Un Nuevo Metodo para Ver El ADN

V 22
V 22
V 22 2008
VVVV
UN NUEVO METODO PARA
VER EL DNA
GLORIA ELENA LEON PAZ

ENRIQUE RODRIGUEZ
GLORIA ELENA LEÓN PAZ 2
ENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA
V22
UN NUEVO METODO DE ANALISIS
DEL DNA
V22
V22
UN NUEVO MÉTODO DE ANALISIS
DEL DNA.
EL TRABAJO DE INVESTIGACIÓN QUE A CONTINUACIÓN

DESCRIBIREMOS ES EL RESULTADO DE UNA INTENSA
EXPERIENCIA CIENTÍFICA, DE UNA BÚSQUEDA Y UN
DESCUBRIMIENTO QUE ES DE CIERTA MANERA UN
ENCUENTRO ANTICIPADO CON EL FUTURO.
EL AÑO DE 1985 INICIAMOS LAS PRUEBAS PRELIMINARES DE UNA

NUEVA INVESTIGACIÓN EN EL CENTRO DE INVESTIGACIONES
CIENTÍFICAS Y TECNOLÓGICAS DE LA UNIVERSIDAD DE SONORA
(CICTUS) PARA POSTERIORMENTE CONTINUARLAS EN EL CENTRO
DE INVESTIGACIÓN EN ALIMENTACIÓN Y DESARROLLO ( CIAD ) EN
HERMOSILLO SONORA, MÉXICO; INSTITUCIÓNES EN LA QUE
TRABAJABA COMO INVESTIGADORA EN LAS DÉCADAS DE LOS
SETENTAS Y LOS OCHENTAS.
NUESTRO INTERÉS ESTABA ENFOCADO A REALIZAR VARIAS

PRUEBAS EXPERIMENTALES SUSTENTADAS EN NUMEROSAS
OBSERVACIONES Y REFLEXIONES TEÓRICAS E INVESTIGACIÓN
BIBLIOGRÁFICA, EL RESULTADO DE ESTAS PRUEBAS NOS LLEVARÍA
POCO DESPUÉS A LA ELABORACIÓN DE UNA HIPÓTESIS QUE SERIA
BASE Y PRINCIPIO DE UNA INVESTIGACIÓN MÁS PROFUNDA QUE
ROMPERÍA RADICALMENTE CON EL MÉTODO TRADICIONAL DE
ANÁLISIS DE DNA POR MEDIO DE ELECTROFORESIS.
EL TRABAJO COTIDIANO QUE REALIZÁBAMOS EN EL LABORATORIO

CON MUESTRAS DE ADN DE DISTINTOS ORÍGENES NOS LLEVO PASO
A PASO A LA DETERMINACIÓN DE QUE ERA NECESARIO ENCONTRAR
UN CAMINO ALTERNO AL USO DEL MÉTODO DE ELECTROFORESIS,
NOS HICIMOS EL PROPÓSITO DE BUSCAR UNA TÉCNICA DE
ANÁLISIS CON LA QUE PUDIÉRAMOS DESCARTAR O SUSTITUIR EL
USO DEL BROMURO DE ETIDIO Y LA LUZ ULTRAVIOLETA, EL
PRIMERO COMO COLORANTE DEL ADN Y EL SEGUNDO COMO
REVELADOR DE ADN.
PARA TODOS LOS INVESTIGADORES QUE NOS DEDICAMOS A LA

BIOLOGÍA MOLECULAR TODA INVESTIGACIÓN CON ADN HA SIDO Y
ES APASIONANTE, EL HORIZONTE ABIERTO POR LA GENÉTICA SE
PRESENTA COMO ALGO INFINITO Y MARAVILLOSO, SIN EMBARGO
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EL RIESGO PROFESIONAL ES CONSTANTE Y PERMANENTE PARA LA

SALUD DE LOS INVESTIGADORES AL ESTAR EXPUESTOS

COTIDIANAMENTE A LA MANIPULACIÓN DE MATERIALES TÓXICOS Y
CANCERÍGENOS.
ESA CIRCUNSTANCIA APARENTEMENTE FATAL, NOS LLEVO A TOMAR
LA DETERMINACIÓN DE BUSCAR UN SUSTITUTO AL BROMURO DE
ETIDIO, UN NUEVO COLORANTE QUE FUERA BIODEGRADABLE, QUE
SE ADHIRIERA A LA MOLÉCULA DE ADN Y QUE LO HICIERA VISIBLE
A LA LUZ NORMAL SIN NECESIDAD DE UTILIZAR LA LUZ
ULTRAVIOLETA.
COMPARTIR CON USTEDES POR ESTE MEDIO, EL RESULTADO DE

NUESTRAS INVESTIGACIONES , ES DARLE SENTIDO SOCIAL A
NUESTRO ESFUERZO, QUE HASTA AHORA ABARCA UN PERÍODO DE
22 AÑOS Y QUE SIGNIFICA PARA NOSOTROS EL PRINCIPIO.
HERMOSILLO, SONORA
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GENESIS
INTRODUCCION
Estado del Arte
A partir de que el holandés Antonio Van Leeuwenhoek dió a

conocer el resultado de sus observaciones realizadas con un
microscopio construido y perfeccionado por él mismo, ante
los científicos miembros de la Real Sociedad de Inglaterra,
entre los que se encontraban Robert Boyle, fundador de la
química científica, Isaac Newton y Regnier de Graaf entre
otros, el estudio de la naturaleza orgánica adquirió una nueva
dimensión, un mundo microscópico desconocido para todos se
reveló creando una gran conmoción en el mundo científico del
siglo XVII, en ese tiempo no se aceptaba que hubiera
organismos mas pequeños que los ácaros, pero el trabajo de
observación minucioso y tenaz de Leeuwenhoek evidenció la
existencia de organismos invisibles para los ojos humanos, en
un siglo en el que aun persistían supersticiones y atavismos
que dificultaban enormemente el trabajo de los hombres de
ciencia, el descubrimiento de Leeuwenhoek tan importante y
trascendente como el descubrimiento del fuego o de la rueda,
habría de convertirse en un impulsor del desarrollo científico
en los siglos siguientes, al igual que la teoría heliocéntrica de
Copérnico que recibió un apoyo determinante en el siglo XV11,
de otro sabio contemporáneo de Leeuwenhoek, Galileo Galilei
que se interesó por la fabricación de los primeros telescopios,
el microcosmo y el macrocosmo revelando en forma
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dosificada, sus enigmas.

La capacidad de poder ver organismos microscópicos se abrió

paso en las ciencias biológicas aportando un elemento
esencial de unidad en el estudio de los seres vivos e hizo
posible analizar todos los organismos en sus dos
caracterizaciones, o bien como un sistema de células o
unicelulares, esto devino en la clasificación de los seres vivos
en dos grupos bien definidos, el primero de ellos es el de los
eucariotas con un núcleo que contiene los cromosomas con
mayor información genética, lo que los convierte en
organismos mas complejos capaces de reproducirse
sexualmente y el segundo grupo al que pertenecen los
procariotas que tienen su cromosoma o sus cromosomas en el
citoplasma y que carecen de núcleo definido que caracteriza a
las bacterias unicelulares.
A mediados del siglo XIX , dos investigadores aportarían

nuevos elementos en el estudio de los organismos y de la
herencia genética, el inglés Charles Darwin y el austriaco
Gregor Mendel. En 1859 aparece la revolucionaria tesis de
Darwin al editarse “El Origen de las Especies”. Darwin
descubrió que la descendencia tenía pequeñas diferencias con
sus progenitores, de tal manera que los hijos son casi iguales
a sus padres y ese “casi”, significa la nueva característica que
permite la evolución de las especies.
Gregor Mendel era un monje austriaco que al interior de su

convento realizó importantes experimentos de polinización de
semillas de guisantes por medio de los cuales descubrió las
leyes de la herencia y acuñó términos aun vigentes como
caracteres recesivos y caracteres dominantes y desarrolló la
estadística rudimentaria al establecer ecuaciones de
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predicción para la descendencia, conociendo las

características de los progenitores. De hecho con Mendel se

desarrollo en 1860 el concepto de gen, aunque sería hasta el
siglo siguiente que pasaría a formar parte del paradigma
genético.
No obstante, ellos nunca supieron que fueron los pioneros en

el estudio del DNA, tampoco los científicos de su época
reconocieron la importancia de los trabajos publicados y fue
hasta principios del siglo XX, después de que ellos murieron,
cuando se retomaron y reconocieron los postulados de Darwin
y Mendel sobre la herencia y evolución .
Un científico contemporáneo a Darwin y Mendel llamado

Fiedrich Miescher descubrió en 1869 que un material extraído
de núcleos celulares y de células del pus era diferente en su
composición química a las proteínas sentando las bases de la
química genética y al descubrimiento del DNA. Miescher aisló
un compuesto que denominó nucleína hoy conocido como
ácidos nucleicos.
Un salto cualitativo muy importante y trascendente en la

biotecnología se produjo en 1937 cuando el bioquímico sueco
Arne Tiselius y el investigador P. Kônig inventaron el método
de la electroforesis cuya aplicación en el estudio de la
genética y del genoma humano ha sido muy determinante.
Otro avance notorio en el campo de la microbiología sucedió

en 1942 cuando el científico italiano Salvador Luria obtuvo la
primera microfotografía de alta calidad de un bacteriófago.
<En 1944, el científico norteamericano Oswald Avery en

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compañía de sus colaboradores Colin Macleod y Maclyn

McCarty demostraron que las características hereditarias de

los seres vivos, se debían al DNA y no a las proteínas y lo
comprobaron al transformar una bacteria inocua en patógena,
con material genético que extrajeron de otra bacteria
virulenta.
Cuando Avery anunció a la comunidad científica su

descubrimiento, la reacción fue de burla y escepticismo , mas
sin embargo, la curiosidad y la expectación creada propició
que se iniciara un gran número de líneas de investigación,
entre ellas la búsqueda de tecnologías para la purificación del
DNA y la definición de sus componentes químicos que dio
elementos teóricos y experimentales suficientes para
establecer la unidad básica estructural del ADN.
Max Delbruck, Salvador Luria y otros investigadores formaron

en 1947 el grupo de “Los fagos” en los Estados Unidos de
Norteamérica, sus investigaciones fueron ampliamente
difundidas y tuvieron una gran influencia.
La investigación de bacteriófagos realizada en 1952 por

Oswald Avery, Martha Chase y Alfred Hershey probó que el
DNA era el portador de la herencia genética y puso de relieve
los factores químicos y moleculares de la composición
estructural del ADN.
Por su parte, la investigadora Rosalynd Franklin entre los

años 1953 a 1954, logro producir imágenes de rayos X de la
forma B de ADN.
En 1953 James Watson , Francis Crick, Maurice Wilkins y

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Rosalynd Franklin descubrieron la estructura molecular del

DNA lo que hoy se conoce como la doble hélice y lo publicaron

en la revista Nature, con el titulo: “Una estructura para el
ácido desoxirribonucleico” J. Watson reconoce en su artículo
“La doble hélice” que el éxito de la propuesta se debió
también a Linus Pauling.
El modelo de Watson y Crick propone dos hélices enrolladas

alrededor del mismo eje formada por residuos de D-
deoxiribofuranosa unidos por enlaces fosfodiester (en las
posiciones 3 y 5). En cada hélice las bases quedan en el
interior y los grupos fosfatos en el exterior. Las dos hélices se
mantienen unidas por enlaces de puente de hidrógeno entre
las purinas de una cadena y las pirimidinas de la otra,
conforme quedan enfrentadas en pares (2 a 2).
En 1956 el investigador Arthur Kornberg descubrió la enzima

ADN polimerasa. La primera enzima de restricción fue aislada
en 1971 y en 1984, el investigador Kary Mullis inventa la
reacción de polimerasa en cadena PCR.
Científicos más jóvenes que James Watson se opusieron en

1986 a la aprobación y financiamiento del “Proyecto Genoma
Humano”, por considerarlo aún sin las suficientes bases
científicas para su desarrollo, el objetivo de este proyecto era
descifrar la secuencia completa del ADN del ser Humano.
Watson fue uno de sus más tenaces impulsores y logró
finalmente que se pusiera en marcha.
Los Nuevos Paradigmas
El epistemologo y filósofo norteamericano Thomas Samuel

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Kuhn (1922-1996) hizo en su obra preguntas fundamentales

acerca del conocimiento científico, entre ellas las siguientes:

¿Como se lleva a cabo la actividad científica?, ¿Es el
conocimiento científico acumulativo a lo largo de la historia?,
las respuestas que da Kuhn a estas y otras preguntas en su
libro “La estructura de las revoluciones científicas” (1962)
significaron un gran cambio en las posiciones filosóficas
acerca de la ciencia, el modelo formalista que imperaba hasta
entonces (Círculo de Viena) fue desafiado por el enfoque
historicista de T. S. Kuhn, según el cual la ciencia se desarrolla
siguiendo determinadas fases:
1.-Establecimiento de un paradigma
2.-Ciencia normal
3.-Crisis
4.-Revolución científica
5.-Establecimiento de un nuevo paradigma
Kuhn consideraba a los paradigmas como realizaciones del

conocimiento científico universalmente reconocidas que
durante cierto tiempo proporcionan modelos de problemas y
soluciones a una comunidad científica, los paradigmas son por
tanto la suma de teorías, conocimientos y prácticas que se
aceptan en forma universal por toda la comunidad científica y
a partir de las cuales se realiza una determinada
investigación, a esta forma de investigación la llama Kuhn
“Ciencia Normal” que significa que una investigación esta
basada firmemente en realizaciones científicas pasadas,
mismas que una comunidad científica particular reconoce
durante cierto tiempo como fundamento valido para su
práctica posterior. Esta fase del conocimiento científico ocupa
la mayor parte del tiempo, de los investigadores que realizan
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trabajos rutinarios de comprobación de los conocimientos, que

han adquirido para poner a prueba la solidez del paradigma

en que se basan, demostrar su amplio dominio sobre el
mismo, pero sin atreverse a romper las concepciones de su
tiempo, como sí lo hicieron Galileo , Einstein y tantos otros
investigadores.
Para Kuhn, se produce una revolución científica, cuando uno

de los nuevos paradigmas sustituye al tradicional, como
sucedió con la teoría heliocéntrica de Copérnico que sustituyó
a la concepción geocéntrica de Tolomeo, o la teoría de la
relatividad de Albert Einstein, que cambió totalmente la visión
del universo propuesta por Isaac Newton, agrega Kuhn, “Las
revoluciones científicas se consideran aquí, como aquellos
episodios de desarrollo no acumulativo en el que un antiguo
paradigma es remplazado, completamente o en parte por otro
nuevo e incompatible, el progreso de la ciencia se produce
solo en las fases de ciencia normal, pero no se puede hablar
de un progreso continuo desde la época de los griegos hasta la
actualidad porque las revoluciones científicas no son sino
rupturas de esa continuidad. Cada revolución científica marca
en cierto sentido un nuevo comienzo de la ciencia, un nuevo
paradigma”.
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LA DOBLE HELICE
QUE ES EL ADN
En términos del paradigma de la

“Ciencia Normal” podemos definir el DNA como la molécula
que contiene y organiza la vida, se encuentra en el núcleo
celular y está compuesta por 2 cadenas complementarias,
unidas entre sí por los pares de bases nitrogenadas. Cada
cadena esta compuesta por unidades que se conocen como
nucleótidos, que son como los eslabones de cualquier cadena.
Hasta la actualidad se han desarrollado diferentes
metodologías para el análisis y conocimiento del DNA, todas
basadas en el principio de que: “El DNA no se puede ver”, se
ha establecido este principio como un dogma indiscutible, un
límite a la visión al igual que lo fueron los ácaros del siglo
XV11. La metodología de electroforesis utilizada actualmente
en los laboratorios del mundo ha brindado conocimientos
sobre el DNA muy importantes, sin embargo, sus resultados
siempre son de interpretación por ser indirectos, ya que no
ofrecen una imagen real y directa del DNA sino bandas, en
todos los casos, independientemente del origen de las
muestras.
BIOFOOD KITS Cat. No. 91.122 BIOTOOLS

M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 M
: Visualización de fragmentos de RFLP correspondientes a 14 especies
diferentes, tras digestion con la Enzima 1. M: 100-bp molecular ladder (Cat. No.
31.006). Carriles 1 a 14: patrones de restricción de buffalo, conejo, caballo, gamo,
vaca, cabra, ciervo, emu, canguro, avestruz, gato, perrro, ratón y humano.
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Del fenotipo al genotipo

“Los genetistas moleculares pensamos en
Genes y genomas, casi en términos visuales.
Somos capaces de “Ver” con nuestros ojos
Mentales el DNA y los esquemas de su
Funcionamiento”
Maxine Singer y Paul Berg, 1993.
En la investigación que durante 22 años hemos realizado,

desarrollamos una metodología para aislar y extraer el DNA de
células sanguíneas, estas muestras de DNA forman patrones
perceptibles bajo un microscopio óptico. En el proceso de
aplicación de la técnica, las células de la sangre son aisladas
de la muestra mediante el procedimiento de remover el
plasma, después las células aisladas, son tratadas con
reactivos orgánicos con alta solución salina, para liberar el
agregado de DNA sin perturbar su integridad, toda vez que los
glóbulos rojos no tienen núcleo, el agregado de DNA es
formado de los glóbulos blancos, una ultima fase del
procedimiento consiste en precipitar el agregado de DNA para
facilitar la formación de patrones visuales, después la muestra
es examinada en el microscopio.
Haber encontrado esta nueva tecnología para estudiar el DNA,

ha sido producto del trabajo experimental de muchos años.
Inicialmente solo quisimos cambiar el bromuro de etidio,
colorante utilizado en electroforesis, por otro que no fuera
perjudicial para la salud y el entorno ecológico y además que
no necesitara de iluminación con luz ultravioleta para poder
ver las bandas de DNA. Buscando el colorante seguro y eficaz,
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probamos algunos por electroforesis en corridas de muestras

de DNA de bacterias, en una ocasión por una omisión, el

buffer de TRIZMA se utilizó sin diluir, ya que se preparaba 10
veces concentrado (10 X), por lo que la muestra de DNA se
comportaba diferente, decidimos observarla al microscopio y
fue así como por vez primera, vimos la cadena de ADN.
El 16 de enero de1991, fecha inolvidable en la que por

primera ocasión observamos una imagen de ADN en el
microscopio óptico, se inició en Medio Oriente, la llamada
“Guerra del Golfo” o “Tormenta del Desierto”, no pudimos
evitar reflexionar en esos momentos, como lo hiciera
muchísimas décadas atrás, el escritor soviético Ilya Ehrenburg
en tiempos similares, sobre esos dos polos extremos de la
existencia humana que son la vida y la muerte. Ante lo
contrastante que resultaba el estar en el laboratorio
observando y analizando una muestra de DNA, origen y
maravilla de la vida y por otra parte estar escuchando
simultáneamente, de un televisor cercano, el estruendo
mortífero de la destrucción de las bombas sobre Bagdad .
Pasada la fuerte emoción de la experiencia indescriptible, de

poder ver por primera vez de manera directa la imagen del
ADN en el microscopio óptico y constatar, que lo que estaba
viendo no tenia ningún precedente visual morfológico con
microorganismo alguno, aun así entramos en duda sobre lo
que observaba, ya que fuimos los primeros escépticos,
influenciados por el peso del dogma vigente, de que “El DNA
no se puede ver”, aprendido desde los años estudiantiles de
nuestra formación profesional. Pensamos que una posibilidad
era que la muestra de DNA, se pudo haber contaminado
durante su preparación y que lo que veíamos tenia ese origen,
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nos resistíamos a creer lo que veíamos en el portaobjeto del

microscopio, un hilo claro y casi transparente, diferente a todo

lo antes visto a través de un microscopio, una imagen
hermosa y apabullante por su importancia y por lo que
significa en el ciclo vital de todos los organismos vivos.
Repetimos por tanto el experimento una y otra vez desde el
principio, teniendo especial cuidado en la realización de cada
paso del proceso, incluyendo la esterilización minuciosa de
todo el material y el equipo utilizado, operación necesaria para
llevar a cabo las repeticiones necesarias siguiendo los
siguientes pasos:
1) Cultivar la bacteria
2) Extraer el ADN
3) Purificarlo
4) Precipitarlo
5) Observarlo al microscopio óptico
Repetimos varias veces las pruebas con el DNA de la cepa

de Escherichia. Coli, que fue la primera bacteria con la que
trabajamos, después con el DNA de otras cepas y luego con
otras bacterias y el resultado siempre fue el mismo, pero
ya con la seguridad plena de que las muestras no estaban
contaminadas, que la forma de extracción era correcta y
de que efectivamente el DNA si se puede ver con un
microscopio óptico.
Después de emplear varias semanas en repeticiones con

diferentes cultivos de microorganismos y una vez que nos
convencimos totalmente que el ADN de bacterias se puede
ver en un microscopio óptico, elaboramos una hipótesis y
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un protocolo que nadie quiso escuchar o conocer, porque el

dogma científico afirma que era algo imposible y

descabellado afirmar que el DNA se puede ver.
Para no frenar nuestro propósito de continuar con esa línea

de investigación y poder avanzar con el proyecto de
desarrollar un nuevo método para analizar y estudiar el
DNA, solicitamos ingresar al doctorado en biología
molecular, en el Instituto de Ingeniería Genética de la
UNAM, que se encuentra en Cuernavaca Morelos.
En el departamento de biología molecular de esa

institución, nos comunicaron que podía ingresar al
posgrado, pero no era admitido que los aspirantes al
doctorado llevaran su propio proyecto de investigación,
mas bien todos los estudiantes aceptados tenían que
adscribirse a un proyecto ya existente y con presupuesto
aprobado por tanto no estaba permitido desarrollar como
tesis doctoral nuestro proyecto.
Sin embargo el Director del área nos recibió y nos escuchó

con mucha gentileza y atención cuando le hablamos de
nuestra investigación y las pruebas realizadas hasta
entonces, también vio minuciosamente nuestras primeras
fotografías del DNA de 4 bacterias que le mostramos.
Nosotros escuchamos todas sus observaciones y tratamos
de responder a sus preguntas de la manera más explicita.
Al final de la entrevista nos causó gran sorpresa cuando nos
recomendó que por considerar que valía la pena desarrollar
un esfuerzo para continuar la investigación, lo primero que
teníamos que hacer es proteger la idea del nuevo método
de análisis de DNA y patentarlo, en México y en Estados
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Unidos.
Regresamos a Hermosillo felices y dispuestos a llevar a

cabo la sugerencia, que nos hizo el entonces director de
Biología Molecular de la Universidad Autónoma de México
(UNAM), que una personalidad científica de su nivel,
estimara nuestro trabajo adecuado para patentarlo, fue un
estímulo absoluto para tratar de vencer todas las
dificultades que se presentaran.
En octubre del mismo año (1991), solicitamos la patente en

el IMPI (Instituto Mexicano de la Propiedad Industrial) en
la ciudad de México, y en diciembre del mismo año viajamos
a Washington D,C, para solicitar la patente en Estados
Unidos. Pasaron 5 años sin recibir ninguna comunicación
del IMPI, y sin que decayera el animo y el entusiasmo por la
investigación continuamos trabajando, pasando de un
asombro a otro ante los resultados obtenidos en el
laboratorio. En 1996 nos otorgaron la patente (182175) en
México, D. F. titulada: “ Un Nuevo Colorante Para la
Tinción del DNA ” (de Rodríguez León Paz Gloria Elena
1996). La solicitud que realizamos en Washington no
prosperó en ese primer intento, porque ignorábamos en
ese tiempo que en Estados Unidos, existen despachos de
abogados autorizados legalmente para llevar a cabo esos
trámites y además no tuvimos los recursos económicos
para contratar a los de abogados que nos llevaran el caso,
le diera seguimiento y en su momento formulara las
reivindicaciones de la solicitud de patente.
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Los Polímeros Naturales

En 1966, 30 años antes de que nos concedieran el registro de
esa patente, presenté mi examen profesional en la
Universidad de Sonora para recibir el titulo de Química
Industrial, con un trabajo de tesis titulado “Obtención de
Extracto curtiente Libre de Almidón de la Cañagria (Rumex
hymenosepalus)” por esta investigación me fue otorgada una
mención honorífica por trabajo de tesis, y en 1980 obtuve la
patente del Instituto de la Propiedad Industrial con el mismo
trabajo., pero con el nuevo título de “Proceso Mejorado para
Obtener Extracto Curtiente Libre de almidón a Partir de la
Cañagria (Rumex Hymenosepalus)”, (Patente número
142378, otorgada el 8 de octubre de 1980) cuyos derechos
doné a la Comisión Nacional de Zonas Áridas, CONAZA.
Tuve mis primeras prácticas profesionales (1967)

trabajando en el análisis de minerales de uranio en el
Estado de Sonora con la Comisión de Energía Nuclear y
tome un curso de actualización profesional en la UNAM en
1968. Durante dos semestres realicé estudios con la
primera generación de la Maestría en Polímeros y
Materiales, en la Universidad de Sonora, esos estudios de
posgrado los abandoné al enterarme que el plan de estudios
no contemplaba el trabajo con polímeros naturales, tenia en
esa época un especial interés por esa clase de polímeros,
puesto que el extracto de Cañagría con el que trabajé en mi
tesis, es un polímero natural. No sabia en esos años que el
futuro me guardaba una sorpresa en relación a esos
conocimientos.
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Desarrollo de un Método
para la Determinación
del Perfil Plasmídico en
Escherichia coli
En 1988, 22 años después de obtener mi licenciatura, me

titulé de la Maestría en Ciencias, con la tesis ”Desarrollo de
un Método para la Determinación del Perfil Plásmidico en
Escherichia coli”, fue mi primer trabajo sistemático con
DNA y nació de la necesidad de tener un método
reproducible para conocer el perfil plásmidico de bacterias.
Al inicio del estudio, en la revisión bibliográfica, encontré
una gran cantidad de metodologías propuestas y al tratar
de aplicarlas en el laboratorio, observé que el perfil
bacteriano dependía del método utilizado, es decir, que un
mismo microorganismo analizado para su perfil plásmidico
por diferentes métodos presentaba resultados distintos. Por
ejemplo, la importancia del perfil plásmidico de un
microorganismo patógeno, que sea resistente a diferentes
antibióticos, es debido a que los plásmidos se puedan
correlacionar con el tipo de microorganismo que lo
contiene, con diferentes toxinas producidas por él, con su
serotipo y también con la resistencia a antibióticos. Esto
hace pensar en la posibilidad, de poder sustituir las
pruebas bioquímicas, por el perfil plásmidico para
caracterizar una cepa determinada, significando esto en
primer lugar, el ahorro de tiempo en el cual se podría
detener una infección y hasta una epidemia. Otra
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observación hecha durante la experimentación, es que

algunas cepas independientemente de que presenten
resistencia a antibióticos, no es posible detectar en ellas la
presencia de plásmidos.
Los trabajos de Poh y Col. (1988) y Tennet y Col, (1984)

reportan respectivamente que únicamente al 20 y 30 % de
la cepas con multiresistencia a antibióticos, se les detectó
DNA plásmidico y en ambos casos se concluye, que
seguramente la resistencia esta codificada en el cromosoma
bacteriano. Por otra parte, McClenaghan y Col. (1988)
comentan que la técnica de teñido con bromuro de etidio en
gel de agarosa no es suficientemente sensible para detectar
plásmidos con bajo número de copias, así pues por lo
reciente de esta nueva fase de la genética no se había
madurado suficientemente una metodología para el
establecimiento del perfil plásmidico, por tanto, el trabajo
que realicé tuvo como objetivo establecer un método de
amplificación plásmidica que lleven genes que codifiquen
resistencia a antibióticos, incluyendo a los de bajo número
de copias. Estudié durante esa investigación 6 cepas de
Escherichia coli , 4 de ellas resistentes a tetraciclina y las
otras 2 resistentes a tetraciclina y carbencilina, esas
bacterias fueron aisladas de heces fecales de niños
enfermos con diarrea internados en el Hospital Infantil del
Estado de Sonora en Hermosillo Sonora. El método
propuesto consiste en 5 etapas principales:
1.- Cultivo de toda la noche de la cepa problema y de la

cepa E. coli jm 101 ya caracterizada
2.- Extracción del ADN plásmidico de la cepa problema con
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fenol-cloroformo
3.-Transformación de E, coli jm 101 con el ADN de la cepa

problema
4.- Cultivo y extracción del plásmido de transformadas
5.- Análisis del perfil por electroforesis.
El perfil de las transformadas demostró que el plásmido que
codifica resistencia al antibiótico tetraciclina, se amplifica al
transformar la E. coli jm101 y tiene un peso molecular de
4.2 kb.
En estas pruebas utilicé en repetidas veces la reacción de

polimerasa PCR. Descubierta por el investigador y Premio
Nobel norteamericano Kary Mullis.
En septiembre de 1989 presentamos el trabajo de

investigación “Obtención del Perfil Plásmidico de
Escherichia Coli, por Transformación” en el III Congreso
Nacional de Biotecnología y Bioingeniería, en Monterrey
Nuevo León.
El estudio del ADN a partir de este trabajo se convirtió en

el centro de todo mi interés como investigadora, sin
embargo y a pesar de los resultados tan satisfactorios
obtenidos con el método desarrollado, el enfoque y la
dirección que tomarían mis futuros trabajos con ADN.
serían completamente distintos a los de esa inolvidable
experiencia.
Al regresar de Monterrey, después de nuestra participación

en el III Congreso de Biotecnología y Bioingeniería,
tuvimos la fortuna de encontrar una valiosa coincidencia,
que sería muy importante para nuestra investigación,
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cuando al realizar el estudio bibliográfico de colorantes,

nos encontramos con publicaciones en donde se reportaba

el uso de taninos, como colorantes de DNA (Stockert J.C.
1989), (Naguro T. et al 1990).
Conservaba aun una pequeña cantidad de extracto curtiente

de cañagria (taninos), que guardaba de recuerdo del
trabajo de tesis de licenciatura, mismo que utilizamos para
probarlo como colorante de DNA. Así lo hicimos y
establecimos la concentración más adecuada, obtuvimos de
esta manera el resultado esperado. En esta forma
encontramos el nuevo colorante para DNA tanto tiempo
buscado y estaba en casa.
Al igual que el DNA, los taninos son polímeros, formados

por unidades o eslabones.
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TANINOS
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NUCLEOTIDOS
Primer Trabajo Experimental del

Nuevo Método de Análisis de DNA.
Iniciamos la experimentación, utilizando 4 cepas bacterianas:
A) Estafilococos Epidermidis, resistente a 4 antibióticos,
tetraciclina (Tc),
penicilina (Pc), eritromicina (Em) y ampicilina (Am).
B) Escherichia coli con una resistencia a (Tc).
C) Escherichia coli con una resistencia a (Tc)
D) Escherichia coli con 2 resistencias a (Tc) y carbencilina
(Cb.).
Estas cepas se cultivaron y después se analizaron de la
siguiente manera:
1) Cultivo de toda la noche y centrifugar.
2) El precipitado se resuspendió en un buffer
3) Se agregó fenol y cloroformo
4) Se centrifugó
5) A la fase acuosa se le añadió alcohol etílico absoluto,
para precipitar el DNA y se incubó a -40º C x 30 min. o
mas.
6) Se centrifugó, se descartó el sobrenadante y se dejó
secar el precipitado
7) Al precipitado se le añadió colorante disuelto en buffer.
8) El DNA teñido se precipitó con alcohol etílico absoluto, se
centrifugó y se dejo secar a temperatura ambiente.
9) Se agregó buffer TE
10) Se tomó una alícuota, se colocó en un portaobjetos
y se dejo secar a temperatura ambiente.
Se observó al microscopio.
11) Se tomó la fotografía al DNA de las 4 cepas..
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Se anexan las fotografías de las 4 cepas analizadas (anexo

# 1), tomadas con el objetivo 4X. Las mismas muestras se
analizaron por electroforesis, teñidas con bromuro de
etidio, se anexan también las fotografías correspondientes.
En los primeros años de la investigación de DNA, aplicando
nuestro Método V22 que permite verlo en el microscopio de
luz, acostumbramos analizarlo, como decimos
anteriormente, en forma paralela con el método de
electroforesis, esto con la finalidad de estar seguros que lo
que observamos en el microscopio era realmente DNA.
Las diferencias que encontramos entre los 2 métodos son

significativos y radicalmente distintos, especialmente en
los resultados que se obtienen, mientras que con el método
de electroforesis lo que obtenemos invariablemente son
bandas, independientemente del origen del DNA, y
adicionalmente se deben realizar una serie de cálculos e
interpretaciones para poder establecer los resultados. En
cambio con el Método V22, lo que obtenemos es una
imagen real con las características intrínsecas de cada DNA
analizado, lo que permite al investigador cuando observa
al microscopio la imagen del DNA de la muestra o bien la
foto obtenida de la misma, saber a quien corresponde, como
cuando observamos la foto de una persona o de algo
conocido, se reconoce al instante.
Es importante mencionar, que con las cepas B y D, hicimos

pruebas de transformación, durante mi trabajo de tesis
(León. Paz. G.E., 1988). En esas pruebas intentamos
transformar la bacteria E. coli JM 101, que es sensible a
todos los antibióticos y está manipulada para ser receptora
V22
de DNA. Con la cepa B se realizo la transformación sin

ninguna dificultad. En cambio con la cepa D, no logramos

transformar la E. coli JM101. En ese tiempo del trabajo de
tesis de maestría no pudimos explicarnos con certeza la
causa. Con las fotos del DNA, se puede observar que el DNA
de la cepa D es muy grande y seguramente no pudo pasar a
la membrana de la JM101. En cambio el DNA de la cepa B,
es muy pequeño y si pudo transformar a la JM 101 en
resistente a TC.
V22
UNA INVESTIGACION
INDEPENDIENTE
“No imité a los escépticos que dudan solo por dudar
y simulan estar siempre indecisos; al contrario,
mi intención era llegar a una certeza y excavar
el polvo y la arena hasta llegar a la arcilla de abajo “
René Descartes
En 1991, renuncie a mi plaza de investigadora de tiempo

completo en el Centro de investigación en Alimentación y
Desarrollo CIAD en Hermosillo Sonora, para poder realizar
con plenitud nuestro proyecto sobre el nuevo Método de
Análisis de DNA. Al disponer de escasos recursos
económicos para iniciar la investigación por nuestra propia
cuenta, solicité asilo “científico” en el Laboratorio Estatal
de Salud Publica del Estado de Sonora, mismo que me fue
concedido y en julio de 1992 , reinicié el estudio de DNA de
bacterias, sin sueldo alguno, pero en condiciones óptimas
en cuanto. a la magnifica infraestructura del laboratorio y el
apoyo de directivos e investigadores a mi trabajo, la única
indicación fue que comprara mis propios reactivos ,
materiales e instrumentos de uso perecederos.
Al reiniciar el trabajo de investigación, en el Laboratorio

Estatal de Salud Pública del Estado de Sonora, iniciamos
una nueva etapa del proyecto, en el que no solamente
trabajaríamos con DNA extraído por nosotros mismos, de
muestras de sangre obtenidas por donaciones voluntarias o
de microorganismos, de cepas cultivadas en el laboratorio,
V22
sino que consideramos que era el momento para realizar y

probar a la par el método con muestras comerciales de DNA

purificado, por lo que adquirimos DNA purificado y
liofilizado de virus lambda, del plásmido PBR322 y una cepa
de Escherichia Coli liofilizada, con un peso molecular de 56
kb y con tres resistencias a antibióticos, esta cepa la
guardamos de manera especial para utilizarla
posteriormente.
Otra nueva fase de la investigación, la enfocamos a la

revisión del propio Nuevo Método de Análisis de DNA, que
estaba aplicando, variamos concentración y temperatura ,
tiempos de aplicación de cada parte del proceso y
fundamentalmente reactivos y componentes del buffer
utilizado en la reacción y probamos muchas variables y
combinaciones posibles.
Por las pruebas que anteriormente había realizado,

pensaba entonces que los taninos integrados al buffer,
eran los que tornaban visible al DNA y para tener
totalmente esa certeza y no quedarnos con alguna duda
realizamos nuevas pruebas de DNA con taninos y sin ellos.
Resultó ser solamente el buffer (BF), el factor principal de
que el DNA se pueda ver. Sin embargo por el resultado
obtenido y observado en las imágenes de las muestras de
DNA., cuando han sido procesadas estando integrados los
taninos en la reacción, decidimos continuar utilizándolos
porque hemos observado que el DNA teñido con los
taninos, ofrece una imagen de mayor tamaño que resulta
muy adecuada para determinados objetivos o casos
especiales de análisis del DNA.
V22
Sabia desde que decidimos continuar con el trabajo de

investigación de nuestro proyecto que al afirmar que el DNA
se puede ver con un microscopio óptico, lo que recibiríamos
serian pocos apoyos y muchas criticas de parte de
escépticos, que se dicen investigadores, que sin tener
curiosidad por observar personalmente los resultados en el
microscopio o preguntar en que consiste el nuevo método,
simplemente negarían que eso pudiera ser posible, hubo
inclusive algunos casos en los que se recomendó que no se
nos apoyara y se vertieron criticas en la televisión y medios
periodísticos. Pero en una ocasión en un hospital, al final de
una conferencia sobre nuestro trabajo, un medico amigo
nuestro, inesperadamente alabó el papel de los escépticos
en la historia de la ciencia, porque, al decir de él, “que
seria de la ciencia sin los escépticos, que son los que
obligan a los investigadores a tener certeza y ser muy
objetivos en lo que afirman”. Carl Sagan señaló en uno de
sus libros que el filosofo y matemático Rene Descartes,
propuso por primera vez consagrar la duda como una virtud
principal de la mente inquisidora, pero también dejó claro
que la duda era una herramienta y no un fin en si misma.
Duda, escepticismo e intolerancia, indiferencia y fanatismo

e inclusive intereses comerciales se han conjugado con ciertas
dosis de soberbia para crear los “dogmatismos científicos”
actuales y pasados, seguramente delineados por lo que
Thomas S. Kuhn llama “ciencia normal”, que pretenden y han
pretendido señalar caminos y poner límites paradigmáticos a
la investigación y al desarrollo de la ciencia. En 1991 Thomas
Lee en su libro “El Proyecto Genoma Humano” escribió
“Debemos dejar atrás el mundo de la visión para encontrar a
V22
los genes”
Mucho tiempo atrás, en 1871 Charles Darwin en su

introducción a “La descendencia del hombre” afirmó “Con
frecuencia la ignorancia engendra mas confianza que el
conocimiento: Son los que saben poco y no los que saben
mucho, los que aseveran tercamente que este o aquel
problema nunca será resuelto por la ciencia”
V22
UNA MODIFICACIÓN EN EL NUEVO

METODO
DE ANÁLISIS DEL DNA
El 5 de octubre de 1993, al regreso de un viaje a Panamá, mi
esposo me trajo de obsequio un libro sobre genética “Our
Uncertain Peritaje: Genetic & Human Diversity” (Hartl L.
Daniel, 1985), en el que entre otras cosas, se presenta una
técnica sobre como se obtiene el cariotipo de una persona.
Me dediqué a estudiar muy bien esa metodología, porque no

estaba completamente satisfecha con los resultados
obtenidos. En ese libro se indica que en el paso final del
cariotipo, los cromosomas se precipitan con alcohol absoluto
mezclado con ácido clorhídrico al 5%. Así que realicé nuevas
pruebas, precipitando el DNA de nuestras muestras con esa
misma mezcla, pero directamente en el portaobjetos,
modifiqué el porcentaje de concentración de ácido, pero por
mas que lo reducía, las muestras no quedaban bien, pensé
entonces que el ácido clorhídrico, era demasiado fuerte para
los resultados que procuraba obtener con nuestra técnica, por
medio de la cual buscaba esencialmente conservar la
integridad del DNA. Decidí sustituirlo por ácido acético por ser
un ácido débil. Lo probamos a diferentes concentraciones,
hasta que los resultados que logramos, fueron óptimos,
repetitivos y a nuestra entera satisfacción.
V22
Así nació el nuevo Método de Análisis de DNA.

V22.
A partir de esas pruebas y los siguientes estudios de DNA,
que realizamos con la nueva formula se inicia el Método
V22, `por lo que las figuras que se presentan se numeran
del numero 1 que corresponde a pBR322, en adelante.
DNA LIOFILIZADO DE VIRUS

LAMBDA Y pBR322,
(de Rodríguez León Paz. G.E., 1998)
El Método V22, consta de los siguientes pasos:
1) 50 microgramos de DNA liofilizado
2) + 100 microlitros de buffer
3) Precipitar una alícuota (1-1.5 microlitros) + Alcohol-.Acido
directamente
en el Portaobjetos.
4) El portaobjetos se decanta y se deja secar a temperatura
ambiente.
5) El DNA se analiza bajo el microscopio y se toman las
fotografías.
Se presentan las fotografías del DNA de virus lambda y el DNA

del plásmido pBR322.. En la figura # 1 vemos un dibujo del
plásmido pBR322 ( Singer M. and Berg P. 1991). En dicho
diagrama se señalan 2 marcadores, uno es un gen
que codifica resistencia a Tc y el otro el gen que lo hace a Am.
En la figura # 2 observamos la foto del plásmido pBR322,
obtenida con nuestro Método V22, podemos apreciar 2
salientes del circulo, que pueden corresponder a los
V22
marcadores Tc y Am.
El trabajo experimental nos ha permitido conocer un poco más

a fondo las propiedades del DNA, por ejemplo hemos logrado
extenderlo y compactarlo modificando las concentraciones.
De virus lambda presentamos 3 fotos, la figura # 3 ( Singer M.
and Berg P. 1991) es una micrografía electrónica de virus
lambda, que tiene un parecido con la figura # 4 obtenida con
el Método V22. Por observaciones personales, que solo se
logran obtener cuando el trabajo del investigador, se realiza
de manera personal en todo el proceso y no se delega a
pasantes o ayudantes, porque es imposible analizar
objetivamente lo que no se ha visto con nuestros propios
ojos. En una ocasión nos dimos cuenta que al precipitar con
alcohol-ácido, el DNA se compacta en mayor o menor grado,
en proporción directa al volumen utilizado.
Dado que no existe aun bibliografía donde se pueda consultar,

debemos ir generando el conocimiento necesario, que nos
permita ir aprendiendo poco a poco todo sobre el DNA, en esta
nueva fase visual de su forma, con ese objetivo realizamos
pruebas de precipitación que nos llevaron a la conclusión de
que: si agregamos un volumen determinado de alcohol, vemos
que se compacta completamente (figura # 6 lambda), y si
usamos un volumen mayor, el DNA se fragmenta y lo
perdemos. En cambio si el volumen es menor de lo necesario,
el DNA se observa difuso (figura # 5 lambda). Aprendimos
que el DNA extendido es circular y cuando lo compactamos
tiene una forma distintiva, dependiendo de su origen, lo que
pudiera ser importante para identificar el organismo al que
pertenece.
V22
Fig.-5 fig.-6
V22
DNA EXTRAIDO DE BACTERIAS

CULTIVADAS
METODO V22
Fueron estudiadas 6 cepas bacterianas, cuyas imágenes se

presentan en el cuadro # 1 (de Rodríguez León Paz Gloria
Elena.1998).
1) Todas las bacterias se inocularon, con una asada los

cultivos líquidos y con una pizca los liofilizados, como es
el caso de BCG Y la bacteria E. Coli adquirida en ATCC,
en el medio de cultivo TY, se incubaron a 37ª C toda la
noche, solo BCG se incubó por 15 días.
2) Centrifugar
3) Descartar el sobrenadante y resuspender el precipitado
en buffer BF
4) + fenol y cloroformo.
5) Centrifugar
6) Transferir la fase acuosa a un nuevo tubo, pera
almacenar el extracto de DNA.
7) Precipitar directamente en el portaobjetos, una alícuota
del extracto de DNA, con una mezcla de alcohol etílico
absoluto y ácido acético glacial.
V22
CUADRO # 1
CEPA ORIGEN
1) Vibrio cholerae O1 Aislado de un paciente
2) BCG (Bacilo de Calmette y Guerin) Vacuna
3) Samonella tiphy Aislado de un paciente
4) Staphylococcus aureus Aislado de un paciente
5) Escherichia coli, Tc, 4.2 KB Aislado de un paciente
6) Escherichia coli Tc, Am, Km, 56 KB ATCC
8) Se analizan los DNA precipitados, bajo un microscopio

9) Se toman las fotos
Se presentan las fotos de los DNA de las 6 bacterias

estudiadas, por el Método V22. Son 2 fotos para cada cepa,
una de DNA extendido y la otra de DNA compactado.
En las figuras 7, 9, 11, 13, 15 y 17 se presenta el DNA de las 6

cepas extendido y de aspecto circular y de cierta manera se
parecen entre si. En cambio las figuras 8, 10, 12, 14, 16 y 18,
podemos observar el DNA completamente compactado y
fácilmente diferenciado uno de otro.
En la figura # 8 vemos que el DNA de Vibrio cholerae O1 es

circular, mientras que el de BCG es lineal (figura # 10),
coincidiendo esto con los reportes bibliográficos. En la figura.
12 podemos ver que el DNA de Salmonella es lineal y en la
figura 14 se observa un DNA circular de Estafilococcus.
Estudiando las imágenes de los DNA, se aprecia para
Estafilococcus un DNA más denso y pesado que el de
Salmonella, que se observa este último muy delgado y ligero.
Esas mismas diferencias se manifiestan en las figuras 11 y 13,
de los DNA extendidos de Salmonella y estafilicoccus
V22
respectivamente, aunque la bibliografía reporta que el DNA de

estafilococcus es menor (45 KB) que el de Salmonella (96 KB),
calculados los pesos moleculares seguramente por
electroforesis. Es posible que realmente el DNA de
Estafilicoccus, sea de un peso molecular mayor que el de
Salmonella y que el cálculo por electroforesis, nos conduzca a
errores, porque desconocemos la imagen real del DNA y
porque los pesos moleculares estimados por electroforesis,
son relativos a los pesos de los marcadores. Parece ser pues
que los DNA lineales serán más pesados que los circulares
utilizando el método de electroforesis, en cambio el Método
V22, nos acerca a una lectura mas apegada a la realidad.
Esta nueva tecnología V22, nos permite también estimar el

tamaño del DNA, como es el caso de las fig. 16 y 18, que
corresponden a 2 cepas de Escherichia Coli, una aislada de un
niño enfermo y la otra adquirida en American Tissue Culture
Collection (ATCC). Es una cepa con resistencias a 3
antibióticos, Tc, Am y Km. Su peso molecular indicado por el
proveedor es de 56 KB, el peso de la otra cepa lo calculamos
por electroforesis y fue de 4.2 KB. En las imágenes vemos que
el DNA de la figura 18 es mucho mayor que el de la figura 16,
el cual lo podíamos haber calculado, comparando las 2 figuras.
figuras.
V22
V22
V22
PRIMERAS IMÁGENES DE DNA

HUMANO
(de Rodríguez León Paz, Gloria Elena,1998)
Después de haber estudiado el DNA de bacterias y de virus

lambda, nuestro siguiente objetivo fue el estudio del DNA
humano. Al iniciar los estudios de DNA humano establecimos
primero el método de extracción del mismo, de un
concentrado leucocitario siguiendo los pasos siguientes:
1) 1.5 ml de concentrado leucocitario
2) Centrifugar
3) Resuspender el precipitado en buffer BF.
4) + fenol y cloroformo y homogenizar en vortex.
5) Centrifugar
6) Transferir la fase acuosa a otro tubo y almacenar hasta
su uso.
7) Precipitar una alícuota con alcohol-ácido, directamente
sobre el portaobjetos y secar a temperatura ambiente.
8) Observar al microscopio
9) Tomar fotografía.
Se presenta la foto que viene a ser la primera imagen

obtenida de DNA humano (fig.-19).
Nuestro siguiente paso fue el de establecer un método de
extracción de DNA, lo más sencillo posible y para lograrlo les
pedimos a 4 voluntarios, una muestra de sangre y seguimos
los siguientes pasos:
1) 8 ml de sangre periférica + EDTA como anticoagulante
2) Se induce a que se separen los glóbulos rojos
V22
3) Se toman 1.5 ml de plasma

4) Se centrifuga
5) Precipitado + buffer y vortex
6) + fenol y cloroformo
7) Centrifugar
8) Transferir la fase acuosa a otro tubo
9) Precipitar una alícuota de extracto de DNA con alcohol-
ácido.
10) Observar al microscopio
11) Tomar fotografía.
Se presentan las 4 fotos del DNA de los voluntarios, son 2

mujeres y 2 hombres, los 4 son jóvenes entre 25 y 32 años
de edad y son saludables.
En las 3 primeras fotos (fig.-20), (fig.-21), (fig.-22), el DNA

se observa como una cadena o hilo limpio, sin replicaciones,
ni fragmentado. En cambio la foto (fig.-23), corresponde a
un hombre de 32 años, al que 8 días antes que nos donara
la muestra de sangre, le hicieron una vasectomía. Antes de
saber de la cirugía, al ver en el microscopio esa imagen de
DNA, pensamos que había un error en la aplicación de la
técnica.
Repetimos nuevamente la extracción de DNA de esa

muestra, y esta de nuevo presentaba esa imagen tan
diferente, tan replicada y tan grande, en comparación con
las imágenes de DNA. de los otros voluntarios. Después
pensamos que el DNA se replico por la agresión al tejido
recibida durante la operación. Estudiando el DNA en la
imagen de la foto y en el microscopio, deducimos que el
DNA se replicó, para expresarse y reponer las proteínas
V22
perdidas durante la cirugía, entre ellas, la hemoglobina, el

tejido que se encarga de reparar y cicatrizar y los

anticuerpos contra infecciones. En conclusión seguramente
la reacción del DNA fue saludable y busca el equilibrio de
nuevo del organismo, ante las agresiones y las infecciones
y la imagen del DNA que obtenemos refleja esos cambios.
Los resultados que obtuvimos, nos llevaron a reflexionar
profundamente en las grandes expectativas, que podemos
obtener si estudiamos el DNA humano y el de todos los
seres vivos con el nuevo Método de Análisis de DNA V22.
Pensamos que tal vez sea posible encontrar el lugar que
ocupan los genes en la cadena de DNA. Sí comparamos por
ejemplo, el DNA de una persona ciega o sorda, con el de
una persona sana, seguramente descubriremos alguna
señal (un marcador), una diferencia, o algo que nos
indique el lugar, en el que debe estar ese gen o grupo de
genes en la cadena, que en la comparación encontremos
alterada o distinta.
V22
V22
Pensando en esas posibilidades, solicitamos donaciones en

varios hospitales de la ciudad de muestras de sangre,
extraída de pacientes con alguna enfermedad para ver y
analizar la imagen del DNA. La experiencia y los resultados
que obtuvimos fueron magníficos por la forma tan singular
y diferenciada que se presenta entre una y otra imagen de
DNA analizada. En la figura 24 podemos ver el DNA de una
adolescente con síndrome de Down. En la figura 25 el DNA,
de un paciente con tuberculosis. En la figura 26 el DNA de
un paciente con lupus eritematoso. En la figura 27 el DNA
de una paciente con cáncer de mama. En la figura 28 el DNA
de una paciente con Alzheimer y en la figura 29 el DNA de
una paciente con artritis reumatoide. En las figuras 30 y 31,
se presentan el DNA de mujeres embarazadas, en donde se
observa un DNA grande unido a uno pequeño que
determinamos es el del bebé por nacer.
V22
V22
Todo ese trabajo desde la figura 1 hasta la 31, lo

presentamos el 8 de enero de 1998, ante el IMPI, con una
solicitud de trámite de patente en el PCT (Patent
Cooperation Trade), en Ginebra Suiza. La fecha de
publicación internacional se realizo el 20 de agosto de ese
mismo año. Se hizo del dominio público, porque no tuvimos
V22
dinero para el pago de derechos respectivos, en los 20

países en los que solicitamos la autorización para la

comercialización. De cualquier manera nos sentimos
satisfechos porque nos protegieron los derechos de autor.
Presentamos otras fotos de DNA, que no fueron incluidas en
la solicitud de patente, pero que son de gran importancia en
el avance del conocimiento del DNA.
La foto (fig.-32), es de un paciente con una infección en las

vías urinarias, estaba tan grande, que no cabía en el campo
visual del microscopio. El paciente tenia 92 años de edad al
tomar la muestra y cuando vimos tal cantidad de DNA,
pensamos que podríamos calcular la edad al ver esas
imágenes, pero el DNA no aumenta con la edad, pero si se
transforma con algunas enfermedades y disminuye con
otras.
FIG.-32
DNA DE HOMBRE DE 92 AÑOS
CON UNA INFECCION LEVE
V22
Estudiando y reflexionando sobre la edad y su relación con el

DNA, lo que nosotros hemos observado durante nuestra
investigación, es que el DNA pierde capacidad de
compactación, a medida que pasan los años. Con la edad
vamos perdiendo algo que tienen los organismos jóvenes, que
permite a su DNA, que se compacte con facilidad. Ese algo
quizá sea la anhelada por muchos, “La fuente de la juventud”
y tal vez, metafóricamente hablando, sea “la piedra filosofal”
guardada en el núcleo de las células, que por tantos siglos
buscaron sin éxito, Los Alquimistas.
El tabaco daña indudablemente el DNA de los fumadores,

como es el caso del DNA de una mujer que fumaba desde los
15 años, al momento de tomar la muestra tenia 42 años y su
DNA presentó una gran cadena lateral (fig.-33).
FIG.- 33
DNA DE MUJER FUMADORA
42 AÑOS
Cuando ella vio la fotografía de su DNA, se preocupó mucho,

V22
nosotros le sugerimos que dejara de fumar unos 4 meses o

más y después regresara al laboratorio para una segunda

prueba. Cabe la aclaración que la paciente de tabaquismo,
fumaba 2 o 3 cigarrillos diarios, muy poco comparado con lo
que fuman los grandes adictos. Ella regresó a los 6 meses de
que había dejado de fumar (fig.- 34).
FIG.-34
DNA MUJER RECUPERADA
DE TABAQUISMO
Su aspecto era como de 10 años menor de la ultima vez que la

vimos y cuando observó la nueva fotografía, se comprometió
ante su familia a nunca volver a fumar.
Una de las drogas mas agresivas y que provoca los mayores

daños al ADN. es el alcohol (fig.-35), La fotografía, nos
muestra el efecto ocasionado por el efecto de la bebida, al ver
esa imagen no se puede evitar la pregunta, ¿cuanto tiempo
lleva la reparación del ADN.?, Sabemos que el alcohol por ser
un compuesto formado con moléculas muy pequeñas, al ser
V22
ingerido no sigue los lineamientos del sistema digestivo, sino

que instantáneamente invade al torrente sanguíneo, atraviesa
las paredes de todos los órganos del cuerpo, llega al cerebro,
al corazón, a los riñones, al hígado, al bazo y a cada una de
nuestras células, por eso el efecto de euforia que se siente de
inmediato al ingerirlo. Se calcula que el alcohol tarda en ser
eliminado de la sangre de 6 a 8 semanas, sin embargo hay
bebedores que lo ingieren a diario y otros con cierta
periodicidad, de tal manera que la célula no tiene tiempo de
concluir la reparación y antes de que pueda terminar su labor,
le llega más alcohol. Como todas las drogas, el alcohol crea
dependencia en el consumidor, pero lo mas grave es que es
capaz de modificar funciones vitales del organismo e inclusive
provocar cambios a nivel celular, y si en el núcleo de la célula,
en el DNA se conserva la herencia genética de los organismos,
el daño que un alcohólico puede provocar en su descendencia
es muy grave.
V22
FIG.- 35
DNA DE HOMBRE QUE INGIRIO
BEBIDAS ALCOHOLICAS
En nuestro recorrido por los hospitales y centros de salud de

Hermosillo, recibimos y luego analizamos una gran cantidad
de muestras sanguíneas, de todo tipo de enfermedades y de
pacientes de todas las edades, con ellas obtuvimos mucha
información sobre el ADN, pero también nos percatamos que
todo lo que hemos logrado saber es muy poco ante la
inmensidad que nos falta por aprender del lenguaje de
imágenes del ADN.
Patente del Nuevo Método aprobada en México
En 1996 nos llegó una carta del Instituto Mexicano de la

Propiedad Industrial IMPI, en la que nos informaron que
nuestra solicitud de patente había sido aprobada. La emoción
que sentimos fue indescriptible, porque era algo que
deseábamos vehementemente obtener después de muchos
años de trabajo. Esa tarde fuimos toda la familia, mi esposo,
mis 2 hijas y yo, a un supermercado y casualmente nos
encontramos a la periodista Emilse Valencia, amiga nuestra y
le platicamos la noticia recibida, hasta ese momento, nunca
habíamos comentado fuera del círculo familiar y de los
compañeros de trabajo en el laboratorio sobre la investigación
que realizaba. Ella trabajaba en una publicación de amplia
difusión que se llama “Revista ASI”, que fundo y dirige el
periodista Antonio Duarte García, nos hicieron una entrevista
y en la siguiente edición publicaron un amplio reportaje sobre
la investigación y la reciente aprobación en México de la
patente, el artículo fechado el 15 de abril de 1996, suscitó
muchos comentarios unos a favor y otros en contra. Recibimos
muchas llamadas telefónicas de políticos y de periodistas de
V22
otras publicaciones, de la televisión y de la radio, entre las

llamadas estuvo una del gobernador del Estado de Sonora,

que nos dio una cita para preguntarnos en que nos podía
ayudar y gracias a su generosidad pudimos pagar los derechos
de la patente por 20 años.
Después de la primera publicación en la revista ASI, mucha

gente nos empezó a visitar en el Laboratorio, todos deseaban
ver su DNA y el de sus familiares. Eso contribuyó
enormemente a que en el futuro inmediato obtuviera mucho
material de investigación.
En la figura 36, vemos el DNA, de una paciente con Alzheimer:
Fig.-36
ig.-36
DNA DE PACIENTE CON ALZHEIMER
En este caso ( figura. 36) nosotros fuimos a domicilio, a tomar

V22
la muestra de sangre ya que la paciente, se encontraba

imposibilitada para salir de su casa. Nos ha tocado analizar

varias personas con esta enfermedad y cuando vemos las
imágenes, nos da la impresión de que el DNA, esta en total
desorden (coloquialmente hablando parece despeinado). Pero
si observamos en el microscopio con cuidado, podemos ver
que la cadena de DNA se encuentra envuelta con pequeños
hilos o fibras que pudieran pertenecer al DNA de un
microorganismo, que poco a poco va impidiendo que el DNA
de la paciente, funcione con normalidad, tal vez a eso se deba
el carácter progresivo pero irreversible de esta enfermedad.
Algún día a través de terapia genética, puede intentarse el
encontrar una forma de eliminar esos filamentos para que los
pacientes con Alzheimer puedan recuperarse y mejor todavía,
si la enfermedad pudiera ser diagnosticada antes de que
aparezcan los síntomas, las personas no se enfermaran,
cuando ya se haya encontrado la forma de prevenirla. Para
esto sabemos que hace falta mucha investigación del ADN.
especializada en esta patología.
En la figura 37, vemos el DNA de un paciente con la

enfermedad de Chagas (Tripanosomiasis americana) esta
enfermedad la trasmite un insecto (Chinche) hematófago, y
provoca una infección, ocasionada por el Tripanosoma cruzi,
esa enfermedad afecta y afectaba mayormente a las clase
social más pobre de la población, quizá por esa razón no se le
daba mayor importancia a su estudio y clasificación.
Fue hasta 1960 que se empezó a poner la debida atención a

esa patología que anualmente afecta entre 15 a18 millones de
personas con una mortandad anual de 50 mil personas. El
problema principal de la enfermedad, es que las personas
V22
infectadas pueden no presentar síntomas en lapsos de 10 o

15 años después de haberla contraído, por lo que su detección

por sistemas convencionales se hace más difícil.
FIG.-37
DNA DE PACIENTE CON
ENFERMEDAD DE CHAGAS
V22
Fig.- 38:
DNA DE PACIENTE
CON CANCER OSEO
Pronostico del Sexo del Bebé

En 1994 por la agenda de trabajo de investigación que
planeamos desarrollar durante ese año, solicitamos
inicialmente donación de sangre a 4 voluntarios, (dos
hombres y dos mujeres) una de ellas estaba embarazada y
ella no lo sabía aun, ni nosotros tampoco, al analizar la
imagen de su ADN. observamos una característica distinta a
los ADN. hasta entonces estudiados, no era el de una persona
enferma, sin embargo era diferente en su estructura, ( figura
30), se puede observar un DNA, con una pequeña cadena
adicional y cuando la vimos en el microscopio, pensamos en la
posibilidad de un embarazo y lo comentamos en familia, pero
V22
como era la primera muestra observada con esta

característica, sin punto de comparación, nada le dijimos a

ella, pero como bien dice la sabiduría popular “Ni el embarazo,
ni la alegría se pueden ocultar” y al poco tiempo, ella misma
nos informó muy contenta su estado de gravidez. En esa
ocasión anotamos en la bitácora, las interesantes
observaciones obtenidas del análisis de la primera muestra de
ADN. de un embarazo que apenas se iniciaba. Pero fue hasta
1995, cuando a partir de los resultados obtenidos y
estimulados por la fantástica posibilidad del pronóstico del
sexo del bebé, desde los primeros momentos de su gestación,
iniciamos el estudio de mujeres embarazadas. Durante el
estudio realizado vimos y analizamos mas de 450 imágenes de
DNA de mujeres en diferentes etapas de gestación, con ellas
aprendimos que antes de las 11 semanas, el DNA de la madre,
se observa diferente si el sexo del bebé es niña (fig.-39)
comparado a la imagen obtenida cuando el sexo del bebé es
de un niño. (figura,40) En los pronósticos del sexo del bebé
que realizamos , antes de la onceaba semana de gestión,
erramos únicamente en 20 casos, algunas veces porque la
mamá estaba tomando medicamentos, otra porque tenia una
infección, también por tener bajos los leucocitos. Nuestra
observación es que cuando ciertas circunstancias, como los
jarabes o infecciones están presentes al momento del análisis
y el pronostico, el DNA se transforma y enmascara los
resultados.
V22
Fig.- 39
V22
DNA DE MUJER CON

7 SEMANAS DE EMBARAZO (NIÑA)
En el caso de las niñas el DNA de la futura mamá, se presenta

como una sola cadena con un lazo adicional, esto antes de las
11 semanas, después es otra la imagen.
Fig.- 40
DNA DE MUJER CON 9 SEMANAS
DE EMBARAZO (NIÑO)
Los niños en cambio, se observan como 2 cadenas , el DNA de

la futura mamá y una cadenita adicional, esta imagen se
presenta hasta las 12 semanas, después cambia.
PRUEBAS DE PATERNIDAD
En junio de 1998 un agente de investigaciones de la
Procuraduría de Justicia del Estado de Sonora, nos preguntó
si era posible realizar una prueba de paternidad con nuestro
método, contestamos que seguramente si, solo que primero
era necesario establecer la técnica especifica para ese
V22
análisis. El caso que necesitaban resolver, era el de un niño

que 4 años atrás, estando recién nacido, había sido
secuestrado y necesitaban saber cual de los 2 matrimonios
que reclamaban al niño como suyo, eran los verdaderos
padres.
El caso en si era todo un drama, la señora que robo al niño,
estuvo en estado de embarazo casi al mismo tiempo que una
vecina suya (la verdadera madre).
Pero al poco tiempo tuvo un aborto natural, que ocultó a su

esposo que se encontraba trabajando en Estados Unidos, así
que fingió que su embarazo continuaba normalmente, pero
cuando nació el niño de la vecina, ella lo sustrajo y se fue de
Hermosillo a vivir a la ciudad de Tijuana, así que cuando su
esposo regresó de Estados Unidos, creyó realmente que el
niño era suyo y lo trataron y cuidaron como si fueran sus
verdaderos padres en los 4 años siguientes.
Para establecer la prueba de paternidad con nuestro método

V22, les pedimos a 10 familias de amigos y parientes, que nos
dieran muestras de sangre, de los padres y de los hijos de
cada familia, a lo que todas ellas cooperaron y se unieron al
estudio.
Iniciamos la investigación para establecer la técnica de

paternidad, tomando las muestras acudiendo a cada domicilio
y obtuvimos las muestras de sangre de :
-El Padre
-La Madre
-Los Hijos
-Las Hijas
V22
En un principio la premisa fue la de comparar los DNA, de los

padres con el DNA de las hijas y los hijos. Creímos que los
DNA de una familia, por lógica elemental, deberían parecerse
tanto que los identificaríamos con cierta facilidad, pero no fue
así. Las cadenas se parecían mucho entre los miembros de una
familia, pero también se parecían a las de otra familia. Unos y
otros se confundían a simple vista, no fue posible la
identificación de los padres y los hijos de una familia de esa
manera, la broma que recibíamos en nuestra casa era que la
confusión se debía a que todos los participantes en la prueba
somos mexicanos.
Buscando una solución mas objetiva y determinante pensamos

entonces que si uníamos directamente en la reacción las
cadenas de ADN de todos los miembros de una familia, que
sucedería. Así lo hicimos y esto fue lo que pasó:
REACCIONES DE AFINIDAD
Las reacciones de afinidad de las proteínas, consisten en el
reconocimiento de una molécula con otra, con una
especificidad asombrosa. Este tipo de reacciones de afinidad,
se utilizan mayormente en una gran cantidad de análisis
bioquímicos, como por ejemplo el uso de reacciones de ELISA
(Ensyme Linked Inmunoassay) en virología. Lo mismo las
reacciones de afinidad entre las hormonas y sus receptores o
las de las enzimas con sus sustratos.
En la tecnología de PCR (Polymerase Chain Reaction), se

utiliza la reacción de afinidad del DNA entre los iniciadores o
V22
“primers” y el fragmento de DNA que se desea amplificar, por

acción de la enzima DNA polimerasa. El requerimiento del

iniciador es que su secuencia de bases. sea igual a la
secuencia inicial de la cadena de DNA, que se desea replicar.
Mezclamos las muestras de DNA, de los padres y los hijos o las

hijas y de los padres con los no hijos o no hijas, siguiendo los
siguientes pasos: En esta prueba participaron 5 personas 2
adultos y 3 niños: 1) El padre (fig.- 41), 2) La madre (fig.- 42),
3) La hija (fig.-43), 4) El no hijo (fig.- 44) y 5) La no hija (fig.-
45).
1) Se tomó la muestra de sangre, con EDTA como
anticoagulante.
2) Se centrifugó para separar el plasma y se descarta.
3) Se adiciona buffer BF
4) Se agrega fenol y cloroformo
5) Centrifugar
6) Volver a agregar fenol y cloroformo y centrifugar
7) Precipitar el DNA de las 5 muestras y se tomaron las
fotografías correspondientes
8) Reacciones de afinidad del DNA: Se mezclaron los DNA de la
forma siguiente:
a) EL PADRE + EL NO HIJO (fig.- 46)
b) EL PADRE + LA NO HIJA (fig.- 47)
c) EL PADRE + LA HIJA (fig.- 48)
d) LA MADRE + EL NO HIJO (fig.- 49)
e) LA MADRE + LA NO HIJA (fig.-50)
f) LA MADRE + LA HIJA (FIG.- 51)
g) EL PADRE+ LA MADRE + EL NO HIJO (fig.- 52)
h) EL PADRE + LA MADRE + LA NO HIJA (fig.- 53)
i) EL PADRE + LA MADRE + LA HIJA (fig.- 54)j) EL PADRE + LA
MADRE (fig.- 55):
V22
FIG.- 41
EL PADRE
FIG.- 42
LA MADRE
V22
FIG.-43
LA HIJA
FIG.-44
EL NO HIJO
V22
FIG.- 45
LA NO HIJA
FIG.-46
EL PADRE + EL NO HIJO ( 2 CADENAS separadas)
V22
FIG.- 47
EL PADRE + LA NO HIJA ( 2 CADENAS)
FIG.- 48
EL PADRE + LA HIJA ( 1 CADENA)
V22
FIG.-49
LA MADRE + EL NO HIJO ( 2 CADENAS)
FIG.-50
LA MADRE + LA NO HIJA ( 2 CADENAS)
FIG,. 51
V22
LA MADRE + LA HIJA ( 1 CADENA)

FIG.-52
EL PADRE + LA MADRE + EL NO HIJO ( 3 CADENAS)
FIG.-53
EL PADRE + LA MADRE + LA NO HIJA ( 3 CADENAS)
V22
FIG.- 54
EL PADRE + LA MADRE + LA HIJA ( 1 GRANCADENA)
FIG.- 55
EL PADRE + LA MADRE ( 2 CADENAS)
V22
Estos resultados obtenidos de la prueba de paternidad,

muestran uno de los alcances que puede ofrecer esta nueva
metodología V22.
Realmente fue para nosotros una sucesión de encuentros y

sorpresas, al ir viendo y analizando las imágenes que Íbamos
obteniendo en las combinaciones, de los padres y los hijos y
los no hijos. Cuando vimos las dos cadenas al juntar el padre o
la madre con el no hijo o la no hija, de las figuras 46, 47, 49 y
50. Podemos afirmar que cuando mezclamos 2 cadenas de
DNA, con secuencias distintas quedan separadas en la
precipitación, seguramente porque no se reconocen. En
cambio, cuando se unen 2 DNA de padres e hijos o hijas, las
cadenas se reconocen en una reacción química de AFINIDAD,
formando una sola cadena, figuras 48 y 51.
Al poder ver esto, nos pareció que era algo que otorga a la
ciencia su aureola mágica pero lógica y que la naturaleza y la
vida está formada de acertijos y enigmas que habremos de ir
descubriendo, con el trabajo experimental continuo, utilizando
y aplicando los conocimientos adquiridos con sentido crítico,
realizando lo que cada quien podemos y nos corresponde
hacer.
Todavía algo más sorprendente sucedió cuando unimos los

DNA de los 3, los padres con los no hijos y con la hija. Con el
no hijo y con la no hija figuras 52 y 53, obtuvimos después de
la precipitación 3 cadenas separadas, debido a que no hay
reconocimiento y por tanto no hay unión.
Algo maravilloso sucede cuando se unen los padres con la hija,

V22
se obtiene una gran cadena, por una reacción de AFINIDAD,

porque las cadenas de DNA tienen secuencias iguales figura

54. Tratando de comprender la reacción de afinidad entre los
padres y los hijos sería la siguiente: Los hijos son
genéticamente hablando, la mitad exacta del padre y la mitad
de la madre, cuando las cadenas se unen, el padre y la hija o
la madre y la hija, se forma una cadena, aunque queda un
sobrante por el que falta. En cambio cuando se unen los 3, el
padre, la madre y la hija o el hijo, obtenemos una enorme
cadena de DNA, porque el hijo o hija son la mitad de cada uno
y al unirse los 3, la cadena queda completa al unirse las
mitades faltantes, por ser DNA de secuencias iguales. Por
último cuando se juntan los padres sin el hijo o la hija, se
obtienen 2 cadenas separadas figura 55, ya que falta el lazo
de unión, que son los hijos, a los que mucha gente llama
intuitivamente pero atinadamente “LAZOS DE AMOR”.
Para el analista será muy sencillo reconocer el resultado de las

pruebas de paternidad, no tiene que interpretar
subjetivamente nada, únicamente observar la reacción de las
cadenas de DNA , si ve cadenas separadas reportar
negativo y si ve una sola cadena reportar positivo.
Nuestro reporte de prueba de paternidad del DNA, fue

aceptado como prueba pericial por el juez calificador, y
coincidió plenamente con las otras pruebas (que nosotros no
conocíamos), realizadas por el cuerpo de investigadores del
ministerio público, ante las evidencias, la señora que había
robado al infante confesó como sucedieron los hechos y el
niño fue reintegrado a sus verdaderos padres.
V22
Hipótesis, Teorías y Experiencia

Científica
El filosofo y matemático Imre Lakatos consideraba que la
ciencia es incapaz de alcanzar la “verdad”, en otras palabras
pensaba que no hay verdades absolutas, pero en su obra
“Programa de investigación Científica” sugirió que “cada
nueva teoría deberá ser capaz de explicar mas cosas que la
anterior y sobre todo ha predecir hechos nuevos que nadie
antes se había planteado “. Su “Programa de Investigación
Científica”, consiste en una sucesión de teorías relacionadas
entre sí, de manera que unas se generan partiendo de las
anteriores.
Para Lakatos el desarrollo de la ciencia consiste en el

enfrentamiento de teorías rivales con la experiencia del
investigador, bajo esa circunstancia una teoría es aceptada y
otra es refutada, generándose un proceso dialéctico continuo
de afirmación- negación - afirmación, con este criterio Lakatos
parece estar de acuerdo con la teoría de su maestro Karl
Popper que asegura que la ciencia esta en una constante
“Revolución Científica”, lo que confronta la teoría de Thomas
Kuhn, que afirma que antes de romperse un paradigma
científico existe un período de ”Ciencia Normal”, que precede
a la aparición de una “Revolución Científica” que significa en
sí, una ruptura.
En el método científico de las ciencias empíricas ha

prevalecido la inducción como única manera de validación de
las ciencias, con un sentido de verificación permanente de la
suma de casos, pruebas y hechos que reafirmen y apoyen las
V22
tesis formuladas, lo que dificulta la validación de hechos

científicos, que rompan y tengan un comportamiento y

resultados diferentes, porque son analizados del punto de
vista de la ciencia y los paradigmas establecidos. En 1970,
Thomas Kuhn hizo la siguiente observación “Cuando se
produce un cambio de paradigma, cambia la naturaleza misma
de lo que importa como explicación. Las explicaciones bajo
dos paradigmas diferentes, no son solo disimiles; son
inconmensurables “.
Todo descubrimiento científico es parte de experiencias que

lo preceden, por línea directa, por ruptura o por contradicción,
entre la afirmación y la negación media la objetividad de la
observación del investigador y la mente abierta a la
posibilidad de un nuevo paradigma. Cada experimento
realizado en el laboratorio da origen a otro experimento,
negación y afirmación tienen igual validez e importancia
metodológica para el desarrollo o la innovación científica. Mi
maestro el Doctor en química orgánica Edward Berka, un
científico alemán asilado en México, que en mi formación
profesional estimuló en mayor medida mi interés por la
investigación científica y el trabajo experimental,
recomendaba constantemente que en los reportes o
anotaciones en la bitácora, se les concediera igual importancia
y se registraran a detalle los resultados positivos y negativos.
Para el Doctor Berka la observación y participación personal,
“Con nuestros propios ojos y nuestras propias manos” en
forma acuciosa y analítica en cada parte del proceso de un
experimento, es el material mas importante e invaluable para
un investigador científico.
Teoría y práctica se conjugan y complementan en la

V22
investigación pero indudablemente la mejor forma de

confirmar o refutar una teoría es la empírica con un profundo

sentido critico y autocrítico, por esa razón mi maestro Edward
Berka consideraba que un investigador debería estar siempre
en el laboratorio, observando, analizando y comparando cada
reacción y cada cambio ocurrido en los experimentos y estar
presentes y atentos a cuanto se produzca y pueda abrir el
camino a un descubrimiento.
Decía el maestro Berka que un investigador debe tener

siempre las manos ocupadas por el trabajo cotidiano que
realiza y guardar oportunamente en el bolsillo de su bata una
pequeña toalla para limpiar sus manos y saludar a eventuales
visitantes de su laboratorio.
EL FINANCIAMIENTO DE
PROYECTOS
CIENTÍFICOS EN MÉXICO
En México la inversión en Ciencia y Tecnología no ha
alcanzado los niveles de crecimiento necesarios para impulsar
el desarrollo de la investigación y la aplicación tecnológica, al
principio del sexenio correspondiente a los años, 2000- 2006,
fue de 0.40 % del PIB y no ha variado sustancialmente en los
siguientes años, el porcentaje de participación del PIB en la
investigación científica de México esta muy por debajo de los
países altamente industrializados, como Alemania, Estados
Unidos, Canadá, Japón, etc . México ocupa el último lugar en
porcentaje del PIB invertido en investigación y desarrollo
entre los 30 países miembros de la OCDE. (Organización para
la Cooperación y el Desarrollo Económico)
V22
Es indudable que los proyectos científicos requieren de

recursos financieros que están muy lejos de la capacidad
económica del ciudadano promedio de nuestro país, de allí que
la mayor parte de la investigación científica y tecnológica se
realiza en instituciones oficiales y escasamente en el sector
privado que condiciona su participación a que la investigación
sea comercialmente muy redituable. Luego entonces hablar de
una investigación científica, independiente del sector oficial,
como la nuestra, que aspiraba a desarrollar un proyecto de
investigación de ingeniería genética y que pretendía
establecer un nuevo método de análisis del DNA, sonaba a
utopía de alta pureza o ingenuidad, y sin embargo, hay una
razón de peso para ello, como bien señala el escritor Eduardo
Galeano en su pregunta- respuesta : “¿Para que sirven las
utopías?” y se responde -“Sirven para caminar, para abrir
caminos”-. Y en un país como el nuestro cuya inversión en
ciencia y tecnología no alcanza ni siquiera el promedio de lo
que se invierte en América Latina, había que abrir camino a la
investigación independiente ante la indiferencia de las
burocracias científicas oficiales de aquel tiempo en el que
iniciamos nuestra investigación, que dificultaban el
financiamiento aun para proyectos de investigación
enmarcados en lo que Thomas Kuhn llama “Ciencia normal”.
Y vaya que hemos caminado desde aquel día que dejamos la
comodidad del cubículo y el cheque quincenal de aquel Centro
de Investigaciones, en el que trabajaba para emprender de
manera independiente el camino de lo que era una bella
utopía, sin mas recursos que el apoyo familiar y la voluntad y
la tenacidad personal para tratar de lograr realizar nuestro
proyecto de investigación. Desde entonces cada vez que
parece que caminando nos acercamos al horizonte de ese “No
V22
lugar” que define a las utopías, el horizonte de nuevo se aleja

y nos obliga a seguir caminando.
LA ENFERMEDAD DE LAS VACAS

LOCAS
En 1996, el llamado síndrome de la “vacas locas” BSE (Bovin
Spongiform Encefalithy) en Inglaterra, fue motivo de la
atención mundial, al conocerse que la detección de este mal se
realizaba cuando el estado de la enfermedad estaba en su fase
terminal o la res este muerta, esto llenó de temor a los
consumidores de carne de res en el Reino Unido, en el resto de
Europa y otros países a los que Inglaterra exportaba
productos cárnicos. La mayoría de estas naciones cerraron el
mercado a las importaciones y establecieron cercos sanitarios
a la enfermedad.
Inglaterra estuvo obligada a sacrificar miles de vacas que

manifestaban el principio de la enfermedad e inclusive tuvo
que eliminar a las reses aparentemente sanas pero que
formaban parte de los hatos ganaderos infectados.
En el estado de Sonora que es una entidad ganadera, la
enfermedad de las vacas locas fue noticia de primera plana en
todos los medios de comunicación.
Un hermano nuestro, Fausto León Paz, atento a esas noticias y

enterado con todo detalle de las investigaciones que llevamos
a cabo con el DNA, nos aconsejó que le escribiéramos al
V22
Primer Ministro de Inglaterra John Major y le propusiéramos

nuestro método de análisis como una posible solución para la

enfermedad de las vacas locas, pero al ver cierta indecisión de
nuestra parte nos dijo: “total si contesta que bueno y si no, no
pasa nada”.
Escribimos entonces a John Major al 10 Downing Street;

London Inglaterra, proponiendo nuestra técnica y cual seria
nuestra sorpresa, que en el lapso de dos semanas recibimos
una carta de la oficina del Primer Ministro inglés
comunicándonos su interés por conocer mas detalles del
método, para esto nos informó que nos pondría en
comunicación con el Ministerio de Agricultura, Pesca y
Alimentación de Gran Bretaña. MAFF.
A partir de abril de 1996 iniciamos una serie de intercambios

de información epistolar con el departamento de BSE del
MAFF, creado especialmente para atender el problema de la
“vacas locas” nuestra experiencia con DNA de ganado vacuno
en ese tiempo se concretaba a un único caso de detección de
brucelosis, sin embargo confiábamos plenamente que
podíamos establecer un método de diagnostico de la
Encefalitis Espongiforme, trabajando con un buen numero de
muestras de vacas sanas y enfermas. Para esto formulamos
un plan de trabajo que incluía la extracción de DNA de la
sangre de las reses y su posterior análisis con nuestro
método.
Entregamos nuestra propuesta en la embajada de Inglaterra

en la ciudad de México y se nos comunicó, que los documentos
serían enviados esa misma semana a Londres en la valija
diplomática y que ellos se comunicarían nuevamente con
V22
nosotros después de estudiar la propuesta.

Poco después, en 1997 se efectuaron elecciones en Gran

Bretaña y el Primer Ministro John Major fue derrotado por el
miembro del partido laborista Tony Blair. A partir del arribo de
la nueva administración perdimos todo contacto con el MAFF
de Inglaterra, pero un año después recibimos una
comunicación de los nuevos funcionarios ingleses informando
de su interés por la propuesta que habíamos hecho a fines de
1996, la propuesta de ellos consistía que en la primera fase
del estudio recibiríamos en México (Hermosillo), muestras
codificadas de DNA de vacas afectadas por la enfermedad,
para esto teníamos que contar con el permiso aduanal
mexicano del Departamento de Agricultura y Ganadería del
Gobierno Federal, hicimos los tramites respectivos ante el
gobierno de México y simultáneamente comunicamos al MAFF
que pronto enviaríamos el permiso aduanal respectivo.
Pero pasaron los días y los meses y el acuse de recibo, el

permiso o una notificación negativa jamás llegó, por tanto nos
olvidamos del asunto (usos y costumbres, dijimos por todo
comentario) y casi un año después (1999) de haber realizado
la solicitud, un funcionario federal nos llamó para
comunicarnos que el permiso estaba listo y podíamos pasar a
recogerlo.
Naturalmente que aquello quedo cómo una anécdota, de la

ineficiencia administrativa que nos privó de la oportunidad de
probar la metodología en un país del primer mundo, contando
con todos los recursos que hasta ese momento, no habíamos
dispuesto en México para desarrollar y aplicar nuestra
investigación.
V22
MACROMOLECULAS HABANA 97
INTERNACIONAL MEETING ON POLYMERS
UNIVERSIDAD DE LA HABANA CUBA
En octubre de 1997 fuimos invitados a participar con nuestro

trabajo de investigación “Desarrollo de un Nuevo Método para
Ver, Analizar y Manipular DNA Utilizando un Microscopio
Óptico “, en el Congreso Internacional de Macromoléculas en
la Habana Cuba, la sede del evento durante la semana del 1 al
5 de diciembre del mismo año, fue la universidad de la capital
de ese país. Previo ha nuestro registro remitimos a los
organizadores el resumen (abstract) de la investigación que
presentaríamos en Cuba. Fuimos aceptados y el problema
inicial fue gestionar en muy poco tiempo los recursos
necesarios para el viaje y estancia en Cuba. Afortunadamente
el Secretario de Salud del Estado de Sonora, Doctor Manuel
Robles Linares, conocía de tiempo atrás nuestra investigación
y fue sensible a la necesidad económica que afrontábamos
para poder asistir al congreso científico. Por lo que nos brindó
boletos de viaje redondo México-la Habana, la Habana –
México, eso nos solucionó parcialmente el problema porque
había que viajar primero de Hermosillo a México y de México a
Hermosillo de regreso, pero nuevamente la suerte estuvo de
nuestra parte y la generosidad de unos amigos periodistas, se
hizo patente y lograron que un periódico local nos financiara
el viaje redondo, a la ciudad de México.
La estancia en la ciudad de la Habana nos permitió conocer a

investigadores europeos y latinoamericanos que con sus
trabajos de investigación concurrieron al Congreso científico,
la diversificada aplicación de los polímeros en esos trabajos,
V22
desde el campo de la industria, la biotecnología y la

odontología, revelo a plenitud ante nuestros ojos el uso de los

polímeros, como un factor o un elemento estructural muy
importante de las sociedades modernas (o posmodernas) del
siglo XX y de inicios del siglo XX1, de hecho es difícil imaginar
la existencia de estas sociedades sin el uso de los polímeros.
Su uso en todos los campos de la actividad humana, como en
las llantas para automóviles, mangueras, suelas de zapatos,
aislantes eléctricos, aparatos de radio, teléfonos, partes de
televisores, pelotas de golf, etc. También en la
nanobiotecnología la aplicación de nuevos polímeros
termoplásticos tiene un amplio campo de aplicación al igual
que en los sorprendentes procesos de nanoimpresión,
nanoelectrónica, etc.. Naturalmente que para nosotros el
mayor interés estaba enfocado en el uso de los polímeros
naturales, de los que la mayor parte de ellos se obtienen por
reacciones de condensación o adición, algunos de esos
polímeros tienen contacto directo con el medio fisiológico y
poseen la ventaja de que son biodegradables.
El uso de las membranas de polímeros en la medicina, ha

adquirido una enorme importancia en procesos de purificación
sanguínea, en la diálisis y en las técnicas de ultrafiltración
para la separación de microorganismos, las membranas de
separación ocupan un lugar muy destacado en la industria
alimenticia, en la fabricación de quesos y de determinadas
bebidas como la cerveza, fermentados diversos, empaque de
alimentos par disminuir o evitar su oxidación en fin, la
experiencia obtenida en el Congreso de macromoléculas en la
Habana, reafirmó nuestro interés por el uso de lo polímeros
naturales que de entonces (1997), a la fecha han adquirido
una mayor importancia, quizá por eso quedaron grabadas en
V22
nuestra mente las palabras de un investigador que dijo:

“Los polímeros y su contribución invisible, tienen un éxito muy

visible en el mundo moderno”
OPTOGENETICS.INC
En agosto de 1998 nos invitaron del Periódico “El Imparcial”
de Hermosillo Sonora, a ofrecer una platica de presentación de
nuestro trabajo de investigación, dentro de un programa anual
de conferencias y actividades culturales que realizan y
denominan “Charlas de Verano”. Después de la platica El
Imparcial publicó un gran reportaje, que tituló “De Hermosillo
al Nobel” esto motivó a que unos empresarios mexicanos y
norteamericanos, nos invitaran a presentar nuestra
investigación en San José California, aceptamos y fue de esta
manera como el 22 de septiembre de 1998, ante la comunidad
de científicos norteamericanos de Silicon Valley y
empresarios, presentamos en esa ciudad californiana las
experiencias en la investigación del DNA. Con nuestro nuevo
método, mostramos además las fotografías obtenidas. Hubo
mucha discusión y dudas, pero para nosotros lo significativo
de esa reunión era que por primera vez investigadores
científicos, se interesaban por escuchar los resultados de un
proyecto de investigación, que médicos e investigadores
mexicanos de Hermosillo, habían calificado de descabellado
sin siquiera conocerlo. Finalmente, científicos y empresarios
mexicanos y norteamericanos decidieron formar una empresa
de biotecnología a la que pusieron por nombre OPTOGENETIC
INC. Partiendo del hecho de que la nueva técnica de análisis
de DNA esta basada en un fenómeno óptico, que permite verlo
en el microscopio . En el lapso de gestión de los abogados
V22
para el registro legal de la empresa en el Estado de California,

la Doctora en Genética Xi Zhao, una connotada investigadora

norteamericana de origen Chino, estuvo en Hermosillo por
acuerdo y solicitud de los miembros de la nueva empresa de la
que ella misma formaba parte, el objetivo de su visita era para
presenciar de manera directa en el laboratorio la aplicación de
la nueva tecnología. Ella dio su aprobación e hizo interesantes
observaciones sobre el método, pero lo que mas recuerdo fue
que en ese primer contacto con el método, ella comentó que le
era difícil aceptar que estaba viendo el DNA y tal vez lo que
veíamos era algo que nadie en el mundo se puede imaginar
que existe.
El 2 de diciembre de 1998 se aprobó el registro legal de la

empresa de biotecnología Optogenetics Inc. en el Estado de
California, con el número 2073727, firmada por el Secretario
de Estado del Estado de California Bill Jones, la dirección de la
corporación quedó establecida en San José California, USA.
Fundada por inversionistas mexicanos y norteamericanos. La

empresa recibió autorización para la emisión de 25.000.000
de acciones de las cuales el 45 % serian para la autora de la
invención., mas US$100.000 dólares anuales por la
transferencia de tecnología de la patente mexicana (182175)
y la patente en PCT (mx98/00003), la entrega de todos los
descubrimientos futuros y un convenio de no competencia con
los intereses de la compañía Optogenetic Inc. El capital inicial
fue fijado en US$1.500.000 dólares., Los abogados encargados
fueron el despacho Wilson Sonsini Goodrich &Rosati de Palo
Alto California.
Desde el principio la compañía tuvo como Director Ejecutivo al

V22
Doctor Víctor Virpullat, científico norteamericano, miembro y

ex-presidente de la organización internacional que agrupa a

las personas de mas alto coeficiente intelectual (CI) en el
mundo (MENSA) y al que pertenecen la mayoría de los
científicos mas destacados de los Estados Unidos y de otros
países. A Optogenetic se incorporarían, además de la Doctora
Xi Zhao, el Doctor en Biología Celular Gin Wu y el promotor y
asesor financiero Arthur Lipper III.
Después de que se formó la compañía Optogenetic, los

empresarios mexicanos hicieron gestiones en Hermosillo con
la Secretaria de Salud para que nos concedieran un espacio
en el Hospital Oncológico del Estado de Sonora, en esa
institución de salud montamos un pequeño laboratorio, en el
que empezamos a trabajar de nuevo, prácticamente en un
nuevo “asilo científico”. Por otra parte, en California empieza
el proceso de solicitud de patente en los Estados Unidos. La
perspectiva muy atractiva para trabajar en el Hospital
Oncológico fue que en ese lugar obtendríamos muestras
sanguíneas de enfermos de cáncer recién diagnosticados, nos
interesaba particularmente empezar a estudiar el DNA de
pacientes con cualquier tipo de cáncer que no hubieran
iniciado su tratamiento de quimioterapia y radioterapia,
enfermos de cáncer Cervico-uterino, cáncer de mama, cáncer
de próstata, cáncer óseo, cáncer de pulmón, etc.
La posibilidad de sustituir el examen papanicolau de cáncer

Cervico-uterino, con la sencilla extracción de una muestra de
sangre, como en cualquier biometría, haría que muchas
mujeres que evitan el examen por pudor, cuestiones morales ,
culturales o religiosas acudieran a hacerse las pruebas de DNA
de manera rutinaria y sobre todo con la posibilidad de
V22
detección temprana. Todos los oncólogos saben que cuando

un cáncer es detectado o manifiesta sus primeros síntomas, la

enfermedad ya tiene algunos años de haberse incubado, así
que si tomamos en consideración que en cualquier
enfermedad el primero que cambia es el DNA, al registrar la
presencia de agentes patógenos, y los genes del sistema
inmunológico se replican e inician la defensa del organismo,
un análisis del DNA, detectaría oportunamente esos cambios,
esa información en manos del oncólogo permitiría la terapia
adecuada cuando la enfermedad apenas se inicia, con la
ventaja adicional de que se le puede dar seguimiento al efecto
de los medicamentos y los resultados de la terapia.
Años atrás, cuando la investigación la realizaba en el

Laboratorio Estatal de Salud Pública, hubo una ocasión que
una de las muestras de DNA que analizaba y que pertenecía a
una joven compañera del laboratorio, presentó un aspecto
extraño muy diferente a las muestras de DNA que a ella
misma le habíamos realizado meses antes y diferente también
a otras muestras de DNA hasta entonces estudiadas, no
sabíamos de que se trataba pero por prevención se lo
comentamos a ella y entonces consultó a su medico, que muy
profesionalmente agotó todo tipo de pruebas y al hacer la
prueba de Papanicolau, le diagnosticaron cáncer cérvico
uterino incipiente, otras pruebas adicionales confirmaron el
diagnostico y el doctor inició en la paciente, una terapia con
interferón. Terminado el tratamiento ella nos dio una nueva
muestra sanguínea para extraer el DNA y repetir el análisis, la
sorpresa fue que la imagen de su DNA había recuperado su
aspecto normal, ya sin el aspecto replicado y desordenado,
que presentaba antes de su tratamiento.
V22
Con ese antecedente en mente, el iniciar un estudio

sistemático de cáncer en el hospital al que acudían
diariamente enfermos de todo el estado de Sonora, me
parecía una gran oportunidad de consolidar una investigación
que ayudara a resolver la erradicación de esa terrible
enfermedad, por su parte, a la compañía Optogenetic les
pareció muy adecuado que iniciáramos con cáncer la nueva
etapa de la investigación de DNA, considerando que solamente
en Estados Unidos esa enfermedad provoca el mayor índice de
decesos.
Hicimos un protocolo de investigación que entregamos al

director del nosocomio, pero extrañamente las muestras
nunca llegaron a nuestro laboratorio, por cuestiones casuales
obtuvimos dos o tres muestras de enfermos que eran
conocidos nuestros, ellos o sus familiares, y aunque algunos
médicos en lo personal nos prometieron amablemente
conseguirnos algunas muestras de los pacientes que ellos
trataban, estas tampoco nunca llegaron. La compañía decidió
entonces poner un anuncio de media página en un periódico
local solicitando muestras voluntarias de enfermos de cáncer
y por ese medio conseguimos otras tres muestras pero de
enfermos que ya habían iniciado el tratamiento o estaban en
fase terminal.
Al no contar con el suficiente número de muestras que nos

permitieran realizar repeticiones y comparaciones estadísticas
entre los diferentes tipos de cáncer y distintas etapas de su
evolución y al constatar que en México difícilmente podríamos
obtener las muestras necesarias para el proyecto de
investigación, recordamos la experiencias obtenidas cuando
V22
establecimos el método para la obtención del perfil plásmidico

de E. coli y las pruebas de paternidad por afinidad, de repente

nos pareció que era lógico pensar que si poníamos dos
muestras de DNA iguales , las cadenas se unirían por afinidad,
por ejemplo Cáncer de Mama (Cam.), con cáncer de mama
(Cam) y si reuníamos DNA de cáncer Cervico-uterino (Cacu)
y cáncer de mama (Cam) las cadenas permanecerían
separadas, por ser dos tipos de cáncer con origen diferente,
entonces y siguiendo esta misma secuencia lógica, si uníamos
el DNA de una persona sana con el DNA de Cáncer de cualquier
tipo, las cadenas permanecerán separadas porque no hay
afinidad, pero si el DNA de una persona aparentemente sana,
se une al DNA de cáncer con el que estamos realizando la
prueba, seria evidencia que la enfermedad ha iniciado el
proceso de incubación .
Realizamos algunas pruebas con las escasas muestras de

cáncer disponibles, hicimos todas las combinaciones posibles
con ellas y luego combinándolas con DNA de personas sanas,
DNA de embarazadas, DNA de enfermos de Alzheimer, DNA de
tuberculosis (BCG), etc, y en todos los casos los resultados
fueron como lo habíamos teorizado. Para agotar las
posibilidades de otro tipo de combinaciones, necesitaba de
cualquier forma obtener muchas muestras de DNA del mayor
numero de tipos de cáncer, sobre todo los de mayor incidencia
y del mayor numero de otros tipos de enfermedades. A todo
esto se une la necesidad de establecer control, sobre las
condiciones de extracción misma del DNA, tiempo de
realización de la prueba y diferencia con el tiempo de
extracción del DNA, condiciones de conservación de la
muestra (congelada, liofilizada, a temperatura ambiente etc, ),
lugar de extracción de la muestra de DNA y lugar de
V22
realización de la prueba, origen de la muestra de DNA, todo

esto para establecer las adaptaciones necesarias a la técnica,

observar los resultados en cada caso hasta obtener resultados
óptimos. Esto implicaba además la necesidad de disponer de
todas las muestras de DNA necesarias para las pruebas,
disponer de un largo tiempo de investigación, de reactivos y
equipo e instrumental adicional con el que no contábamos.
Por otra parte, no podíamos tampoco contratar ayudantes

porque según la compañía Optogenetic, todos los recursos
disponibles estaban enfocados a pagar a los abogados y los
altos costos en la gestión de registro de patente en los
Estados Unidos y eso mismo limitaba el compartir el secreto
de patente, con otras personas ajenas al proyecto.
Financiamiento y Comercialización
La compañía Optogenetic obtuvo inicialmente recursos para su
operación de la venta de acciones principalmente a
destacados empresarios de Sonora, de Nuevo León y de San
Diego California, que veían, unos con cierta simpatía los
objetivos humanitarios de la investigación, otros porque el
plan de negocios incluía el ingreso de la compañía a la bolsa
de valores de Nueva York, por otra parte los estudios de
mercado realizados por el Dr. Jefrey Níkel (Executive VP) eran
muy optimistas en cuanto a las posibilidades de
comercialización del descubrimiento, un elemento más que
ayudó a consolidar la imagen de la compañía eran las
personalidades del Presidente de Optogenetic Inc. Dr. Victor
Vurpillat (CEO), Dr. XI Zhao (CTO), John Gorsich (CEO) Brenda
Fox (CIO), el Dr, Gin Wu como Presidente científico de la
V22
Compañía y el (Chairman) Arthur Lipper III como Director de

las operaciones financieras de la compañía.
Arthur Lipper III (Chairman de British Far East Holding Ltd. Y

de Environmental Technologies Corporation of America ) es un
destacado financiero , consultor y banquero, autor de varios
libros, conferencista y columnista de varias publicaciones de
Estados Unidos, con amplias relaciones en el medio cultural,
educativo y científico, su colaboración en Optogenetic hizo
posible la difusión en varias compañías y universidades
norteamericanas la tecnología del nuevo método de análisis
del DNA.
Para Arthur Lipper, una de las principales dificultades para

aceptar y aplicar la tecnología de Optogenetic en Estados
Unidos, aparte de ser un descubrimiento muy polémico por
retomar el campo de la visión en el estudio del ADN, campo
abandonado por los genetistas moleculares, es que el
descubrimiento procede de un país del tercer mundo (México),
fue hecho en una provincia de ese país (Sonora) y la
investigadora es una mujer mexicana y agrega, “Si ella fuera
Noruega, inglesa o alemana hace mucho tiempo la atención
del mundo científico estaría puesta en su descubrimiento,
pero no es así, por lo que tenemos que ser doblemente
eficaces en la argumentación y comprobación de la ciencia,
que sustenta este descubrimiento“.
El Dr. V. Virpullat, presidente de la compañía Optogenetic

opinó: “Hace aproximadamente medio siglo, las ciencias
química y bioquímica modernas empezaron desarrollos de
importancia. Los estudios del material genético fueron más
V22
intensos y aceleraron descubrimientos genéticos nuevos. Los

investigadores se dieron cuenta que los genes se formaban de

macromoléculas extremadamente largas y delgadas, llamadas
ahora ADN.
Sin embargo, la visualización de los genes con el microscopio

óptico es virtualmente imposible. La investigación moderna
abandonó la idea de estudiar el ADN con microscopios ópticos,
hasta el descubrimiento de la Doctora Gloria Elena León Paz,
las investigaciones actuales enfocan la estructura lineal del
ADN por medio de métodos bioquímicos. Al inicio de la
biología molecular moderna se empleó el microscopio
electrónico, para estudiar la estructura microscópica del ADN.
Hace varios años habían fallado los intentos por ver los genes
individuales en las moléculas del ADN.
Hay muy pocos investigadores que estudian la estructura

topológica del ADN y estos son una minoría, entre los
investigadores genéticos. Sin embargo, en la actualidad
sabemos que el ADN funciona no solo mediante la estructura
lineal de sus genes, sino que se ve afectado por su estructura
tridimensional. Debido a la complejidad extrema de su
estructura tridimensional y la limitación de la tecnología
actual y además, debido a la técnica obsoleta del microscopio
óptico utilizando conceptos modernos, a excepción de la
Doctora Gloria Elena León Paz.
El concepto muy importante de Optogenetic desarrollado por

la Doctora, en relación a la observación del ADN mediante el
microscopio óptico, fue para establecer una comparación entre
los cambios morfológicos de los agregados del ADN normal y
los agregados del ADN de pacientes. Esta tecnología no es con
V22
el propósito de estudiar el ADN normal. En otras palabras la

tecnología de Optogenetic, es una tecnología que enfoca las

aplicaciones médicas y no el estudio genético puro, aunque
podría ser una herramienta útil para el estudio genético en el
futuro.
La Doctora León Paz encontró que mediante el procedimiento

de extracción especial del ADN (o aislamiento), el ADN
agregado de los glóbulos blancos mostraba patrones
diferentes en la sangre normal y anormal (enfermedad,
incluso embarazo) de los pacientes. Usando esta tecnología,
podía determinarse el sexo de un feto tan solo una semana
después de su concepción. La Doctora León, ha estudiado
unos cuantos cientos de especímenes casi con exactitud
completa (debido a que no se tuvo un informe final después
del parto, a causa de la reubicación de los pacientes fuera del
área). Así mismo se observaron patrones entre las personas
normales y los pacientes con cáncer. Pero debe tenerse en
mente que los cambios en el patrón de ADN en esta aplicación
se basan en los cambios del sistema inmune. No se trata de
cambios en el feto o en las células cancerosas.
En nuestra opinión, la idea de la Doctora Gloria Elena León

Paz, creará una industria de diagnóstico médico, de gran
importancia”.
La investigación del ADN con

Optogenetic
La relación de trabajo con la compañía Optogenetic tuvo una
motivación importante, en cuanto que estaba integrada por
personas ampliamente relacionadas con el mundo científico,
V22
de Estados Unidos y con promotores financieros de primer

nivel de ese país, bastó con la promesa de que asumirían los
gastos concernientes de la solicitud y registro de patente en
los Estados Unidos del Nuevo Método de Análisis del ADN y
la promoción a nivel mundial de la tecnología, para
convencernos de asociarnos con esa compañía
norteamericana. El contrato que nos ofrecieron (Según el
agente que nos representaba), era el más ventajoso que haya
sido propuesto a cualquier inventor en los Estados Unidos,
aunque a cambio pidieron firmar un convenio de transferencia
total de la tecnología y de todos los descubrimientos futuros
que realizáramos en el campo de la genética. La propuesta
económica era deslumbrante y por lo tanto increíble (no
creíble), sin embargo aceptamos firmar ese contrato porque lo
que en realidad nos interesaba era poder continuar la
investigación y consolidar los resultados, difundirla y
promocionarla en todos los laboratorios y centros de
investigación del mundo, la posibilidad de que cientos o quizá
miles de investigadores aplicaran el método en temas
específicos de la salud y encontraran formas de diagnostico y
vacunas genéticas para cada enfermedad, desborda la
imaginación.
Todos los que nos dedicamos a la investigación científica

sabemos que los procesos de desarrollo de la ciencia rebasan
el corto lapso de vida productiva de un investigador y que
únicamente cuando el conocimiento es compartido y se aplica
el ingenio y la creatividad de muchos investigadores, es
cuando una generación puede ver y disfrutar de los resultados
de los descubrimientos científicos y cuando estos son en el
campo de la salud, difícilmente puede ponerse precio a un
V22
valor que pertenece por derecho propio a toda la humanidad.

Sí bien es cierto que un descubrimiento científico aunque

tenga un autor es producto de la inquietud, el esfuerzo y el
conocimiento generado y trasmitido de generación en
generación por miles de seres humanos, cuando se produce
una “Revolución Científica” como a la que se refiere

Thomas Kuhn, se produce también un salto histórico, en el
cual un descubrimiento crea un nuevo eslabón en la cadena
del desarrollo y transformación de la realidad, al igual de las
sociedades humanas, que se transforman y renovan en la
clausura de sus viejas instituciones y significaciones, esto es
de cierta manera, similar al fenómeno de replicación de una
célula, cuando la cadena se abre para encontrar sus nuevos
pares y crear una nueva unidad de vida, así es el conocimiento
científico y difícilmente puede tener un equivalente en el
mundo del dinero.
Nuestro trabajo tuvo con Optogenetic, una expectativa nunca

imaginada, después de muchos años de investigación solitaria
en la que en muchas ocasiones se vio interrumpida por falta
de reactivos o laboratorio en el cual realizar nuestro trabajo y
de una gran cantidad de cartas, dirigidas a presidentes de la
república, diputados y senadores de varios sexenios, rectores
de universidades y gobernadores tuvo como respuesta la
indiferencia, a excepción de un gobernador (que nos apoyó
para realizar el pago de derechos de la patente en México) y
de un Rector de la UNAM que amablemente contestó nuestra
carta.
Siempre deseamos que el derecho de explotación de la

patente perteneciera a nuestro país, pero el hecho de no
pertenecer al Sistema Nacional de Investigadores (SNI) y de
V22
no pertenecer a alguna de las instituciones oficiales de

investigación, limitó nuestras posibilidades de publicar y de

recibir financiamiento de CONACYT, así que cuando la empresa
norteamericana, nos propuso el año 2004, realizar una
validación de la metodología, en el estado de Arizona de los
Estados Unidos, consistente en pruebas ciegas de muestras
de ADN, que serian extraídas y congeladas en el Arrowhead
Regional Medical Center, en Colto California y
posteriormente empacadas y enviadas por avión y vía
terrestre al laboratorio instalado en el Holy Cross Hospital en
Nogales Arizona, cambiando por completo el protocolo con el
cual habíamos obtenido buenos resultados en México, proceso
en el cual aplicando personalmente nuestro método y en un
tiempo preciso de realización, extraíamos el ADN, lo
congelábamos a determinada temperatura y aplicábamos el
método que hace posible verlo en el microscopio óptico, sin
embargo aceptamos porque no teníamos otra alternativa, ante
el argumento esgrimido por el consejo científico de la
compañía, de que el ADN no se altera ante variables de
temperatura, tiempo de conservación o traslados a grandes
distancias. Con todo y nuestras dudas, durante 10 meses
realizamos pruebas ciegas de cáncer Cervico-uterino, cáncer
de mama y de mujeres embarazadas.
Teníamos que acertar y decir que muestras de ADN,

pertenecían a mujeres sanas o afectadas por un tipo de cáncer
determinado, en el caso de lo embarazos se trataba de
predecir con exactitud el sexo del bebé, sin mayor información
que el que proporcionara la muestra marcada con una clave.
A pesar de esas circunstancias (En calificación del 10 al 100 )

los resultados alcanzados en aciertos fueron 70 que la hace
V22
una tecnología viable, pero sin alcanzar el mínimo deseable de

85, que la convierte en comercializable.
El Doctor Raymond Cestero, uno de los doctores que participó

en la prueba, marcando las claves de cada muestra y en la
extracción del ADN en California, opinó que en Estados Unidos
regularmente la validación de un medicamento, o
descubrimiento generalmente pasa por varios intentos de
validación, antes de obtener su aprobación y que en nuestro
caso se trataba de volver a la mesa de diseño, revisar los
factores que impidieron el total de aciertos, invertir un poco
mas en investigación y volver a intentarlo hasta lograr el
objetivo.
Resultó obvio que la forma de extracción, el congelamiento a

una temperatura distinta a la empleada en nuestro método y
el desplazamiento a grandes distancias, afectó seriamente los
resultados, posteriormente nos enteramos que muchas de las
muestras estuvieron varios años guardadas en congelación, al
contrario de las pruebas realizadas en Hermosillo en las que
siempre trabajamos con muestras nuevas y realizando todo el
proceso en el mismo lugar de manera continua.
Sin embargo el trabajo realizado en Arizona, tuvo una

aportación importante en el largo proceso de investigación,
logramos elaborar una valiosa tabla de concentraciones de
ADN para lograr en menor tiempo, determinados procesos en
el análisis del DNA, esta tabla será en el futuro un elemento
muy importante para los investigadores que no tendrán que
hacer determinados cálculos para obtener la concentración
adecuada de ADN, esto les permitirá poder estudiar un mayor
V22
número de muestras en una jornada o servirá de base para la

automatización del método, que seria uno de los pasos

siguientes por hacer.
Desarrollar un nuevo proyecto de investigación en base a la

experiencia vivida en Arizona seria el camino a seguir si se
quiere aprovechar la información positiva y negativa obtenida,
el estudiar las múltiples variables de temperatura a la que
puede estar expuesta una muestra de ADN, el tiempo de
antigüedad de la extracción del mismo, si fue empacado en
forma adecuada y recorrió determinadas distancias por vía
aérea o terrestre y poder establecer los ajustes necesarios en
el método de análisis para obtener el control sobre los
resultados, y responder las preguntas siguientes : ¿Qué tanto
cambia el ADN bajo determinadas condiciones como las
mencionadas?, ¿Qué tanto varia la imagen de una muestra de
ADN en condiciones variables?. Es indudable que así como
reacciona de inmediato el ADN ante cualquier agente o factor
que perturbe el sistema inmunológico, así mismo es sensible a
cambios a los que es sometido.
V22
La Patente en Estados Unidos

Entre el largo período de la búsqueda de comercialización y
alianzas estratégicas de Optogenetic con grandes compañías
de biotecnología en Estados Unidos, hubo algo afortunado, la
solicitud de patente realizada el 17 de enero del 2001 en
Estados Unidos, fue aprobada y otorgada el 16 de agosto de
2005 con la modalidad de expediente abierto, es decir que de
presentarse un nuevo descubrimiento se anexa al ya aprobado
sin mayor trámite.
El titulo de la patente aprobada es: “METHOD FOR

PROCESSING BLOOD SAMPLES IN ORDER TO PRODUCE DNA
COMPLEX PATTERNS FOR DIAGNOSTIC APPLICATIONS”.
PATENT No. US 6,929,908 B1
INVENTORS: Gloria Elena León Paz de Rodríguez
And Gin Wu, San José Ca. (US).
Una importante compañía farmacéutica de Nueva York

consultada, calculó un precio de salida de la patente al
mercado entre un millón a dos millones de dólares.
Después del trabajo realizado en Arizona, la compañía

Optogenetic nos comunicó que estaba descapitalizada y que el
consejo de administración estaba estudiando vender la
patente para compensar a los inversionistas, ignoramos que
decisión tomaron, desde el año 2004 dejaron de pagarnos la
mensualidad de tres mil dólares mensuales que recibíamos,
(tres veces menor a lo convenido en el contrato de
V22
transferencia de tecnología). Las anualidades pactadas

tampoco fueron cubiertas y el único pago realizado fue de

$50.000 dólares por la firma del contrato.
A fines del año 2007 recibimos comunicación de la compañía

Optogenetic de que el Doctor Mark Talamini especialista en
cáncer de la Universidad de San Diego California, estaba
interesado para que en los laboratorios de esa institución se
realizara un nuevo protocolo, para un segundo intento de
validación de la técnica, con algunos tipos de cáncer que son
su especialidad como oncólogo, y que se estaba gestionando
con la institución, los aspectos referentes a nuestra estancia
en esa Universidad.
Pero después se hizo el silencio de nuevo.

El equipo de laboratorio con el que realizamos las pruebas
ciegas en Arizona, quedó depositado en una bodega de ese
estado, por lo que no hemos podido regresar a trabajar al
laboratorio y continuar con la investigación del DNA,
temporalmente trabajamos como docentes en una
Universidad local, en el lapso que hicimos una solicitud ante la
Secretaria de Economía del Gobierno Federal para la
formación de una empresa de biotecnología y nos remitieron a
la incubadora de empresas Tx- Tec en la Universidad de
Sonora, después de una serie de requisitos, consultas y
entrevistas nuestro proyecto fue considerado viable y
recomendable para invertir en él, pero sabemos que hasta el
momento en México ninguno de los grandes empresarios
mexicanos (exceptuando a Ignacio Romo de Monterrey y Juan
Enríquez Cabot, en Boston), se han atrevido a invertir en
biotecnología . En palabras del Doctor René Druker Colín,
Maestro Emérito y ex coordinador de investigación en la
V22
UNAM, los investigadores mexicanos no reciben de CONACYT

el apoyo económico adecuado para el desarrollo de grandes

proyectos de investigación que contribuyan al desarrollo del
país . Lo poco que se invierte esta destinado a salarios y si se
apoyan proyectos de investigación están condicionados a
resultados rápidos y publicables como artículos científicos,
adecuados para obtener estímulos académicos en la
instituciones de Educación Superior.
Es de conocimiento público que los países miembros de la

Organización para la Cooperación y el Desarrollo Económico
OCDE, son dueños del 97% de la patentes y las
corporaciones globales poseen 90% de toda la tecnología y los
productos patentados. Nuestro trabajo de investigación del
DNA, desarrollado totalmente en México y patentado en los
Estados Unidos y en el PCT esta dentro de esa categoría, por la
indiferencia y la falta de apoyo al trabajo que podemos
desarrollar los investigadores mexicanos.
V22
AQUELLOS QUE PIENSAN QUE LA

TIERRA ES PLANA
DEBEN QUEDARSE EN LA ORILLA
PERO NO DISUADIR
A OTROS DE NAVEGAR.
Arthur Lipper III
A lo largo de la historia del conocimiento humano y del

desarrollo de la ciencia, todas aquellas personas que han
dedicado sus esfuerzos a buscar respuestas sobre la
naturaleza y el mundo físico y social que percibimos, han sido
confrontados y poco comprendidos por personas que por
temor a lo desconocido prefieren evitar que se produzcan los
cambios, sin embargo, la estructura misma de todo el universo
conocido y todo lo que este contiene, esta en un proceso
permanente de transformación y cambio, la misma naturaleza
del ser humano a partir del momento en el que se unieron los
genes que le dieron vida, esta en un proceso de cambio
permanente, y así como un organismo que esta desnutrido se
ve afectado en su desarrollo pleno , así , de la misma manera,
las sociedades que permanecen al margen del desarrollo
científico y tecnológico, son sociedades desnutridas de
conocimientos y de los cambios que estos generan.
Un investigador científico, es una persona que ha logrado

preservar para sí la curiosidad y el interés primigenio por el
mundo que lo rodea y nada puede calmar su inquietud, mas
que encontrar las respuestas a los muchos enigmas que aún
guarda la naturaleza pues sabe que más allá de la naturaleza
V22
esta la propia naturaleza y lo que ignoramos de ella.

La decisión de investigar territorios inexplorados llevo a los

navegantes a descubrir nuevos mundos, los territorios
estaban allí desde siempre, pero ellos y sus sociedades no los
conocían, fue necesario convencer a los escépticos y vencer el
temor y las dificultades para llegar a la otra orilla.
Las mentes cerradas siempre han existido, en países pobres y

en países ricos y son esas mentes las que frenan el desarrollo
y obstaculizan la investigación y frustran la curiosidad infantil
por el conocimiento con programas educativos que imponen la
disciplina y la obediencia como factores para lograr la
eficiencia productiva, sin importar el aprender, usar la
imaginación y aportar algo nuevo.
La investigación científica como profesión y motivo de vida es

una experiencia excepcional que nos da acceso de manera
privilegiada al conocimiento y realizar investigación del

DNA es como abrir una puerta al futuro y vislumbrar
que todo esfuerzo que realicemos valdrá la pena a pesar de
cualquier dificultad que hayamos encontrado en el camino.
El trabajo de investigación que hemos realizado a lo largo de

varios años y que ahora hemos presentado tiene la intención
de que todos los que tengan acceso a él y lo lean compartan
la emoción de poder ver por vez primera las imágenes del DNA
y valorar y agradecer el esfuerzo de mucha gente que
generosamente ha colaborado para que esto haya sido
posible. Familiares, amigos, enfermeras, químicos biólogos,
médicos, señoras embarazadas, enfermos y personas sanas,
empresarios mexicanos y norteamericanos, periodistas,
maestros y jóvenes estudiantes que nos han comunicado sus
V22
deseos de ser investigadores después de escuchar nuestras

pláticas.
Del DNA hemos aprendido que el equilibrio de sus

componentes, en sus múltiples posibilidades de combinación,
es lo que define su perfección, cada DNA de cada ser vivo es
igual a otros DNA, pero también es diferente. comparte genes
con otros individuos, pero posee otros que le confieren su
singularidad. Es como la historia de la cultura de la
humanidad, de la que bien sabemos todos que su riqueza y su
universalidad radica en su diversidad. La aportación de cada
persona, de cada cultura para alcanzar el progreso y
desarrollo, sin desigualdades sociales es lo que puede hacer
posible que el conocimiento científico pueda encontrar
condiciones adecuadas, para dar y proporcionar las respuestas
y soluciones a las necesidades de todos los seres humanos.
Nuestro deseo es continuar investigando, por ahora no

tenemos laboratorio, ni patrocinadores, ni sueldo, ni recursos,
pero intentaremos seguir investigando, tenemos de capital
para empezar de nuevo, la autoría de 4 patentes que nos han
aportado la mayor riqueza a la que puede aspirar un ser
humano, que es el conocimiento mismo.
FIN
V22
Posdata Iconográfica
Mostraremos a continuación unas fotografías del DNA, de una
familia que acudió al Laboratorio por iniciativa de la abuela
Ramona, que al enterarse del estudio que estaba realizando,
convocó con todo entusiasmo a 3 de sus nietas a sumarse a
nuestro esfuerzo y cooperar en el conocimiento del DNA.
Fig.- 56
En la figura 56 se presenta la fotografía del DNA, de la abuela,

V22
la señora Ramona de 83 años. Podemos ver un DNA difícil de

compactar, aunque ella esta saludable y muy emocionada de

poder participar en el estudio. Para nosotros todos estos
gestos de solidaridad es uno de los factores más importantes
para mantenernos cautivos, dentro de este proyecto.
Las figuras 57, 58 y 59, corresponden a 3 nietas de la señora
Ramona, ellas son primas entre si.
Fig.- 57
En la fig 57 vemos el DNA de Clara, una estudiante de artes

plásticas en la Universidad de Sonora , ella fue la que le contó
a su abuela Ramona lo que su maestro , mi esposo, les platicó
V22
acerca del proyecto del DNA. Clara tiene 35 años y su DNA se

ve normal y bien compactado.
Fig.- 58
En esta fotografía figura-58, vemos el DNA de Bricia, es

también nieta de la señora Ramona. Ella tiene lupus
eritematoso y su DNA casi no lo podíamos ver de tan delgado
V22
que estaba, por lo que decidimos agregar taninos (polímeros )

al buffer de extracción de DNA y como se observa, el DNA de

Bricia se reveló y se puede estudiar la cadena con toda
comodidad. Creemos que el uso de taninos, deberá ser
esencial en las aplicaciones de esta tecnología V22.
Fig.- 59
La fig.- 59 nos presenta el DNA de Carolina, la otra nieta de la

señora Ramona , ella tiene 20 años y esta saludable. De cierta
manera los DNA de Carolina y Clara se parecen entre si,
probablemente sean del mismo tipo sanguíneo o por ser
primas seguramente tienen genes en común.
V22
Otras fotografías de DNA que se tomaron estudiando la

compactación del DNA, se presentan a continuación:
MARTHA C DNA. EXTENDIDO
FIG.-60
En la fig 60 vemos el DNA extendido de Martha Cecilia, una

joven voluntaria y en la fig.- 61 el mismo DNA, solo que
compactado.
V22
FIG.- 61 DNA COMPACTADO
En la fig.- 62 se nos presenta el ADN extendido de Mirna, una

joven voluntaria
V22
FIG 62 DNA EXTENDIDO

FIG.- 63 DNA COMPACTADO
El estar estudiando el DNA, nos ha ofrecido sorpresa tras

sorpresa, Mirna es gemela monocigoto, su DNA extendido lo
vemos muy grande, figura 62, comparado con el de Martha
Cecilia, figura 60. Al compactar el DNA de Mirna, se observan
2 “ovillos” figura 63, en lugar de uno solo como el de Martha
Cecilia, figura 61. Así que estamos seguros, que cuando
aprendamos el idioma de imágenes del DNA, con solo verlo
directo al microscopio o estudiando su fotografía,
inmediatamente conoceremos el origen de ese DNA y todas
V22
sus características.
Ya por ultimo les ofrecemos una prueba de compactación de

DNA de un señor de 56 años:
Fig.- 64 DNA EXTENDIDO

V22
FIG.-65 DNA COMPACTADO
En la figura 65, se observa una compactación incompleta, nos

aventuramos a decir que el DNA está perdiendo ya su
capacidad de compactarse, son deducciones que vienen a
nuestra mente, cuando estamos estudiando las imágenes del
DNA.
V22
V22
ANEXO # 2
VISION22
AGRADECIMIENTOS
A MI AMADO ESPOSO ENRIQUE, POR DARNOS TANTA FELICIDAD A
MI Y A NUESTRAS HIJAS.
A MIS ADORADAS HIJAS ERICKA Y SU ESPOSO RAMÓN Y A
NUESTROS NIETOS FELIPE, ALEJANDRO Y MARCOS, A MI ADORADA
CRISTY Y SU ESPOSO ROBERTO Y A SU DESCENDENCIA POR VENIR.
A MIS AMADOS PADRES JUAN Y CLOTILDE, POR LA FELIZ INFANCIA
QUE NOS DIERON.
A MIS QUERIDOS HERMANOS Y HERMANAS: FAUSTO, YOLANDA,
JESÚS, ADELIZA, JUAN, ROSA MARIA, MARTHA, JESÚS MATIAS,
SILVIA, RENE, PEPE Y A TODOS MIS QUERIDOS SOBRINOS Y
SOBRINAS.
A MIS QUERIDOS SUEGROS: IGNACIO Y HERLINDA Y QUERIDAS
CUÑADAS Y CUÑADO, MARIA DEL CARMEN, OLIVIA Y OSCAR.
A MI ADMIRADO Y QUERIDO SOBRINO JESÚS Y SU ESPOSA LLUVIA
Y SU BEBITA.
A MIS QUERIDAS TÍAS Y TIOS: LUCILA, GUILLERMO, ROSA, JOSÉ
MARIA, ADELA, ARMANDO, QUELITA, RENE Y A TODOS MIS
QUERIDOS PRIMOS Y PRIMAS.
A MIS INOLVIDABLES MAESTROS: ARMIDA MACALPIN, FERNANDO

ARAGÓN, ERNESTO LÒPEZ RIESGO, ALEJANDRO DUEÑAS, LUIS
GOMEZ DEL CAMPO, VIRGILIO RÍOS AGUILERA, GILBERTO
GUTÍERREZ QUIROZ, CARLOS ENRIQUE PEÑA LIMÓN, RAÚL
PETERSON, CARLOS ROMBOLD, MANUEL PUEBLA PERALTA Y
EDWARD BERKA,
A MIS AMIGAS DE SIEMPRE: MARISSA , MELIDA, MARTHA ELISA,

MARIA ANTONIETA, MARIA JESUS, PUPI MARTINEZ, CHEPI
OCHOA, CHAYO ORTEGA, CARMEN ALICIA.
A LA DRA. LUZ VÁZQUEZ MORENO, POR SU IMPORTANTE Y VALIOSA

ASESORÍA EN MI TESIS DE MAESTRÍA.
A NUESTRO ADMIRADO Y GRAN AMIGO ALBERTO HIJAR SERRANO.

A LA DRA. IFIGENIA MARTÌNEZ POR SU APOYO SOLIDARIO.
AL LIC. ANDRES MANUEL LOPEZ OBRADOR CON RESPETO Y
ADMIRACION.
NUESTRO PROFUNDO AGRADECIMIENTO A NUESTROS AMIGOS

ROSA MARÍA Y ALAN SOTELO CRUZ, POR SU SABIDURÍA Y SU
V22
VALIOSA ASESORÍA.
A NUESTROS BUENOS AMIGOS, MARTÍN CRUZ ALONSO, SOCORRO

TRUJILLO MORENO Y GUSTAVO OZUNA GONZÁLEZ , NUESTRO
AGRADECIMIENTO POR SU AMISTAD SOLIDARIA.
AL LIC. MANLIO FABIO BELTRONES RIVERA, AL ING. VERNON

PEREZ RUBIO, AL DR. JOSÉ LUIS NAVARRO HELSEN,AL
DR.FILIBERTO PERÉZ DUARTE, AL LIC. MIGUEL QUIROS, AL LIC.
ALVARO OBREGÓN Y DORA LUZ OBREGÓN Y A SUS HIJAS CLAUDIA Y
DORA LUZ, POR SU IMPORTANTE Y VALIOSO APOYO.
ASI MISMO QUEREMOS AGRADECER LAS GENTILEZAS DE LOS

DESTACADOS PERIODISTAS Y COMUNICADORES QUE NOS HAN
BRINDADO SU VALIOSA ATENCIÓN , EMILSE VALENCIA, ANTONIO
DUARTE GARCIA, FAUSTO SOTO SILVA, MARTHA OBESO, MARTIN
OLGUIN, CARMEN ALICIA ESPINOZA ORTEGA, GILDA VALENZUELA
PICOS, LUPITA PEREZ RIOS, ELSA NUÑEZ ESQUER, SILVIA
MANRIQUEZ, NOHEMI GONZÁLEZ, SILVIA DUARTE, RICARDO ACEDO
SAMANIEGO, CRISTINA PACHECO, JOSÉ GUTÍERREZ VIVÓ, FORTINO
LEÓN ALMADA, AMALIA ESCOBAR, ROGELIO MORENO COTA,
EDUARDO GÓMEZ TORRES, RUBÉN PARODI, MANUEL BORBÓN
MONTAÑO, SONIA DOMÍNGUEZ J.,RAFAEL RENTERÍA ROSALES,
ROCÍO BANDA, MARÍA JESÚS ROMERO, AZUCENA MEZA, PATRICIA
ANTILLÓN, GUADALUPE CENTENO, MARIO MUNGUÍA, CARMEN
CHÁVEZ MADA, ALMA AYÓN LÓPEZ, LOURDES SARRACINO, CINTHYA
DEL VILLAR, NORMA ALICIA PIMIENTA, SOLEDAD DURAZO, ANA
LUISA PACHECO, JESUS RUIZ, BETTY ESTRADA Y LOS
DISTINGUIDOS MIEMBROS DE “ AMIGOS DE LA RADIO”.
A TODAS LAS EMBARAZADAS QUE FUERON AL LABORATORIO, POR

EL PRÓNOSTICO DEL SEXO DE SU BEBÉ.
A TODA LAS PERSONAS QUE TUVIERON LA GENTILEZA, DE DARNOS

UNA MUESTRA DE SU SANGRE, PARA TENER LA FOTOGRAFÍA DE SU
DNA.
A LAS FAMILIAS QUE NOS APOYARON EN EL ESTUDIO PARA

ESTABLECER EL MÉTODO DE PATERNIDAD:
1) FAMILIA CÁZAREZ LEÓN, 2) FAMILIA ANDRADE LEÓN, 3)
FAMILIA LEÓN CERVANTES, 4) FAMILIA SILVA PALOMARES, 5)
FAMILIA BURGOS CALLEJA, 6) FAMILIA MORENO QUINTANA, 7)
FAMILIA PARADA LOAIZA, 8) FAMILIA GIL GARZA, 9) FAMILIA
AYALA LENDO, 10) FAMILIA GÓMEZ FRANCO, 11) FAMILIA RAMÍREZ
VALDEZ, MUCHAS GRACIAS A TODOS.
V22
ANEXO # 3
PERSONAS VOLUNTARIAS QUE HAN PARTICIPADO
EN EL DESARROLLO DE ESTA NUEVA
TECNOLOGIA V22, NUESTRO PROFUNDO
AGRADECIMIENTO A TODAS ELLAS.
1994
1) MARTHA BEATRIZ MATY ORTEGA
2) ALMA ROSA BOJORQUEZ V.
3) COYITO BLANCO
4) GRACIELA LIMÓN O.
5) DRA. SAGUCHI
6) ALBERTO RAMIREZ
7) LUIS F. PLATA
8) MARTIN R. ZAMUDIO
9) MANUEL LOPEZ E.
10) EMA DELIA VEGA
11) LUPITA DEL VALLE
12) DANIEL ARIAS
13) RITA A. YAÑEZ
14) EDUARDO BERNAL
15) DRA. NAVARRO
1995
16) RUTH CHAPARRO PEÑA
17) AIDA CHAPARRO PEÑA
18) JOSEFINA MARQUEZ
1997
19) ANGELITA GARCIA BALDENEGRO
20) YOLANDA DE CARLON
21) MARIA ISABEL CAZARES DE ACOSTA
22) IRENE DE LEON
23) FAUSTO RICARDO LEON C.
24) CLARA ZAMBRANO GIL
25) ERICKA RODRIGUEZ LEON
26) RAMON IÑIGUEZ P.
V22
27) ROSALINDA GIL TORRES

28) MIRNA GIL TORRES
29) ELISA GIL TORRES

30) RAMONA TORRES D.
31) BRICIA OSUNA
32) LUIS FRANCISCO ROMERO URBALEJO
33) LUIS FRANCISCO ROMERO MUNGUIA
34) ALINE MIRAZO
35) MONICA MIRAZO
36) MOISES MIRAZO
37) MAVY ETHEL SANCHEZ
38) CAROLINA BURGOS CALLEJA
39) PANCHITA CALLEJA DE BURGOS
40) CLAUDIA IÑIGUEZ P.
41) JEAN MCLAURIN
42) YOLANDA GARCIA
43) PINA CAMPA
44) ANA GLORIA CAZARES LEON
45) MATIAS LIMON CAZARES
46) MAGDA IÑIGUEZ P.
47) AGUSTIN MANING
48) JUAN ALVARADO
49) PAULINA MIRANDA CAZARES
50) CELIA MORENO D.
51) SORAYA PLATT LLITERAS
52) GUILLERMO DIAZ BORCHARDT
53) DALILA GARCIA V.
54) GUILLERMO DIAZ MELO
55) ANGELINA BORCHARDT DE DIAZ
56) EVA ALICIA ACOSTA R.
57) MA. MERCEDES ESCARCEGA VILLEGAS
58) BRICIA OSUNA GIL
59) MARIO SANTANA
60) ANA CRISTINA RODRIGUEZ LEON
61) LINELBA GIL TORRES
62) MA. SOLEDAD MARTINEZ
63) BERTHA ALICIA STEMPLESCA V.
64) SANDRA MARTINEZ
65) MARTHA CECILIA SIQUEIROS T.
66) MIRNA ANABEL MORENO G.
67) JUAN MORENTES
68) MA. EMA SANTILLANEZ
69) ADOLFO ENRIQUE LANDAVAZO
70) CARMEN GUADALUPE GODINEZ V.
71) ADOLFO RIVERA
1998
72) GEMA VERONICA PARADA L.
V22
73) EDUARDO FLORES

74) DOLORES VELAZCO

75) TANIA GIL GARZA
76) CARMEN LETICIA SORIA
77) MA. ELENA GIL ALCANTAR
78) VELIA VEGA GIL
79) LARISSA VEGA GIL
80) FERNANDA GARZA ORTEGA
81) MA. HORTENCIA GARZA ORTEGA
82) ALBERTO OROZCO GARZA
83) LUZ OTILIA GRIJALVA T.
84) MAGDA BALLESTROS RAMIREZ
85) MELISSA JASSO ESPINOZA
86) CARMEN ALICIA ESPINOZA ORTEGA
87) MARINA ZAZUETA NORIEGA
88) CONSUELO ROSAS ELIZALDE
89) ARNULFO OCHOA
90) LETICIA INDART
91) LUIS TERAN
92) RAQUEL TIRADO ALVAREZ
93) MARINA NORIEGA DE ZAZUETA
94) EDUARDO SILVA PEÑUÑURI
95) ELDA CAZARES SALCIDO
96) ELDITA MURRAY CAZARES
97) JUAN PABLO MURRAY CAZARES
98) ROMAN FELIX NAVARRO
99) EDITH RUBIO
100) MARIA CORDOVA QUIROZ
101) ZOILA BERNAL
102) MARTHA PIÑA ANDRADE
103) ELVIA MARINA MUNGUIA
104) CAROLA ALCARAZ
105) RICARDO RODRIGUEZ
106) IVONNE CANDIANI
107) JOEL GOMEZ
108) ANA CATALINA
109) JULIO DIEGO DAVILA
110) ROCIO GUADALUPE MARTINEZ PALOMARES
111) GIBRAN JALL VALENZUELA
112) MIRIAM GUADALUPE BARNETT MEZA
113) FERNANDA FRAIJO
114) OLGA LILIA FELIX SOTO
115) ANGELICA LOPEZ DE CARRANZA
116) ANA IRMA RASCON
117) ALMA BELIA RASCON DURAN
118) ROSA ELENA DURAN ENCINAS
119) ALMA DELIA DURAN DE RASCON
V22
120) MARGARITA LOPEZ CRUZ

121) MONICA MARTINEZ

122) TERE DURAN TELLEZ
123) ADRIANA CASTELO DE PARADA
124) CAROLINA MORALES DE GARCIA
125) JESSICA CRUZ QUINTERO
126) MARIA JESUS ROMERO
127) LAURA ELENA DURAZO DE LEON
128) MARIA EVA DURAZO ARMENTA
129) LORENIA RIOS GONZALEZ
130) DORA GUADALUPE RIOS
131) IMELDA VAZQUEZ MEZA
132) CARMEN MEZA HERRERA
133) OTILIA ALMAZAN
134) JESUS ARMANDO CONTRERAS
135) JESUS RUIZ ROMERO
136) SOLEDAD R. DE CARRANZA
137) ANGELICA LOPEZ DE CARRANZA
138) JAVIER R. IRACHETA
139) ANA MARIA VAZQUEZ MEZA
140) EDGARDO LOPEZ VAZQUEZ
141) ANGELICA MOLINA DE AYALA
142) RAFAEL BURRUEL MONTIJO
143) RUTH BURRUEL
144) MARIBEL ROMERO PABLOS
145) JESUS ANTONIO RAMIREZ VALDEZ
146) JESUS RAMIREZ OZUNA
147) ROSA ARMIDA RAMIREZ VALDEZ
148) CLARA RAMIREZ VALDEZ
149) BRENDA PATRICIA VAZQUEZ
150) MARTIN VAZQUEZ RAMIREZ
151) MA. ERNESTINA RAMIREZ VALDEZ
152) JOSE ANTONIO GARCIA GUERRERO
153) MARIA DORA FIGUEROA
154) DORA MARIA BURRUEL FIGUEROA
155) ANA CAROLINA BURRUEL FIGUEROA
156) PEDRO RAMIREZ VALDEZ
157) DULCE MARIA RAMIREZ LORETO
158) LILIAN OFELIA RAMIREZ LORETO
159) FERNANDO RAMIREZ LORETO
160) ABELINO HERNANDEZ
161) KARLA LOZANO
162) CECILIA NENINGER
163) MARTHA NAVARRO
164) LOURDES CAMPILLO
165) MARIA ESTER MORENO SARABIA
166) LUZ ARACELI MOLINA GALINDO
V22
167) BEATRIZ GOMEZ FRANCO

168) ALFONSO TIRADO OCHOA

169) FRANCISCO RAMIREZ VALDEZ
170) JOSE LAURO RAMIREZ VALDEZ
171) JUAN BOSCO RAMIREZ
172) MARTHA CRISTINA RAMIREZ VALDEZ
173) IVAN RAMIREZ VILLA
174) SERGIO RAMIREZ VILLA
175) MARICELA VAZQUEZ RAMIREZ
176) ISRAEL RAMIREZ DUARTE
177) ABRAHAM RAMIREZ DUARTE
178) SARAHI RAMIREZ DUARTE
179) LUZ IMELDA RAMIREZ DUARTE
180) ERICKA ALEJANDRA RAMIREZ ALATORRE
181) KAREN GUADALUPE RAMIREZ ALATORRE
182) EDNA ROSARIO RAMIREZ ALATORRE
183) TANIA BERENICE RAMIREZ ALATORRE
184) THELMA EUNICE RAMIREZ ALATORRE
185) MARTIN R. RIVERA MARTINEZ
186) JUAN BOSCO RAMIREZ LOPEZ
187) GERALDINE RIVERA RAMIREZ
188) MARIA DE LOS ANGELES RAMIREZ LOPEZ
189) VERONICA ARNOLD
190) KENA RAMIREZ DE MARTINEZ
191) MOISES MIRAZO GARCIA
192) DIANA BUSTAMANTE
193) GLORIA MOSQUEIRA
194) CLAUDIA ZEPEDA
195) LUZ MERCEDES DUARTE DE RAMIREZ
196) OFELIA LORETO DE RAMIREZ
197) MARIA DE LOS ANGELES LOPEZ DE RAMIREZ
198) JULIO CESAR RAMIREZ LORETO
199) CINTHYA DEL VILLAR
200) GREGORIO RAMIREZ
201) LUCIA GUADALUPE ARTEAGA
202) J. GREGORIO RAMIREZ
203) JONATHAN RAMIREZ A.
204) JONATHAN MARIO RAMIREZ
205) ADAN GUTIERREZ
206) GUADALUPE CORDOVA MORALES
207) REBECA LEYVA GARCIA
208) FLORENTINO SERRANO
209) JUAN ALDECOA ACOSTA
210) JOAQUIN LOZANO CORONA
211) MARISSA SOTO ZAVALA
212) NOHEMI AGUIRRE
213) SONIA CORDOVA CORRAL
V22
214) LUZ ELBA PEREZ

215) AMELIA ARAQUE

216) FRANCIS RODRIGUEZ ENRIQUEZ
217) OCTAVIANO ROJAS GUTIERREZ
218) DORA CELIA MORENO
219) LUZ ELENA RAMIREZ CORDOVA
220) RAMON OZUNA
1999
221) SILVIA AGUILAR
222) JUAN CASANOVA
223) SANDRA URBALEJO
224) ROSARIO VALDEZ ORTEGA
225) ANA CECILIA BUJANDA
226) ANA CECILIA DE BUSTILLO
227) DOLORES VELAZCO OLMOS
228) LUZ DEL CARMEN RODRIGUEZ
229) IRENE HERNANDEZ
230) LIDIA DE MANCILLAS
231) MARIA DE LOS ANGELES CAMPOY
232) ALMA GUTIERREZ DE DURAZO
233) FRANCISCO SILVA
234) ADRIANA VALDEZ
235) EDITH MORALES
236) CLAUDIA MIRANDA
237) ELSA RINCON DE ZEPEDA
238) LILIAN BUJANDA
239) HUGO FIMBRES G.
240) MARIA TERESA VAZQUEZ DE OCHOA
241) PATRICIA ARAIZA
242) ELSA SANCHEZ
243) CARLA NAVARRO
244) XOCHITL RODRIGUEZ
245) KITTY GUTIERREZ
246) GILBERTO CAÑEZ
247) MARIA REFUGIO GRACIA DE CAÑEZ
248) MARCOS ALAN MIRANDA CAZAREZ
249) MARTHA CECILIA CAZARES
250) ANA ELSA ALVIDREZ
251) MARIA DOLORES MARTINEZ DE TAPIA
252) ROSA ELENA FIEL PRADO
253) MARIA ELSA GUTIERREZ FONTES
254) BRENDA FRAGOSO
255) ISABEL CHAVEZ
256) KAREN DENISSE SIQUEIROS AVILA
257) MARIA ANTONIETA MATUS
258) EMA DELIA VEGA
V22
259) CAROLINA ANDRADE LEON

260) RAFAEL C.
261) PERLA RODRIGUEZ QUIÑONEZ
262) ROSA MARIA GARCIA
263) DIANA PLATT
264) MONICA MORALES PARADA
265) SOFIA CARRANZA DE LLAMAS
266) VLADIMIR LEON DURAZO
267) MARIA DEL CARMEN RODRIGUEZ ZAZUETA
268) EDGAR ARAIZA CASTRO
269) SOFIA VAZQUEZ
270) ROSALIA PLATT ORTEGA
271) LISSETTE DE GUTIERREZ
272) MA TERESA VAZQUEZ
273) SANDRA SALAZAR
274) JANETTE PUJOL
275) GUILLERMINA DE ALLEGRE
276) FRANCISCA MONGE
277) FEDERICO AGUSTIN VARELA M.
278) ANA CRISTINA RODRIGUEZ LEON
279) RAQUEL TORRES PERALTA
280) RITA ELIA CORONADO
281) ANITZA PERALTA DE ARAIZA
282) SANDRA MARTINEZ MOLINA
283) ALMA DE CRUZ
284) EVANGELINA CUEVAS
285) IRMA LAURA M. DE CARDENAS
286) ABEL CARDENAS
287) GRACIELA PEREZ RAMIREZ
288) PATRICIA ROMERO ORTIZ
289) ADRIANA SANTELIZ
290) VERONICA NORIEGA DE HERNANDEZ
291) ROSY BERNAL
292) BEATRIZ FRAGOSO
293) PATRICIA RUBIO DE QUIHUI
294) SANDRA GOEHRINGEK DE AYALA
2000
295) ALMA IRENE SALAZAR
296) ELIA VERONICA SILVA
297) LORD EMI CAMACHO MURILLO
298) MARTIN FRANCISCO CORDOVA MENDOZA
299) ANA VENCY AVENA SOTO
300) ERICKA JIMENEZ CRUZ
301) ANITA AHUMADA TANORI
302) JORGE CORDON
303) EFRAIN VEGA
V22
304) ANTONIO TEON GUTIERREZ

305) MARIA DEL CARMEN GOMEZ C.

306) JULIETA GALVEZ LOPEZ
307) RAMON ANTONIO PARRA ALVAREZ
308) KARLA JULIETA MUÑOZ MADRID
309) YOLANDA GARCIA MORALES
310) SONIA PATRICIA MENDOZA R.
311) PATRICIA PEÑA ALARCON
312) PAOLA OTHON ONTIVEROS
313) RAMONA PEREZ ALVAREZ
314) FRANCIS MARQUEZ
315) RUTH ELIZABETH FAVELA
316) JUAN ANTONIO MALDONADO
317) MARTHA BEATRIZ ANTUNEZ DOMINGUEZ
318) INEZ CORTEZ LARA
319) LAURA MIRANDA LEYVA
320) ERITZEL LEON NUÑEZ
321) ATZIN LEON NUÑEZ
322) ANA ELSA NUÑEZ DE LEON
323) ALMA CANDELARIA HERNANDEZ
324) ANA MELISSA VALENZUELA FLORES
325) MARIA DE LOURDES FEDERICO
326) MARTHA TELLEZ MONTAÑO
327) ALTAGRACIA BURGOIN
328) ADRIANA ORTIZ GONZALEZ
329) SINDY VILLAREAL GARCIA
330) MARIA DOLORES MORENO VAZQUEZ
331) MARIO CARVAJAL VILLA
332) ROSA GUADALUPE QUINTANA DE MORALES
333) MARIA DE LOS ANGELES SALLARD SOLIS
334) YOLANDA SALLARD SOLIS
335) JOSE FELIX DIAZ DE LEON
336) AMADA DEL CARMEN GUTIERREZ CASTRO
337) KARLA ANTUNEZ DOMINGUEZ
338) FRANCISCO JAVIER ANTUNEZ DOMINGUEZ
339) MARIO YADIR RENDON SALLARD
340) TANIA RENDON SALLARD
341) MANUELITA GOMEZ CAMOU
342) AURORA HERRERA LUJAN
343) FRANCISCO JAVIER RUIZ OCHOA
344) GUADALUPE HERNANDEZ GONZALEZ
345) ROSARIO GARCIA AGUILAR
346) JORGE GALINDO PLACENCIA
347) MARIA DE LA LUZ LOPEZ C.
348) GLORIA OCHOA SANCHEZ
349) MARIA DOLORES ESCOBEDO O.
350) MANUELA GUADALUPE FLORES D.
351) SILVIA DUARTE DE SODI
V22
352) CARMEN GLORIA DUARTE GAMBOA

353) IRENE DE LEON
354) BERTHA ELVIA LOPEZ

355) GABRIELA SALLARD SOLIS
356) BLANCA LIDIA SALLARD SOLIS
357) MERCEDES DE PANTOJA
358) MARIA DEL CARMEN MELLADO DE NUÑEZ
359) MARIA TRINIDAD PICOS BELTRAN
360) ARACELI LOPEZ DIAZ
361) MARIA LUISA NAVARRO
362) FILIBERTO VERDUGO LUCERO
363) RAMONA ALCANTAR MEDINA
364) ESTER LUCINA PACHECO RODRIGUEZ
365) ALMA ESTELA RAMIREZ ARMENDARIZ
366) JESUS `PLACENCIA
367) ANA KARINA FELIX PICOS
368) LAURA ELNA ZUBIA M.
369) CLARISA VALENZUELA DE VAZQUEZ
370) EDUVIGES LUZANIA LOPEZ
371) MARGARITA QUIHUIS LOPEZ
372) ALEJANDRO HERRERA MONGE
373) BEATRIZ PONCE DE LEON DE GOMEZ
374) YOLANDA SARABIA DE ZUBIA
375) ALMA ROSA SOSA LOPEZ
376) MANUELITA SOSA LOPEZ
377) PATRICIA DURAZO MOSQUEDA
378) MARCO ANTONIO MENDIVIL VEGA
379) MARGARITA ANDRADE LEON
380) KARINA JACOBO
381) PALOMA ACOSTA DE SUAREZ
382) HECTOR FIGUEROA
383) CONSUELO GARCIA YAÑEZ
384) PENINA JIMENEZ GARCIA
385) JESUS FEDERICO MARTINEZ
386) GUADALUPE MIRANDA VALENZUELA
387) MARIA LOURDES GOMEZ TERAN
388) FRANCISCO BENITO RUIZ MARQUEZ
389) MARIA ELENA JAIME VALENZUELA
390) GUADALUPE JAIME VALENZUELA
391) NORMA GLORIA CABALLERO DE OCEGUERA
392) MARCELA OCEGUERA CABALLERO
393) ZARINA MORENO VALENZUELA
394) MARIA TERESA POMPOSO BANDA
395) MARIA CANDELARIA LOPEZ DE MORENO
2001
396) RAMIRO CRUZ VERGARA
397) ALMA DELIA LOPEZ NAVARRO
398) JANETTE ZUBIA DE ANAYA
399) GUADALUPE ALCARAZ FELIX
400) YESENIA GALAZ
V22
401) NADIA ARREDONDO

402) GRACIELA MIRANDA DE MARTINEZ

403) HECTOR E. LOZANO CARVAJAL
404) MARIA JESUS CARVAJAL DE LOZANO
405) MARCELA GARCIA
406) ABAD NAVARRO
407) MIRIAM RAMONET BUSTILLO
408) ANGEL BUSTAMANTE
409) IGNACIO MALDONADO
410) KARLA MARGARITA SORIA URQUIDEZ
411) RAFAEL LEON MONGE
412) CLAUDINA GONZALEZ
413) ELIA SILVA
414) ANA MARIA BERNAL CAÑEZ
415) MARIA TERESA CHON GOMEZ
416) MARINA DE LEON
417) ANA ALICIA DE BERNAL
418) ANA MARIA GARCIA BUSTILLOS
419) LUIS MIGUEL DUARTE BUSTILLOS
420) MARIA ESTELA BUSTILLOS DE DUARTE
421) RAUL PLASENCIA CAMACHO
422) SANTOS ALCARAZ NOGALES
423) MARIA FLORES DUARTE
424) BENIGNO ALCARAZ FLORES
425) MARIA AMPARO ALCARAZ FLORES
426) AMANDA ALCARAZ FLORES
427) FACUNDO ALCARAZ FLORES
428) CALITA ALCARAZ FLORES
429) CLAUDIA GONZALEZ
430) MARIA ESTELA SALLARD LOPEZ
431) BERTHA SALLARD LOPEZ
432) BERTHA P. ALDANA BARRON
433) EMA LOURDES CAMPILLO ROMO
434) ANA LILIA VARELA
435) EVANGELINA SALLARD LOPEZ
436) ABIGAIL SALLARD
437) IMELDA GONZALEZ DE CORONA
438) OMAR CORONA
439) EDGAR GIL GARZA
440) SANDRO DE LA FUENTE
441) YADIRA FELIX
442) VICTOR FELIX LEYVA
443) MARIA DOLORES CABALLERO
444) ALMA LORENA ECHAVE
445) TADEO RAMIREZ LANDAVAZO
446) JOSE GERARDO RAMIREZ LANDAVAZO
447) JORGE MORENO SCOTT
V22
448) JOSE MARTIN SERRANO SANTIAGO

449) ILDEBRANDO BARRIOS GARCIA

450) BLANCA ESTELA LEYVA VELAZQUEZ
451) SERGIO ALBERTO PAZ SMITH
452) LUPITA BURGOIN HERNANDEZ
453) ALICIA ORTIZ SEGUNDO
454) CECILIA CASTELO DE CARDENAS
455) FERNANDA OSIO DE ESCALANTE
456) RAUL PLASCENCIA CAMACHO
457) VENUS RICO DE CASTELLANOS
458) MIGUEL ANGEL CASTELLANOS
459) RUTH GUERRERO VALENZUELA
460) OMAR ROBERTO MARTINEZ VALENZUELA
461) FABIOLA GODOY RIOS
462) ISABEL CRISTINA SALAZAR LOPEZ
463) MARIA ELENA RODRIGUEZ MIRANDA
464) SILVIA SOTO MARIN
465) MARIA MAGDALENA SALAZAR
466) ALMA LIDIA HUGUEZ CANIZALES
467) LISETTE SALCIDO DE GUTIERREZ
468) JOSEFINA GONZALEZ GALLEGO
469) IRMA EMILIA ARAMBULA CHON
470) JUAN FRANCISCO ESPINOZA GRACIA
471) SANDRA LUCIA VELASCO JIMENEZ
472) RUTH GUERRERO
473) KARLA FERNANDA VILLAESCUSA
474) LORENA GUADALUPE NORIEGA

475) LIRIO ELIZABETH NAVARRETE
476) ALAN MONTOYA
477) BERTA ELVIA LOPEZ MORENO
478) LAURA LOPEZ
479) JAVIER ANDRADE
480) MARIA DEL CARMEN ROMERO LLAMAS
481) SANDRA DE LA FUENTE BECERRIL
482) EDGAR GIL GARZA
483) CLUDIA CERVANTES DE PEINADO
484) BERENICE JOHNSTON DEL TORO
485) CRISTINA MARTINEZ MARTINEZ
486) JOSEFINA GONZALEZ
487) LUPITA MARIN RODRIGUEZ
488) MARIBEL ESQUER QUIÑONEZ
489) SELENE ESTRADA DE CORONA
490) CLAUDIA VALDEZ CONTRERAS
491) GUADALUPE ALVAREZ VAZQUEZ
492) JUANA MARIA RODRIGUEZ ARMENDARIZ
493) MAGDALENA PEREZ MORENO
V22
494) ROSALVA SUAREZ M.

495) JORGE FRANCISCO RUIBAL COCKER

496) MILDRED GUADALUPE NUBES ROMO
497) DHARMA RUIBAL NUBES
498) LUAN LUIS VARGAS MAGOS
499) CESAR JAVIER PRECIADO
500) RAMIRO CAMPA CAMPA
501) OMAR DAVID SOTO MARIN
502) ROBERTO ESTRELLA GIL
2002
503) MAGALY DELGADO DE GUILLOTH
504) MAYRA SALAZAR
505) ANA ESQUER
506) MARIA TERESA RAMIREZ
507) OSCAR GUSTAVO VALDEZ
508) MARIA EULALIA CORRAL LEON
509) RAFAELA CORRAL LEON
510) VICTOR VIRPULLAT
511) ARTHUR LIPER III
512) GIN WU
513) MARIA DE LOURDES GARCIA DE MARTINEZ
544) JOSE FERNANDO TAPIA C.
545) ARMANDO RODRIGUEZ MOLINA
546) KARLA SOFIA HERAS
547) ANA LUGO RIVERA
548) SOCORRO FRIAS
549) TANIA FRAGOSO
550) LOREMI CAMACHO MURILLO
551) DIANA SOSA
552) FERNANDO RIOS
553) SANDRA VILLALOBOS DE HERRERA
554) SILVIA VILLALOBOS PEÑA
555) MARTHA ALMADA DE ASTIAZARAN
556) PAOLA VALENCIA
557) LUPITA SUASTEGUI
558) FATIMA FLORES
559) LUISA LOURDES RODELO GOMEZ
560) ELVIA SALAZAR
561) DORA LUZ OBREGON PINTO
562) YOLANDA GARCIA BALDENEGRO
563) GABRIELA MIRAZO GARCIA
564) CASANDRA AELLO GARCIA
565) MONICA ALEJANDRA MIRAZO GARCIA
566) AMANDA VALENZUELA DE SALAZAR
V22
567) CARMEN ROMO CONTRERAS

568) CLAUDIA CORDOVA VALDEZ

569) MARTHA LOPEZ MILLAN
570) PATRICIA POSADA CASTILLO
571) MIRIAM FELIX DE SOTELO
572) ANDRES SOTELO
573) MARTHA LILIA MUNGUIA
574) MARTHA RIVAS SALAZAR
575) MARIA DOLORES TAPIA MARTINEZ
576) ROSINA MORENO
577) KARLA PAZ Y PUENTE
578) MARIA JESUS ESPINOZA
579) CLAUDIA MARIA MENDOZA MONTAÑO
580) ADRIANA SANCHEZ SOTO
581) JOSEFINA DEWAR VALENZUELA
582) SANDRA CONSILION VILLA
583) ADRIANA CARREÑO QUIJADA
584) MARTHA VERONICA MARTINEZ
585) MONICA ISABEL GAMEZ LEON
586) NORMA CAMPOY ROSS
587) MAYRA LETICIA ARELLANO FELIX
588) DORA CELIA ROSS ARGUELLES
589) MARTHA ELENA CONSILION
590) KARINA LEDGAR
591) PATRICIA FELIX
592) ANA LOURDES MOLINA
593) ELIA SILVA B.
594) KARLA LIDIA PRECIADO
595) AURORA HERRERA
596) RODRIGO MEXIA LEAL
597) OMAR SILVA CARLON
598) EDGAR IVAN ENCINAS VELARDE
599) MANUELITA GAMEZ
600) MARIA LUISA DELGADO MORENO
601) SILVIA CAROLINA MOLINA DELGADO
602) GABRIELA PERALTA MORALES
603) JOSE ALFREDO MURILLO
604) DANIEL LOPEZ PERALTA
605) LUPITA NUÑEZ NAVARRO
606) MIGUEL SALAZAR
607) ADELA BALLESTEROS
608) ANNI LIPPER
609) BRADLEY MONK
610) RAY CESTERO
611) LIDIA RODRIGUEZ GONZALEZ
612) GUADALUPE GOMEZ RODRIGUEZ
613) MARIA GUADALUPE GARCIA TANORI
V22
614) LUZ DEL CARMEN JUAREZ RAZO

615) FRANCISCO ALBERTO OTHON CONTRERAS

616) RAQUEL ROBLES PACHECO
617) JESUS MANUEL COSIO RIVAS
618) MARINA BERENICE OCHOA CASTRO
619) CONSUELO GALLARDO
620) ROSA MARIA VALENZUELA
621) LORENA VALENZUELA
622) ROCIO ACEVEDO
623) ARLENE HIGUERA
624) GUADALUPE ARACELI NAVARRO
625) ARMANDO RODRIGUEZ MOLINA
626) MARCO ANTONIO RODRIGUEZ MOLINA
627) ANA CRISTINA MOLINA
628) DINORA MALDONADO RICARDEZ
629) VERONICA HERNANDEZ
630) VICTOR HUGO MARTINEZ
631) GABRIELA GARCIA
632) BERTHA ALCARAZ
633) ELIZABETH LEAL OJEDA
634) PATRICIA FRANCO AZUNA
635) MARIA JESUS VAZQUEZ
636) SOCORRO DE RIOS
637) ANA ALICIA GARCIA CAMPA
638) MIGUEL PESQUEIRA LOPEZ
639) DALIA ACOSTA
640) SOCORRO VAZQUEZ
641) NORMA ALICIA CONTRERAS
642) BELEM CAÑIZALEZ
643) EVA AMAYA GARCIA
644) DIANA CONTRERAS AMAYA
645) AIDA GIL CORDOVA
646) AIDA VAZQUEZ GIL
647) FLORA DE DIAZ
648) MIGDALIA MATUS
649) CINTHYA MARIA FELIX GARCIA
650) PABLO JOSE NAVARRO ARAGON
651) CLAUDIA GARCIA
652) SIMONA GARCIA
653) ROMAN GASCA
654) BERNARDETTE BONNASOUX ALCARAZ
655) MARCO ANTONIO TRUJILLO SILVA
656) GLORIA MARIA QUIROZ QUIJADA
657) RAQUEL DEWAR
658) MARCO ANTONIO CASTILLO
659) DAVID RODRIGUEZ
660) ESPERANZA BENITEZ
V22
661) HECTOR VILLASEÑOR

662) MONICA RAMIREZ

663) MARCO ANTONIO RIVERA
664) SOLEDAD DURAZO
665) ANGELICA NAVA ANDRADE
666) JOSE ALBERTO GONZALEZ
667) ALIDA MARIANA BECERRA
668) EDNA MARIA JIMENEZ DE DIAZ
669) CONCEPCION VALDENEGRO LOPEZ
670) NORMA NEGRETE MUÑOZ
2003
671) CARLOS GUTIERREZ FELIX
672) LUIS MENDOZA ARREOLA
673) MARICELA MUNGUIA FLORES
674) MARIA DE LOURDES HERRERA SANCHEZ
675) NANCY LEON BLANCO
676) LAURA ANGELICA GONZALEZ
677) ANY TORRES
678) LUZ DEL CARMEN PACHECO GALINDO
679) IRMA MOLINA MUNGUIA
680) CLAUDIA RAMOS
681) MARIANA MENDOZA LUNA
682) WENDY ELLIS MENDOZA
683) LETICIA SABIÑON
684) AIDA QUIROZ CHAPARRO
685) EMILIANO MARTINEZ VILLALOBOS
686) MARIAN ELLIS MENDOZA
687) PATRICIA RAMOS C.
688) BRIGIDA ANTUNEZ ORTEGA
689) MARIANA MEDINA ANTUNEZ
690) MARIA DE LOS ANGELES CANEVETT
691) ALEJANDRA RAMOS
692) MARIA ROSARIO CUEVAS
693) MARIA MEDRANO GUTIERREZ
694) MARIA DEL ROSARIO TRUJILLO GARCIA
695) ANA MARIA CRUZ DE ESTRELLA
696) LAURA PATRICIA SANCHEZ NAVARRO
697) PAULA GONZALEZ PALACIOS
698) FERNANDO LEAL
699) BLANCA SUSANA ROBLES DE GARCIA
700) MARTHA ALICIA GASTELUM VALENCIA
701) VICTORIANO SALCIDO VALENZUELA
702) MARIA DEL CARMEN MARTINEZ PAZ
703) MARICELA SANCHEZ VALENCIA
V22
704) ROBERTO TORRES

705) ROBERTO ELLIS MUÑOZ

706) LISETTE RODRIGUEZ
707) LIDIA CAMOU
708) GABRIELA PAULA DUARTE GONZALEZ
709) IRIS PAULINA DUARTE GONZALEZ
710) ANABELLA AVILA QUIROZ
711) ARCELIA QUIROZ
712) LETICIA MARTINEZ P.
713) MELISA RUIZ DE PADILLA
714) MARIA ZEPEDA ROMO
715) PATRICIA SANCHEZ
716) ALMA ALICIA CORONADO E.
717) PATRICIA SORTILLON
718) ALEJANDRO MORALES VILLALOBOS
719) CARMEN JULIA DE HERRERA
720) ENEDINA BAUTISTA GONZALEZ
721) ALMA ROSA CAZARES
722) ELSA VALENCIA
723) MARGARITA ANDRADE CAÑEZ
724) JUAN CORRALES
725) DIANA MIRANDA
726) ENRIQUE RODRIGUEZ
727) CAROLINA QUIROZ
728) MIGUEL RODRIGUEZ
729) BETTINA PESQUEIRA DE ESCALANTE
730) GLORIA MAGDALENA MENDOZA RUIZ
731) ROBERTO CALVO RUIZ
732) MARGARITA CASTRO VALENCIA
733) BLANCA SOSA AGUILAR
733) VIRGINIA PALACIOS HUIZAR
734) CLAUDIA OBREGON
735) BRENDA DINORA DURAZO QUIJADA
736) MARIA TERESA FLORES DE OROZCO
737) ALBERTO OROZCO GARZA
738) ERICKA JIMENEZ CRUZ
739) OSWALDO SILVA PALOMARES
740) BLANCA ROSA GASTELUM MENDEZ
741) SAGRARIO GALLARDO DE GAMEZ
742) HIPOLITA PINEDA FELIX
743) MARIA AMPARO TAPIA DE IBARRA.
2000 (CONTINUACION)
744) IRMA VILLEGAS DE CANSECO
745) JAVIER EDUARDO CANSECO GIRON
746) KARLA MURGUIA DE FONTES
V22
747) ANA JULIA CAMPILLO

748) MARIA GUILLERMINA CASTILLO VILLEGAS

749) LOURDES URUCHURTU
750) CARMELITA QUEVEDO
751) JIM HUISH
752) ANGELICA OROZCO DE PERALES
753) ANA JULIA LOPEZ CAMPILLO
754) BERENICE LIZARDI DE DUARTE
755) ALMA LORENA BUSTAMANTE
756) ANA LORENA CASTILLON BARRAZA
757) LIDIA DE MANCILLAS
758) MARCELA DIAZ FIGUEROA
759) MARIA LUISA SEPULVEDA MENDEZ
760) CLARISA VALENZUELA DE VAZQUEZ
761) IRENE GARCIA DE LEON
V22
BIBLIOGRAFIA
1) AVERY O. T., MC LEOD C. M.., MCCARTY J. (1944), EXP. MED. ,
79, PGS 137-158.
2) DE KRUIF (2002), “LOS CAZADORES DE MICROBIOS”,

EDITORES MEXICANOS UNIDOS S.A.
3) FRANKLIN R. E.GOSLING R.G. (1953), “MOLECULAR

CONFIGURATION IN SODIUM THYMONUCLEATE” NATURE.
4) HARTL DANIEL (1985), “OUR UNCERTAIN HERITAGE:

GENETICS & HUMAN DIVERSITY”, SECOND ED. , HARPER &
ROW PUBLISHERS, INC.
5) HIJAR ALBERTO, ARGÛELLO A., HIJAR G. CRISTINA, RIUS

CASO LUIS, ESQUIVEL MIGUEL ANGEL, (2000), “ARTE Y
UTOPIA EN AMERICA LATINA”, PRIMERA ED. INSTITUTO
NACIONAL DE BELLAS ARTES.
6) KHUN T.S., (1991), “LA ESTRUCTURA DE LAS REVOLUCIONES

CIENTÌFICAS”, ED. FONDO DE CULTURA ECONOMICA, MEXICO
D.F.
7) LEE THOMAS (1991), “THE HUMAN GENOME PROJECT”, ED.

PLENIUM PUBLISHING CORP.
8) MADDOX B. (2002), “ROSALIND FRANKLIN, THE DARK LADY

OF DNA”. HARPER COLLINS ED.
9) NAGURO T. ET AL. (1990), “ELECTRON MICROSC TOKYO”,

VOL. 39 (6), PGS. 511-513.
10) SAGAN CARL (1997), “EL MUNDO Y SUS DEMONIOS”, ED.

PLANETA, BARCELONA ESPAÑA.
11) SINGER MAXIME AND BERG PAUL (1993), “GENES Y

GENOMAS, UNA PERSPECTIVA CAMBIANTE”, ED. OMEGA,
V22
BARCELONA ESPAÑA.
12) SOKAL A., BRICMONT J. (1999), “IMPOSTURAS

INTELECTUALES”, ED. PAIDOS, BARCELONA, BUENOS AIRES,
MEXICO.
13) STOCKERT J.C. (1989), “ACTA-HISTOCHEM” VOL 87(1),

PGS. 33-42.
V22

Un Nuevo Metodo para Ver El ADN

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V 22

GLORIA ELENA LEON PAZ

EL TRABAJO DE INVESTIGACIÓN QUE A CONTINUACIÓN

EL AÑO DE 1985 INICIAMOS LAS PRUEBAS PRELIMINARES DE UNA

NUESTRO INTERÉS ESTABA ENFOCADO A REALIZAR VARIAS

EL TRABAJO COTIDIANO QUE REALIZÁBAMOS EN EL LABORATORIO

PARA TODOS LOS INVESTIGADORES QUE NOS DEDICAMOS A LA

EL RIESGO PROFESIONAL ES CONSTANTE Y PERMANENTE PARA LA

SALUD DE LOS INVESTIGADORES AL ESTAR EXPUESTOS

COMPARTIR CON USTEDES POR ESTE MEDIO, EL RESULTADO DE

Estado del Arte

A partir de que el holandés Antonio Van Leeuwenhoek dió a

dosificada, sus enigmas.

La capacidad de poder ver organismos microscópicos se abrió

A mediados del siglo XIX , dos investigadores aportarían

Gregor Mendel era un monje austriaco que al interior de su

predicción para la descendencia, conociendo las

características de los progenitores. De hecho con Mendel se

No obstante, ellos nunca supieron que fueron los pioneros en

Un científico contemporáneo a Darwin y Mendel llamado

Un salto cualitativo muy importante y trascendente en la

Otro avance notorio en el campo de la microbiología sucedió

<En 1944, el científico norteamericano Oswald Avery en

compañía de sus colaboradores Colin Macleod y Maclyn

McCarty demostraron que las características hereditarias de

Cuando Avery anunció a la comunidad científica su

Max Delbruck, Salvador Luria y otros investigadores formaron

La investigación de bacteriófagos realizada en 1952 por

Por su parte, la investigadora Rosalynd Franklin entre los

En 1953 James Watson , Francis Crick, Maurice Wilkins y

Rosalynd Franklin descubrieron la estructura molecular del

DNA lo que hoy se conoce como la doble hélice y lo publicaron

El modelo de Watson y Crick propone dos hélices enrolladas

En 1956 el investigador Arthur Kornberg descubrió la enzima

Científicos más jóvenes que James Watson se opusieron en

Los Nuevos Paradigmas

El epistemologo y filósofo norteamericano Thomas Samuel

Kuhn (1922-1996) hizo en su obra preguntas fundamentales

acerca del conocimiento científico, entre ellas las siguientes:

Kuhn consideraba a los paradigmas como realizaciones del

trabajos rutinarios de comprobación de los conocimientos, que

han adquirido para poner a prueba la solidez del paradigma

Para Kuhn, se produce una revolución científica, cuando uno

En términos del paradigma de la

BIOFOOD KITS Cat. No. 91.122 BIOTOOLS

Del fenotipo al genotipo

Maxine Singer y Paul Berg, 1993.

En la investigación que durante 22 años hemos realizado,

Haber encontrado esta nueva tecnología para estudiar el DNA,

probamos algunos por electroforesis en corridas de muestras

de DNA de bacterias, en una ocasión por una omisión, el

El 16 de enero de1991, fecha inolvidable en la que por

Pasada la fuerte emoción de la experiencia indescriptible, de

nos resistíamos a creer lo que veíamos en el portaobjeto del

microscopio, un hilo claro y casi transparente, diferente a todo

Repetimos varias veces las pruebas con el DNA de la cepa

de que efectivamente el DNA si se puede ver con un

Después de emplear varias semanas en repeticiones con

un protocolo que nadie quiso escuchar o conocer, porque el

dogma científico afirma que era algo imposible y

Para no frenar nuestro propósito de continuar con esa línea

En el departamento de biología molecular de esa

Sin embargo el Director del área nos recibió y nos escuchó