UAM4241

Universidad Autnoma
Unidad lztapalapa
Metropolitana
Casa abierta al tiempo
Escalamiento de Biorreactores para co-composteo de suelos contaminados con petrleo
'IbisparaobtenerelGradode Maestro en Biotecnologa

Presentada por:
Lucian0AguileraVgzquez,
I.$.
CC@RDtU4CIO?J DE SERVlCICG D * X Q M W W EIWCITBCA
Sustentada el jueves 10 de Septiembre de 1998 a las 11:O0 Hrs. ante el jurado compuesto por: Dr. VAzquez Rafael Presidente Duhalt, Dr. Secretario Rivera, Chvez Rafael Dr. J. Gerard0 Saucedo Castaeda, Vocal Dr. Mariano Gutierrez Rojas, Vocal
AGRADECIMIENTOS
A mis padres y a mi hermano Javier, por demostrarme siempre su amor y comprensi6n, y

hacerme sentir quetengo una familia.
A...
A mi hermano Julihn por ensearme que aun siendo mhs d6bil que los demas se puede tener infinita fuerza y entereza, y a mi to Javier por su ejemplo, graciasal cual emprend la aventura de vivirfuera de mi casa.
A Mariano y a Gerard0 por su direcci6n y apoyo, gracias al cual se logr6 cristalizar este
trabajo.
A Ernesto y Sergio por sus crticas gracias a las cuales siempre se pudo mejorar este
trabajo, y sobre todo por el apoyo que brindan al preocuparse por uno como estudiante y como ser humano.
A CONACyTporlabecaquemeotorgoparaalcanzarelgrado
VI).
de Maestro en
Biotecnologa, y al IMP por la beca que recib durante parte de este trabajo (FIES-96F-48-
A Tania, a Martha, a Oscar y a Romano por la gran amistad que me han brindado, gracias por sus acertados comentarios, por su comprensi6n y su apoyo. Gracias al resto de los integrantes de la Planta y en especial gracias a Doa Maria Elena Martinez Roque, por su apoyo.
INDICE
INDICE
INDICE
INDICE DE FiGURAS
SlMBOLOGiA
i
IV
Vlll
XI1
BIBLIOGRFICA
RESUMEN
l.
REVISIN
2
2 6 7 9 10 11 12
I.I. SISTEMAS DE CO-COMPOSTEO EN BIORREMEDIACI~N DE SUELOS 1.2.IMPORTANCIA DE LA AlREACldN EN LOS SISTEMAS DE CO-COMPOSTEO 1.3.ESCALAMIENTO DE BIORREACTORES EN CO-COMPOSTEO 1.4.METODOS DE ESCALAMIENTO 1.4.1. Mtodos Fundamentales 1.4.2.Mtodos Semi-fundamentales 1.4.3. Mtodos empricos
2. OBJETIVOS
2.1. OBJETIVO GENERAL 2.2.OBJETIVOS PARTICULARES
14
14 14
3. MATERIALES Y MTODOS.
3.1.SUELOS CONTAMINADOS CONHIDROCARBUROS. 3.2.LODOS ACTIVADOS. 3.3.BAGACILLO DE CANA. 3.4.NUTRIENTES PARA EL CRECIMIENTO MICROBIANO. 3.5.PREPARACIN DEL SISTEMA EXPERIMENTAL 3.6.TCNICAS ANAL~TICAS Y EOUIPOS EMPLEADOS EN LA REALIZACI~NDE
LOS EXPERIMENTOS
16
16 18 18 19 19 21
21
3.6.1.Humedad 3.6.2.pH en Bagacillo de Caria 3.6.3. pH en Suelo 3.6.4. Actividad de agua 3.6.5. Extraccin de Hidrocarburos por Soxhlet 3.6.6. Azcares totales por el Mtodo de
Fenol-Sulfrico
21 22 22 23 24 26 27 27
3.6.7. Densidad Aparente del suelo 3.6.8. Densidad Real 3.6.9.Determinacin de la Porosidad
~~~~
lndice
3.6.1 O. Densidad Real en las mezcla

bagacillo-suelo-agua
27
3.6.1l. Porosidad de una mezcla debagacillo-sueloagua
3.6.12.PBrdida de materia seca 3.6.1 3. Relacin carbonolnitrgeno (UN) 3.6.14. Registro en lnea de CO, y O , .
28 28 29 29
4. DESARROLLO DE
5. DISEO DE
EQUIPO PARA EL CO-COMPOSTEO LA MEZCLA EXPERIMENTAL PARA
32
38
38 38 39 40 41 45 47
LA COMPOSICIN DE
ELCO-COMPOSTEO
5.1.METODoLOGiA DE MEZCLAS EMPLEADA 5.1 .l. Definicin de variables 5.1.2.Delimitacindel rea de experimentacin 5.1.3.Diseo experimental tipo Simplex-Centroide 5.2.EFECTO DEL BAGACILLO DE CAA, SUELO CONTAMINADO Y AGUA EN LA
Y LA D & , E L
MEDIO DE CO-COMPOSTEO.
5.3.DEFINICION DE LAS CONDICIONES DE CO-COMPOSTEO 5.4.CONCLUSIONES
6. BIODEGRADACI~N DE HIDROCARBUROS A ESCALA LABORATORIO

6.1.EVALUACI~N DEL EFECTO DEL CONTROL DE LA TEMPERATURA. 6 . 1.l. Resultados de temperatura 6.1.2. Factores fisicoqumicos determinados (aw, humedad, pH. produccin de COZy prdida de
materia seca)
49
50 51
6.1.3.Biodegradacin de hidrocarburos 6.2.EVALUACION DEL EFECTO DELNMERO DE REYNOLDS 6.2.1.Temperatura 6.2.2.Factores fisicoqumicos determinados 6.2.3. Biodegradacin de hidrocarburos 6.6.CONCLUSIONES
4
52 55 56 56 58 62 64
7. ESCALAMIENTO DEL
HIDROCARBUROS
PROCESO DE BIODEGRADACI~N DE
66
67 68 76 79 80
7.1.CAMBIO DE ESCALA DE COLUMNAS 50 G DE CAPACIDAD A BIORREACTORES DE0.864 KG 7.1.l. Factores fisicoqumicos durante el co-composteo 7.1.2. Biodegradacin de hidrocarburos en biorreactores de 0.864kg 7.2.CAMBIO DE ESCALA DE BIORREACTORES DE0.864KG A 26.50KG 7.2.1.Factores fisicoqumicos durante el co-composteo
II
lndice
7.2.2. Biodegradacin de hidro-carburos en el biorreactor de 26.50 kg 7.3. CONCLUSIONES
85
87
8. BALANCES DE MATERIA Y ENERGA EN LOS BIORREACTORES DE 0.86 Y 26 KILOGRAMOS

8.1. PLANTEAMIENTOTERICO DE LOS BALANCES DE MATERIA Y ENERGA
89
89 89 90 94 96 96 98 1 o1
104
8.1 .l. Balance deCOP
8.1.2. Balances de calor 8.1.3. N,ic durante el co-composteo
8.2. PRESENTACI~N DE RESULTADOS 8.2.1. Balance de CO, 8.2.2. Balance de calor 8.2.3. Evolucin del durante
8.4. CONCLUSIONES
el co-composteo
9. CONCLUSIONES GENERALES 10. RECOMENDACIONES

BIBLIOGRAFA
106
111
ANEXOS
ANEXO A l . Transformacin de coordenadas no ortogonales a un sistema ortogonal ANEXO A2. Composicin de los puntos de muestre0 segn el diseo Simplex-Centroide.
117 120 124 126 126 127 128 129
B1 Valores delos parmetros empleados ANEXO ANEXO C1. Estimacin terica del calor generado durante el co-composteo Sacarosa Hidrocarburos alifticos
Calor total generado por ambas fuentes ANEXO C2. Adirnensionalizacin del modelo de balance de calor
...
Ill
INDICE DE
FIGURAS
Figura 1.1 Esquema de las ventajas y desventajas de los procesos de FMS (Hesseltine, 1977b) ........................................................................................................ 3 Figura 1.2. Representacin de las fasesquesepresentan en unsistemacontrolado d e composteo. .................................................................................................................... 4
Figura 3.1 Mapa de localizacin del rea de muestre0 de suelo contaminado en Cactus, Chis................................................................................................................. Figura 3.2. Distribucin de tamao de partcula en bagacillo de caa.. ...................................... Figura 3.3. Esquema de preparacin de la mezcla experimental modelo ....................................
17 18 20
Figura 4.1. Columnas de fermentacin y humidificador para realizar el proceso de .................................................................................. co-composteo a escala laboratorio. Figura 4.2. Biorreactor de acero inoxidable de1 kg de capacidad............................................. Figura 4.3. Sistema de co-composteo empleando un reactor de acero inoxidable de 30 kg de capacidad .................................................................................................................. Figura 4.4. Cdmara de control de temperatura.........................................................................
32
33
34 36
Figura 5.1 Diagrama de tres fases de las mezclas de suelo-bagacillo-agua ................................. Figura 5.2. Curvas de nivel y superficie de respuesta de a, y E, ............................................. Figura5.3. Capacidad de retencin de agua en funcin del dimetro promedio de ......................................................................................... partcula de bagacillo de caa
40
44 45
CAPTULO 6
Figura 6.1. Evolucin de la temperatura para los
, N ,
0.34 y 0.86 ............................................
52
Figura 6.2. Evolucinde la humedad, a+,, pH, h produccindedixidodecarbono y h prdida de materia seca durante el co-composteo, para los experimentos con la temperatura............................................................................ control y sin control de Figura 6.3. Biodegradacindehidrocarburosduranteelco-composteo para diferentes ,, ................................................................................................................ casos de N Figura 6.4. Evolucin de la temperatura en las columnas operados a distintos N
54 55
R..______........___ ~ 57
iv
lndice de Figuras
Figura 6.5. Evaluacin de los parametros evaluados durante el co-composteo realizado a distintas condiciones de N,, .........................................................................................
59
Figura 6.6. Relacin entre h prdida de materia seca y h cantidad de CO, producida en 150 h de co-composteo ................................................................................................ 60 Figura 6.7. Produccin y acumulacin de COP durante el co-composteo realizado a distintas condiciones de N,, ....................................... .................................................... Figura 6.8. Biodegradacin de hidrocarburos durante el co-composteo a distintas condiciones de N R ~ .................................................................................................... . Figura 6.9. Biodegradacibn de hidrocarburos a las 150 h de operacin contra el
61
63
NRe del proceso. ....................................................................................................................... 6 4
los biorreactores de Figura 7.1. Esquema de los puntos de muestre0 en el empaque de laboratorio y piloto......................................................................................................... 67
, humedad, pH y % PMS durante el co-composteo en columnas Figura 7.2. Evolucin del a testigo ..........................................................................................................................
Figura 7.3. Representacinde la a, y la humedad al final del proceso de co-composteo en los biorreactores............................................................................................................
69
70
Figura 7.4. Representacin del pH al final del proceso de co-composteo en los biorreactores.................... ... ...................... ....................... ............................................. 7 1 Figura 7.5. Cintica de consumo de azcares para ambas condiciones .................................... 71
azcares totales a hs 150 h de co-composteo los Figura 7.6. Concentracin de biorreactores.................................................................................................................
72
Figura 7.7. Evolucin de la relacin CM durante el co-composteo y valores finales en los bioreactores.................................................................................................................. 73
de COZ en los biorreactores durante el Figura 7.8. Produccin y acumulacin co-composteo operados a dos condiciones de NRe ........................................................
75 76 77 78
a temperatura de los biorreactores operados a distintas Figura 7.9. Evolucin de ! N , ...................................................................................................... condiciones de ,
Figuras 7.10. Cinticas de biodegradacin durante el co-composteo en columnas testigo a distintas condiciones de N,, . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Figura 7.11. Biodegradacin de hidrocarburos de distintos en los biorreactores.......................
, humedad y pH a las 150 h de co-cornposteo en los Figura 7.12. Resultados finales de a biorreactores................................................................................................................. 8 0
Figura 7.1 3. Cantidad de azcar remanente al final del co-composteo en el biorreactor a NR e - 1 .19................................................................................................................... 8 1 Figura 7.14. Relacin C/N a las al final del co-composteo en el biorreactor a
N ,,
= 1.19........... 82 84
Figura 7.15. Produccin y acumulacin de COZdurante el co-cornposteo en el biorreactor piloto. ...........................................................................................................................
Figura 7.16. Evolucin de la temperatura del biorreactor piloto durante el co-composteo......... 84 Figura 7 . 17 . Biodegradacidn de los hidrocarburos al final del co-composteo en el ....... ...................................... 8 5 biorreactor piloto .............................................................. Figura 7.18. Fotografa del empaque despus de 150 h de co-composteo.............................. 85
lndice de Figuras
CAPTULO
8
93
Figura 8.1. Secciones del empaque para realizar los balances de calor .....................................
Figura 8.2. Diagrama de Flujo del cAlculo de balance de calor para los biorreactores empleados .................................................................................................................... 94 Figura 8.3. Diagrama de Flujo para elc~lculo del NBic .............................................................. Figura 8.3. Evolucin del calor durante el co-composteo.......................................................... Figura 8.4. Evolucin del NBi durante el co-composteo................... ...........................
97
1 O0
........102
ANEXOS
Figura A.l. Transformacin de coordenadas de un sistema no ortogonal (diagrama de tres fases) a un sistema ortogonal ..... ........................... ........................................................1 17
vi
SlMBOLOGiA
NOMENCLATURA
,A ,
a , C p , CP,
= = =
=
rea especfica del reactor actividadagua de
[=I
m2/m3 de empaque
capacidad calorfica promedio de la mezcla experimental capacidad calorfica promedio del aire
[=] J/kgeC
[=I
J/kg'C
constante para el clculo de h, en cuerpos sumergidos [=] adimensional dimetro promedio de partcula del material a compostear dimetro externo del biorreactor [=] m fraccin de agua fraccin de bagacillo de caa fraccin de suelo contaminado gasto msico de aire
[=I
[=I
kg aire/s
calor de reaccin de una biorreaccindurante el co-composteo entalpa del aire a la entrada del biorreactor entalpa del aire a la salida del biorreactor
hi
[=I
[=I
J/kg
[=I
J/kg
coeficiente de
3 . $ (
=
5)
pelcula interno
[=]
J/m2sGKK. Calculado como
0.365
hc
coeficiente de
pelcula
externo
[=I
J/m2sQKK. Calculado como
Vlll
...
Simbologia
conductividad trmica del aire
[=I
J/ms'K
conductividad trmica de la pared del biorreactor [=I J/mscK conductividad trmica del agua altura del empaque
[=I
J/ms'K
[=I
, en cuerpos sumergidos constante para el clculo de h
[=I
adimensional
nmero de variables hiRa nmero de Biot de calor [=] adimensional. Calculado como k CpghI nmero de Prandtl [=] adimensional. Calculado como kg nmero de Reynolds para lechos empacados
[=I
adimensional.
d,pgvg Calculado como -
calor latente de vaporizacin del agua [=] J/kg agua radio del empaque
[=I
tasa de reaccin de una biorreaccin durante el co-composteo tiempo adimensional tiempo de fermentacin
[=I
tiempo total de fermentacin [=] h temperatura adimensional temperatura de fermentacin [=] "C temperatura mnima durante proceso de fermentacin [=] "C temperatura mxima durante proceso de fermentacin [=] "C
Simbologia
coeficiente global de transferencia de calor [=] J/m2"Cs velocidad del aire en el empaque [=] m/s volumen de empaque [=] m3 variable independiente
v,
Vemp
=
=
xi
LETRAS GRIEGAS
Pijk
coeficiente de regresin mltiple Porosidad densidad de empaque del material [=] kg/m3 densidad del aire que atraviesa el empaque [=] kg/m3 variable dependiente porosidad del empaque densidad del aire a la entrada del biorreactor [=] kg/m3 densidad del aire a la salida del biorreactor
EO
Pm pg
rl
EO
Pae Pas Yae Yas

hijk
[=I
kg/m3
fraccin msica de agua a la entrada del biorreactor [=] kg aire/kg agua fraccin msica de agua a la salida del biorreactor [=] kg aire/kg agua coeficiente de regresin mltiple espesor de la pared del biorreactor [=] m viscosidad del aire [=] kg/m S viscosidad del medio circundante al biorreactor
F
k 3
P
[=I
kg/m S
RESUMEN
RESUMEN
Lacontaminacin de los suelosseharecrudecidoen los ltimos aos. Una de las estrategias para solucionar el problema de la contaminacin del suelo es la biorremediacin la cual se define como la aplicacin de tratamientos biolgicos para limpiar compuestos txicos presentes en el ambiente (Cookson, 1995). Entre las tcnicas actuales de biorremediacin de suelos se encuentra el co-composteo, ste consiste en emplear el proceso de composteo para degradar los contaminantes que se hallan en el suelo. El composteo fue definido por Haug, (1993), como un proceso de descomposicin estabilizacin y de sustratos orgnicos slidos gracias a la actividad tipos microbiana. En general, cuando se habla de composteo existen distintos
de biorreactores a gran escala donde se lleva un control de los parmetros de operacin como son la humedad del medio, la aireacin del material, la adicin de nutrientes, entre otros. Para el diseo de los biorreactores adecuados para procesos de co-composteo es necesario que se realicen estudios de ingeniera
y escalamiento, ya que es muy importante que se desarrollen sistemas

eficientes de control de parmetros de operacin. Esta necesidad surge de la falta de conocimientos sobre en estos procesos desde
al., 1 993).
la fisiologa de los microorganismos empleados el punto de vista de la ingeniera (Durand et
El objetivo general de la presentetesisesdesarrollarcriterios de escalamiento de un biorreactor de lecho empacado empleado en un proceso modelo de co-composteo para el tratamiento de suelos contaminados con hidrocarburos. La mezcla experimental modelo mediante el uso de la
metodologa superficie de respuesta de comportamientode la actividad deagua (a,)
(MSR) para predecir el y de la porosidad (E,) de la
los mezcla en funcin de su composicin, y as, planear adecuadamente experimentos de biodegradacin hidrocarburos de por co-composteo de la mezcla seleccionada fue (g/g Mezcla): (captulo 5). La composicin bagacillo de caa, 0.14; suelo contaminado con hidrocarburos totales de petrleo,0.13;agua, 0.6; y Iodosactivados, 0.02, comoinculo.Adems de nutrientes para el crecimiento microbiano.
En la biodegradacin de hidrocarburos aireacin la es muy xii
Resumen
importante y por ello en el captulo 6 se describe el estudio del efecto del No. de Reynolds para lechos empacados ( N ) , sobre el co-composteo por ser un parmetro que relaciona la aireacin del lecho con trminos correspondientes a la escala del biorreactor. Se emplearon columnas de vidrio de 50 g de capacidad como biorreactores para estudiar el efecto del N , , a pequea escala; se probaron 4 niveles de , N , desde 0.0 hasta 1.19 para lo cual se vari el tamao de partcula del bagacillo de caa y la tasa de aireacin. A excepcin del experimento realizado a , N , 0.0, la tasa de aireacin empleada garantiz la cantidad necesaria de oxgeno para oxidar los hidrocarburos presentes durante el tiempo de composteo (150 horas). Se observaron parmetros como la a , del medio, pH, humedad, prdida de materia seca,
, y concentracin de hidrocarburos produccin de CO,, consumo de O presentes. La concentracin promedio inicial de hidrocarburos presentes en el
f 15,176 ppm. Se alcanzaron porcentajes de biodegradacin mayores al 50 Yo, en los experimentos realizados a valores mayores a 0.35 de N R , sin presentar diferencias significativas entre ellos. Para realizar el primer cambio de escala se seleccionaron los niveles de , N , de
0.17 y 0.43para llevar a cabo el proceso de co-composteo en biorreactores
medio fue de 47,800
kg. La mezcla a compostear present una concentracin inicial de hidrocarburos de 46000 ppm y se determinaron los mismos parmetros que en el estudio anterior. La biodegradacin alcanzada N , de 0.43 y de 48 Yo, en el caso de , N , de fue del 80 Yo para el caso de ,
acero inoxidable de 0.864 0.17. Por ltimo, se realiz un co-composteo en un biorreactor de 26.5 kg de 1.19, la tasa de aireacin capacidad (captulo 7) a un nivel de NRe de empleada no garantiz la demanda qumica de O , . La concentracin inicial de hidrocarburos la mezcla experimental en el biorreactor de 26.5 kg fue de 41,200 ppm. La biodegradacin alcanzada fue baja, 34 f 16 Yo debido, posiblemente, a una aireacin inadecuada. En los experimentos realizados en 0.86 a 26.4 kg se observaron gradientes de temperatura enel empaque. A partir de las ecuaciones de balance adimensionales de calor se obtuvo el valor del No. de Biot de calor (NBic) cuyos valores se determinaron en funcin de las temperaturas observadas durante el co-composteo (captulo 8). Se concluy que acoplado al N , , puede emplearse como un criterio de escalamiento.
N , el ,
xiii
... y si uno no se queda corrigiendo elL6ro
elresto
d Ih vida es porque ef mismo rigor dejierro que

hacefaha para empezarlb se impone para termrlarlb... Fa6rieGarcia mazquez
REwsrN
'm
BIBLlOGRFlCA
REVISIN
BIBLIOGRFICA
El ser humano en su afn de industrializacin ha descuidado el hecho de que la mayora de los desechos que genera no se degradan en el medio ambiente sino que permanecen en I durante mucho tiempo as, la contaminacin ambiental se ha ido recrudeciendo en los ltimos aos. La contaminacin del suelo constituye una preocupacin importante actualmente. Esta se ha originado por varias razones, como son: el uso indiscriminado de plaguicidas (Cole et al., 1995); los derrames de desechos txicos como el cido tereftlico que es unresiduoen la produccin defibrassintticas; los derrames de petrleo crudo, ya sean accidentales, o bien, los que se generan durante la excavacin de pozos petroleros (Saval, 1995); o la transminacin de combustibles de los tanques donde son almacenados (Hutchins et al., 1995). Por ende, se han generado algunas estrategias para solucionar el
problema de la contaminacin del suelo, por ejemplo, el uso de tecnologas limpias en los procesos industriales y la biorremediacin; lo primero, para no contaminar ms, y lo segundo, para limpiar lo que se encuentra contaminado. De hecho, una definicin ms apropiada de biorremediacin es la aplicacin de tratamientos biolgicos para limpiar compuestos txicos presentes en el ambiente (Cookson, 1995).
1. 1. SISTEMAS DE CO-COMPOSTEO EN BIORREMEDIACI~NDE SUELOS

Entre las tcnicas de biorremediacin de suelos que se han empleado se
encuentra el co-composteo, mediante el cual el suelo se compostea para degradar los contaminantes que se hallan en el suelo. El composteo fue definido por Haug, (1993), como un proceso de descomposicin y estabilizacin de sustratos orgnicos slidos gracias a la actividad microbiana. Los materiales que se emplean en los procesos de co-composteo son muy diversos, y pueden ser desechos domsticos, agrcolas, de la industria alimentaria, Iodos industriales, estircol, basura generada en los jardines y parques, y el contaminante que se desea degradar. Algunos de estos componentes funcionan como agentes de volumen, para evitar la compactacin del material y facilitar la aireacin del sistema, o como componentes que aportan nutrientes y enriquecen el sustrato (Haug, 1993).
Revisin Bibliogrfica
Los procesos de co-composteo se realizan en ausencia de escurrimiento de

agua,motivopor no excede la el cual se pueden considerarcomoprocesosdefermentacin en la cual crecen en medio slido (FMS). Usualmente, en los procesos fermentativos de este tipo capacidad de saturacin de la matriz slida el agua
los microorganismos (Laukevics et al., 1984). Se propuesto ha el trmino "Fermentacin en Medio Slido" para todos los procesosen los cuales se emplean
materiales insolubles crecimiento el para agua en microbiano (Moo-Young et al., 1983). Los sistemas de co-composteo presentan caractersticas propias de los sistemas de FMS las cuales se resumen en la Figura 1.l.
Gentajas:
Medio de cultivo simple, algunos sustratos utilizados son enriquecidos con nutrientes. El producto de inter& se encuentra mas concentrado en el medio fermentado, cual facilita su purificacin. En FMS se emplean la flora natural, esporas o celulas como inculo. baja humedad La que se emplea y el gran inculo que se requiere reduce enormemente posibilidad la de contaminaciones. La cantidad de desechos que se generan es menor que en FL
= Los microorganismos que se utilizan se limitan a aquellos que crecen en niveles reducidos de humedad.
La determinacin de parmetros como la humedad, pH, oxgeno libre y dixido de carbono, constituye un problema debidoa la falta de dispositivos monitoreo de
E l manejo de sistemas de
FMS a gran escala ha sido poco estudiadoy presenta varios problemas.
Figura 1.1 Esquema de las ventajas y desventajasde los procesosdeFMS (Hesseltine, 1977b).
Los microorganismos que son empleados como inculo en
los sistemas de
co-composteo son parte de la propia flora natural de los sustratos involucrados. Las 0.93 y 0.98, actividades de agua (a,) bajas que se presentan en estos sistemas, entre favorecen el crecimiento de los hongos ms que el de las bacterias. En ocasiones se las plantas de tratamiento de aguas residuales emplean Iodos activados de domsticas como inculo de las compostas en donde los microorganismos patgenos
son eliminados del producto final, debido a las temperaturas elevadas que se alcanzan durante el proceso (Haug, 1993). Este calentamiento se produce debido al
los microorganismos patgenos calor metablico que se acumula, y adems de destruye tanto huevecillos de insectos y parsitos como semillas de plantas presentes,
por lo que el producto final es totalmente incuo al ambiente. En ocasiones los sistemasdecomposteoson confinados a recipientes o
lugares donde se puede evitar la prdida de calor al aislar el sistema del ambiente. Cuando se lleva a cabo este tipo de control los procesos de composteo desarrollan tres etapas de perfiles trmicos caractersticos,representadosenla etapa de calentamiento, donde la temperatura se incrementa temperatura ambiente; una segunda etapa donde la temperatura se constante por encima delatemperaturaambiente; y unaterceraetapa Figura 1.2: una con respecto a la mantiene donde los
sustratos se han agotado y no se produce ms calor metablico, por lo cual el calor acumulado se disipa poco a poco al ambiente (Stentiford y Dodds, 1992).
Temperatura constante
I\
i
Enfriamiento
"
Tiempo
Figura 1.2. Representacin de las fases que se presentan en u n sistema controlado de composteo: 1, Etapa de calentamiento; 2 , Etapa de temperatura constante;3, Etapa de enfriamiento y final.
Beaudin et al., (1996), co-compostearon un suelo contaminado con hidrocarburos proveniente de la compaa "Imperial Oil", en Sarnia, Ontario, Canada. 17,800 ppm, de La concentracin de hidrocarburos presentes enestesueloerade los cuales,el 40 Yo eran hidrocarburos alifticos, 32 Yo polares y el 28 o/o restante eran aromticos. Estesuelofue mezclado con hojas, en su mayora de maple, y
4
alfalfa, como fuentes de carbono de fcil degradacin que facilitaban el crecimiento microbiano y agente de volumen. Los autores emplearon como inculo una composta de 90 das. Las proporciones de estos componentes fueron:
/' 35.4 O
de suelo
contaminado, 35.4 Yo de alfalfa, 20.2 % de hojas y un 5 Yo de inculo. Emplearon un reactor de 8 litros provisto con un sistema de calentamiento. La aireacin del sistema se varo durante el co-composteo, aumentando la tasa de aireacin conforme aument la temperatura.La degradacin de hidrocarburos obtenida por los autores fuede un 60 Yo aproximadamente, en un perodo de 105 das.Cole et al., (1995), emplearon un sistema semejante al anterior para biorremediar un suelo contaminado con fertilizantes y herbicidas, en Illinios, E.U.. Los autores encontraron en elsuelo herbicidas como trifluralin, metolachlor y pendimethalin en concentraciones del orden de gramos por kg de suelo hmedo. Mezclaron el suelo con composta en una relacin
1:l en peso. La composta empleada provena deunproceso mesoflico donde an haba semillas y microorganismos viables. El sistema de co-composteo fue apilado sin tener un control de la temperatura ni de la aireacin del sistema y slo se alcanz hasta el 30 o/o de degradacin de algunos de los pesticidas presentes.
un Schulz-Berendt y Poetzsch, (1995), reportaron proceso denominado
TERRAFERMB semejante al co-composteo pero prescindieron del uso de agentes de volumen, y utilizaron nicamente suelo contaminado. El proceso permite biorremediar en gran escala suelos contaminados por hidrocarburos totales de petrleo (HTP's) en una concentracin de hasta 20,000 ppm e hidrocarburos poliaromticos (HPA's) en 800 ppm. El proceso consta de varias etapas, primero una separacin del suelo de elementos como plsticos y metales que no son degradables. Posteriormente se homogeneiz y se le aadieron sustratos de fcil degradacin, nutrientes y bacterias aisladas del mismo suelo contaminado. El suelo contaminado ya preparado se traslad a tiendas donde se apil sobresoportes preparados con capasde arena, lana de vidrio y una pelcula de material plstico impermeable a los contaminantes para evitar que se lixiviaran al subsuelo. Cada biopila se revolva cada 4 semanas, atiadiendo ms agua y nutrientes. Despus de 14 meses se obtuvieron niveles de degradacin de los hidrocarburos del 98 YO aproximadamente, tanto para los HTP's como para los HPA's.
Breitung et al., (1995), biorremediaron por co-composteo un suelo contaminado con TNT (20,000 ppm), de Clausthal-Zellerfeld en Lower Saxony, Alemania. Se emplearon trozos de remolacha azucarera como agente de volumen y
fuente de nutrientes, en una relacin suelo-remolacha de 1:l. La aireacin del sistema se mantuvo constante durante el co-composteo, con lo cual se alcanz un 92 Yo de degradacinde TNT en unperodode 28 das. Los reactoresquese emplearon fueron botellas Dewar de 10 litros de capacidad equipadas con un distribuidor de aire y un colector de lixiviados en su fondo, ambos realizados con tubos de polietileno. Laine y Jmgensen, (1997), reportaron un proceso de co-composteo a escala de planta piloto para biorremediar un suelo contaminado con clorofenoles. Los clorofenoles presentes se dividan 2,4,6-triclorofenol en
(7-15
O / . ) ,
2,3,4,6-tetraclorofenol (cerca del 80 Yo) y pentaclorofenol (6-10 %). En este caso se emplecomoinculo remocin de clorofenoles el residuo de unacompostadechampiones.Se logr una Se para de alrededor del 90 o/o en un perodo de 4 meses. emplearon biopilas para el co-composteo y eranrevueltascadadossemanas airear el material. anteriormente citados, En los casos haciendouna seleccin deltamaodepartcula las materias primas se
pretrataron la
del sustratoparahomogeneizar
mezcla a co-compostear. En el primero de los casos se vari la aireacin del sistema durante el proceso de co-composteo, haciendo hincapi en la importancia del oxgeno en la degradacindeestoscontaminantes. En los otrosdos la aireacin se llev a de cabo por difusin natural. Tambin se observa que existe una relacin entre el tipo de
y el tiempo en que se alcanzan valores semejantes aireacin del sistema degradacin de los txicos.
1.2.
lMPORTANClADELAAIREACINEN
LOS S I S T E M A S D E C O - C O M P O S T E O
La aireacin es un factor importante en los procesos de co-cornposteo, ya que permite controlar la temperatura del cultivo, evita el secado del material durante el proceso, y suministra el oxgeno requerido para el desarrollo de los microorganismos y la degradacindelcontaminanteobjetivo. De hecho, casi cualquiercontaminante puede ser degradado cumpliendo ciertos requerimientos bsicos como (Cookson, 1995): Presencia de un sustrato susceptible de emplearse como fuente de carbono una fuente energa, la cual puede ser el compuesto contaminante, o bien, carbono de fcil degradacin, por ejemplo glucosa. y de son
Condiciones ambientales adecuadas para que se lleven catalizadas por humedad y pH.
a cabo las reacciones
las enzimas, enfatizando valores adecuados de temperatura,
Presenciadeunaceptor-donadordeelectronesadecuado,queen los procesos aerobios es el oxgeno, y en los anaerobios, pueden ser el nitrgeno en alguna de sus formas, Nos-, N02-,N2, el carbono, CH4, el azufre, S o y , S", entre otros. Dott et al., (1995), prob el efecto del aceptor-donador de electrones en un experimento de biorremediacin in situ, en un suelo contaminado con hidrocarburos en una concentracin promedio de halla presente se alcanzan niveles 7,000 ppm y encontr que cuando el oxgeno se de degradacin de hidrocarburos cercanos al
98 O h en un perodo de un ao aproximadamente. Varios grupos de investigadores en este campo han obtenido niveles de degradacin altos cuando experimentales se airean, siendo
los sistemas
los sistemas experimentales tanto suelos como o sus derivados, e incluso algunos medios lquidos contaminados con hidrocarburos otros contaminantes importantes como bifenilos policlorados (Geerdink et al., 1996; Marn et al., 1995; Hansveit,1992; Foght et al., 1990). As, la biorremediacinse
considera como un proceso aerbico, preferencialmente (Cookson, 1995).
1.3. ESCALAMIENTO D EB I O R R E A C T O R E SE NC O - C O M P O S T E O
Debe notarse que los trabajos citados, en su mayora, se han realizado laboratorio. En los que se han llevado en
a cabo a nivel de planta piloto, la informacin
revelada es insuficiente para establecer el modo en que se realiz el escalamiento. El escalamiento se ha definido tcnicamente por diferentes autores, coincidiendo todos mediante los cuales un equipo ellos en que es el procedimiento o los mtodos aumenta de tamao, logrando que tanto en una escala pequea como en una ms rendimiento obtenga grande un se comparable (Kossen, 1994b; Durand et al., 1993; Lonsane et al., 1992; Edgeworth y Thring, 1957). Dado que el composteo puede considerarse como un proceso de FMS, los estudios en esta rea sobre escalamiento de biorreactores pueden aprovecharse para plantear el cambio de escala de un biorreactor para co-compostear un suelo los escalamientos realizados en FMS contaminado con hidrocarburos. Dentro de
destacan los siguientes; pero debe aclararse que los autores no siguieron ningun mtodo para hacer el cambio de escala: Roussos, S. et al., (1991), realizaron un escalamiento del proceso de produccin de celulasas de laboratorio a escala piloto. La operacin del reactor Zymotis de 42 kg de material hmedo se llev a cabo siguiendo las mismas condiciones que a escala laboratorio, previamente determinadas. Aunque a escala laboratorio obtuvieron un mayor rendimiento de enzima por gramo de materia Zymotis. Durand, A. et al., (1993) disearon procesos a nivel industrial parala produccin de tres productos distintos. El enriquecimiento con protena unicelular de la pulpa de la remolacha azucarera poruna cepa mutantede Trichoderma viride TS(2), proceso que funciona existosamente en China. La produccin de pectinasas para la aplicacin en enologa y en la produccin de sidra a partir una cepa selecta de hmeda final,
los autores lo atribuyeron a una esterilizacin deficiente del material utilizado en el
Aspergillus, empleando dos plantas industriales de 300 kg y 750 kg de materia
Y tambin, en el campodelos biopesticidas se producen, tanto biomasa comoesporas,de hongos entomopatgenos como Trichoderma, Fusarium, Arthrobotrys, Beauveria, entre otros gneros, en plantas de la compaa francesa CALLIOPE que producen biopesticidas a nivel industrial desde 1993.
secadecapacidad. En cuanto a los procesos de co-composteo quese emplean en biorremediacin de suelos contaminados se han desarrollado varios procesos a gran escala. Uno de ellos es el proceso TERRAFERfl (proceso comercial) gracias al cual se contaminado. El biorremediaron aproximadamente 38,000 toneladas de suelo
proceso propuesto por Laine y Jrargensen fue diseado a escala de planta piloto con una capacidad de 30 toneladas por lote. Sin embargo, este proceso se realiz en sistemas de biopilas que son usualmente empleados en composteo donde se tiene poco control sobre la evolucin de la composta. En general, cuando se habla de composteo existen distintos tipos de biorreactores a granescala donde se lleva unmejor control de los parmetros de operacin comosonla humedad delmedio,la aireacin del material, la adicin de tipo de tambor nutrientes, entre otros. Entre estos se pueden citar como los de rotatorio, los de charolas agitadas y estticas, y los de lechos empacados. El material a compostear permanece en ellos durante 7 o 14 das y posteriormente se pasa a un
sistema de biopilas donde permanece durante varios meses o ms para completar el proceso (Haug, 1993).
1.4. MTODOS DE ESCALAMIENTO

En cualquier tamao los equipos cuentan con tres cualidades que los
caracterizan: el tamao, la forma y su composicin. Dos objetos diferentes en tamao
y composicin pueden ser similares si poseen la mismaforma.La configuracin espacial y temporal de un sistema fsico se determina por las relaciones dentro de las magnitudes dentro del sistema mismo y no depende del tamao o la naturaleza de las unidades en el cual se miden estas magnitudes (Edgeworth y Wooldridge, 1957). De
estas cualidades surge el concepto de similitud entre equipos. Los principios de similitud se refieren a las relaciones existentes entre los sistemas fsicos de tamaos diferentes. Los principios de similitud ms importantes son cuatro (Green, 1990; Edgeworth y Wooldridge, 1957): Similitud geomtrica. Se define en trminos de correspondencia, dos
cuerpos son similares geomtricamente cuando para cada punto en uno de los cuerpos existe un punto correspondiente en el otro. Similitud mecnica. Comprende la similitud esttica, cinemtica y dinmica. Cada una de estas se considera como una extensin del concepto de similitud geomtrica. La similitud esttica se refiere a dos cuerpos que cuando son sometidos a unesfuerzo constante susdeformaciones relativas permanecen constantes. La similitud cinemtica se tiene cuando las partculas en dos cuerpos similares geomtricamente presentan lamisma posicin relativa en intervalos de tiempo iguales. La similitud dinmica se tiene cuando las relaciones de las fuerzas de una misma clase (gravitacional, centrfuga, entre otras) que actan sobre partculas de ambos cuerpos son iguales. Similitud trmica. Estasetiene cuando endos cuerpos se mantienen las correspondientes diferencias de temperaturas constantes, y ambos sistemas, si se encuentran en movimiento, son cinemticamente similares. Similitudqumica. Se tiene cuando dos cuerpos, similares geomtrica y trmicamente, mantienen los correspondientes gradientes de concentracin constantes a intervalos de tiempo correspondientes.
9
Estrictamente hablando para obtener cada uno de los estados de mencionados se requiere que se cumplan los anteriores, es decir, si geomtrica no pueden presentarse los otros y as, sucesivamente.
similitud no hay similitud
El anlisis dimensional es una tcnica para expresar el comportamiento de un sistema fsico en trminos de un nmero mnimo de variables independientes. Las cantidades fsicas son arregladas en grupos adimensionales consistentes en
relaciones de cantidades semejantes que velocidades,fuerzas,entreotras).Mantener ambasescalas permite conservartambin caracterizan el sistema (longitudes,
los gruposadimensionales
iguales en de y otra
los criteriosdesimilitud.Uncriterio
escalamiento consiste en mantener ciertas condiciones entre una escala
constantes para realizar el cambio de escala, es decir, mantener el valor de un grupo adimensional constante cambiando magnitudes las algunas de variables independientes que lo definen equivale a utilizar dicho grupo adimensional como criterio de escalamiento. un
Los
procedimientos escalamiento de sido han agrupados
en
y empricos, de acuerdo con la cantidad de fundamentales, semi-fundamentales conocimientos fsicos y qumicos que se necesitan para ponerlos en prctica
(Kossen, 1994b). La aplicacin de estos procedimientos incluye el mantener la similitud entre una escala y otra. A continuacin se hace una descripcin de cada uno de los grupos que se generaron de acuerdo a esta clasificacin:
1.4.1.
MTODOS FUNDAMENTALES
Estosmtodossecaracterizanporquepara llevarse acaboes necesario resolver los microbalancesdemomento,masa y calor,incluyendo la cinticas de conversin de sustrato a producto. Estos mtodos se subdividen en analticos y numricos, y esta subclasificacin sefundaen la manera en queseresuelven
los
microbalances, ya sea analticamente o por medio de algn mtodo apropiado(Kossen, 1994b).
numrico
Dentro de este grupo de mtodos se han hecho algunas aportaciones a la y Modak, realizaron estudios de simulacin de FMS. En 1994, Rajagopalan objeto de estudio transferencia de calor y masa en procesos de FMS, teniendo como la difusin deoxgenoenunprocesodeproduccindekoji.Aunquesolamente se
10
Revisin Bibliogrtifica
presentaron los resultados de nivel laboratorio, estetipode modelos sonun medio para predecir la transferencia de oxgeno y calor en reactores de mayor escala. Otro aporte en estesentidofue realizado por Gutirrez-Rojas et al., (1995), donde se como la estudia el comportamiento de Aspergillus niger al crecer sobre un soporte Amberlita IRA-900, embebido de medio de cultivo. El modelo propuesto por los autores relacion satisfactoriamente las variables involucradas en el proceso de FMS (formacin de biomasa, consumo de azcares, consumo de agua, valores de parmetros biolgicos que de otro produccin de CO, y evolucin de la temperatura), lo cual constituye una herramienta para estimar los modo son difciles de determinar y de inhibicin, entre otros). hicieron estudios sobre la (coeficiente de mantenimiento, constante de Monod
1990, Asimismo, Saucedo-Castaheda et al., en con yuca para el crecimiento de A. niger.
transferencia de calor empleando como modelo de estudio un biorreactor empacado
a cambiar las dimensiones de los equipos utilizados manteniendo la similitud geomtrica, y se predice el comportamiento del proceso en esta nueva escala.
1.4.2.
MTODOS SEMI-FUNDAMENTALES
Una vez resueltos
los modelos matemticos se procede
Estos mtodos requieren menor informacin de los sistemas biolgicos que
los mtodos anteriores (Kossen, 1994b). En este conjunto se encuentra el anlisis de

grupos adimensionales, y se basa en el hecho dequetodos los trminos en una relacin que describe un proceso fsico o qumico, tienen siempre el mismo valor. Para emplear los grupos adimensionales como criterio de escalamiento se requiere que los sistemas presenten similitud geomtrica durante el escalamiento (Kossen, 1994b). Adems, tambin se puede conservar la similitud bioqumica, lo que implica que se conserven las mismas condiciones en las que se realiza la reaccin biolgica de conversin, tanto en una escala como en otra. Dentro de este campo se han
y Biot de de calor (Saucedo-Castaeda et al., 1990), el nmero de Re para lechos empacados (Romano-Machado et al., 1996) como criterios para llevar a cabo el escalamiento.
propuesto los nmeros de Peclet calor de
Otro mtodo dentro de este grupo es aquel que consiste en mantener agua y calor en una escala como en otra constantes los balances de
11
(Saucedo-Castaeda, et al., 1992). Asimismoen el trabajo realizado por Roussos, en 1991, sobre la produccin de celulasas por Trichoderma harzianum se mantuvieron las condiciones iniciales de la materia prima y la tasa de aireacin especfica iguales en los biorreactores usados a nivel laboratorio y los de piloto.
1.4.3.
MTODOS EMPRICOS
Estos mtodos son los que se encuentran basados en la experiencia, y son aquellos que han prevalecido en el campo de las FMS. Dentro de estos mtodos se encuentra el que se denomina como "de prueba y error" y consiste en llevar a cabo los cambiosdeescalacon el objeto deestudiar el sistema y hacerlascorrecciones su los apropiadas hasta llegar a la escala deseada (Lonsane et al., 1992). Este mtodo se emplea, usualmente, cuando se carece de informacin acerca del sistema, de comportamientotrmico,de
su fisiologa,entreotrosaspectos
que sonimportantes
conocer.Aplicarestosmtododeescalamientopuederesultarinadecuadopues errores son, en ocasiones, muy costosos.
Tomandoencuenta
la carencia de informacinqueexisteparallevara se plantearon
cabo el escalamiento de biorreactores enprocesosdeco-composteo los siguientes objetivos.
12
2 1
OBJETIVOS
2. OBJETIVOS
2.1. OBJETIVO GENERAL

Desarrollar criterios de escalamiento para un biorreactor de lecho
empacado empleado en un proceso modelo de co-composteo para el tratamiento de suelos contaminados con hidrocarburos.
PARTICULARES 2.2. OBJETIVOS

1. Definir la composicin de una mezcla
experimental que incluya
suelo contaminado con hidrocarburos.

2. Ensayar y evaluar criterios de escalamiento basados en la
aireacin y los mecanismos de transferencia de calor que se presentan en biorreactores de 0.05 y 0.86 kg de lecho empacado. 3.Aplicar dichos criterios en el escalamiento de un escala de planta piloto. biorreactor de
14
3.
MATERIALES Y
MTODOS
3. MATERIALES Y MTODOS.
Paracumplircon los objetivosplanteados,se materiales modelo y mtodos analticos. emplearon los siguientes
3.1. SUELOS CONTAMINADOS CON HIDROCARBUROS.

Los suelos seleccionados para realizar el proceso de co-composteo fueron
muestreados de la zona inmediaciones de un pozo industrial de Cactus, en el Edo. de Chiapas, en las petrolero ya clausurado (Figura 3.1)
E l suelo, clasificado
como arcilloso, presenta las caractersticas que se muestran en la Tabla 3.1 :
Tabla 3.1 Caractersticas del Suelo Contaminado.
COMPOSICI~N:
Orgnica P Muestra. Materia Contaminado Suelo CARACTERSTICAS: pH del Suelo: inicial:
o/o
(4
3.13 11.77
ppm
Hg Pb Zn Cu
0.65 14.1 7.63
Ni
Cr
t
7.67
Humedad (g H20/g Mat.Seca.):
15.00
Capacidad de retencin agua de Densidad aparente (g/ml): Densidad real(g/ml): Porosidad:
0.25
1. l o 6
2.06 0.46 801 98 23.38 36.72 40.00
Hidrocarburos (mg/kg Materia Seca) Arena (%): Limo (A): Arcilla (%): Arcilla. Clasificacinde Textura: t: No detectado.
16
Area de muestreo
Figura 3.1 Mapa de localizacibn del Area de muestreo de suelo contaminado en Cactus, Chis
17
Matenales y mtodos
3.2. LODOS ACTIVADOS.

Los Iodos activados se recogieron de la planta de tratamiento de aguas residuales "Cerro de la Estrella", ubicada en la delegacin Iztapalapa, de la Ciudad un embudo de de Mxico. Los Iodos se pasaron a travs de empleando una cama de gasa de algodn para retener los filtracin rpida slidos, stos se
consideran como la biomasa presente y se emplearon como inculo de la mezcla a co-compostear.
3.3. BAGACILLO DE CAA.

El bagacillo de caa se obtuvo del
Ingenio Independencia, en Martinez de
la Torre, Ver. Una vez que fue muestreado el bagacillo de caa se sec para procurar su conservacin alcanzndose una humedad entre el 5 y 9%. El bagacillo fue tamizado para determinar la distribucin de tamaos de partcula. Adems una la Figura 3.2 se muestra la porcin fue molida en un molino Pulvex 200. En distribucin de tamao de partcula obtenida a travs de tamices Tyler en el bagacillo de caa sin moler (a) y molido (b).
Tamao de partcula (mm)
Tamao de partcula (mm)

(a) y molido en un
Figura 3 . 2 . Distribucin de tamaRo de partcula en bagacillodecaasinmoler molino Pulvex 200 (b).
18
Materiales y
mtodos
3.4. NUTRIENTES PARA EL CRECIMIENTO MICROBIANO.

Se utiliz sacarosa como fuente de carbono y energa de fcil degradacion con el fin de garantizar el crecimiento inicial de los microorganismos degradadores. A la mezcla se aadi el medio mineral (Goodhue et al., 1986) quese Tabla 3.2. detalla en la
Tabla 3.2. Solucindeelementos compostear (Goodhue eta/, 1986).

~~~~~~
trazautilizados en h mezcla a
Sulfato de magnesio.7H20 Sulfato ferroso.7H20 manganeso.H20 de Sulfato Cloruro de sodio. Cloruro de calcio.2H20 Molibdato de sodio.2H20 Sulfato de zinc.7H20
25.00 g 2.80 g
1.70 g
0.60 g
0.10 g 0.10 g
0.60 g 1 .o0 L
cido clorhdrico, 1 M.
3.5. P R E P A R A C I ~DEL N SISTEMA EXPERIMENTAL

La mezcla experi-mental de bagaciilo de caa-suelo contaminadoaguaqueseemple tiene la composicin que se presenta en la Tabla 3.3. El diseodeestamezcla modelo se discute en el captulo 5. La preparacin de la mezcla experimental se lleva a cabo de acuerdo ai esquema que se presenta en la Figura 3.3.
19
Materiales y mtodos
Tabla 3.3. Composicin de co-composteo. Componente Suelo contaminado caa activados de Bagacillo Lodos Sacarosa
! a mezcla modelo para el
Fraccin (% p/p) con hidrocarburos

13.0 14.0
2.0 7.0 4.0
K2HP04 y urea
minerales sales de Solucin
Agua
0.3
59.7
" .
Bagacillo de caa
"
Sacarosa
+
Medio mineral
+
Suelo contaminado
Mezcla Experimental Modelo
W
Mezclado Mezclado
W
Mezclado
S
~
U
Biorreactor
testigo
Determinacin de aw, pH, humedad, 0 2 e hidrocarburos temperatura, COZ,
Figura 3.3. Esquema de preparacin de la mezcla experimental modelo
20
Maferiales y metodos
3.6.
TCNICAS ANALTICAS
REALlZAClN DE
Y EQUIPOS EMPLEADOS LA EN LOS EXPERIMENTOS
Las tcnicas analticas que se emplearon durante la realizacin del trabajo experimental se describen en los prrafos siguientes.
3.6.1.
HUMEDAD
La humedad se determina por prdida de peso, de acuerdo al
procedimiento siguiente. En una charola desechable de aluminio, a peso constante, se colocaron de 1 a 3 g de muestra. Se secaron en una estufa a 60% durante 24 horas Se pes la muestra seca. Se calcul como sigue:
o/o
Humedad =
(rHIg;) 1
*
O0
donde: PMH:Pesode muestra hmeda. PMS: Peso de muestra seca. PCh: Pesode la charola.
3.6.2.
pH EN BAGACILLO DE C A A
El procedimiendo fue empleado por Mendoza (1994):

Se pes un gramode muestra hmeda. Se agreg 10 ml de agua destilada. Se mezcl perfectamente y se dej reposar durante 30 minutos
21
Materiales y mtodos
Se determin el pH directamente en un pHmetro Conductronic pH20, previamente calibrado.
3.6.3.
pH EN S U E L O
La determinacin potenciomtrica de la actividad de H' en una suspensin
de suelo en agua se realiza de acuerdo al siguiente procedimiento (Garcia, 1981): Se pes 10 g de suelo seco (al aire) y de malla menor de 2 mm en un matraz. Se aadi 25 m 1 de agua destilada. Se agit durante 1 minuto. Se dej reposar durante 1 hora y se midi el pH en el sobrenadante. Se volvi a agitar y se midi, inmediatamente, el pH.
3.6.4.
ACTIVIDAD DE AGUA
La a , se mide como la relacin entre la presin de vapor de agua de una
muestra y la presin de vapor de
agua pura a la misma temperatura. Se utiliz un
equipo AquaLab, modelo CX-2 el cual emplea la tcnica de punto de roco en espejo fro. El equipo mide la a , al enfriar y calentar repetidamente un espejo de lmina de acero en el interior del aparato, en el cual se forma el roco
y es secado
sucesivamente. Este proceso es acelerado mediante una corriente de aire generada por el ventilador del aparato. Cada vez que seforma el rocosobre el espejo, el equipo mide la temperatura y la a , de la muestra, los valores son almacenados y comparados sucesivamente en cada repeticin. Cuando los valores consecutivos de a , tienen una diferencia menor a 0.001 se completa la medicin y se reporta el valor de a , encontrado y la temperatura de la muestra.
El procedimiento es el siguiente:
22
Materiales y mtodos
Se tom una muestra y se coloc en la celda de determinacin, cuidando llenar la celda slo hasta la mitad para proteger los sensores en el interior del instrumento. Se inici el proceso de determinacin y se esper hasta que el aparato valores de a , y temperatura de la muestra. report los
La calibracin del instrumento AquaLab, CX-2, se realiz como sigue:

Se prepar una solucin de cloruro de sodio grado reactivo con agua desionizada. Se llen la celda de determinacin hasta lamitad . , cloruro de sodio, y se determin la a con la solucin saturada de
La lectura obtenida coincidi con los valores que se encuentran en la Tabla 3.4.
Tabla 3.4. Valoresde ,.a , parauna solucin saturada de cloruro de sodio empleada en h calibracin del instrumento Aqualab CX-2
Temperatura PC) a ,
5 10 15 20 25 30 35
0.757f0.003 0.757+0.002 0.756+0.002 0.755+0.001

0.753+0.001
0.751f0.001 0.748+0.001
3.6.5.
EXTRACCIN DE
HIDROCARBUROS POR S O X H L E T
Es un procedimiento para extraer componentes no voltiles y voltiles de slidos como suelos y Iodos (EPA, Mtodo 3540). Estemtodo garantiza e l intimo contacto de la matriz de la muestra con el solvente. Es un mtodo aplicable al aislamiento y concentracin de compuestos orgnicos insolubles o poco solubles en agua. La extraccin se realiza como se indica a continuacin:
23
Materiales y mtodos
La muestra debe estar libre de objetos extraos (hojas, varillas, rocas, etc.) Se mezcl 10 g de muestra y 10 g sulfato de sodio anhidro y se colocaron en el dedal de extraccin de un equipo Soxhlet de 250 m 1 de capacidad. Seaadieron 140 ml desolventedeextraccin(hexano:acetona de ebullicin en el matraz de ebullicin del equipo Soxhlet. Se extrae la muestra durante 16-24horas colocando el equipo Soxhlet a reflujar el solvente de extraccin a 70' C. Se transfiri el extracto a un charola de aluminio a peso constante solvente hasta sequedad a 3 5 ' C. Se pes el residuo de la charola. Se calcul la cantidad de hidrocarburos extractables usando la siguiente frmula: HC = donde: HC: Concentracin de hidrocarburos M: Pesodelcapacillodealumnio (g/gmezcla) MMs : Peso del capacillo de aluminio MI: Peso de la muestra inicial (9). con muestra seca (9).
3.6.6.
AZCARES TOTALES
1:l) y las perlas
y se evapor el
(MMs - M). MI '
sin
muestra
POR EL MTODODE F E N O L - S U L F ~ R I C O
Porestemtodosedeterminanazcaressimples,oligosacridos derivados siguiendo el procedimiento siguiente:
y sus
A. PreDaracin de muestra.
Se tom 1 g de muestra y Se dej reposar durante
se agregaron 10 ml de agua desionizada.
10 minutos.
24
Materiales y mtodos
De la suspensin se tomaron 3 ml y se centrifug a 5000 rpm durante 10 minutos. Setomaron 3 ml de la solucinsobrenadante Millipore a 0.45 pm.
y se filtraron atravsdeun
filtro
B. PreDaracin de la solucin reactivo.
Se prepar una solucin de 1 mg de fenol grado reactivo por
m l de cido sulfrico
grado reactivo. Esta solucin debe prepararse al momento de realizar los anlisis. C. Determinacin de azcares totales. Se adicionaron 2 ml de la solucin reactivo a 1 ml de la muestra o estndar. Se mezclaron y se dejaron en reposo durante 10 minutos en bao de hielo. Se colocaron las muestras a bao Mara a 30% durante 20 minutos. Se leyeron las muestras a 480 nm, se prepar un blanco con agua desionizada la misma forma que las muestras. D. Preparacin de la curva estndar. Sepreparunasolucinestndar con 0.25 g de sacarosadisueltosenaguay en
aforado a 250 ml. Para preparar la curva estndar se mezclaron las cantidades de reactivos que se muestran en la Tabla 3.5. La curva estndar se prepar y ley al mismo tiempo que las muestras.
25
Materiales y mtodos
Tabla 3.5 Curva estndar de sacarosa.

SOLUCIN PATRN
VOLUMEN DE AGUA
CONCENTRACI~N
@I)
O0
1O0 1O00
(rng/l)
O
900 800 700

600
10
200 300
400
20
30
40
500 600 700 800
500
50 60 70 80 90 1 O0
400
300
200 1O 0
O0
900
1 O00
3.6.7.
DENSIDADAPARENTE DEL SUELO

La densidad aparente del suelo se determina como sigue (Garcia, 1981):
Se pes una probeta de 10 o 100 ml (vaca). Seagregsuelohasta del laboratorio. Se agreg suelo hasta completar los 10 ml, se pes la probeta con el suelo. Serealiz el siguienteclculo:
los 10 ml, golpeando ligeramente 10 veces sobre la mesa
D.A.=
donde ,
D . A . : Densidad aparente
PMB-PM
PMB : Peso de la probeta ms suelo PM : Peso de la probeta vaca,
V :Volumen.
26
Materiales y mtodos
3.6.8.
DENSIDAD REAL La densidad real del suelo se determin como sigue (1981):
Se pes un matraz aforado vaco de
50 ml y se agregaron 5 g de suelo.
el matraz por
Se aadi una tercera parte de agua destilada, cuidando de no mojar fuera, con movimientos de rotacin suave se desaloj el aire.
Se dej en reposo durante 5 minutos y se llen el matraz de agua hasta el aforo. Se pes el matraz con suelo y agua. Se pes el matraz slo con agua. Se calcul la densidad real como sigue:
D. R. =
donde:
S
S+A-(s+a)
D.R.: Densidad real S: Peso del suelo solo.

3.6.9.
A: Peso del agua sola. (s + a): Peso del agua y el suelo.
DETERMINACIN DELAPOROSIDAD
Empleando los datos anteriores, calcule:
o bien,
E,
=1 "
D. A. D.R.
donde,
E,
es la fraccin de espacios vacos en la mezcla (Garcia, 1981).

DENSIDADREAL ENLASMEZCLABAGACILLO-SUELO-AGUA
3.6.1 o.
Se pes una probeta limpia y seca (50 o 100 ml), y empacar la mezcla experimental teniendo en cuenta la misma densidad de empaque que se emplear en los experimentos hasta un volumen conocido.
27
Materiales y mtodos
Se pes la mezcla experimental en la probeta. Se aadi aceite ligero (aceite para cocinar), hasta una tercera parte del volumen ocupado por la mezcla, se golpe suavemente con el fin de desalojar el aire que se encuentre entre las partculas. Se dej en reposo 5 minutos y se virti aceite nuevamente hasta cubrir el volumen empacado con la mezcla. Se pesaron la mezcla y el aceite juntos.
La densidad real se calcul usando la siguiente frmula:

D.R.=
%aceite
S+A-(s+a)
donde: D.R.: Densidad real.

paceite: Densidad del aceite.
( S + a):
S: Peso de la mezcla sla. A: Peso del aceite

3.6.1
Peso de la t-nezcla
Y el
aceite juntos.
1.
POROSIDAD DE UNA MEZCLA DE BAGACILLO-SUELO-AGUA
Se emplearon los datos de densidad real de la mezcla y la densidad de empaque, la cual se consideraron como la densidad aparente de la mezcla. Se aplicaron las frmulas anteriormente explicadas para la porosidad del suelo.
3 . 6 . 1 2.
PRDIDA DE MATERIA SECA

Para determinar la prdida de materia seca las columnas empleadas en los
experimentos se procede como se indica a continuacin: Se pes al inicio del co-composteo cada columna. Se pes nuevamente la columna al momento del muestreo.
28
Materiales y mtodos
Se determin la humedad delamezcla realizar el muestreo.
experimental al inicio y al momento de
La prdida de materia seca se determin a travs de la siguiente frmula:
%PMS
donde:
MSI-MSF,,OO
MSI
%PMS: Porciento de prdida de materia seca MSI: Materia seca inicial

MSF: Materia seca final
3.6.1 3.
RELACIN
CARBONOINITRGENO
(C/N)
La determinacin de la relacin C/N se realiz en un analizador elemental Perkin Elmer 2400 Series H. La muestra es oxidada en un ambiente de oxgeno puro lo cual produce C02, H20 y N2. Los elementos, tales como halgenos y azufre, son removidos de lamezcla. Los gases resultantes son homogenizados y ajustados a liberados a condiciones exactasde presin, temperatura y volumen.Despusson travs de una columna y se detectan por conductividad trmica. Los resultados que reporta el analizador se expresan en relaciones molares,por conversin Peso/Peso.
3.6.14.
lo cual se realiza la
REGISTRO EN
LNEA DE
coz Y 02.
Los gases de salida de las columnas y los biorreactores fueron analizados por un equipo denominado Metabolmetro, desarrollado enla UAM-lztapalapa, que determina las concentraciones de dixido de carbono, oxgeno en los gases y el flujo de salida de los biorreactores. Los detectores empleados en este sistema describen a continuacin:
Detector de
se
C o p : Espectrofotmetro de
absorcin en el
infrarrojo, Servomex
1505. El diseo del sensor est basado en la configuracin de un solo haz una sola longitud deonda monocromtica hecha pormedio de un litro ptico. Este
29
Materiales y mtodos
sensor no
utiliza partes movibles debido
al sistema de pulsado
de la fuente mximo
infrarroja. Otra caracterstica de este sensor es su corto periodo de calentamiento.
lo cual permite que todo el sistema est listo para funcionar en un tiempo de 5 minutos.
Detector de
02: Paramagntico Servomex
11 11/000,
su
principio
de al
funcionamiento se basa en que las
molculas de oxgeno se orientan cuando
gas se le aplica un campo magntico, el sensor consta de una varilla con esferas en los extremos suspendida en un campo magntico dentro de una cmara que se sella cuando entra el gas. La varilla es empujada fuera del campo con una fuerza de torque proporcional a la concentracin de O2 en la muestra, para contrarrestar este torque el sistema genera una corriente de retroalimentacin torque y se mide por un voltaje de salida.
Medidorde
proporcional al
flujo delamezcladegases:
NeumotacmetroHansRudolfInc.
8300A, su principio de funcionamiento se basa en detectar la diferencia de presin que se crea en el flujo de gases al pasar por una malla muy fina, la diferencia de presin se convierte en una seal elctrica proporcional al flujo de gases.
El metabolmetro posee una computadora provista de un desarrollado tambin en la UAM-lztapalapa, que permite realizar la
automtica de los detectores, la programacin de la frecuencia de
programa, calibracin los anlisis, y el
almacenamiento de detectores, la programacin de la frecuencia de los anlisis, y el almacenamientodeforma continua de los resultadosde 11 lneasdemuestreo. La calibracin se realiz cada 4 horas mediante el suministro de flujos de N2 y de una mezcla de COZ y O2 de concentraciones conocidas.
30
4 .
EQUIPO EMPLEADO EN
EL CO-COMPOSTEO
4.
EQUIPO EMPLEADO PARA EL CO-COMPOSTEO
Para realizar el
co-composteo
Salida de aire algodn
se emplearon columnas de fermentacin de 50 g de capacidad (Raimbault, M. & Alazard, 1980), Figura 4.1. Cada columna se acopla a un humidificador de aire con el findeevitarelsecado material empacado durante el co-composteo. de Tambin emplearon biorreactores de
30 kg decapacidad,
del proceso se acero

Material a cocompostear
Columna de Ferrnentacion
inoxidable de 1 kg, Figura 4.2, y de Figura 4.3b;tanto unos como otros cuentancon trampas de humedad colocadasen la parte inferior de la estructura del equipo.
algodon
El aire con que se alimentaron estos equipos se satur previamente en humedad para evitar secado el del material. En la Figura 4.1 se muestra el humidificador empleado en las columnas de vidrio y en la Figura 4.2, se aprecia el empleado en los biorreactoresde 1 kg de capacidad. Para saturar de humedad el aire de alimentacin del biorreactor de 30 kg emple se una autoclave permiti, tambin, modificada, lo cual controlar temperatura la del aire (Figura 4.3). En la Tabla 4.1 se resumen las caractersticas ms importantes de los equipos empleados.
5cm
Figura 4.1. Columnas de fermentacion hurnidificador para realizar el proceso co-cornposteo a escala laboratorio.
y de
32
Equipos empleados para el co-composfeo
Salida de aire Humdificador
Maten?
Entrada de aire
Biorreactor de acero inoxidable de 1 kg de capacidad
lOcm
Figura 4.2. Biorreactor de acero inoxidable de 1 kg de capacidad para estudiar el co-composteo a escala laboratorio indicando la posicidn de los termopares ( )
Tabla 4.1. Caractersticas principales de los equipos empleados en el proceso de co-composteo de (m) vidrio Columna de Biorreactor Biorreactor II
0.035 0.1 10
0.335
Altura Dimetro Equipo calentamiento (m)

0.1 5 0.28
(kg)
0.05 0.864 26.5
1.o0
Cmara cmara Chaqueta y calentamiento de aire
4.1. CONTROL DE LATEMPERATURA.

Las columnas y los biorreactores de 1 kg se colocaron en una cmara con temperaturacontrolada. El aire de la cmarasecalent y serecirculmediante un extractor y calefactoracoplados al sistemadedistribucinqueposee la misma. De
33
Equipos empleados para el co-composteo
a)
I
I
r._.___._._
Aire
seco
DeterminacinlRegistrO
.
! :
I .
r'
Sistema de saturacin de aire

Aire seco
Reactor de
L
DeterminacinlRegisl deCO 2 / 0 2
Figura 4.3. Sistema de co-composteo empleando un reactor de acero inoxidable de 30 kg decapacidad: a) Columnas testigo en h cmara de temperatura controlada; b) Biorreactor acoplado a sistema de saturacin de aire de alimentacin y sistema de recirculacin de agua con control de temperatura; c ) Instrumentos para b captura y registro de datos de temperatura y concentracin de COZ y 02.
34
este modo, las columnas siguieron la misma historia trmicaque mediante un dispositivo de medicin en lnea de la temperaturadel cmara.
presentaron los interior de la
biorreactores durante el co-composteo (Figura 4.4). La temperatura se monitore
acopl una El biorreactor de 30 kg cuenta con chaqueta, por loquese bomba a un bao de temperatura para controlar la temperatura del biorreactor, Figura 4.2. Los termopares empleados se acoplaron en linea a una computadora y se emple el software DastemprM para registrar las temperaturas durante los experimentos realizados. El registro de temperaturas se realiz cada hora.
35
Vista lateral
Vista superior
l m
Figura 4.4. Cmara de control de temperatura: l. Cmara de acrlico; 2 . Biorreactor de acero inoxidable: 3. Columnas defermentacintipo Raimbault; 4. Sistema dedistribucinde aire; 5. Recirculador de aire; 6. Calefactor de aire; 7 . Humidificador para el biorreactor.
36
5 .
DISEO DE LA COMPOSlClN DE LA MEZCLA EXPERIMENTAL PARA EL CO-COMPOSTEO
5.
DISEO DELA COMPOSICIN DE LA MEZCLAEXPERIMENTAL PARA EL CO-COMPOSTEO

La degradacin de los hidrocarburos depende de factores como la presencia
de aceptores deelectrones adecuados (el oxgeno en el caso de sistemas aerobios), de la presencia de agua suficiente para el crecimiento microbiano y la presencia de un sustrato susceptible de emplearse como fuente de carbono y energa, entre otros (Cookson, J.T., 1995). Por lo anterior, determinar las proporciones de los componentes de la mezcla experimental que contengan estos factores es importante.
5.1. METODOLOGA DE MEZCLAS EMPLEADA

5.1 .l.
DEFINICI~ DE NVARIABLES
El suelo contaminado tiene una capacidad de retencin de agua (CRA) muy
baja, 0.25 g H,O/g Materia Seca (MS), lo cual significa que difcilmente podra alcanzar valores de humedad superiores al 20 Yo, sin escurrimiento. Entre el 17 Yo y el 20 o/o se tienen valores de a , adecuados para el crecimiento microbiano (Du Preez et al., 1992). Sin embargo, un rango de humedad tan pequeo resulta restrictivo para el proceso, ya que un descenso ligero en la humedad provocara que la a , disminuyera drsticamente, o bien, un aumento de la humedad provocara escurrimiento del agua ocupando los espacios entre las partculas, disminuyendo as la transferencia de oxgeno en la masa. El bagacillo de caa se utiliz como agente de volumen para facilitar la aireacin y la incorporacin de nutrientes y agua al medio. El bagacillo de caa tiene una CRA aproximada de 4 g H,O/g MS, es decir, puede alcanzar valores de humedad cercanos al 80%, sin escurrimiento de agua. En este material los valores de a , adecuados parael crecimiento microbiano se sitan en un rango ms amplio de humedad, que va del 40 al 80 Yo. Como fuente de inculo se aadieron Iodos activados a la mezcla experimental, ya que se ha demostrado su efectividad en el co-composteo (Cole et al, 1995; Beaudin et al., 1996).
Composicin de la mezcla experimental modelo
Los componentes de la mezcla se agruparon para hacer nfasis en aquellos que representan las fracciones ms importantes. As, la sacarosa, la urea y el fosfato de potasio dibsico se consideraron como parte del bagacillo activados se tomaroncomopartedelsuelocontaminado de caa. Los Iodos y la solucin de sales minerales se incorporaron en la fraccin de agua. De este modo se definieron nicamente tres fracciones principales: suelo contaminado, bagacillo de caa y agua. Las variables de respuesta, actividad de agua ( a , ) y porosidad
(E,,),
son
propiedades que dependen slo de las cantidades relativas de los componentes de la mezcla. Para determinar la relacin entre las variables de respuesta y la composicin de la mezcla seemple explica en este captulo. 5.1.2. DELIMITACI~N DEL REA DE EXPERIMENTACIN la metodologa de superficie de respuesta (MSR) que se
El universo de mezclas que se puede generar con los componentes citados se representa esquemticamente mediante un diagrama de tres fases en la Figura 5.1,
donde cada lado del tringulo representa cada uno de los componentes principales (en fraccin), variando entre O y 1. Sin embargo, existe slo un conjunto de mezclas que
los requerimientos necesarios para llevar a cabo el proceso de cumple con co-composteo, esdecir, garantizando la disponibilidad deagua,la aireacin dela
mezcla, y adems, contener la mayor cantidad posible de suelo contaminado. Esta rea delimitada, se muestra sombreada en la Figura 5.1 y sus lmites son: a) Fraccin de suelo contaminado: b) Fraccin de bagacillo de caa: c) Fraccin de agua: de 0.00 a 0.40 de 0.20 a 0.60 de 0.40 a 0.80
El rea resultantedebemuestrearsesistemticamenteparaobtener las superficies de respuestasrelativasa las variables a , y E , . Para tal propsito se
planearon los experimentos siguientes Simplex-Centroide. de acuerdo un adiseo del tipo
39
Composicin dela mezcla experimental modelo
1 .o
0.4
fs
0.0
Figura 5.1 Diagrama detres suelo-bagacillo-agua que incluye rea el de
fasesde
lasmezclas de
y los puntos de muestre0 de un experimentacin de agua; f,, diseo Simplex-Centroide. I , , fraccin fraccin de bagacillo decaa;y f , , fraccindesuelo contaminado.
(o)
5.1.3.
DISEOEXPERIMENTALTIPOSIMPLEX-CENTROIDE
El diseo simplex-centroide se aplica eneste tipo de anlisis cuando se desea estudiar el efecto de los componentes de una mezcla sobre una variable de inters. Las proporciones de cada componente en la mezcla no son independientes entre s, es decir, la variacin en la proporcin deuno afectaa las de los otros (Montgomery, 1991). Estos componentes cumplen la siguiente condicin:
cxi=1
(5.1)
si se aplica la condicin anteriora la mezcla de estudio se genera la siguiente ecuacin: fa + f,
+ f,
=1
Cornell, (1981), propone un diseo simplex-centroide para seleccionar los puntosdentrodeluniversodemezclas(Figura 5.1) paraformar la superficie de
40
222257
respuesta. En la Tabla 5.1 se muestra la composicin de cada punto seleccionados. La composicin detallada de dichos puntos se muestra en el Anexo A.
El modelo estadstico para tratar este tipo de diseos experimentales ha sido propuesto, anteriormente por Scheff, (1963), donde la ecuacingeneral es la siguiente:
Que en el caso de la mezcla suelo-bagacillo-agua se convierte, para laa, en: a , = Prf, + Pzfb +P3fs
+PIZfafb + P13fafs + P23fbfs +P12Sfafbfs
(5.4)
y para la e , es:
Obsrvese que las ecuaciones
5.3, 5.4 y 5.5 carecen de
trmino
independiente ya que la respuesta se considera slo funcin de las fracciones de los componentes de la mezcla y de ningn factor ajeno a ellos.
5.2. EFECTO DEL BAGACILLO DE CAA, SUELOCONTAMINADO Y AGUA ENLA

aw Y LA & , DEL MEDIO DE CO-COMPOSTEO.
Los resultados obtenidos de la a ,
y la
E,
se muestran en la Tabla 5.1. Los
valores de los componentes corresponden a las mezclas planteadas y se expresan en fraccin peso.
41
Tabla 5.1. Composiciones de los puntos de muestre0 deacuerdo al diserio Simplex-centroide , y E, obtenidos experimentalmente. (expresadas en fraccin msica), con los resultados de a
Composiciones Mezcla 1 2 3 4 5 6 7 8 9
0.00
fs
fa
X
a ,
0 . 1 03 2.12 4.24 5.66 2.12 3.54 2.12 0.70 2.83

0.00
X
EO
fb
0'1 o2 1.90 3.16 1.40 0.71 2.12 0.86 0.56 0.17 1.34 0.64
.40
0.20
0.00
0.00
0.40 0.40 0.80 0.60 0.40 0.60 0.53 0.46 0.66 0.46
0.964 0.884 0.983 0.971 0.926 0.943 0.954 0.957 0.968 0.922
0.748 0.599 0.649 0.683 0.675 0.676 0.699 0.744 0.694 0.664
0.60 0.20 0.20 0.40 0.40 0.33 0.26 0.26
0.20
0.20
0.14
0.28
0.08
x : Media de los valores experimentales. o: Desviacin estndar de los valores experimentales
10
0.08
0.46
0.71
Los valores de a , que se obtuvieron varan desde 0.884 hasta 0.983. La
E,
vara en un rango ms amplio de valores que va desde 0.599 hasta 0.748, mayores al determinado en el suelo contaminado, 0.463. Esto significa que existe una mayor fraccin de espacios vacos con lo que setendr una mejor aireacin en el material.
Los coeficientes de los trminos de los modelos de regresin mltiple para fueron estimados por el paquete Statistical Package for Social Sciences for
a ,
E,
Windows'95, SPSSTMversin 7.5, y se presentan en las ecuaciones 5.6 y 5.7. Los
valores del coeficiente de correlacin (R') para ambos casos fue de 0.999, lo cual indica que los modelos explicansignificativamente las respectivas respuestas.
42
A partir deestos modelos estadsticos se generaron valoresde
a ,
E,,
para ello se emplearon composiciones que caen dentro del rea experimental para obtener las superficies de respuesta correspondientes. El diseo simplex-centroidese puede interpretar como un sistema de coordenadasno ortogonales, es decir, que entre los ejes (cada lado del tringulo) no hay 90" de abertura. Por ello, para graficar las superficies a travs del paquete Surfer Access System versin 4.07 para DOS se transformaron las coordenadas a un sistema ortogonal de acuerdo al procedimiento que se explica enel Anexo A. En la Figura 5.2a se presentan las curvas de nivel que corresponden a la a . , Se observa que este parmetro aumenta conforme aumenta la fraccin de agua y de suelo. Sin embargo, existe una disminucin de la a , conforme aumenta la fraccin de bagacillo de caa, esto se debe a que la fraccin de agua retenida tambin disminuye. La superficie de respuesta de la a , (Figura 5.2b) muestra una zona con
valores elevados donde la a , vara poco. Esta regin se ubica en valores de la fraccin deagua elevados y de fraccin de bagacillo bajos. Conforme la fraccin deagua disminuye la superficiemuestraundescenso, disminuir la fraccin de suelo contaminado. En la Figura 5 . 2 ~ se muestran las curvas de nivel que corresponden a la de la mezcla. Puede observarse que al disminuir la fraccin de agua la
E,
quese
hacemspronunciado
al
E,
aumenta,
asimismo se incrementa cuando aumenta la fraccin de suelo presente en la mezcla. , se asocia a la De hecho, en la Figura 5 . 2 ~ se observa que el mayor cambio en la E variacin de agua en la mezcla. Posiblemente, debido a que el volumen del bagacillo de caa aumenta en funcin del agua que absorbe. La superficie de respuesta de la E , (Figura 5.2d) presenta la forma de una superficie curva a lo largo de su centro. En ella se aprecia un mximo de la E, cuando la fraccin de agua es mnima (0.40) y la de suelo contaminado es mxima (0.40). La curvatura se hace ms pronunciada conforme vara la fraccin de bagacillo de caa (Figura 5.2d). Y adems, la superficie desciende paulatinamente hasta que (0.80). de agua alcanza su valor mximo la fraccin
43
0.4
60 O
0.00
0.20
O .4
60
Figura 5.2. Curvas de nivel y superficie de respuesta de a, (a y b) y para la Eo (c y d) respectivamente. Punto de operacin; f a , fraccin de agua; f , , fraccin de bagacillo de caa; y Area de operacin; f,, fraccin de suelo contaminado.
44
5.3
DEFINICI~N DE LAS CONDICIONES DE CO-COMPOSTEO

Las curvas de nivel de a , (Figura 5.2a) muestran que no toda el rea
delimitada inicialmente cumple con las condiciones adecuadas para el crecimiento microbiano, por lo cual fue necesario definir una zona segura de operacin dentro del rea experimental analizada. Considerando que los valores de a , ms adecuados para el crecimiento microbiano se encuentran por encima de 0.95 se establece que el lmite inferior de la fraccin de agua sea de
U
0.9
o)
m al
I f
0.55
(Figura 5.2a). El lmite superior se fija en funcin de experimentos futuros en los que se emplearn tamaos de partcula mayores para la preparacin de la mezcla de co-composteo. El tamao promedio de partcula de bagacillo de caa ms grande que se emplear esde 6.5 mm, el cual retiene una fraccin mxima de agua de
0.66, aproximadamente, como se aprecia
0.7
0 6 .-
4 6 8 Tamao Prom. de partcula (mm)
en la Figura 5.3.
Figura 5.3. Capacidad de retencin de agua en funcin del dimetro promedio de partcula de bagacillo de caa
De esta forma, la zona segura de operacin queda limitada por las siguientes cotas: a) Fraccin de agua: de 0.55 a 0.70, 0.20 a 0.45,
0.00 a 0.25,
b) Fraccin de bagacillo de caa: de

c) Fraccin de suelo contaminado: de
segn se aprecia como el rea sombreada en las Figuras 2a y c. La

E,,
dentro de esta rea (Figura 5 . 2 ~ ) presenta valores de 0.64 a 0.70. La
zona segura de operacin se coloca a un lado del mximo de la superficie de respuesta, es decir,no atraviesa la cuwa central (Figura 5.2d).
45
Dentro de esta rea se seleccion el punto de operacin que corresponde a la siguiente composicin: fraccin de agua, 0.60; suelo contaminado, 0.15; y bagacillo de caa, 0.25. En la Tabla 5.2 se muestra la composicin detallada de la mezcla en el punto de operacin seleccionado que se sealaen las Figs. 5.2a, b, c y d. La seleccin del punto de operacin se bas en el hecho de que la mezcla debe contener la mayor cantidad de suelo posible. Dentro de sta las combinaciones que contienen la mayor fraccin de suelo contaminadose localizan en el lado izquierdo del diagrama de fasesy cercano al lmite inferior (Figuras 5.2a y c).
Tabla 5.2. Composicin detallada de la mezcla experimental en operacin seleccionado para el co-composteo
~~~ ~
el punto de
Componente Componente principal Subfraccin Fraccin

fb
caa
deBagacillo Sacarosa
K,HPO,
0.14
0.07
y urea
0.04
0.25
fs
contaminado Suelo activados Lodos
0.13 0.02 0.597

0.003 0.60 0.15
fa
Agua minerales Sales
Esta mezcla mantiene una relacin en peso bagacillo de caa a suelo contaminado aproximada de 1 a 1, lo cual concuerda con lo que se indica en la literatura (Beaudin, et al., 1996; Breitung, et al., 1996; Cole, et al., 1995). Donde se han empleado relaciones en peso de agente de volumen a suelo contaminado semejantes. Siendo el agente de volumen basura de jardines, la cual incluye, hojas y varas, o bien, compostas de distintos orgenes.
46
Composicin de l a mezcla experimental modelo
5.4. CONCLUSIONES
El uso de la MSR para predecir el comportamiento de a ,
experimentos de degradacin por y de la
E,
de una
mezcla compleja en funcin de su composicin y permite una mejor planeacin de los co-composteo. Esto implica un ahorro tanto econmico como en horas de trabajo, ya que sustituye los mtodos de ensayo y error para encontrar una zona segura para llevar a cabo el co-composteo. De la evidencia experimental se puede concluir que las mezclas que se encuentren en el rea de operacin se tendrn niveles de a , adecuados parael crecimiento de microorganismos. La mezcla seleccionada para la realizacin de la siguiente parte experimental contendr las fracciones principales de: 0.15 de suelo contaminado con hidrocarburos, 0.25 de bagacillo de caa y 0.60 de agua. Con lo cual se alcanza el primer objetivo especifico de la presente tesis, el diseo de una mezcla modelo parael co-composteo.
47
... pero se djo l i a r p o r su conviccin de que Ibs seres humanos no nacen para siempre eldia en que sus madres Ibs aCum6ran, sino que Ih
vida Ibs o6liga otra vez y mucfiasveces a pan'rse a s mismos...
S;a6rielGarcia %fazquez, TCamor en cos tiempos ddclkra", 1985.
6.
BIODEGRADACIN DE HIDROCARBUROS A ESCALA LABORA TORI0
6.
BIODEGRADACI~N DE HIDROCARBUROS A
ESCALA
LABORATORIO
Antes de llevar a cabo el escalamiento de un proceso biotecnolgico debe estudiarse detenidamente para establecer la estrategia ms adecuada para realizar el cambio de escala (Lonsane et al., 1992; Kossen, 1994). La aireacin en los sistemas de biorremediacin de suelos es muy importante (Cookson, 1995), por ello enel presente captulosedescribeelestudiodelefectode la aireacin sobre la degradacin de los hidrocarburos presentes involucrando parmetros que incluyen trminos de escala. Para realizar los experimentos a nivel laboratorio la mezcla anterior satisface los requerimientos de experimental diseada en el captulo
disponibilidad de agua y nutrientes para la actividad microbiana.
La aireacin en un lecho empacado depende del gasto de aire, de la

la mezcla,
E,
de
y de la relacin entre ellos. Para mejorar la aireacin en un lecho empacado se pueden seguir dos estrategias, la primera es aumentar el gasto de aire que atraviesa el lecho, y la segunda, aumentar el tamao de la partcula empacada con lo que se incrementa la E,. Un medio para estimar la aireacin en un empaque es a travs del nmero de Reynolds (NRe)que es un relacin adimensional definida para
lechos empacados como sigue (Levenspiel, 1993):
donde:
: Nmero de Reynolds NR~ d,

Pg
vg
E,
: Velocidad de la corriente deaire : Porosidad : Viscosidad del aire
: Dimetro promedio de particula

: Densidad del aire
pg
en este nmero se expresa la relacin de las fuerzas inerciales a las fuerzas viscosas de la corriente gaseosa que atraviesa el lecho, es decir, la relacin de las fuerzas que dominan el movimiento del aire a aquellas que impiden ese movimiento a travs del calcular el N ,, se muestran en la lecho empacado. Los valores empleados para
49
Biodegradacin de hidrocarburos a escala laboratorio
Tabla 8.1, del Anexo B. As, modificando el , N , de aireacin.
pueden obtenerse distintos niveles
El calentamiento quese presenta en los procesos decomposteo puede tener un efecto importante sobre la biodegradacin de los hidrocarburos. Para plantear las condiciones en las cuales se llevaron a caboelpresenteestudiose realiz un experimento inicial para conocer la efecto del control de la temperatura en la biodegradacin de los hidrocarburos.
La biodegradacin de los hidrocarburos en la mezcla es el parmetro ms importante del proceso ya quese control de la temperatura y del escalamiento.
N ,
emplear para determinarsiexisteunefecto del para poder emplearlos como un criterio de
6.1. E V A L U A CDEL I~N E F E C T O DEL
CONTROL DE L A T E M P E R A T U R A .
Para evaluar este efecto se realizaron dos experimentos uno con control y otro sin control de la temperatura del proceso. Se realiz una cintica de biodegradacin de hidrocarburos en columnas de vidrio de 50 g de capacidad y un biorreactor de acero inoxidable de 0.864 kg de capacidad para cada experimento. El biorreactor y las columnas se empacaron con el mismomaterial, y se operaron en condiciones iguales, como se muestra en la Tabla 6.1. El primer experimento se llev a cabo controlando la temperatura de la cmara, sta se calent tanto como la temperatura ms caliente en el biorreactor de modo que el interior de la cmara se tuviera una temperatura igual, o cuando ms,4Cpordebajodeesta que se defini como temperatura de referencia. temperatura,
El segundo experimento se llev a cabo sin control de la temperatura de la cmara, es decir, la temperatura interior de la cmara sigui los perfiles de temperatura del ambiente exterior a la cmara. Las condiciones de operacin para este experimento se muestran en la Tabla 6.1. El tiempo de co-composteo fue de 150 h para todos los casos, manteniendo constante la aireacin correspondiente. El muestre0 de las columnas se realiz a intervalos regulares de tiempo. A cada una se le determin awl humedad, pH, perdida de materia seca (PMS), produccin de CO,,
temperatura y cantidad de hidrocarburos totales.
50
Tabla 6.1. Condiciones de operacin para en La evaluacin del columnas y biorreactores h temperatura sobre La efecto del control de biodegradacibn de los hidrocarburos.
A Control de Temperatura Gasto especfico de aire 2.33 2.44 (vkgm)' 1.60 Dimetro de partcula (mm) 0.75 Porosidad ( E , ) ~
B
3.55 0.72
0.06
N,, 0.34 Densidad empaque de (kg/m3) 350 350 150 operacin Tiempo de(h) A: Con control de temperatura B:Sin control de temperatura + : vkgm : volumen de aire por kilogramo materia por minuto '+: Medida en este trabajo
150
de
6.1 .l.
RESULTADOS DE TEMPERATURA En la Figura 6.1 se muestra la evolucin de la temperatura durante la temperatura de la cmarasiguiun 6.la). el perfil Las
co-composteo. La temperatura a la que fueron incubadas las columnas de vidrio en el experimentorealizadoconcontrolde semejante a la temperatura de referencia del biorreactor (Figura
temperaturasmsaltasfueron de 30.6% para las columnas y de 38.3% para el biorreactor entre las 40 h y 75 h , aproximadamente. Por ello puede suponerse que la las columnas y biorreactor en el fue semejante. actividad microbiana en Presentndose, probablemente, una sucesin de poblaciones microbianas promovida por la temperatura. En el segundo caso, las columnas muestran las oscilaciones que present la temperatura del ambiente exterior de la cmara (Figura 6.lb). Esta es la diferencia ms importanteentrelosdosgrupos,yaquedeestemodo la actividad microbiana en las columnas, posiblemente, fue distinta a la del biorreactor.
51
50
t
t
No. de Re = 0.34
No. de Re = 0.86
m
+
40
l -
30
25
2o
l 715 5 ; 510 215
lb0 1 : 5 Tiempo (h)
1:O
25 50
75
100
125 Tiempo (h)
150
Figura 6.1. Evolucinde la temperaturapara los

temperatura de referencia (a ).
NRe
0.34 (a) y 0.86 (b) en columnas ( ) y de la
6.1.2. FACTORES FlSlCOQUMlCOS

DE
co, Y
DETERMINADOS
(a,,
HUMEDAD, pH, PRODUCCIN
PRDIDA DE MATERIA SECA)
En la Figura 6.2 se
muestran los parmetros determinados durante el
tiempo de co-composteo. En la Figura 6.2a se muestra la evolucin de la humedad en el tiempo, en ambos casos se inicia con valores cercanos al 60 % y su evolucin es semejante. La a , present valores iniciales de 0.973 y 0.969 para los casos con (A) y sin (B) control de temperatura, respectivamente, mostrando una variacin semejante durante el co-composteo (Figura 6.2b). La a ,
y la humedad disminuyeron en las primeras 25 h debido,
posiblemente, a un efecto de secado por la corriente de aire que atraviesa la masa. La cantidad de agua aumenta al transcurrir el tiempo debido al desarrollo de la poblacin microbiana y la produccin de vapor de agua propio de un metabolismo respiratorio (Durand & Chereau,1988). Hacia el final del co-composteo la actividad microbiana disminuye con l o cual la cantidad de agua en la matriz slida tambin disminuye. En la literatura se han reportado comportamientos semejantes de , para sistemas de composteo (Cooperband 8, Middleton, 1996; humedad y a Papadimitriou & Balis, 1996).
52
A y B, respectivamente (Figura 6 . 2 ~ ) Durante . el co-composteo los valores de pH se mantuvieron en el mismo

El pH inicialfue de 5.96 y 6.75 para loscasos intervalo. El pH ms adecuado para el crecimiento microbiano se encuentra en un rangode 3 a 4 unidadesdepH, y queenelcasode presentan un mejor crecimiento cuando el pH se sita entre pueden crecer en un rango de rango ms amplio de 2 a 9 de pH (Prior et al., 1992). En la Figura 6.2d se observa la produccin de CO, durante el co-composteo. mayor La produccin COZ de present se a las 5 5 h aproximadamente, para el caso A, alcanzando niveles de produccin de 2.49. En el caso B, la mxima produccin de CO, se present a las 60 h, alcanzando niveles de 2.1 %. La cantidad total de CO, producido en 150 h de co-composteo fue de 250.75 y 424.64 mg COJg MSI, para los casos A y B, respectivamente. siempre la FMS,las bacterias 6.5 y 7.5, sin embargo
4 a 9 de pH; y los hongos filamentosos crecen en un
CO, es la evidencia ms palpable de la actividad La produccin de microbiana en la mezcla. Los microorganismos consumen los azcares y la mayora
de los hidrocarburos presentes, alifticos y aromticos, para la formacin de biomasa y la generacin de energa para su mantenimiento. El periodo de mayor monitoreadas coincide con el aumento de la de CO, de las columnas produccin a , y la
humedad, y el punto donde la prdida de materia seca ocurre con mayor velocidad. El perodo de mayor actividad microbiana en el caso B se present 5 h ms tarde que en el caso A, posiblemente, debido a que al existir un mayor espacio interpartcula el calor generado se disip ms rpidamente enfriando el empaque actividad microbiana. El COZproducido proviene tambin del bagacillo de caa que se consume durante el co-composteo, lo cual se refleja en la prdida de materia seca. La Figura 6.2e muestra la evolucin de este parmetro para los casos A y B. Se aprecia que en las primeras 72 h se alcanz el mayor nivel de PMS de 17.73 %, en ambos casos. y disminuyendo la
53
6ow t
65
m '
0.98
55
0.97
0.96L
50
451 I O 7 55 02 5
100 150 125
0.951 O
25
5 10 5 10 2 15 00 75
Tiempo (h)
C)
Tiempo (h)
7.5
7.0
I
6.0.
5'5 O 5.0
L
25 50 75 100 125 Tiempo (h)
150 Tiempo (h)
Figura 6.2. Evolucin de h humedad (a), a, (b). pH (c), h produccin de dixido de carbono (d) y h prdidade materiaseca (e) durante el
Tiempo (h)
co-composteo, para los experimentos con control (O) y sin control (O) de la temperatura.
54
6.1.3.
B I O D E G R A D ADE CI~ HIDROCARBUROS N
La biodegradacin de hidrocarburos present perfiles semejantes con una mayor (Figura 6.3). Sinembargo, en el caso A labiodegradacinocurri velocidad, 0.25 mg Hid./g MSl'h, que en el segundo caso, 0.10 mg Hid./g MSI*h en lasprimeras96h. La biodegradacin alcanzadaen
150 h fuede61.2
& 5.3 '10 y
53.9 & 1O %, para los casos A y B, respectivamente.Posiblemente, al controlar la temperatura con queserealizelproceso (NR, 0.34) sefavoreci la aparicin de poblaciones nuevas con cualidades para degradar hidrocarburos mejores que las que (NRe 0.86). Las condiciones de se presentaron en el experimento no controlado aireacinenambosexperimentosfuesemejanteyaqueelgasto de aire y la E , presentaron valores similares (Tabla 6.1).
Esto significa que el control de
la
temperatura juega un papel importante en la biodegradacin (Cookson, 1995). De acuerdo a los resultadosanteriores, los experimentosrealizados para evaluar el efecto del , N , se efectuaron controlando la temperatura de la cmara para seguir un perfil trmico semejante al del biorreactor de lecho empacado.
70r
25
50
7 5150 125 100
Tiempo (h)
Figura 6.3. Biodegradacin de hidrocarburos durante el co-composteo para diferentes casosde NRe: 0.34 (O) y 0.86 ( O ) .
55
Biodegradacin de hidrocarburosescala a laboratorio
6.2. EVALUACI~N DEL EFECTO DEL
NMERO DE REYNOLDS
Se plantearon cuatro niveles de N ,,
quese especifican enla Tabla 6.2.
Estos se obtuvieron al modificar el tamao de la partcula de bagacillo de caa y el gasto de aire. El material empacado se prepar de acuerdo a la composicin indicada en el captulo anterior y la densidad de empaque se mantuvo constante casos. Se determinaron los mismos parmetros que en evaluacin del efecto del control de la temperatura. 6.2.1. en todos los
los experimentos de
TEMPERATURA
En la Figura 6.4 se muestra la evolucin de la temperatura en los distintos N , 0.0 la temperatura de las columnas y el biorreactor casos probados. En el caso de , siguieron el perfil del ambiente externo a la cmara. Se pueden observar claramente las oscilaciones en la temperatura entre el da y la noche (Figura 6.4a). En los otros N , 0.17, 0.34 y 1.19, las columnas presentaron un periodo de calentamiento casos, , marcado por la temperatura de referencia, Figuras 6.4b, c y d, respectivamente. En el casode N ,, de 0.17 y 0.34 el periodo de calentamiento se observ entre las 50 y 60 h, alcanzando temperaturas de 35 y 30C en las columnas y de 45 y 38.2"C para los biorreactores en cada caso. En el ltirno caso, las temperaturas ms altas fueron 33 y 375C para las columnas y el biorreactor, respectivamente. En estecaso el periodo de calentamiento se present ms tarde, entre las 70 y 75 h, hacia el final del experimento la temperatura promedio fue de 27"C, 5" ms arriba de la temperatura inicial. Conforme aument el
N,,
la temperatura mxima alcanzada por los
biorreactores fue disminuyendo y presentndose cada vez ms tarde, lo cual significa, que se removi una mayor cantidad de calor producido al aumentar la tasa de aireacin y la E , del medio. Esto ha sido aprovechado anteriormente para controlar el calor acumulado en sistemas de co-composteo siguiendo la estrategia de aumentar la tasa de aireacin en los periodos de calentamiento (Beaudin et al., 1996).
56
a)
50
b)
N ,,
= 0.0
45 40 35 30 25 20 15 15 10 2 15 0 O0 755025
2
m
E
m 3
m
Q
50 45 40 35 30 25 20
, N ,
= 0.17
3 m
Q
k-
I-
I 15 11 51 2 00 O 57 055 02 5
Tiempo (h)
Tiempo ( h )
c)
40 5 5
2 m
I
40 35 30 25
c
li
I 1
I
, N ,
= 0.34
N , ,
= 1.19
2 40
I
m
al
2
F
35 30 25 20
2o
151 I 11 51 2 00 5 O7 055025
O 7 55 02 5
100 150 125
Tiempo (h)
Tiempo (h)
Figura 6.4. Evolucin de b temperatura en empleados, operados a distintos , N , .
las columnas
(:.) y temperatura de referencia
(0)
57
Biodegradacin de hidrocarburos a escala laboratorio Tabla 6.2. Niveles de
N ,,
en los experimentospara
estudiar su efecto en la biodegradacin de hidrocarburos. Dimetro de partcula(m) 6.95 X 1O 6.95 x 1O 1.60 X 1 4.06 x
+:
Velocidad del gas (&S)

0.00
3.33 x 103
Eo
0.69 0.69
0.75
0.00
0.17 0.34 1.19
3.1 9 X 1 4.27 x 1O 3
1O 3
0.73
Medida en este trabajo.
6.2.2.
FACTORES FlSlCOQUMlCOS DETERMINADOS La a , humedad pH y mostraron un comp ortamiento semejante
al
observado en los experimentos descritos en la seccin anterior. Los valores iniciales de a , y humedad presentaron un valor promedio de0.97 f 0.002 y 57.7 & 1.4, respectivamente, mostrndose una disminucin ensusvalores durante las primeras 50 h (Figura 6.5a y b). El pH inicial fue de 5.96 k 0.65 en los casos de N ,, 0.17, 0.34 y 1.19, y en N ,, 0.0 el pH inicial fue menor a 5 mantenindose cercano a este valor durante el co-composteo (Figura 6.5~). La evolucin de la PMS se muestra en la Figura 6.5d y se puede apreciar que en las 150 h de co-composteo se obtuvieron valores semejantes, 16.56 k 2.01 Yo. Aproximadamente, el 17 Yo de PMS se alcanz en 75 h en los casos de N ,, de 0.17 y 0.34, y hasta las 150 h en el caso de N ,, 1.19. Como ya se dijo en la seccin anterior la PMS refleja el consumo de las fuentes de carbono presentes en el medio que salen del sistema como CO, y vapor de agua, principalmente. La relacin entre la PMS y la cantidad de COZproducida en 150 h se muestra grficamente en la Figura 6.7. La produccin de CO, durante el co-composteo se muestra en la , N , 0.0 la produccin de COZ no fue monitoreada. La Figura 6.7a. En elcasode mxima produccin de CO, se presenta cada vez ms tarde conforme el N ,, aumenta y disminuye la cantidad porcentual observada, sto se debe a que la cantidad de COZ presente en la salida de gases de las columnas depende de su gasto de alimentacin, ello, los valores mximos de CO, ya que el COZ producido se diluye en l. Por expresados en relaciones porcentuales disminuyen conforme aumentaba el gasto de alimentacin. Sin embargo, la cantidad de COZproducida en 150 h es similar en los
58
Biodegradacin de hidrocarburos escala a laboratorio
tres casos, 250.75, 277.7 y 262.34 mg COJg MSI, para los NR,de 0.17, 0.34 y 1.19, respectivamente, como se muestra en la Figura 6.7b. La velocidad de produccin de CO, durante el periodo de mayor actividad microbiana es similar en los dos primeros casos, 7.85 y 7.30 mg COJg MSI*h, respectivamente. En el tercer caso, la velocidad de produccin fue menor, 4.85 mg COJg MSl'h, mantiene una produccin msaltadespuesde casos. durante dicho periodo pero se
ste en comparacin con los otros
a)
b)
6
73 73
" 6
I
E,
8
5
O
Tiempo
7.0
(h)
Tiempo (h)
6.5
I,
6.0
5.5
5.0
4.5
25
50
75
100
125 Tiempo (h)
150
25
50
75
100 125 Tiempo (h)
150
59
Biodegradacin de hidrocarburos escala a laboratono
La cantidad de
COZ producido se debe
al proceso respiratorio de
los
y generan la cantidad de CO, producido durante el proceso (Figura 6.6). Sin embargo, se aprecia una mayor produccin de COZla cual debe estar vinculada con la biomasa generada durante el co-composteo.
microorganismos presentes en energa, biomasa. Si slo produjeran la materia seca perdida coincidira con
el empaque con lo cual obtienen energa
300r
30
25
20 8
S
15
10
5
0.34 Nmero de Re
0.17
1.19
Figura 6 . 6 . Relacin entre h prdida de materia y ( . la cantidad de CO, producida (1111) en 150 seca ) h de co-cornposteo.
60
E
U
3
Tiempo (h)
I I
Velocidaddeproducinde
7.85 rng C O g !
$ -
COZ
MSlh
I
I
e 7 30 mg COjg MSlh
4.35 rng COig MSlh
75
O 50
25
1 O0
125 Tiempo (h)
150
Figura 6.7. Produccin (a)y acumulacin (b) de C 0 2 durante el co-composteo realizado a distintas 0.17 ( O ) ,0.34 ( O ) y 1.19 (O) condiciones de NRe:
61
6.2.3.
BIODEGRADACI~N DE HIDROCARBUROS
La biodegradacin de hidrocarburos durante el co-composteo se muestra Figura 6.8. Las concentraciones iniciales de hidrocarburos en la mezcla
en la
f 9,000
experimental fueron de55,000 f 2,000, 47,800 f 15,176, 56,348 k 1,470 y 71,340 ppm para los N ,, de 0.0, 0.17, 0.34 y 1.19, respectivamente. Se biodegradaron un16.9 f 0.9,25.9 k 7.4, 61.2 ? 5.2 y 64.4 k 6.3 %, de los hidrocarburos iniciales en los experimentos de N ,, 0.0, 0.17, 0.34 y 1.19, respectivamente. En los primeros dos casos, la biodegradacin de los hidrocarburos presenta una gran dispersin de los resultados, e incluso, no presenta una degradacin de hidrocarburos definida. En los otros dos la variacin de los resultados fue menor
y se observa que a las 30 h de co-composteo la biodegradacin de hidrocarburos alcanzvalorescercanosal 50 Yo, despuselaumentofue menos marcado.
los resultados de biodegradacin Para comparar estadsticamente encontrados se utilizaron pruebas det-student debido alreducidonmerode datos ,, 0.0 y 0.17 no eran disponibles. Se encontr que los experimentos realizados a N distintos entre s con una significancia de 0.05. Asimismo, los experimentos realizados a N ,, 0.34 y 1.19 no fueron distintos significativamente entre s. Las comparaciones se realizaron en el paquete estadstico lnStatTM versin 2.03 para Macintosh.
,, AI graficar la biodegradacin alcanzada en 150 h contra el N

realiz el proceso se puede observar la grupos, el primero que se encuentra por
al que se
separacin de los experimentos en dos ,, de 0.26 donde la debajo de N
biodegradacin no alcanza el 50 Yo; y aquel que se halla por encima de este valor / o (Figura 6.9). donde se observan niveles de biodegradacin por encima de 50 o Por otra parte, Breitung et al., (1996), al estudiar el co-composteo de suelo contaminado con 2,4,6-trinitrotolueno encontr una biodegradacin del 64 '10, aproximadamente, en 7 das, empleando un sistema aireado cuyo rgimen de turbulencia corresponda a un N ,, de 0.63 de acuerdo a las condiciones citadas.
62
a)
8 0 r
b)
NRe= 0.0
80
N R e = 0.17
$
3
70-
?
e
70-
f !
60
'o
'O
40-
0;
25
:o
7 1 5
lb0 115 Tiempo (h)
1 : o
25
50
75
100 125 Tiempo (h)
150
* O r
N , ,
= 0.34
Tiempo
(h)
Tiempo (h)
63
P9
S3NOISlll3N03
'9'9
aHN
SZ'L I
00'1
I
SL'O
I
05'0
I
SZ'O
00'0 1 01
JO 8
99
L9
USL=J.
.....................
U:
S
a
U
O
!
3
!
S
O
89
69
S'P
S
o1
O'S
0'9
5'9
U I
O'L
(3
os1
S21
001
OS
SZ
os1
S21
001 S6'0
OS
I
96'0
OL
a
Q
06.0
26'0
P6.0
96'0
86'0
EP'O
Joo.1
CL
(Y) odua!l
os1
I
o
SZl
I
001
SL
os
sz
SL'9
Y
08'9
ZL
a 001
:
1
@O =anN
L10
=N
EL
EPO =N
L 10 =
PL
a
(D
o
O
W
C
c W
a
O
0'0
S'O
o. 1
S' 1
o
O
O'Z
S'Z
3 a
Q.
Q O
so~nq.!e~o~p!q ap uom?pe~6apo!q osaso~d ap lap olua!ureleDs3
9L
LL
8L
so~nq~e3o~p!q ap uo!3epe~6apo!q ap OSa3OJd lap olua!wele3s3
08
61'1
96'0
L 6'0
86'0
61'1
61'1
loo.
66'0
18
28
8.
0-
P8
S8
98
so~nq~e~o ap ~uo!~epe~dapo!q p!q ap osa3o~d lap oluaIu~ele~s3
L8
68
06
ouoqle3 ap a l u a n j
16
(98)
Z6
(Z1'8)
( 1 1'8)
(O1'8)
66
(S 1.8)
P6
(9 1'8)
S6
(8 1'8)
(L 1' 8 )
96
L6
t
olqua!w opun6as
86
66
'/o
P1'88
Yo CE'06
Yo SO'P
opezueqe 03!~Oal yo
O0 1
10 I
zo 1
EO t
PO 1
S37WH3N33 S3NOlSn73N03
'6
90 1
LO 1
60 1
PC C
81 I
:aua!l as uo!aenDa elsa ap
6 opuefadsap
:saauolua 'q sa esnualod!y el
A 6 sa
alua3ehpe
olale3 apuop
IS
611
: a u q as p opueiadsap
esnualodlu
A 'ua3ouo3 as q A e anb e
oz 1
cz I
zz1
EZ 1
PZ 1
90+30E'Z
ZL'O
90+30E'Z
ZL'O
90+30E'Z
ZL'O 8 19'0
8 19'0
10-3OS'S
8 19'0 10-309'2 S09'0 8Z'SP 9ZO'O 82'9
co-309'Z 909.0 8Z'SP 9ZO'O 8Z.9 66'ZL LO-3SS'Z PO-3Sl'L 6 1'0 SZ. CZOE S8'E
S09'0 8Z'SP 910'0
SE'9 1 90-368'L EO-30S.9 6 1'0

SZ' 1ZOE
16'ZS LO-39Z.E
EO-30E' 1
6 1'0
SZ' 1ZOE
18' 1
S8'E 8'0 T E ' l

3'0
ZZ'O T 6 1' 1
Z' 1
L'Z T P'8
L 1.0
64 S'9Z
'SOClV3ldVU3 SOHl3WVUVd SO1 30 S3HOlV/\
'C'8
SZ 1
S661 " J W 4i
SO-308' 1 SO-308' 1 EO-300'Z SLZ'O L68'0 PES
SO-308' 1 SO-308' 1 0-300'8

SSL'O
SO-308' 1 SO-308' 1 0-300'8 Z69'0 L68'0

OSE
Ti
6Ti
9
o3
L68'0
OSE
6d
se6a!.16 s w l a l
ZO-396'P
LOCOO'O rS'EtSO 1
EO-3PE'Z
6PPOO'O 19's 6'88 9'ZZ OS 1
EO-3PE'Z
CS~OO'O
d u r a ,
8L'S
6'PP
n
wl
O 1
1'6P E'6 1 OS 1 to-30L'C
E'8 1
OS 1
w1
ZO-3SE'S
ZO-3SE'S
etl
92 1
:aua!l as 'low6 ua opesaldxa
82 1
6Z I
IP"1 = 1P ! - P = *1P
.lP(
O1-
"I) =I P
[7q-q01-
" ) 'P
= .lP
O 1
"
- "I
O1-1
- 1
(1'3)
O t
:anb souaqes !S
3% =a 6 6 d
A d P
u sand ~
LE: L
:sa3uolua -- !'N !S e& -
"
!3!Y + Y Y!Y
-n

UAM4241

Загружено:

Сведения о документе

Авторское право

Доступные форматы

Поделиться этим документом

Поделиться или встроить документ

Параметры публикации

Этот документ был вам полезен?

Это неприемлемый материал?

Авторское право:

Доступные форматы

UAM4241

Загружено:

Авторское право:

Доступные форматы

Universidad Autnoma

Casa abierta al tiempo

Escalamiento de Biorreactores para co-composteo de suelos contaminados con petrleo

'IbisparaobtenerelGradode Maestro en Biotecnologa

CC@RDtU4CIO?J DE SERVlCICG D * X Q M W W EIWCITBCA

A mis padres y a mi hermano Javier, por demostrarme siempre su amor y comprensi6n, y

3.6.1 O. Densidad Real en las mezcla

3.6.1l. Porosidad de una mezcla debagacillo-sueloagua

EQUIPO PARA EL CO-COMPOSTEO LA MEZCLA EXPERIMENTAL PARA

5.3.DEFINICION DE LAS CONDICIONES DE CO-COMPOSTEO 5.4.CONCLUSIONES

6. BIODEGRADACI~N DE HIDROCARBUROS A ESCALA LABORATORIO

7.2.2. Biodegradacin de hidro-carburos en el biorreactor de 26.50 kg 7.3. CONCLUSIONES

8. BALANCES DE MATERIA Y ENERGA EN LOS BIORREACTORES DE 0.86 Y 26 KILOGRAMOS

8.1 .l. Balance deCOP

8.1.2. Balances de calor 8.1.3. N,ic durante el co-composteo

9. CONCLUSIONES GENERALES 10. RECOMENDACIONES

117 120 124 126 126 127 128 129

0.34 y 0.86 ............................................

NRe del proceso. ....................................................................................................................... 6 4

azcares totales a hs 150 h de co-composteo los Figura 7.6. Concentracin de biorreactores.................................................................................................................

Figura 7.15. Produccin y acumulacin de COZdurante el co-cornposteo en el biorreactor piloto. ...........................................................................................................................

rea especfica del reactor actividadagua de

J/m2sGKK. Calculado como

J/m2sQKK. Calculado como

conductividad trmica del aire

, en cuerpos sumergidos constante para el clculo de h

d,pgvg Calculado como -

Pae Pas Yae Yas

y escalamiento, ya que es muy importante que se desarrollen sistemas

la fisiologa de los microorganismos empleados el punto de vista de la ingeniera (Durand et

(MSR) para predecir el y de la porosidad (E,) de la

medio fue de 47,800

... y si uno no se queda corrigiendo elL6ro

d Ih vida es porque ef mismo rigor dejierro que

1. 1. SISTEMAS DE CO-COMPOSTEO EN BIORREMEDIACI~NDE SUELOS

Los procesos de co-composteo se realizan en ausencia de escurrimiento de

Los microorganismos que son empleados como inculo en

a cabo las reacciones

las enzimas, enfatizando valores adecuados de temperatura,

considera como un proceso aerbico, preferencialmente (Cookson, 1995).

a cabo a nivel de planta piloto, la informacin

los autores lo atribuyeron a una esterilizacin deficiente del material utilizado en el

Aspergillus, empleando dos plantas industriales de 300 kg y 750 kg de materia

1.4. MTODOS DE ESCALAMIENTO

caracterizan: el tamao, la forma y su composicin. Dos objetos diferentes en tamao

similitud no hay similitud

escalamiento consiste en mantener ciertas condiciones entre una escala

procedimientos escalamiento de sido han agrupados

microbalances, ya sea analticamente o por medio de algn mtodo apropiado(Kossen, 1994b).

1990, Asimismo, Saucedo-Castaheda et al., en con yuca para el crecimiento de A. niger.

transferencia de calor empleando como modelo de estudio un biorreactor empacado

Una vez resueltos

los modelos matemticos se procede

Estos mtodos requieren menor informacin de los sistemas biolgicos que

los mtodos anteriores (Kossen, 1994b). En este conjunto se encuentra el anlisis de

conocer.Aplicarestosmtododeescalamientopuederesultarinadecuadopues errores son, en ocasiones, muy costosos.

la carencia de informacinqueexisteparallevara se plantearon

cabo el escalamiento de biorreactores enprocesosdeco-composteo los siguientes objetivos.

2.1. OBJETIVO GENERAL

PARTICULARES 2.2. OBJETIVOS

experimental que incluya

suelo contaminado con hidrocarburos.

3.1. SUELOS CONTAMINADOS CON HIDROCARBUROS.

como arcilloso, presenta las caractersticas que se muestran en la Tabla 3.1 :