Ubicuidad de los nucleadores de hielo biolgicos en nevazones. Brent C. Christner, 1 * Cindy E. Morris, 2 Christine M.

Foreman, 3 Rongman Cai, 1 David C. Sands4 Los aerosoles desempean un papel integral en el clima directamente dispersando y absorbiendo la energa de radiacin solar, e indirectamente estas partculas sirven para la condensacin y la formacin de hielo en las nubes. Hielo La formacin de hielo en las nubes troposfricas es requerida para la nieve y la mayora de las lluvias. A temperaturas> -40 C, La formacin de hielo no es espontnea, y diversos sustratos pueden actuar como catalizadores de nucleacin de hielo (1). Nucleadores de hielo biolgicos (IN) son los ms activos en la naturaleza, y algunos patgenos de plantas bacterianos pueden catalizar la formacin del hielo a temperaturas cerca de -2 C. Aunque las partculas biolgicas son importantes componentes de los aerosoles (2), las tecnologas existentes no son capaces de detectar activos a temperaturas >-10 C (3), y el impacto de la diversidad biolgica IN en procesos atmosfricos siguen siendo ambiguas (4). Se examin la concentracin y naturaleza de IN en activos a temperaturas> 10 C en 19 nevazones frescas recogida en medianas y altas latitudes de Octubre 2005-junio 2006 (5) y la concentracin ms baja acumulada de IN a -9 C fue en las nevazones de la Antrtida (cuatro IN por litro de nieve derretida) y la ms alta en muestras de Montana y Francia (110 y 120 litros de IN,respectivamente). El DNA contiene clulas entre 0,3 y 15 micrones de dimetro (1,5 104 a 5,4 106 clulas por litro) representaron el <1% de las partculas totales en las muestras de nieve (1.1 107 a 3,9 109 partculas por litro), y la concentracin biolgica de IN era independiente de la partcula y concentracin de clulas (Fig. 1). Los datos presentados en. Figura 1B son para las temperaturas ms altas para las concentraciones de IN que pudieron calcularse para todas las muestras (-7 C), lo que facilita la comparacin. La actividad biolgica de IN ms conocida es mediante protenas o compuestos proteicos(4). Por lo tanto, pensamos que en la de la diversidad biolgica IN se inactiva por el calor, mientras que en la de origen mineral, no lo hara. El tratamiento de inactivacin es de 69% a 100% de IN activo a temperaturas -7 C y -4 C (Fig. 1B). En las bacterias, actividad de nucleacin de hielo depende de una pared celular intacta y es conferida por 120 - 180 kD protenas incrustadas en la membrana externa (6). El trastorno de las paredes celulares reduce la actividad de nucleacin de hielo en bacterias (7). Por lo tanto, se postula que la lisosoma disminuira la actividad de nucleacin de hielo si a las bacterias que estaban involucradas se les encontr que 0 a 85% de la IN fueron susceptibles a la lisozima (Fig. 1B). La hidrolisis y resistencia incompleta del lisozima podran permitir que algunas clulas bacterianas permanezcan intactas en presencia del lisozima, y, por lo tanto, nuestros resultados son probablemente subestimar la concentracin de bacteriana en los nevazones.

Las muestras analizadas fueron recogidas durante periodos y locaciones (por ejemplo, en la Antrtida) desprovistas de plantas de hoja caduca, por lo que es probable que el IN que observamos fuera transportado desde largas distancias y probablemente portaban su hielonucleante en actividad en la atmsfera. Suponiendo que todos los IN en las muestras de nieve eran de ADN que contiene clulas, se estima que aproximadamente el 0,4% de las clulas en nevazones en latitudes medias eran de IN activo en temperaturas entre -7 C y -4 C. Aunque la extrapolacin de la composicin y la cantidad absoluta de la diversidad biolgica IN en las nubes sobre la base de las concentraciones la precipitacin es difcil, nuestros resultados indican que estas partculas estn ampliamente dispersas en el ambiente, y, si est presente en las nubes, probablemente tienen un papel importante en la iniciacin de la formacin de hielo, especialmente cuando las temperaturas mnimas de las nube son relativamente clidas. El IN biolgico primero fue descrito cerca de 40 aos atrs (1), sin embargo, no existen estimaciones para el componente biolgico de IN en la atmsfera. Nuestros resultados revelan que IN biolgico activo en altas temperaturas es abundante en las muestras de nieve fresca y son ubicuos en la precipitacin de todo el mundo. Desvelar el papel de IN biolgico en el ciclo de la precipitacin tiene implicaciones para descifrar la retroalimentacin entre la biosfera y el clima, mejorando considerablemente la comprensin de estrategias de difusin atmosfrica de patgenos de plantas (4) y otros microorganismos.

Total de particulas Clulas con DNA

IN acumulado Sensibilidad al calor del IN

Sensibilidad a la lisozima del IN

Nmero de muestra

. Figura 1. Partculas, clulas, y la inmersin de congelacin en las concentraciones en las nevadas frescas recogidas en Montana, Francia, el Yukn, y la Antrtida. (A) Cantidad de partculas y clulas

que contienen ADN entre 0,3 y 15 micrones de dimetro. (B) La concentracin acumulativa de IN (> 0,2 mm) por litro de derretimiento de la nieve que estaban activas en -7 C y sensible a la lisozima y la desnaturalizacin por calor. De izquierda a derecha, las muestras se clasificaron en la base de concentraciones crecientes acumulativas de IN. Se recogieron muestras 2, 5 a 8, 10 a 12, 17, y 18 en las proximidades de Bozeman, Montana, muestras 3, 9, 13 a 16, y 19 de los Alpes franceses y los Pirineos en el sur de Francia, y las muestras 1 y 4 de la isla de Ross, en la Antrtida y el Glaciar Wheaton, Yukon, respectivamente. Ver cuadro S1 para datos numricos y detalles sobre las fechas de muestreo y Locales. References and Notes 1. G. Vali, in Biological Ice Nucleation and Its Applications, R. E. Lee Jr., G. J. Warren, L. V. Gusta (American Phytopathological Society Press, St. Paul, MN, 1995), ch. 1. 2. R. Jaenicke, Science 308, 73 (2005). 3. O. Mhler, P. J. DeMott, G. Vali, Z. Levin, Biogeosciences 4, 1059 (2007). 4. C. E. Morris, D. Georgakapolous, D. C. Sands, J. Phys. (Paris) 121, 87 (2004). 5. Materials and methods are available on Science Online. 6. H. Kawahara, J. Biosci. Bioeng. 94, 492 (2002). 7. S. E. Lindow, E. Lahue, A. G. Govindarajan, N. J. Panopoulos, D. Gies, Mol. Plant-Microbe Interact. 2, 262 (1989). 8. We thank F. Johnson, T. Leonard, S. Savage, M. Skidmore, and S. Trautman for collecting snow samples. This research was funded by a Louisiana State University faculty research grant awarded to B.C.C. and NSF grant OPP-0440943 to C.M.F. Supporting Online Material www.sciencemag.org/cgi/content/full/319/5867/1214/DC1

Materials and Methods Table S1 27 August 2007; accepted 5 December 2007 10.1126/science.1149757