MODELO BIOLÓGICO PARA TESTAR OS EFEITOS DE DROGAS NO RITMO

CARDÍACO

Resumo do Protocolo Experimental:

1 a 2
gotas

Papel de
filtro

Solução
Dáfnias (Droga)

2. Observação ao Microscópio 5. Adição da droga

3. Contagem dos batimentos cardíacos (controlo) 6. Contagem dos batimentos
1. Elaboração da preparação 4. Previsão dos efeitos das drogas
microscópica cardíacos (droga)

Lista do Material Necessário - por grupo(3 a 6 alunos):

1 Lâmina escavada
1 Bola de algodão
1 Pipeta de Pasteur 1 ml (solução experimental - droga)
1 Pipeta de Pasteur 3 ml (Dáfnia)
1 Frasco com solução experimental - droga (tabaco ou cafeína ou álcool)
1 Tira de papel de filtro
1 Gobelé (2 -3 Dáfnias)
1 Pinça
1 Microscópio
1 Cronómetro ou relógio
1 Lápis
3 Folhas de papel A5

1 Gobelé com água mineral para recolha das Dáfnias utilizadas na actividade

Atenção: Usar luvas e bata.

1
Protocolo Experimental

1. Elaboração da Preparação Microscópica

a. Com a ajuda de uma pinça colocar alguns fios de algodão

algodão na depressão da lâmina escavada (apenas os

suficientes para aprisionar a Dáfnia). Lâmina escavada
Pipeta de
Pasteur
2 gotas de
Água

Cuidado: Se for colocado algodão em excesso, não será

possível observar a Dáfnia com a nitidez pretendida.

b. Adicionar 2 gotas da água do gobelé com as Dáfnias,

com uma pipeta de Pasteur de 3 ml.

Dáfnias
c. Usando a mesma pipeta de Pasteur recolher uma
Dáfnia e colocá-la em cima dos fios de algodão (evitar
colocar mais do que duas gotas de água com a Dáfnia).

2. Observação ao Microscópio Óptico Composto

(MOC)

Cuidado: A luz do microscópio aquece a água e a Dáfnia,

provocando-lhe stresse.

a. Colocar a preparação na platina e acender a luz (menor

intensidade possível).

b. Mover o parafuso macrométrico e, observando através Daphnia sp. 40x

da(s) ocular(es), focar a preparação.

c. Utilizando apenas o parafuso micrométrico, corrigir a
focagem até obter uma imagem nítida.
Sugestão: Realizar microfotografias e
vídeos das observações ao Microscópio,
com câmaras apropriadas ou máquinas
fotográficas digitais.

d. Observar a Dáfnia, prestando particular atenção à

localização do coração.

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3. Contagem dos batimentos cardíacos - Controlo (Água)

O ritmo cardíaco das Dáfnias varia entre 200 a 300 Batimentos cardíacos Por Minuto (BPM),
dependendo do tamanho e da idade das mesmas.

Técnica de Contagem dos Batimentos Cardíacos

Para determinar o ritmo cardíaco da Dáfnia, um aluno bate com a ponta de um lápis numa folha de
papel, fazendo um ponto por cada batimento cardíaco que observar, enquanto outro elemento
controla o tempo (10 segundos), com um cronómetro ou relógio. No final conta-se o número de
pontos registados.
Nota: É aconselhável treinar esta técnica duas ou três vezes.

Atenção:

- As contagens devem ser realizadas rapidamente. Se as contagens demorarem muito tempo, adicionar mais uma ou duas
gotas de água à preparação.

- Se se verificarem contagens com valores superiores a 300 BPM ou inferiores a 200 BPM, deve repetir-se a contagem.

- Quando não se está a observar a Dáfnia ou a realizar contagens, a luz do microscópio deve estar desligada.

- As contagens devem ser sempre realizadas pelo mesmo elemento do grupo.

a. Efectuar a contagem: um elemento do grupo bate com a ponta do lápis na folha de papel por cada
batimento cardíaco, enquanto outro elemento controla o tempo (10 segundos), com um cronómetro ou
relógio.

b. No final dos 10 segundos, contar o número de pontos na folha de papel e registar o valor no quadro I.

c. Multiplicar a contagem obtida para os 10 segundos por 6 para determinar os BPM.

d. Determinar e registar o ritmo cardíaco da Dáfnia pela 2ª e 3ª vez, 10 segundos cada, e multiplicar os
valores obtidos por 6. Estes são os valores do ritmo cardíaco (BPM) da Dáfnia para o controlo (água).

e. Somar os 3 valores do ritmo cardíaco (BPM) e dividir esse valor por 3 (número de contagens), obtendo
a média do ritmo cardíaco (BPM) para a Dáfnia em condições controlo (água).

f. Inserir a média obtida (A) no quadro III.

3
4. Previsão do Efeito da Solução Experimental (Droga) no ritmo cardíaco da Dáfnia

Numa folha de registo (ex. quadro III) fazer uma previsão do modo como a solução experimental (droga)
irá influenciar os batimentos cardíacos da Dáfnia.

5. Adição da Solução Experimental (Droga)

Atenção: Não provar, cheirar ou colocar as soluções em

a. Retirar a preparação do microscópio.
contacto com a pele.

b. Usando a pipeta de Pasteur de 1 ml colocar uma ou

duas gotas da solução experimental (droga), por
exemplo, do lado direito da Dáfnia, enquanto com uma
tira de papel de filtro, se absorve a água em excesso,
1 a 2
pelo lado esquerdo. gotas

c. Permitir que a solução se difunda por um minuto. Papel

de
filtro
d. Voltar a colocar a preparação no microscópio e
observar a Dáfnia, com baixa intensidade luminosa. Solução
(Droga)

6. Contagem dos Batimentos cardíacos Por Minuto (BPM)- Solução Experimental (Droga)

a. Efectuar a contagem: um elemento do grupo bate com a ponta do lápis na folha uma vez por cada
batimento cardíaco, enquanto outro elemento controla o tempo (10 segundos), com um cronómetro ou
um relógio.

b. No final dos 10 segundos contar o número de pontos no papel e registar o valor no quadro II.

c. Multiplicar a contagem obtida para os 10 segundos por 6 para determinar os BPM.

d. Determinar e registar o ritmo cardíaco da Dáfnia pela 2ª e 3ª vez, durante 10 segundos cada, e
multiplicar os valores obtidos por 6. Estes são os valores do ritmo cardíaco (BPM) da Dáfnia para a
solução experimental (droga).

e. Somar os 3 valores do ritmo cardíaco (BPM) e dividir o valor obtido por 3 (número de contagens),
obtendo a média do ritmo cardíaco da Dáfnia para a solução experimental (droga).

f. Inserir a média obtida (B) no quadro III.

4
g. Remover a Dáfnia da lâmina com a pipeta de Pasteur de 3 ml e colocá-la no gobelé “Dáfnias utilizadas
na actividade”. Estas podem ser usadas para observar a morfologia ao MOC ou como alimento para
peixes que existam na Escola.

h. Classificar a solução experimental - droga (Estimulante ou Depressora).

Atenção: Lavar as mãos, após a actividade.