Bioqumica da digesto e absoro

2.1 Digestes dos carboidratos

Como visto no captulo sobre os microorganismos ruminais, a Maior parte dos carboidratos do alimento fermentada no rmen, originando, principalmente, os cidos graxos volteis (AGV): acetato, propionato e butirato. Na Figura 2.1, apresentado um esquema geral da digesto dos carboidratos nos ruminantes. Os AGV podem ser considerados um resduo da fermentao para os microorganismos, mas, para o ruminante, representam principal fonte de energia. A energia presente nos cidos graxos volteis representa em torno de 75 a 80% da energia originalmente presente nos carboidratos fermentados e, normalmente, contribuem com 50 a 70% da energia digestvel do alimento. A concentrao dos AGV no fluido ruminai normalmente varia de 70 a 130 mmol/d, embora possam ocorrer valores mais extremos. As taxas de produo de AGV variam com o tempo, aps a ingesto, e com o tipo de alimento. Quando o alimento base de concentrado, a curva mais aguda e o pico de produo ocorre em tomo de 2 a 3 horas aps a ingesto. De outro modo, quando a dieta consiste de forragem (volumoso), a curva de produo menos aguda e o pico ocorre em torno de 4 a 5 horas aps a ingesto (Figura 2.2). A maior parte dos AGV, cerca de 80 a 90%, so absorvidos pelo epitlio ruminai, sendo o restante absorvido no omaso e abomaso. A taxa de absoro, em quantidades absolutas (g/h), diretamente proporcional concentrao do AGV no rmen e, deste modo, mais alta para o acetato, intermediria para o propionato e mais baixa para o butirato. No entanto, proporcionalmente concentrao de cada AGV (%/h), as taxas de absoro so similares. As taxas de absoro aumentam com a diminuio do pH ruminai.
Figura 2.1 - Esquema geral da digesto dos carboidratos nos ruminantes. CHO = carboidratos; AGV= cidos craxos volteis

Figura 2.2 - Curvas caractersticas de produo ruminai de cidos graxos volteis (AGV) em animais recebendo dietas base de concentrado ou de volumoso.

A absoro ruminai dos AGV passiva, ou seja, sem gasto de energia. A concentrao de AGV no sangue varia em torno de 3 a 4 mmol//?, isto , uma concentrao bem mais baixa que no fluido ruminai, o que permite que os AGV no-ionizados atravessem as clulas do epitlio ruminai em direo ao sangue por difuso passiva. No entanto, nas condies de pH normalmente presentes no fluido ruminai, entre 6,5 a 6,8, a maior parte dos AGV encontra-se dissociada, ou seja, ionizada. Constatou-se que a absoro dos AGV eletricamente neutra, desta forma, para explicar a absoro daqueles na forma ionizada, foi sugerido um mecanismo de troca aninica entre as clulas do epitlio e o lmen ruminai, envolvendo cloreto (Cl" ) e bicarbonato (HCO,). No entanto, este mecanismo de absoro no rmen no est conclusivamente estabelecido. Outro importante produto derivado da fermentao ruminai o metano (CH4), que normalmente representa at 10% da energia do alimento consumido pelo ruminante. Uma parte do metano pode ser absorvido pelo epitlio ruminai, entrar na circulao sangunea e sair com o ar expirado pelos pulmes. No entanto, a maior parte sai do rmen juntamente com outros gases durante a erutao. O gs ruminai constitudo por cerca de 2/3 de CO2 e 1/3 de metano, alm

de uma pequena frao de outros gases como H,, H2S, N, e Or Concomitante ao processo fermentativo, parte da digesta ruminai, representada principalmente por partculas menores e mais densas, saem deste compartimento em direo ao abomaso e intestino delgado. A digesto abomasal e intestinal nos ruminantes tem algumas particularidades. Uma das principais que o fluxo de digesta, a partir do rmen, relativamente contnuo e no-pulsativo como nos monogstricos. Da mesma fornia, as enzimas digestivas tambm so secretadas mais continuamente e em menores concentraes que nos monogstricos, principalmente aquelas responsveis pela digesto intestinal dos carboidratos e dos lipdios. Os carboidratos que chegam com a digesta ao abomaso e intestino delgado so representados, principalmente, por aqueles do alimento que no foram fermentados pelos microorganismos ruminais e tambm por quantidades variveis de carboidratos presentes nas clulas microbianas. Em torno de 10a 30% da biomassa bacteriana ruminai pode ser representada por polissacardios. No existe atividade carbohidrase no abomaso. As secrees abomasais so constitudas de HC1, muco, pepsinognio, bicarbonato e lisozimas. O tempo de permanncia da digesta no abomaso curto, cerca de l a 2 horas, e o pH, neste compartimento, baixo, em torno de 2 a 2,5. A atividade carbohidrase inicia aps a digesta entrar no duodeno e se misturar com a secreo pancretica, que contm atividade amilsica e, juntamente com a secreo biliar, neutraliza o pH. A a-amilase pancretica hidrolisa as ligaes a-1,4 glicosdicas do interior da cadeia do amido e de polmeros de glicose bacterianos semelhante ao amido, liberando maltose, maltotrioses e dextrinas limites de amilopectinas contendo ramificaes a-1,6. Quando as dietas dos ruminantes consistem somente de forragem, os carboidratos presentes na digesta que chega ao intestino delgado so representados fundamentalmente por celulose e hemicelulose sendo que quantidades insignificantes, ou mesmo nulas, de amido esto presentes. Nesta situao, a quantidade de a-amilase secretada pelo pncreas e a atividade amilsica tambm insignificante. No entanto, quando as dietas so constitudas por altas propores de gros de cereais, principalmente de milho ou sorgo, quantidades significativas de amido podem passar pelo rmen sem serem fermentadas e so digeridas nos intestinos. A sntese de a-amilase pancretica grandemente estimulada pela presena de amido e de protenas no abomaso e duodeno. Os produtos resultantes da atividade aamilsica so hidrolizados por a-1,4 e a-1,6 glicosidases presentes na membrana luminal das clulas do epitlio intestinal, liberando glicose, que ser absorvida. Os ruminantes tm menor capacidade que os monogstricos para digerir amido no intestino delgado. As causas desta limitao parecem estar associadas a uma limitada atividade da a-1,4 glicosidase nos entercitos, a uma proteo fsica superficial dos grnulos de amido que escapam da fermentao ruminai e a um baixo tempo de exposio ao enzimtica intestinal. Assim como no abomaso, o tempo de permanncia da digesta no intestino delgado tambm relativamente curto, cerca de 3 horas. Os ruminantes no secretam sacarase. De qualquer maneira, a presena e absoro de outros acares solveis no intestino delgado dos ruminantes, alm da eventual glicose derivada do amido, <|i> rara e insignificante em razo da total prvia fermentao ruminai

desses carboidratos. A absoro de glicose no intestino delgado dos ruminantes, assim como nos monogstricos, ocorre por um sistema de transporte ativo e envolve a entrada simultnea de um on sdio (Figura 2.3). Uma protena transportadora de glicose/Na+ presente na membrana luminal das clulas do epitlio do intestino delgado carreia a entrada de glicose e sdio na clula. A glicose entra na circulao por transporte, facilitada atravs de uma outra protena transportadora presente na membrana celular oposta quela luminal. O sdio, por sua vez, expulso da clula em direo ao lquido extracelular pela atividade de uma Na+/K+ATPase presente nesta membrana, com gasto de ATP.
.Figura 2.3 - Mecanismo de absoro de glicose no intestino delgado, l = Protena transportadora de NaVGlicose; 2 = NaVK+ ATPase.

No intestino grosso, chegam os carboidratos que no foram fermentados no rmen e nem foram digeridos e absorvidos no intestino delgado. So representados, principalmente, por celulose e hemicelulose e tambm por amido, dextrinas e oligossacardeos, quando a dieta dos animais rica em gros de milho ou sorgo. Assim como no rmen, parte destes carboidratos so fermentados por populaes bacterianas presentes nestes compartimentos, originando principalmente AGV. Entre os polissacardeos estruturais, a fermentao hemiceluloltica mais intensa que a celuloltica. As ligaes furanosdicas da hemicelulose so mais sensveis acidez do abomaso que as ligaes P-1,4 glicosdicas da celulose. Deste modo, a hemicelulose indisponvel fermentao ruminai torna-se disponvel fermentao no intestino grosso. Como no rmen, os AGV so absorvidos nas formas associada e dissociada (ionizada). A forma associada alcana a circulao por difuso passiva. A forma ionizada, por sua vez, absorvida por um mecanismo que envolve tambm o fluxo de os Na+e H+(Figura 2.4). A digesto no ceco e intestino grosso contribui com cerca de 6 a 16% da energia digestvel dos alimentos normalmente consumidos pelos ruminantes.
Figura 2.4 - Mecanismo de absoro de AGV no intestino grosso. Acr = AGV ionizado.

2.2 Digesto dos compostos nitrogenados

Na Figura 2.5, apresenta-se um esquema geral da digesto dos compostos nitrogenados nos ruminantes. Assim como os carboidratos, a maior parte dos compostos nitrogenados ingeridos degradam-se previamente pelos microorganismos no riimen. As caractersticas e a composio dos compostos nitrogenados presentes nos alimentos podem ser amplamente variveis. Para exemplificar, do nitrognio total presente em forragens verdes, 50% ou mais representado por nitrognio no proteico, ou seja, nitratos, cidos nuclicos, aminas, amidas e aminocidos. Gros de cereais ou oleaginosas, por sua vez, contm nitrognio basicamente proteico. De outra forma, a degradabilidade ruminai do nitrognio proteico pode ser amplamente diferente entre os diferentes alimentos ingeridos. Alm do nitrognio alimentar, soma-se aopool ruminai o nitrognio que est presente na saliva, como ureia e mucina, e a ureia que entra no rmen via epitlio a partir do sangue e nitrognio associado descamao epitelial.
Figura 2.5 - Esquema geral da digesto dos compostos nitrogenados nos ruminantes. Nt = nitrognio total ruminai; Nnd = nitrognio ingerido no-degradado no rmen; Nm = nitrognio microbiano; a.a. = aminocidos; p.p. =

peptdeos; Ni = nitrognio indigestvel no intestino delgado. Neste esquema no est presente o nitrognio endgeno.

A maior parte dos compostos nitrogenados que chegaim no rmen so degradados pelos microorganismos, liberando amnia. Cerca de 50 a 70% do nitrognio total ingerido normalmente liberado como amnia no rmen. Uma parte desta amnia incorporada nos compostos nitrogenados microbianos e o restante, geralmente a maior parte, absorvida atravs do epitlio ruminai, entrando na circulao portal. A absoro da amnia diretantiente proporcional sua concentrao rmen e aumenta com o aumento do pH do fluido ruminai. Deste modo, conclui-se que a sua absoro ocorre por difuso passiva da sua forma dissociada, ou seja, de sua forma no-carregada eletricamente. Uma parte da amnia pode sair com a digesta e ser absorvida no ceco e intestino grosso. A amnia absorvida convertida para ureia, no fgado, a qual pode novamente retornar ao trato gastrintestinal via saliva ou via transepitelial. A importncia relativa destas duas formas de entrada ruminai de ureia no est conclusivamente estabelecida. Para entrada via saliva, reportaram-se, na literatura, valores em torno de at 3 g de N/dia em ovinos, e 35 g de N/dia em bovinos, dependendo do tipo e do teor de nitrognio da dieta. A concentrao de ureia na saliva pode variar de 30 a 65% da concentrao plasmtica e constitui cerca de 60 a 70% do N salivar total. A entrada transepitelial de ureia, por sua vez, tem representado entfe 15 a 40% do nitrognio total ingerido pelos animais. No entanto, a entrada transepitelial de ureia pode ocorrer no rmen ou nos intestinos. Quando a concentrao de amnia ruminai baixa ou quando as dietas so base de concentrado, a ureia entra principalmente no rmen. Quando a concentrao de amnia ruminai alta ou a dieta base de volumosos, a ureia entra principalmente no limen intestinal. Com exceo da poro final do leo, onde uma atividade fermentativa microbiana est significativamente presente, no existe atividade uresica no intestino delgado. Deste modo, a ureia que entra no seu lmen novamente reabsorvida ou sai com a digesta para o ceco e intestino grosso. Tanto a entrada salivar corno a transepitelial de ureia ocorre por difuso passiva. A entrada transepitelial de ureia no rmen, no entanto, depende da atividade uresica de bactrias aderidas ao epitlio ruminai. A camada de queratina que reveste o epitlio impede a passagem da ureia, mas no a da amnia. Uma parte do nitrognio degradado incorporada s clulas microbianas ruminais. Em torno de 50 a 70% da protena microbiana total derivada da incorporao de amnia e, o restante, da incorporao direta de aminocidos e peptdeos. Os compostos nitrogenados que chegam ao abomaso e intestino delgado com a digesta podem ser amplamente variveis, representados por nitrognio do alimento no-degradado no rmen, nitrognio microbiano e nitrognio de origem endgena, presente nas secrees gstricas e intestinais e em clulas epiteliais descamadas. O nitrognio endgeno, no entanto, quantitativamente significativo somente quando as dietas so fibrosas e deficientes em nitrognio. Normalmente, do nitrognio total, fluindo com a digesta duodenal, em torno de 15 a 40% representado por protena do alimento no-degradado no rmen, e 60 a 85%, por nitrognio microbiano.

Do nitrognio microbiano, em torno de 80% representado por protena verdadeira e, o restante, principalmente por cidos nuclicos. A digesto ps-ruminal das protenas inicia j no abomaso pela atividade pepsinognica e tambm de lisozimas presentes na secreo gstrica. Nos ruminantes, a atividade das lisozimas auxilia a pepsina na digesto das protenas microbianas provenientes do rmen. No entanto, a digesto proteica intestinal nos ruminantes semelhante a dos monogstricos. O pncreas secreta as formas inativas das endopeptidases tripsina, quimotripsina e elastase e as exopeptidases carboxipeptidases A e B. A tripsina ativada inicialmente pela enteroquinase, uma protena presente na membrana luminal dos entercitos. A tripsina, por sua vez, ativa suas demais proenzimas assim como as formas inativas das demais enzimas proteolticas. Um resumo das caractersticas da atividade das enzimas proteolticas apresentado na Tabela 2. l . O produto da atividade destas enzimas so aminocidos e oligopeptdeos. Oligopeptdeos so hidrolizados ainda por aminopeptidases e dipeptidases presentes na membrana luminal dos entercitos. A digesto das protenas no intestino delgado varia normalmente entre 65 a 75% daquela que chega com a digesta.
Tabela 2.1 - Caractersticas da atividade das principais enzimas digestivas proteolticas

Assim como os monossacardeos, os aminocidos e oligopeptdeos so absorvidos no intestino delgado, principalmente atravs de sistemas de transporte ativo dependentes de sdio. No entanto, outros sistemas, independentes de sdio, tambm esto presentes. As taxas de absoro so diferentes entre os aminocidos, sendo mais altas para a leucina, Usina e fenilalanina e a mais baixa para a glicina. Os oligopeptdeos absorvidos provavelmente so hidrolizados por oligopeptidases presentes no interior dos entercitos e entram na circulao como aminocidos. Tem sido sugerido que os ruminantes absorvem quantidades significativas de aminocidos na forma de peptdeos atravs do epitlio ruminai. No entanto, embora existam evidncias experimentais, este processo ainda no est conclusivamente estabelecido. Os cidos nuclicos constituem a principal forma de nitrognio no-protico presente na digesta que chega no intestino delgado, e basicamente de origem microbiana. Cerca de 75 a 90% desses cidos nuclicos so digeridos e absorvidos no intestino delgado. A digesto ocorre inicialmente por ribo e desoxiribonucleases, secretadas pelo pncreas, liberando nucleotdios e oligonucleotdios. Posteriormente, esses produtos so hidrolizados por nucleotidases e nucleosidases ligadas mucosa intestinal, liberando pentoses e as bases nitrogenadas purinas e pirimidinas, as quais so absorvidas. O nitrognio que chega no intestino grosso com a digesta normalmente composto de 40 a 60% de cc-amino N, 15% de ureia, 4% de cidos nuclicos e l a 13% de amnia. A ureia sangunea pode entrar no lmen do intestino grosso via transepitelial. Parte destes compostos nitrogenados podem ser degradados e metabolizados pelas populaes microbianas presentes neste compartimento do trato gastrintestinal. A amnia proveniente do intestino delgado ou do metabolismo microbiano pode ser absorvida. J a absoro de aminocidos no intestino grosso, se existe, insignificante. A quantidade

de nitrognio excretada nas fezes aumenta com o aumento da atividade fermentativa no intestino grosso. Isso ocorre particularmente quando as dietas so ricas em gros de cereais como milho e sorgo.

2.3 Digesto dos lipdios

Na Figura 2.6, apresenta-se um esquema geral da digesto dos lipdios nos ruminantes. Normalmente, a concentrao de lipdios na dieta dos ruminantes baixa, cerca de 3 a 4%, e est presente, principalmente, na forma de steres de glicerol. Estes so hidrolizados e os cidos graxos insaturados liberados so biohidrogenados pelos microorganismos ruminais. Deste modo, enquanto os cidos graxos insaturados representam cerca de 80% dos cidos graxos totais presentes nos alimentos normalmente utilizados nas dietas dos ruminantes domsticos, passam a representar somente em torno de 25% daqueles que chegam com a digesta no intestino delgado. Uma parte dos cidos graxos liberados no rmen pode ser incorporada pelas clulas microbianas. No entanto, a maior parte sai do rmen com a digesta para o abomaso e intestino delgado. Os lipdios que chegam no intestino delgado so compostos por cerca de 70% de cidos graxos livres, de origem microbiana e alimentar, e 10 a 20% de fosfolipdios microbianos. Estes lipdios encontramse em duas fases: uma fase adsorvida a partculas fibrosas da digesta e uma outra fase dissolvida na forma de micelas. A adsoro favorecida no abomaso e na poro inicial do duodeno por causa do baixo pH, condio em que os cidos graxos encontramse predominantemente protonados. medida que fluem ao longo do intestino delgado, o aumento do pH e a ao detergente dos sais biliares e fosfolipdios determinam a passagem dos cidos graxos da fase particulada para a micelar, permitindo sua absoro, que ocorre por difuso passiva. Os fosfolipdios microbianos e tambm aqueles secretados com a bile tm uma funo relativamente mais importante, na formao das micelas nos ruminantes que nos monogstricos . Alm dos fosfolipdios e sais biliares, a formao das micelas incrementada nos monogstricos pela presena de monoglicerdios, os quais so praticamente ausentes na digesta intestinal dos ruminantes. Em algumas situaes dietticas, os triglicerdios do alimento so protegidos da degradao ruminai e podem
Figura 2.6 - Esquema geral da digesto dos lipdios nos ruminantes. TG = triglicerdios; FL = fosfolipfdios; Lm = lipdios microbianos; AGI = cidos graxos insaturados; AGS = cidos graxos saturados; AGV = cidos graxos volteis; CHO = carboidratos; AGp = cidos graxos adsorvidos em partculas; AGm = cidos graxos micclarcs.

alcanar o intestino delgado. Neste caso, a digesto semelhante a dos monogstricos, nos quais a lipase pancretica tem a funo de hidrolizar os steres, liberando cidos graxos e monoacilglicerdios, que so absorvidos. A gordura pode ser protegida da fermentao ruminai por encapsulao em algum material inerte, por enriquecimento com cidos graxos saturados ou por formao de sais de clcio de cidos graxos. Normalmente, a digestibilidade dos lipdios, no intestino delgado dos ruminantes, de cerca de 80 a 90%. Durante o processo de absoro dos lipdios, em torno de 10% do estearato absorvido insaturado para oleato, e a maior parte dos cidos graxos so

esterificados para triglicerdios, fosfolipdios e steres de colesterol nos entercitos. Uma pequena parte dos cidos graxos pode entrar livremente na circulao portal. Os lipdios esterificados so absorvidos, via linfa, na forma de quilomicras ou de lipoprotenas de muito baixa densidade (VLDL). A proporo desta ltima aumenta com a proporo de cidos graxos saturados absorvidos do lmen pelos entercitos. O excesso de lipdios na dieta dos ruminantes, acima de 7%, principalmente daqueles com alto teor de cidos graxos insaturados, pode inibir a fermentao e o crescimento microbiano ruminai. Esta inibio pode ser em razo de um efeito protetivo da gordura sobre as fibras, impedindo a aderncia bacteriana e o acesso das enzimas fibrolticas ao seu substrato ou, ainda, a um efeito txico dos cidos graxos insaturados sobre as clulas bacterianas. Este efeito txico estaria associado a uma mudana da composio lipdica e das propriedades fsico-qumicas das membranas celulares bacterianas.
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