Metabolitos bioactivos de Spilanthes acmella Murr. Resumen: Spilanthes acmella Murr.

(Compositae) se ha utilizado en medicina tradicional para dolor de muelas, reumatismo y la fiebre. Sus extractos han demostrado que exhiben actividades vasorelajantes y antioxidantes. Aqu, sus actividades antimicrobiana, antioxidante y citotxica fueron evaluados. Se realizo ensayos Mtodo de dilucin en agar contra 27 cepas de microorganismos. Los resultados mostraron que las fracciones de los extractos de cloroformo y metanol inhibi el crecimiento de muchos organismos de prueba, por ejemplo, Corynebacterium diphtheriae NCTC 10356 con concentracin mnima inhibitoria (CMI), de 64-256 g / mL y Bacillus subtilis ATCC 6633 de 128-256 con MIC g / mL. Las fracciones expuestos a prueba todas Con propiedades antioxidantes en los dos ensayos de DPPH y SOD. Potente actividad radical basureros se observ en el ensayo de DPPH. los efectos no citotxicos de los extractos contra lneas celulares KB y HuCCA-1 fueron evidentes. bioensayo Guiado para aislamiento resulto en un grupo diverso de compuestos bioactivos como fenlicos [vanillic cido (2), trans-ferulic cido (5) y la traduccin isoferulic cido (6)], la cumarina (scopoletin, 4) y triterpenoides como cido 3-acetylaleuritolic (1), sitostenone (3), y estigmasterol stigmasteryl-3-O -- -D-glucopyranosides, en Adems de una mezcla de stigmasteryl y -sitosteryl-3-O -D-glucopyranosides. El compuestos de 1 - 6 representan metabolitos bioactivos de S. acmella Murr. que nunca fueron inform anteriormente. Nuestros resultados demuestran por primera vez los beneficios potenciales de esta planta medicinal como una rica fuente de compuestos de alto valor teraputico para medicamentos, cosmticos, los complementos y como un alimento saludable. Palabras clave: Spilanthes acmella Murr.; Antioxidantes, antimicrobianos; efectos citotxicos. Resultados y Discusin Aislamiento En el presente estudio, los extractos, fracciones y los aislados de S. acmella Murr. fueron evaluados para antimicrobiana, antioxidante y citotxica actividades. Guiado por bioensayo se llev a cabo el aislamiento por repetido columna de gel de slice utilizando gradiente de elucin con solventes de polaridad creciente. Las estructuras fueron confirmados por la comparacin de sus datos espectrales (UV, IR, 1 H-y 13 C-RMN) con los datos de la literatura. 2D RMN tambin datos espectrales obtenidos. El extracto de hexano de S. acmella Murr. dio estigmasterol fracciones de H1, H3, H7, mientras que H8 incluyendo una mezcla de triterpenoides. El extracto de cloroformo siempre estigmasterol de la fraccin C3, stigmasteryl-3-O -- -D-glucopyranoside (SG) de la fraccin C8, junto con una mezcla de steres de hidrocarburos de cadena larga. Fraccionamiento del extracto de acetato de etilo dio tres compuestos; 3 acetylaleuritolic cido (1), vanillic cido (2) y -sitostenone (3) de fracciones E5, E6 y E8, respectivamente. El extracto de metanol ofrece cuatro compuestos; scopoletin (4), COOH ferulic cido trans-(5), trans-isoferulic cido (6) y una mezcla de stigmasteryl-3-O -- -D-glucopyranoside y -sitosteryl-3-O -- -D-glucopyranoside (MBSG) de fracciones F2, F3, M2 y M3, respectivamente. Aislados se resumen en la Actividades biolgicas: actividad antimicrobiana El hexano, cloroformo, metanol y acetato de etilo extractos, fracciones C2-C11, C2.2, C2.3, C2.7, C3.2, E1-E14, F1-F5-M1 y M6 y aislados 1, 2, 4, 5, 6, estigmasterol, SG y MBSG de S. acmella Murr. se realizarn las pruebas de actividad antimicrobiana contra 27 cepas de microorganismos mediante el agar mtodo de dilucin [16]. Los resultados (Tabla 2) mostraron que los extractos de hexano cloroformo y inhibi completamente el crecimiento de Saccharomyces cerevisiae ATCC 2601 con MIC 256 microgramos / ml. El cloroformo extracto tambin completamente expuestos antigrowth actividad contra Streptococcus pyogenes II con 256 MIC microgramos / ml. uno: los compuestos 1, 2, 4, 5, 6, estigmasterol, SG MBSG y se pusieron a prueba a 64 microgramos / ml, no hay crecimiento inhibicin; b: MIC: concentracin inhibitoria mnima fue la ms baja concentracin que inhibe el crecimiento de microorganismos. Fracciones C3, C4, C5, C2.2, C2.3, C3.2 C 2.7 y aislados del extracto cloroformo expuestos antigrowth actividad contra C. diphtheriae NCTC 10356 con MIC 64-256 mg / ml. Adems, la fraccin C4 tambin inhibe completamente el crecimiento de B. subtilis ATCC 6633 (MIC 128 mg / ml) y Bacillus cereus con MIC 256 microgramos / ml. Fracciones (E3, E4 y E14), de acetato de etilo extracto inhibe el crecimiento de C. diphtheriae NCTC 10356 con MIC 64-128 mg / ml. Antigrowth actividad de acetato de etilo y metanol extractos, incluyendo fracciones C2, C6-C11, E1, E2, E5, E13 y M1, se evaluaron a 256 mg / mL, pero ninguna actividad se observado. Los aislados, los compuestos 1, 2, 4, 5, 6, estigmasterol, SG MBSG y se pusieron a prueba a 64 microgramos / ml, pero result ser inactivo. Es interesante observar que las fracciones del cloroformo y acetato de etilo

mostrar extractos selectiva inhibicin de crecimiento contra el C. diphtheriae NCTC 10356 con MIC 64-256 mg / ml. En particular, las fracciones C3, C4, E4 y E14 inhibe el crecimiento de C. diphtheriae NCTC 10356 con MIC 64 mg / ml. Todos los prueba de metanol fracciones (F1-F5, M2-M6), salvo la M1, mostraron actividad antimicrobiana. F1-fracciones F5, M2, M3 y M5 selectivamente inhibe el crecimiento de B. subtilis ATCC 6633 con MIC 128 mg / mL, el MIC se M4 de 256 microgramos / ml mientras que las fracciones F4, M2, M5 y M6 tambin mostraron actividad contra C. diphtheriae NCTC 10356 con MIC 128 mg / ml. Adems, F1 y F2 actividad ejercida antigrowth contra C. diphtheriae NCTC 10356 con MIC 256 microgramos / ml. Adems, M2 tambin inhibe el crecimiento Micrococcus de Lutens ATCC 10240, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 y B. cereus con MIC 128-256 mg / ml. Efectos citotxicos Los extractos de hexano, cloroformo, metanol y acetato de etilo se han probado en contra de la KB y HuCCA lneas de clulas-1 [18]. Los resultados mostraron que todos los extractos expuestos ED 50 valores superiores a 10 mg / mL y, por consiguiente, fueron consideradas como inactivas. Significativamente, el acetato de etilo y metanol mostrar extractos de las ms potentes radicales basureros actividad (DPPH) [14] que ofrece diversos antioxidantes. Hay fenlicos (2, 5 y 6), cumarina (4), triterpenoides (1, 3 y MBSG). La fraccin ms potente antioxidante (SOD ensayo) de cloroformo extracto [14] y que ofrece estigmasterol stigmasteryl glucsido (SG). El primero haba sido aislado previamente a partir de un extracto de luz de gasolina de S. acmella Murr. junto con -sitosteryl-3-O -D-glucsido extracto de etanol a partir de la [19] y el aislamiento de la SG de la misma planta tambin se ha descrito [20]. Debido a la limitada cantidad de los aislados en los casos, no ha sido probado para antioxidantes. Sin embargo, todos los aislados (excepto 3) se realizaron pruebas de actividad antimicrobiana, pero no se observ inhibicin del crecimiento en el 64 microgramos / ml. El estudio indica que los compuestos 1 - 6 son metabolitos bioactivos que nunca han sido aislados de S. Murr acmella .. Los compuestos aislados se ha informado de poseer diversas bioactivities de la siguiente manera: 3-acetil aleuritolic cido (1) se ha demostrado que la exposicin de diversos bioactivities, por ejemplo, antigrowth actividad frente a S. aureus y S. typhimurium [21] y una inhibicin significativa de la vitalidad de los gusanos machos adultos de O. gutturosa [22]. Adems, este compuesto se mostraron inhibicin de la topoisomerasa II de ADN [23] y una fuerte actividad citotxica contra el carcinoma pulmonar de clulas A549 [23]. Se ha informado de que pentacyclic triterpenoides; oleanolic cido y eritrodiol expuesto vasorelaxant efecto [24]. En nuestra estudio reciente, la actividad observada vasorelaxant de S. acmella Murr. [14] podra ser debido a la pentacyclic, 3-acetylaleuritolic cido (1) aislado de la fraccin de la E5 extracto de acetato de etilo. Vanillic cido (2) se haba informado de ejercer una fuerte antioxidante (protector bucal) [25], de gran alcance propiedades de cicatrizacin de la herida [26], efectos protectores contra el dao del ADN [27], as como antimutagnico [28] y inmunoestimulantes [29] propiedades. -Sitostenone (3) es un triterpenoid con diversas actividades, tales como hipoglucemiantes importante [30], antiarrtmica [31] y pronunciado antituberculosos [32] las actividades. Scopoletin (4) dispone de interesantes actividades, en particular, vasorelaxant [33], antioxidante [34], antimicrobiana [35], anti-inflamatorio [36], antipirtico [37], antiagregantes agregacin [38] y la lucha contra la propiedades de la diabetes mellitus [39]. Adems, ejerce neuroprotectores [40] y hipotensor [41] Adems de las actividades en las aplicaciones en las enfermedades cardiovasculares [39], antitumoral [42], antiproliferation y antitiroideos [43] el tratamiento. Ferulic cido (5) es un importante antioxidante natural presente en frutas, verduras, salvado de arroz [44], hierbas medicinales, bebidas y suplementos [45]. Adems de ser un antioxidante, cido ferulic ejercieron una gran variedad de actividades: por ejemplo, vasorelaxant [46], anti-inflamatorio [45], antivirales [47] y analgsico actividades [48], as como efectos de proteccin contra los trastornos neurodegenerativos (enfermedad de Alzheimer enfermedad) [49], quimioprotector [50] y hipotensiva acciones [51]. Adems, se exhibi una amplia gama de efectos teraputicos contra el cncer, la diabetes, las cardiovasculares y las enfermedades neurodegenerativas [44]. Isoferulic cido (6), ha sido conocida como un componente de la medicina china a base de hierbas utilizados por un dolor asesino y stomachic [52]. Se trata de un compuesto activo principal de la rhizoma de Cimicifuga (tradicional japonesa medicamento que se usa como un anti-inflamatorio [53]). Conclusiones Este estudio reporta el xito de aislamiento de un grupo diverso de metabolitos bioactivos 1 - 6, estigmasterol y su glucsido, junto con una mezcla de stigmasteryl y -sitosteryl de glucsidos Murr acmella S. .. En este y

otros estudios de estos compuestos antioxidantes que poseen marcadas, vasorelaxant, antimicrobianos y efectos relacionados con actividades que incluyen, por ejemplo, antiinflamatorios, antipirticos, analgsicos, antiagregantes agregacin, antidiabticos, hipotensores, neuroprotectores, cardiovasculares, antivirales, anticancerosos y chemoprotective efectos. Prometedores, scopoletin (4) ejercida antioxidante, vasorelaxant antimicrobianos y las acciones que ferulic cido trans-(5) suscit antioxidante y vasorelaxant actividades. Otras cepas, vanillic cido (2), trans-isoferulic cido (6), y estigmasterol stigmasteryl glucosidos se haba informado de que ser fuertes antioxidantes. 3-Acetylaleuritolic cido (1) muestra los antimicrobianos y fuerte actividad citotxica. -Sitostenone (3) mostraron un importante hipoglucemiantes, antiarrtmicos y antituberculosos acciones. Estos compuestos 1 - 6 representan los metabolitos bioactivos que nunca fueron previamente aisladas de la S. Murr acmella .. El extracto con cloroformo y antioxidante antimicrobianos actividades que ofrece fracciones (C3, C4, C5), de fuerte antigrowth acciones contra C. diphtheriae NCTC 10356 con MIC 64-128 mg / ml. Curiosamente, los extractos antimicrobianos inactivos (acetato de etilo y metanol), siempre la mayora de las fracciones con un fuerte crecimiento de inhibicin contra C. diphtheriae NCTC 10356 y B. subtilis ATCC 6633 con MIC 64-128 mg / ml. Adems, fuertes o potente antioxidante fracciones (F, M) de extracto de metanol exhibieron actividad antimicrobiana. Esta relacin Tambin se observ para las fracciones de extracto de cloroformo. Como resultado, los datos apoyan el uso de S.acmella Murr. como una rica fuente de compuestos de alto valor teraputico de los medicamentos, cosmticos, los complementos alimenticios y de salud como la alimentacin. Experimental Evaluaciones biolgicas Ensayo antimicrobianos: actividad antimicrobiana de los extractos de plantas, las fracciones y aislados (1, 2, 4, 5, 6, estigmasterol, SG y MBSG) se ha investigado, usando el mtodo de dilucin en agar [16]. En resumen, la prueba los compuestos disueltos en cualquiera de los dos CH 2 Cl 2 MeOH individual o se mezclan con Mller Hinton (MH) caldo para obtener un volumen final de 2 ml. Un doble dilucin, se prepar y la solucin se transferido a la solucin de agar MH a dar el ltimo que van desde las concentraciones de 4-256 ug / mL. Veintisiete cepas de microorganismos (Tabla 4), el caldo de cultivo en MH a 37 C durante 24 h, se 0,9% diluido con solucin salina normal para ajustar la densidad celular de 10 8 UFC / mL. Los organismos fueron inoculadas en cada plato utilizando una inoculator multipunto y adems se incuba a 37 C durante 2448 h. Compuestos que poseen alta eficacia para inhibir el crecimiento de las clulas bacterianas fueron analizadas.