ATLAS de HISTOLOG IA VEGETAL y ANIMAL

CITOLOG IA 8 - Ciclo celular

Pilar Molist Manuel A. Pombal Manuel Meg as Depto. de Biolog a Funcional y Ciencias de la Salud Facultad de Biolog a Universidad de Vigo
(Versi on: Mayo 2011)

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INTRODUCCION

El ciclo celular se puede considerar como una sucesi on de etapas por las que transcurre la vida de una c elula. Una c elula nace.a partir de la divisi on de una predecesora, pasa por una serie de etapas donde crece, duplica su tama no y, por u ltimo, se divide para dar dos c elulas hijas que comenzar an de nuevo el ciclo. Esto es lo que ocurre a las c elulas que proliferan. Sin embargo, hay otras posibilidades. As , muchas c elulas no se dividir an nunca, como las neuronas, y otras nacer an no de la divisi on sino de la fusi on de dos c elulas, como ocurre cuando se fusionan dos gametos para dar un zigoto y crear un organismo nuevo. Finalmente, algunas c elulas morir an. Hay dos grandes tipos de c elulas en los organismos pluricelulares: las c elulas som aticas y las c elulas germinales. Las c elulas som aticas son las que no producir an gametos, mientras que las c elulas germinales s . Esta distinci on es importante porque las c elulas germinales dan lugar a los gametos por un proceso denominado meiosis, mediante el cual se consiguen cuatro gametos haploides a partir de una c elula dipliode. Las c elulas som aticas que proliferan terminar an su ciclo celular dividi endose y convirti endose en dos c elulas hijas con la misma dotaci on g enica que su antecesora por un proceso denominado mitosis.

Figura 1: Fases del ciclo celular de cualquier c elula eucariota. Las fases G1, S, y G2 se
agrupan en una fase mayor denominada interfase.

En los siguientes apartados se van a tratar las etapas del ciclo de las 3

c elulas som aticas que proliferan. Tambi en veremos ejemplos de c elulas que no completan el ciclo celular y que son muy longevas, y otras que no lo completan porque mueren. La muerte de las c elulas puede ser por da nos no controlados por el organismo, por ejemplo la muerte del propio organismo, o por un suicidio celular inducido siol ogicamente denominado apoptosis. El ciclo celular de los distintos tipos celulares dentro de un tejido o de un organismo debe estar fuertemente controlado y coordinado. Durante el desarrollo embrionario y juvenil de los animales se crece en tama no y muchos tipos celulares contribuyen a ello. Sin embargo, alcanzado el tama no adulto muchas poblaciones celulares detienen o disminuyen sus tasas de proliferaci on, ajust andolas a las necesidades de reparaci on, mantenimiento o supervivencia del organismo. En algunas ocasiones ocurren errores en ciertas c elulas que escapan a dichas regulaciones del ciclo celular y se dividen sin control. Estas son las c elulas cancerosas. El ciclo celular pasa por una serie de etapas denominadas: G1, S, G2 y M (las letra G signica intervalo o gap, la S s ntesis y la M mitosis). Esta secuencia se mantiene en pr acticamente todas las c elulas que proliferan y s olo ocasionalmente alguna de las fases es omitida. Las fases G1, S y G2 se suelen agrupar en la denominada interfase.

Figura 2: Imagen del epitelio del intestino de una rata donde se produce un alta proliferaci on celular.

La fase G1 es la primera por la que pasa una c elula. Es la etapa m as larga y m as variable, y en ella se produce crecimiento celular hasta alcanzar el tama no optimo. Existe un sistema molecular, denominado punto de control, que impide que la c elula comience la siguiente etapa, fase S, si no se han alcanzado todos los requisitos necesarios para avanzar en el 4

ciclo celular. Por ejemplo, un tama no adecuado. No todas las c elulas de un organismo adulto proliferan continuamente, sino que la mayor a detienen el ciclo celular para realizar una funci on. En esta parada del ciclo celular pueden estar un tiempo determinado y luego volver a reemprenderlo, o permanecer en esta fase para siempre. En la fase S o de s ntesis se duplica el ADN. Esta es una acci on compleja debido a la gran longitud de las hebras de ADN que forman un n ucleo eucariota. Adem as, la replicaci on del ADN debe cumplir dos condiciones: una sola replicaci on y cometer los menos fallos posibles. Cualquier error en la copia del ADN puede llevar a da nos letales para las c elulas hijas o incluso para la totalidad del organismo. La fase G2 es otra etapa de crecimiento, m as breve que la G1, en la cual se acumulan los productos necesarios para la siguiente etapa, la fase M, en la que se producir a la divisi on celular .

Figura 3: Diferentes etapas por las que pasa una c elula vegetal de un meristemo de
cebolla durante su ciclo celular. La interfase agrupa a las fases G1, S y G2. La metafase incluye a la profase, metafase, anafase y telofase. La citocinesis supone la creaci on de la pare celular que separar a las dos c elulas hijas.

La fase M o mitosis es quiz as la m as compleja y la que supone una mayor reordenaci on de los componentes celulares. Hay muchos procesos que se disparan y avanzan en paralelo. La mitosis se puede dividir a su vez en varias etapas relacionadas con los diferentes estados por los que va 5

pasando el ADN. Se denominan profase, metafase, anafase y telofase, durante las que el ADN se compacta, forma cromosomas, se organizan y segregan, y nalmente se descondensan para formar los n ucleos de las c elulas hijas. Durante este proceso ocurren otros procesos en paralelo: rotura de la envuelta nuclear, formaci on del huso mit otico, reparto de componentes citoplasm aticos, entre otros. La fase M termina con la citocinesis o separaci on del citoplasma en dos como consecuencia de un estrangulamiento del citoplasma original que lleva a un acercamiento, fusi on y posterior si on de la membrana plasm atica, resultando dos c elulas hijas diploides e iguales a la c elula madre.

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FASE G1

La fase G1 es el periodo del ciclo celular que abarca desde que termina la fase M hasta que comienza la fase S. Durante la fase G1 la c elula comprueba las condiciones externas e internas y decide si continuar con el ciclo celular o no. En un organismo metazoo, el avance del ciclo celular est a condicionado por se nales externas, como adhesi on, factores tr ocos o mit ogenos, entre otros, que emiten otras c elulas del organismo. Las se nales internas son aquellas que informan del estado de salud de la c elula, como una correcta dotaci on de elementos celulares tras la divisi on, una segregaci on correcta de los cromosomas, etc etera. Si todas estas se nales son propicias la c elula crecer a en tama no y se preparar a para entrar en la fase S. Sin embargo, la mayor a de las c elulas de un organismos pluricelular adulto no se dividen constantemente sino que detienen su ciclo celular en la fase G1, temporal o permanentemente. Detener el ciclo celular supone que la c elula se va a diferenciar, a quedar quiescente, a sufrir un periodo de senescencia o a morir por apoptosis. Cuando la c elula queda detenida en fase G1 en forma quiescente se dice que est a en fase G0. Desde los estados de quiescencia y de c elula diferenciada en algunos tipos celulares se puede volver a retomar el ciclo celular. Por tanto tenemos cuatro decisiones posibles que se toman en la fase G1 y todas ellas dependen de complejos moleculares o puntos de control que la c elula debe ir sorteando para llegar a la fase S. Cuando uno de ellos no se pasa se dice que la c elula ha tomado una decisi on, pero si no se detiene en ninguno se dividir a, siendo este el camino por defecto.

Figura 4: Esquema de las posibles salidas de una c elula desde la fase G1. (Modicado
de Blomen y Boonstra, 2007)

Las mol eculas que est an en la base de los puntos de control, y por tanto

de la progresi on del ciclo celular, son las quinasas dependientes de ciclinas o CdKs (Cyclin-dependent kinases ). Estas enzimas, se han encontrado 9 diferentes en las c elulas eucariotas, necesitan estar unidas a unas prote nas denominadas ciclinas y adem as ser activadas por fosforilaci on. Una vez activadas son las responsables de fosforilar numerosos sustratos, entre los que se encuentran los inhibidores del avance del ciclo celular, permitiendo as que el ciclo progrese. Las ciclinas son mol eculas que se sintetizan de forma peri odica durante el ciclo celular y se han encontrado hasta 16 ciclinas diferentes en las c elulas eucariotas, siendo las m as importantes para el avance del ciclo celular las A, B, D y E. Las ciclinas D y E son importantes para el avance de la fase G1. Los complejos CdK/ciclina D y Cdk/ciclina E act uan fosforilando al factor de transcripci on Rb (retinoblastoma), que forma parte del u ltimo punto de control de la fase G1. A este u ltimo punto de control en el que se fosforila a Rb se le denomina punto de restricci on, porque si se pasa se entra irremediablemente en la fase S. Es importante porque se decide si la c elula se dividir a o no. Los elementos centrales de este punto de restricci on son la Cdks-ciclina, la mol ecula Rb y el factor E2F. Rb defosforilado inhibe el avance del ciclo celular porque reprime la expresi on de los genes necesarios para entrar en fase S, pero cuando es fosforilado por las CDKs-ciclina activa al factor E2F, el cual permitir a que se inicie la expresi on de los genes implicados en la replicaci on del DNA, as como en la duplicaci on del centrosoma en las c elulas animales. Todo este entramado molecular integra se nales de las condiciones celulares (alimento, se nales tr ocas, etc etera), del posible da no del ADN durante la segregaci on de cromosomas o en la fase de crecimiento de celular posterior, puede que tambi en del tama no apropiado de la c elula. Si todo es correcto, dicho punto se sobrepasar a y se comenzar a la fase S. Pero, como dijimos, la mayor a de las c elulas de un organismo adulto no est an en permanente proliferaci on. Ello es debido a que existen inhibidores de las Cdk/ciclinas de la fase G1. Hay diversos tipos de inhibidores y uno de ellos es el p53, un factor de transcripci on que est a da nado en numerosos tipos de c anceres. Cuando hay da no del DNA celular, estr es celular, cambios de pH u otras alteraciones celulares, aumenta su concentraci on y provoca la activaci on del gen p21, el cual a su vez impide la fosforilaci on de Rb, y por tanto la c elula no comienza la fase S.
Bibliograf a espec ca Blomen VA, Boonstra J .Cell fate determination during G1 phase progression. 2007.

Cellular and molecular life sciences. 64:3084-3104.

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FASE S

La fase S comienza cuando se ha pasado el punto de restricci on de la fase G1. Se producen dos sucesos importantes: replicaci on del ADN y duplicaci on de los centrosomas en las c elulas animales. Replicaci on del ADN El ADN est a formado por dos cadenas de desoxirribonucle otidos o bases nucleot dicas. Ambas cadenas est an unidas por puentes de hidr ogeno que se establecen entre bases complementarias (adenina-timina, citosina-guanina), formando una doble h elice. Las dos cadenas se disponen de forma antiparalela entre s . Esto quiere decir que el extremo 3 de una cadena est a al lado del 5 de la otra cadena. Es decir, un extremo de la doble cadena posee un extremo 3 de una cadena y un extremo 5 de la otra. Para la duplicaci on del ADN hay que separar las dos cadenas rompiendo los puentes de hidr ogeno y copiarlas simult aneamente. El ADN de una c elula eucariota no se copia empezando por un solo punto, esto llevar a demasiado tiempo, sino en m ultiples sitios a la vez denominados or genes de replicaci on. La c elula dispone de los mecanismos necesarios para evitar que un origen de replicaci on se active m as de una vez. Si no fuese as se producen m as de una copia, lo que podr a ser letal. Se consigue por un mecanismo en dos pasos. En el primero se organiza la maquinaria molecular necesaria para iniciar el proceso de copia y en segundo lugar se recibe una licenciapara comenzar la replicaci on. Para que se inicie la replicaci on se separan, no se rompen, las dos cadenas del ADN por una helicasa. A las cadenas libres se une una enzima denominada primasa (en eucariotas es un complejo formado por una ADN polimerasa m as una subunidad de una primasa) que sintetizar an un peque no fragmento de ARN de unos 10 nucle otidos complementarios a una secuencia de la cadena de ADN, uno distinto en cada cadena. A estas peque nas secuencias de ARN se les denomina cebadores o primers. Entonces se reclutan las polimerasas y , las cuales a nadir an al extremo 3 desoxirribonucle otidos complementarios en la direcci on del extremo 5 de la cadena copiada. Por tanto, formar an una cadena de nueva s ntesis complementaria a cada una de las existentes previamente. Por eso se dice que la replicaci on es semiconservativa , una cadena nueva sobre una vieja. Un paso adicional es la eliminaci on del cebador de ribonucle otidos, llevado a cabo por las ARNasas, y su sustituci on por desoxirribonucle otidos. El hueco se copiar a por las DNA polimerasas que vienen copiando desde un 10

origen de replicaci on situado m as atr as en la cadena. La apertura inicial de la doble cadena de ADN supone la creaci on de una horquilla de replicaci on. A partir de ella se copiar an las cadenas en las dos direcciones. Sin embargo, las ADN polimerasas a naden desoxirribonucle otidos exclusivamente en direcci on 5 )) 3 (5 a 3 de la cadena copiada). Ello supone que la copia en la direcci on 3 a 5 necesita de un proceso ligeramente m as complicado. As , en la zona de apertura de la doble h elice se ir an a nadiendo cebadores espaciados y ser an los espacios entre estos cebadores los que llenar an las ADN polimerasas con nucle otidos complementarios pero siempre en direcci on 3. Esto supone que hay un proceso contin uo de creaci on de cebadores, copia de ADN, eliminaci on de los cebadores m as antiguos, copia del espacio dejado por ellos por las ADN polimerasas y sellado de los segmentos de ADN con las enzimas denominadas ligasas. A estos fragmentos de ADN que se sintetizan peri odicamente y son ligados entre s para formar una cadena continua se les denomina fragmentos de Okazaky. Es importante tener en cuenta que no todo el ADN se est a replicando a la vez. Se estima que en cualquier momento de la fase S se est a copiando entre un 10 y un 15 % del ADN total. Si se detectan roturas del ADN, mediante los sistemas de control, la copia del resto del ADN se detiene. Otros eventos est an ligados a la replicaci on del ADN como la s ntesis de histonas, que debe tambi en duplicar su n umero, y la duplicaci on de los centrosomas en las c elulas animales, necesarios para organizaci on del huso mit otico.

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4.

FASE G2

La fase S del ciclo celular da paso a la fase G2, la cual termina con la entrada en la fase M o mitosis. En la fase G2 se acumulan progresivamente aquellas mol eculas cuyas actividades ser an necesarias durante la fase M. Tradicionalmente se ha considerado como un estado de tr ansito entre las fases S y M. Durante esta etapa, sin embargo, se comprueba si ha habido errores durante la replicaci on del ADN y si se ha producido su duplicaci on completa. Si estos defectos son detectados la c elula no entrar a en fase M y el ciclo celular se detendr a hasta que los da nos sean reparados o el ADN sea completamente copiado. Se puede entender que estos mecanismos son cr ticos para la c elula puesto que los errores no detectados pasar an irremediablemente a las c elulas hijas. Durante la fase G2 la c elulas tambi en aumentar an en tama no y los centrosomas, duplicados durante la fase S, se dirigir an a lugares opuestos de la c elula para formar posteriormente el huso mit otico. El l mite entre las fases G2 y M no est a totalmente claro y algunos autores consideran este cambio en la mitad de la profase mit otica. De cualquier manera, el n de la fase G2 est a mediado por la quinasa dependiente de ciclina (CdK) tipo 1 y por la ciclina B1. La ciclina B1 se sintetiza durante la fase S tard a. Es este complejo, m as otras prote nas quinasas y fosfatasas, el que determina si la c elula entrar a en la fase M, es decir, es un punto de control.

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FASE M. MITOSIS

La fase M o mitosis supone la divisi on de una c elula en dos c elulas hijas. Conlleva una serie de procesos encaminados a repartir los componentes celulares sintetizados durante las fases anteriores del ciclo celular, destacando el ADN duplicado en la fase S, entre las dos c elulas hijas resultantes de una forma generalmente equitativa. La fase M se divide en varias etapas: profase, metafase, anafase, telofase y citocinesis. Algunos autores incluyen a la citocinesis en la telofase. Las tres primeras est an relacionadas con las modicaciones que se producen en el ADN: compactaci on, formaci on y movimiento de los cromosomas y descondensaci on. La citocinesis es el proceso de divisi on del citoplasma en dos partes por estrangulamiento celular, lo que provoca la fusi on y si on de la membrana plasm atica, dando como resultado dos c elulas independientes. Aunque la mayor a de los procesos que vamos a describir se basan en cambios en la cromatina, hay que tener en cuenta que los org anulos y dem as componentes celulares tambi en sufren procesos de desorganizaci on, respecto a sus formas normales en las fase G1, S y G2, y su posterior reparto entre las c elulas hijas. Profase La profase comienza con la condensaci on del DNA, de manera que llegan a ser visibles las crom atidas de forma aislada, y con la desaparici on del nucl eolo. La condensaci on parece estar favorecida por la fosforilaci on de las histonas que componen la cromatina. En el citoplasma tambi en se producen acontecimientos. Hay una desorganizaci on parcial de los lamentos del citoesqueleto, lo que hace que las c elulas adquieran una forma redondeada al entrar en mitosis. Hacia el nal de la fase S la c elula duplica su centrosoma, cuyos descendientes inicialmente permanecen juntos. Cuando se inicia la profase los centrosomas viajan a polos opuestos dentro de la c elula, conducidos por prote nas motoras y microt ubulos. Entonces ambos centrosomas polimerizan y organizan un sistema de microt ubulos con una alta inestabilidad din amica, alternancia entre crecimiento y decrecimiento, que posteriormente formar an el denominado huso mit otico. Los org anulos, como el ret culo endoplasm atico y el aparato de Golgi, se fragmentan y disminuye enormemente el tr aco vesicular. La envuelta nuclear todav a no se ha roto. Algunos autores distinguen una fase denominada prometafase en la que se empieza a desorganizar la envuelta nuclear, la cual se fragmenta en 13

peque nas ves culas, desencadenado por la fosforilaci on de las prote nas que constituyen la l amina nuclear. Entonces los microt ubulos pueden penetrar entre las crom atidas. Las crom atidas, que al principio presentan una cromatina poco empaquetada se convierten r apidamente en cromosomas t picos por compactaci on progresiva. Los extremos de los microt ubulos forman uniones con lugares concretos de los cromosomas llamados cinetocoros, localizados en los centr omeros. Cada cromosoma tiene dos cinetocoros. Los microt ubulos que contactan con los cinetocoros se denominan cinetoc oricos. Como los cinetocoros est an orientados en lugares opuestos, los dos centrosomas env an microt ubulos que contactan con un mismo cromosoma. El n umero de microt ubulos que contacta con un cinetocoro es variable y en humanos suele ser de 20 a 40, mientras que en las levaduras es uno solo. Otros microt ubulos, partiendo de centrosomas opuestos, no interaccionan con la cromatina sino que lo hacen entre s . Contactan con sus extremos m as y llegan a estabilizarse, deteni endose la inestabilidad din amica. Estos microt ubulos se denominan polares. Metafase Al nal de la profase (o prometafase) las crom atidas hermanas est an unidas entre s y tambi en a los microt ubulos cinetoc oricos del huso mit otico. Las dos crom atidas hermanas unidas forman los cromosomas, que son desplazados hacia el centro del huso mit tico, equidistante a los dos centrosomas, form andose la denominada placa ecuatorial. Esto dene a la metafase. Los desplazamientos son consecuencia del acortamiento y alargamiento de los microt ubulos, as como de la acci on de las prote nas motoras. Durante este periodo los cromosomas se mueven para ocupar su posici on enla placa ecuatorial y a veces se desplazan temporalmente fuera de esta. Ello es indicio del tira y aoja que mantienen los microt ubulos de cada centrosoma. Anafase La anafase comienza con la rotura de las conexiones entre crom atidas hermanas a nivel del centr omero gracias a la participaci on de proteasas, de manera que cada crom atida ir a hacia uno de los centrosomas. La velocidad del desplazamiento es normalmente de 1 m por minuto. Existen dos etapas: la anafase A, en la cual los microt ubulos cinetoc oricos se acortan por despolimerizaci on, tanto en el extremo menos como en el m as;

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mientras que en la anafase B los propios centrosomas se separan entre s , empujados por los microt ubulos polares, favoreciendo a un m as la separaci on de las crom atidas. Esta separaci on de los centrosomas va acompa nada por una elongaci on de los microt ubulos polares, aportando la fuerza las prote nas motoras, que hace que se deslicen unos microt ubulos polares sobre los otros. Tambi en parece que otras prote nas motoras se asocian a los microt ubulos que salen desde los centrosomas en direcci on opuesta a las crom atidas y contactan con el cortex celular, tirando de los centrosomas. Son los microt ubulos del aster. Telofase Durante esta fase se organiza de nuevo la envuelta nuclear alrededor de cada conjunto de crom atidas que han migrado hacia cada uno de los centrosomas formando los dos n ucleos hijos. Esto se produce por defosforilaci on de las prote nas que constituyen la l amina nuclear. Tambi en se forman los poros nucleares y la crom atidas comienzan a descondensarse. Los microt ubulos se han liberado previamente de los cinetocoros. Citocinesis La citocinesis comienza durante la anafase y naliza con la formaci on de las dos c elulas hijas. El primer indicio del arranque de la citocinesis es la formaci on de un surco en la supercie celular llamado surco de escisi on, que es perpendicular al huso mit otico y se sit ua en una posici on ecuatorial. Este surco se forma por la acci on de los lamentos de actina y por la miosina. El desplazamiento de unos sobre otros, como ocurre durante la contracci on muscular, produce un fen omeno de estrangulamiento. Este anillo es transitorio y se forma s olo durante la citocinesis para despu es desaparecer. Para completar la citocinesis han de eliminarse los restos del huso mit otico atrapados durante el estrangulamiento, desorganizarse el propio anillo y romperse y sellarse las membranas plasm aticas. Recientemente se ha visto que en las c elulas animales, al igual que en las vegetales, el tr aco vesicular participa en la nalizaci on de la citocinesis: se necesita m as membrana y mol eculas que lleven a cabo la rotura y sellado de la membrana plasm atica, de forma parecida a lo que ocurre con las ves culas del tr aco vesicular. En las c elulas vegetales la citocinesis es diferente a causa de la presencia de la pared celular. Las c elulas hijas se separan, no por la formaci on de un

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anillo contr actil sino por la formaci on de una nueva pared celular en el interior de la c elula que se va a dividir. Esta pared nace rodeada de membrana y es perpendicular y central al huso mit otico. Su posici on determina la localizaci on de las dos c elulas hijas y por tanto tambi en la direcci on de crecimiento de la planta. La formaci on de esta nueva pared celular est a mediada por lo que se denomina el fragmoplasto, que posee como componentes a los restos de los microt ubulos polares del huso mit otico y a ves culas procedentes del aparato de Golgi. Estas ves culas se transportan hasta esta zona por prote nas motoras y se fusionan entre s y con la pared en crecimiento. En su interior llevan componentes de la pared celular que se ir a formando como consecuencia del proceso de fusi on vesicular.

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