et al, 2011). El latido de dicho msculo est influido por factores internos y externos. Los tejidos de conduccin especial del corazn establecen un ritmo particular cuya velocidad puede ser acelerada o disminuida por fibras nerviosas especficas del sistema nervioso central. La mdula del encfalo y otros factores qumicos y fsicos tambin influyen en la frecuencia cardaca. La peculiar estructura del msculo cardaco permite que la onda de despolarizacin originada en el nodo sinusal se extienda por toda la red de aurculas constituyendo un sincitio funcional; (Estrada, 1999). La noradrenalina y la acetilcolina ejercen su accin sobre el aparato cardiovascular mediante la activacin de receptores de membrana en los cardiomiocitos, clulas endoteliales o clulas musculares lisas de los vasos sanguneos; la noradrenalina activa los receptores adrenrgicos que se clasifican en -adrenrgicos y -adrenrgicos, cada uno de los cuales se dividen a su vez en 1, 2, los cuales provocan vasoconstriccin y venoconstriccin, mientras que 1, y 2 incrementan la frecuencia de los marcapasos, aceleran la velocidad de la conduccin, acortan el periodo refractario y hacen ms rpidas y enrgicas las contracciones. Por otro lado la acetil colina activa los receptores colinrgicos que se dividen en dos subtipos: muscarnicos siendo estos los que ejercen las las principales acciones cardiovasculares de acetilcolina pues estos reducen la frecuencia de los marcapasos, disminuyen la velocidad de la conduccin, aumentan el periodo refractario y hacen ms lentas y las contracciones, adems de inhibir la liberacin de las neuronas simpticas y provocar la vasodilatacin; el otro tipo de receptores son los nicotnicos; (Cunningham, 2008). Falt informacin en la introduccin (efecto de la temperatura).
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Si esto ocurre al aplicar en el corazn de la rana noradrenalina topicamente y debido a la influencia del sistema nervioso simptico aumentar la frecuencia NA cardiaca; por el contrario al administrarle tpicamente acetilcolina al corazn de la rana, el sistema nervioso parasimptico reducir la frecuencia del latido.

Objetivos Obtener registros de las actividades mecnicas y elctricas del corazn de una rana (Rana catesbiana). Analizar el efecto que tiene una aplicacin tpica de deAceticolina (ACh) y Noradrenalina (NA), sobre la fuerza y la frecuencia de la contraccin.

Material y mtodo El montaje del equipo para el registro del electrocardiograma (ECG) se llevo a cabo dentro de la jaula de Faraday para aislar de seales exteriores a la muestra. Para armar el

equipo de registro de ECG se coloc el soporte palmer dentro de la jaula al soporte se le coloc un tornillo transversal, a este se sujeto el transductor Fort 100 y el otro extremo del cable se conect a al amplificador en el canal (2) Bridge 8. Con un micromanipulador se sujet la sonda de alta impedancia con clip para tierra y conector de electrodos, un extremo de la sonda se conecto al amplificador en el canal (1) Iso DAM8A, en el extremo contrario de la sonda se conectaron dos electrodos de aguja.Pulsando el botn MP100 del programa de Acqknowledge 3.8.1 y dando de alta el canal 2 (Bridge 8) se calibr el Fort 100 siendo C1 el

valor mnimo, el cual no tenia peso y para el Cal2 se usaron pesas de 50 gr siendo este el valor mximo. Este proceso se llevo a cabo en el programa Aqcknowledge 3.8.1 en el cual se capturan los datos de la sonda de alta impedancia y del transductor Fort 100 por el sistema de adquisicin de datos MP100 de Biopac. Se comprob que la sonda de alta impedancia registrara seales haciendo contacto entre los electrodos. Segmento de captura 10 minutos, la frecuencia de muestreo 100 mps, el tiempo de adquisicin fue de 6 minutos.Se uso una rana catesbiana de peso 63.2 gr y Longitud de 23 cm, la cual permaneci en refrigeracin aproximadamente 20 minutos. Despus de este tiempo se saco a la rana y se decapit, se abri por la regin ventral, retirando los intestinos, hgado y pulmn hasta obtenerse el corazn el cual fue colocado en una caja de petri y mantenido con solucin Ringer a temperatura ambiente. Al corazn se le amarro un extremo de hilo, el otro extremo se fijo en el Fort 100. Se inicio el registro de seales y se llevaron a cabo 3 protocolos experimentales:

Registro noradrenalina Se tomo el registro de la contraccin del msculo cardiaco de la rana por 1 minuto, pasado este tiempo con un gotero se le aplico NA observando los registros durante 2 minutos. Para que el corazn regresara a la contraccin basal se lavo con solucin Ringer a temperatura ambiente y se esperaron 2 minutos.

Registro Acetilcolina

Se obtuvo un registro basal de 1 minuto, despus con un gotero se le aplic ACh y se tomo el registro por 1 minuto, posteriormente se lavo con solucin Ringer a temperatura ambiente y se espero a que regresara a una contraccin basal. SolucionRinger a 45 C Con una parrilla elctrica se calent solucin fisiolgica Ringer(NaCl 1M, KCl 0.1M, CaCl 2 0.1M, Na2HPO4 0.1M) hasta alcanzar una temperatura de 45 C la cual fue medida con un termmetro. Se tom registro de contraccin basal por 1 minuto y despus se aplico solucin Ringer a 45 C, el registro tomado fue durante 2 minutos, despus de transcurrido el tiempo se lavo con solucin Ringer a temperatura ambiente para que el corazn regresara a su contraccin basal.

Resultados En la figura 1, se observo un segmento del registro basal, donde los latidos del corazn por minuto (BPM) fueron de 12.09677 y el tiempo transcurrido entre el inicio y final del segmento seleccionado (Delta T) que es de -4. 9600 sec. y la fuerza de contraccin es de 0.38516. Een cuanto a las ondas, se podan observar perfectamente diferenciadas las ondas auriculares y ventriculares, con una frecuencia y amplitud constantes. En la figura 2, se observo el registro de la Noradrenalina, igual por segmento, donde los latidos del corazn por minuto (BPM) fueron de 11.90476 y el tiempo transcurrido entre el inicio y final del segmento seleccionado (Delta T) que es de 5.04 sec. y la fuerza de

contraccin es de 0.40592. en cuanto a las ondas, aumentaron tanto en la amplitud como en la frecuencia al grado de que la contraccin auricular y ventricular llegaron a fusionarse. En la figura 3, se observo el registro del lavado con solucin de Ringer durante 2 minutos, igual por segmento, donde los latidos del corazn por minuto (BPM) fueron de 12 y el tiempo transcurrido entre el inicio y final del segmento seleccionado (Delta T) que es de 5 sec. y la fuerza de contraccin es de 0.35609. en el caso de las ondas, se logro observar el aumento en la amplitud y una leve disminucin de la frecuencia.

En la figura 4, se observo un segmento del registro basal II, donde los latidos del corazn por minuto (BPM) fueron de 11.92843 y el tiempo transcurrido entre el inicio y final del segmento seleccionado (Delta T) que es de 5.0300 sec. y la fuerza de contraccin es de 0.78369. en cuanto a las ondas disminuye la frecuencia, aunque no de forma significativa, la amplitud sigue siendo mayor y se logra observar que la contraccin auricular y ventricular siguen fusionadas.

En la figura 5, se observo el registro de la Acetilcolina por un minuto, igual por segmento, donde los latidos del corazn por minuto (BPM) fueron de 11.85771 y el tiempo transcurrido entre el inicio y final del segmento seleccionado (Delta T) que es de 5.06000 sec. y la fuerza de contraccin es de -0.47650. Las ondas disminuyen su frecuencia pero no as la amplitud. La contraccin auricular dismminuyedisminuye tanto que ya no es medible. En la figura 6, se observo el registro del lavado con solucin de Ringer a 40, igual por segmento, donde los latidos del corazn por minuto (BPM) fueron de 11.97605 y el tiempo transcurrido entre el inicio y final del segmento seleccionado (Delta T) que es de 5.01000 sec. y la fuerza de contraccin es de 0.47650. Se observo que la amplitud disminuye y un incremento en la frecuencia de las ondas.

Discusin: Debido a fallas con el equipo de laboratorio, solo se pudo obtener el registro de la actividad mecnica del corazn, es decir a la fuerza de contraccin del musculo cardiaco (auricular y ventricular). De acuerdo a los resultados obtenidos, el estado basal refleja el estado en

reposo de las clulas contrctiles miocardicas que es a -90 mV, que tras recibir un estimulo permite el paso de Na+ a travs de la membrana y regulado por el voltaje, permitiendo

asias una despolarizacin casi instantnea. Una vez que el potencial de membrana alcanza los 20 mV, los canales de Na+ se cierran, activando a los canales que permiten el paso al K+, lo que permite una repolarizacin inicial, despus ocurre la fase de meseta donde disminuye el paso del K+ e incrementa la permeabilidad del Ca2+ , donde los canales de Ca2+ son dependientes de voltaje y su apertura es simultanea a la disminucin de los canales de K+, lo que produce un aplanamiento en el potencial de accin. Por ultimo se produce la repolarizacin rpida, que consiste en el cierre de los canales de Ca2+ y del aumento de la permeabilidad de los canales de K+. en cuanto a la funcin mecnica se lleva un proceso de contraccin y relajacin del musculo cardiaco, es decir, la contraccin corresponde a la fase de despolarizacin de las clulas y conforme a esto la tensin muscular aumenta, mientras que la relajacin comprende a la repolarizacin de las clulas miocrdicas, por lo que la tensin muscular disminuye, generando asias la regulacin cardiaca. La frecuencia cardiaca, est regulada por un tipo de clulas denominadas clulas del nodo SA o marcapasos, que a la vez estn reguladas por el sistema nervioso mediante la secrecin de neurotransmisores, tal es el caso de la Noradrenalina, que es una catecolamina, esta ayuda al incremento de la frecuencia cardiaca, ya que aumentan la permeabilidad de los iones de Ca2+ , la entrada rpida de cationes acelera la velocidad de despolarizacin de marcapasos, lo que ocasiona que la clula alcance el umbral mas rpido y el aumento de la descarga de los potenciales de accin, por lo que la frecuencia cardiaca aumenta. Enen cambio, con la acetilcolina la frecuencia cardiaca disminuye, esto es porque activa los receptores colinrgicos muscarnicos que influyen en los canales de K+ y de Ca2+ en la clula marcapasos. La permeabilidad del potasio aumenta ,aumenta, lo que

hiperpolariza la clula del modo que el potencial de marcapasos comienza en un valor negativo. Al mismo tiempo la permeabilidad del Ca 2+ del marcapasos disminuye, alentando asi la frecuencia cardiaca.Citas? De acuerdo a la elevacin de la temperatura, causa un Incremento en la frecuencia cardaca, ya que aumenta la permeabilidad de la membrana muscular para los diferentes iones, se aceleran las etapas de autoexcitacin y la tensin muscular. Falt informacin n sus discusiones (que interpretacin tienen esta modulacin en un organismo ntegro) Conclusin La amplitud de la contraccin muscular es mayor cuando la frecuencia es baja. Al darse un estimulo de frecuencia alta se puede generar un efecto tetania ya que el msculo deja de responder. El msculo se puede fatigar al realizar estmulos consecutivos sobre el nervio citico. La aplicacin de acetilcolina sobre el msculo esqueltico hace que se contraiga este ya que provoca la apertura de canales inicos y una serie de procedimientos que permiten la entrada de calcio indispensable para la contraccin. Bibliografa Cunningham F. 2006. Fisiologa veterinaria, tercera edicin. Editorial Elsevier. Espaa. 581 pp. Estrada M. 1999. Fisiologa I prcticas. Editorial Bho. Santo Domingo Repblica Dominicana. 105 pp. Donnersberger A. y A. Lesak. 2002. Libro de laboratorio de anatoma y fisiologa. Editorial Faidotribo. Espaa. 514 pp.

Barrios A., M. Durn, B. Garduo, M. Miranda, E. Moreno y J. Prieto. 2011. Manual de Prcticas de Biologa de Animales II. Las Prensas de Ciencias, UNAM. Mxico. 71 pp.

Silverthorn. 2008. Fisiologa Humana: Un Enfoque Integrado. Editorial Medica Panamericana, Mxico D.F. Pginas: 980

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