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Introduccin
Se entiende como GENOMA el conjunto de genes que especifican todos los caracteres que pueden ser expresados en un organismo. Un genoma es todo el material gentico de un ser vivo. Es el juego completo de instrucciones hereditarias para la construccin y mantenimiento de un organismo.
Ingeniera Gentica
La Ingeniera Gentica es una rama de la gentica que se concentra en el estudio del ADN, pero con el fin su manipulacin. Es decir, es la manipulacin gentica de organismos con un propsito predeterminado. La ingeniera gentica incluye un conjunto de tcnicas biotecnolgicas, entre las que destacan: La tecnologa del ADN recombinante. En este proceso son muy importantes las llamadas enzimas de restriccin, producidas por varias bacterias. Estas enzimas tienen la capacidad de reconocer una secuencia determinada de nucletidos y extraerla del resto de la cadena. Esta secuencia, que se denomina Restriction Fragment Lenght Polymophism o RLPM, puede volver a colocarse con la ayuda de otra clase de enzimas, las ligasas. Anlogamente, la enzima de restriccin se convierte en una "tijera de ADN", y la ligasa en el "pegamento". Por lo tanto, es posible quitar un gen de la cadena principal y en su lugar colocar otro. Microinyeccin. Es un proceso que consiste en utilizar microagujas para insertar sustancias a un nivel microscpico o en el lmite de lo macroscpico dentro de una clula viva. Es un simple proceso mecnico en el cual una aguja extremadamente fina penetra la membrana celular y a veces la membrana nuclear para lanzar su contenido. El proceso es frecuentemente usado como un vector en ingeniera gentica y transgentica para insertar material gentico en una clula. Insercin de los fragmentos de ADN. Esta insercin se realiza en vectores de clonado, que son los agentes transportadores capaces de introducirlos en las clulas hospedadoras. Los vectores de clonacin son pequeas molculas de ADN, que tienen capacidad para autorreplicarse dentro de las clulas hospedadoras. Se utilizan con frecuencia dos tipos de vectores de clonacin: plsmidos y virus. de introducirlos en las clulas hospedadoras. Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR). Es una tcnica que permite duplicar un nmero ilimitado de veces un fragmento de ADN en un tubo de ensayo. Mediante esta tcnica pueden generarse millones de molculas idnticas, a partir de una molcula de ADN. Esto se puede conseguir en unas horas. La reaccin es muy sencilla, necesita cantidades de ADN muy pequeas y slo se precisa un tubo de ensayo, algunos reactivos, una fuente de calor y unas pequeas cadena de nucletidos que actan como cebadores. La reaccin es un proceso cclico: 1.La molcula de ADN que va a copiarse se calienta para que se desnaturalice y se separe las dos hebras. 2.Cada una de las hebras es copiada por la ADN-polimerasa. (Se utiliza la ADNpolimerasa de una bacteria que vive en aguas termales, Thermus aquaticus, as la enzima puede trabajar a altas temperaturas). 3.Las cadenas recin formadas son separadas de nuevo por el calor y comienza otro nuevo ciclo de copias. Estos ciclos se repiten hasta que se obtiene el nmero
de copias deseado.
4. La Ingeniera gentica tiene numerosas aplicaciones en campos muy diversos, entre las mas destacadas encontramos: En Medicina, Obtencin de protenas de mamferos. Una serie de hormonas como la insulina, la hormona del crecimiento, factores de coagulacin, etc ... tienen un inters mdico y comercial muy grande. Gracias a la tecnologa del ADN recombinante, se clonan los genes de ciertas protenas humanas en microorganismos adecuados para su fabricacin comercial. Obtencin de vacunas recombinantes. El sistema tradicional de obtencin de vacunas a partir de microorganismos patgenos inactivos, puede comportar un riesgo potencial. Muchas vacunas, como la de la hepatitis B, se obtienen actualmente por ingeniera gentica. Como la mayora de los factores antignicos son protenas lo que se hace es clonar el gen de la protena correspondiente. Diagnstico de enfermedades de origen gentico. Conociendo la secuencia de nucletidos de un gen responsable de una cierta anomala, se puede diagnosticar si este gen anmalo est presente en un determinado individuo. En el siguiente dibujo se explica brevemente la base del diagnstico. En otros campos, Aplicaciones en la agricultura. La modificacin en los genes permite producir unos cultivos con mayor rendimiento, resistencia a herbicidas, a plagas... Tambin se pueden modificar para que tengan un mayo aporte de nutrientes y con especies angiospermas poliploides obtener un mayor tamao de hojas y frutos. Aplicaciones en la ramadera. Se aplican tanto para la mayor produccin de carne y leche con hormonas, como en las investigaciones de los animales con parecidos genticos para una posterior extraccin de vacunas u rganos para los xenotransplantamientos.
Aplicaciones de bioadsorcin. Consiste en la obtencin de cepas bacterianas capaces de fijar ciertos metales que interesa retirar del medio, como los iones txicos depositados en el suelo, biofiltros capaces de retener iones txicos...
Clonacin.
Clonar significa obtener uno o varios individuos a partir de una clula somtica o de un ncleo de otro individuo, de modo que los individuos clonados son idnticos, genticamente hablando, del original. Se distinguen tres tipos de clonacin: Clonacin molecular. Se refiere al proceso de aislar una secuencia de ADN de inters y obtener mltiple copias de ella en un organismo. Su aplicacin es muy variada, desde deteccin de mutaciones y diagnstico de mutaciones, hasta secuenciacin de ADN y aplicaciones para estudios evolutivos. Clonacin celular o de tejidos. Este mecanismo utiliza las clulas para clonar fragmentos de ADN, no es una clonacin de clulas. Para ello, previamente se han tenido que crear varias copias del ADN que se pretende clonar. Despus se inserta el ADN en vectores que lo transportan e introducen en las clulas que hay que cultivar en un medio de cultivo. Clonacin de organismos. La clonacin de un organismo es crear un nuevo organismo con la misma informacin gentica que una clula existente. Es un mtodo de reproduccin asexual, donde la fertilizacin no ocurre. En trminos generales, slo hay un progenitor involucrado. Esta forma de reproduccin es muy comn en organismos como las amebas y otros seres unicelulares, aunque la mayora de las plantas y hongos tambin se reproducen asexualmente. Tambin se incluye la obtencin de gemelos idnticos de manera natural. Se considera como una alteracin espontnea durante el desarrollo embrionario. Gemelacin artificial. Este tipo de clonacin consiste en tomar un embrin de hasta 8 clulas y generar embriones idnticos preimplantatorios (se podran generar hasta 8 embriones idnticos, uno a partir de cada blastmera). Las blastmeras biopsiadas del embrin original se introducen individualmente o de dos en dos en una zona pelcida vaca (puede proceder de otro animal, pues despus el embrin sale de ella), o en una cubierta artificial (ZPA), y de cada uno se generan embriones idnticos al original (clones). En veterinaria se lleva haciendo ms de 30 aos (para preservar las razas puras y mantener los caracteres deseados de un determinado animal), sin embargo, al considerarse una clonacin, est totalmente prohibido en humanos, principalmente porque los embriones humanos pueden morir durante el proceso. Si se legalizase esta tcnica, el rendimiento por ciclo de fecundacin in vitro (FIV) aumentara espectacularmente, pues se podran obtener muchos ms embriones y fcilmente; adems ya no sera necesario someter a las mujeres a tratamientos fuertes de estimulacin ovrica, pues a partir de un slo embrin podran obtener hasta 8 clones: se transfiere uno y los otros se congelaran, para poder ser transferidos aos despus o como reserva de seguridad, por si el hijo necesita clulas madre para el tratamiento de alguna enfermedad Clonacin reproductiva. La clonacin reproductiva es la clonacin propiamente dicha, y se basa en la creacin de una copia genticamente idntica a una copia actual o anterior de un ser humano o animal. Es tcnicamente posible, pues se ha conseguido en animales, aunque tiene bajo rendimiento y conlleva ciertos riesgos, como por ejemplo, problemas epigenticos (sndrome LOS: el clon crece mucho ms, que el animal original) y de senescencia. Este tipo de clonacin est absolutamente prohibido en humanos, pues no tiene ningn sentido teraputico, aparte de que al no ser una tcnica perfeccionada,
La tcnica en animales consiste en conseguir clulas que contengan el gen responsable de la caracterstica deseada. Posteriormente, el ncleo de esa clula es insertado en un ovocito, del que previamente se ha extrado su ncleo. Despus hay que conseguir que esa clula diploide se divida formando un nuevo individuo, tal como lo hara un cigoto formado por la fecundacin de un vulo con un espermatozoide. Finalmente, para que se desarrolle el embrin hay que implantarlo en el tero de una hembra. sta tcnica permite seleccionar a los individuos mas capacitados o en mejores condiciones, permitir la descendencia a progenitores que no podran tener de otra manera y en el desarrollo y la investigacin creando copias idnticas que permiten el estudio de un mismo frmaco o experimento en varios individuos genticamente idnticos En el caso de vegetales se utilizan clulas con capacidad de divisin. A stas se les aaden los genes seleccionados. A continuacin, las clulas se cultivan en el laboratorio y se obtienen de ellas, plantas con caractersticas distintas a la planta inicial. De la misma manera, la obtencin de vegetales mas resistentes y con mayores propiedades abren las posibilidades de aumentar la calidad y la experimentacin con ellos
Clulas madre
Clula madre se define como una clula progenitora, capaz de regenerar uno o ms tipos celulares diferenciados. En los animales superiores, las clulas madre se han clasificado en dos grupos. Por un lado, las clulas madre embrionarias . Estas clulas derivan de la Masa celular interna del embrin en estadio de blastocisto (7-14 das), y son capaces de generar TODOS los diferentes tipos celulares del cuerpo, por ello se llaman clulas pluripotenciales. De estas clulas se derivaran, tras muchas divisiones celulares, el otro tipo de clulas, la clulas madre rgano-especficas. Estas clulas son multipotenciales, es decir, son capaces de
originar las clulas de un rgano concreto en el embrin, y tambin, en el adulto. El ejemplo ms claro de clulas madre organo-especficas, es el de las clulas de la mdula sea, que son capaces de generar todos los tipos celulares de la sangre y del sistema inmune. Pero estas clulas madre existen en muchos ms rganos del cuerpo humano, y podemos encontrar en la literatura cientfica como ya se han aislado clulas madre de adulto de la piel, grasa subcutnea, msculo cardaco y esqueltico, cerebro, retina, pancreas... A da de hoy, se han conseguido cultivar (multiplicar) estas clulas tanto en in-vitro (en el laboratorio), como in-vivo (en un modelo animal) utilizndolas para la reparacin de tejidos daados. A pesar de todo, la aplicacin de estas tcnicas de trasferencia de clulas madre de adulto para el recambio y reparacin de tejidos enfermos est todava en sus comienzos. Problemas cientificos. En las clulas madre embrionarias: Difciles de controlarlas; por lo tanto, la manera en que el tipo de clula trate una enfermedad debe ser optimizada y definida correctamente. Pueden generar conflictos en el sistema inmune de la persona, debido a que difieran en este aspecto con las del recipiente donde estn contenidos. Aquellos quienes piensan que la vida se inicia al momento de la concepcin, indican que las investigaciones en embriones humanos no es tico, independientemente de s hubo o no consentimiento para donarlos. En las clulas madre adultas: Aquellas que hayan sido cosechadas pueden originar mutaciones causantes de enfermedades, o con riesgo de ser daadas en la experimentacin. No viven mucho bajo cultivo, como s las embrionarias. Solo pueden obtenerse en cantidades muy pequeas. Aspectos ticos. En los animales superiores, las clulas madre pueden ser embrionarias y somticas o adultas, segn su estado evolutivo. En la actualidad se mantiene una extraordinaria polmica sobre qu clulas madre utilizar: las embrionarias o las adultas, debate en el que se han incluido aspectos cientficos, ticos, religiosos, sociales y polticos. Un aspecto del debate cientfico est relacionado con la capacidad generativa de tumores por las clulas embrionarias. Tambin se ha sealado que los beneficios de las clulas embrionarias se han exagerado y que en su lugar podran utilizarse clulas madre adultas, con las que no existen restricciones ticas ni se ha comprobado la generacin de tumores. Desde el punto de vista tico, se ha argumentado que el uso de las clulas madre embrionarias humanas implica la destruccin de embriones y se ha considerado que la vida comienza en el mismo momento de la unin del espermatozoide con el vulo. Lo que equivaldra a la destruccin de una vida humana, algo no justificable. Otros no estn de acuerdo con estos criterios, y plantean que su uso para salvar vidas mediante la investigacin o la teraputica estara justificado. Recientemente se ha logrado la obtencin de clulas madre embrionarias denominadas clulas madre ticas, pues este nuevo mtodo eliminara el dilema tico de destruir embriones. Algunos han planteado que estos resultados son preliminares, posiblemente exagerados, y la eficiencia del mtodo es muy baja. Otros sealan que resulta ms tico trabajar con embriones que de todas formas se van a destruir.