UNIVERSIDAD DE LA GUAJIRA EXTENSION MAICAO ASIGNATURA: TOXICOLOGIA. DOCENTE: ARTURO TURIZO.

TEMA: DETERMINACION DE CIANURO EN MUESTRA BIOLOGICA LABORATORIO No: ____ FECHA: _______________

1. INTRODUCCION El envenenamiento agudo con cianuro (-CN) puede producirse despus de la inhalacin de acido cianhdrico (HCN gaseoso) o ingestin de este es solucin acuosa (HCN acuoso) o cianuro de potasio o de sodio. Es un compuesto qumico que tiene utilidad industrial como la galvanoplastia en la metalurgia, y como tal se puede evaluar en una posible intoxicacin laboral por metalhemoglobinemia, sabiendo que su intoxicacin es letal. Hay insecticidas de base de este compuesto como lo es el tiocianuro, el cual se metaboliza a ion cianuro en el organismo y puede producir serios problemas de toxicidad. El cianuro es tambin es el matabolito de nitrito prusiato de sodio usado en la medicina como un vaso dilatador pero es muy raro el envenenamiento por este subproducto medicamentoso.

2. OBJETIVO Desarrollar habilidades analticas y experimentales mediante la determinacin cualitativa en la formacin de la metahemoglobina (MiHb) por la administracin de cianuro.

3. MATERIALES Y REACTIVOS

MATERIAL BIOLOGICO. 50g de hgado de pollo

MATERIALES 2 Morteros 2Tijeras 2 Cajas de petri 2 Tubos de ensayo 2 de ensayo para centrifugadora

1 Embudo de filtracin 3 Pipetas 2, 5 y 10 ml 2 peras de succin 2 Matraces de 100 ml 2 Vasos de precipitados de 50 ml 1 Porta tubo (gradilla) 1 Porta pipetas EQUIPOS 1 pH-metro 1 Equipo para diseccin 1 Centrifugadora 1 Estereoscopio REACTIVOS 5 ml Solucin acuosa de hidrxido de sodio (NaOH) al 10% 5 ml Solucin acuosa de sulfato ferroso (FeS04) al 10% recin preparada. 5 ml Solucin acuosa de acido clorhdrico (HCl) al 10% 100 ml Agua destilada 50 ml Solucin salina fisiolgico

4. PROCEDIMIENTO Determinacin cualitativa Se basa en la formacin de un complejo azul de ferriferrocianuro (azul de Prusia) con los iones ferrosos. Prepara el homogenizado de la muestra utilizando la solucin salina (para la muestra y el control). Proceder a trabajar en paralelo ambas muestras. *. Determinar el pH. *. Filtrar. *. Tomar 2 tubos de ensayo y se marcan. Trabajar en paralelo, luego se llevan a la centrifuga. *.Diluir 1 ml de muestra con 2 ml de solucin de NaOH al 10%. *. Agregar 2 ml de solucin de FeSO4 al 10%. *. Agregar HCL suficiente para disolver el precipitado de hidrxido ferroso Fe(OH)2). *. Un color azul indica presencia de cianuro.

Para realizar el estudio de la exposicin ante un agente toxico, utilizaremos 2 animales vivos, a una se le va a inyectar una dosis del toxico cianuro muestra problema (M), el otro animal servir de control (C). 1. Inyectamos a la muestra problema (uno de los dos animales) 10 ml de Cianuro, luego esperamos unos segundos para ver la reaccin del toxico en el animal. 2. Paralelo al punto uno se mata al otro animal (C). 3. Sacar el hgado a las dos animales al mismo tiempo. 4. Relajar los hgados de (M) y (C) y colocarlos en la Caja de Petri, analizar las diferencias con el estereoscopio. 5. Macerar en salina. 6. Filtrar y medir el PH ajustar si es necesario. 7. Tomar 10 ml del filtrado de cada muestra M y C y depositarlo en 2 tubos de la centrifugadora. 8. Centrifugar por 5 minutos. 9. Tomar 1 ml de lquido sobrenadante y depositarlo en 2 tubos de ensayos (M y C), a cada tubo de ensayo le adicionamos 2 ml de Hidrxido de sodio (NaOH). 10. Agregar 2 ml de Sulfato Ferroso (FeSO4) en ambos tubos de ensayo. 11. Agregar acido clorhdrico (HCl) suficiente, a ambas muestras. morteros independientes los hgados con 50cm de solucin

Sensibilidad Cianuro 10 mg/l

5. RESULTADOS

6. DISCUSIN

7. CUESTIONARIO a. Haga un anlisis a partir de los resultados cualitativos de la prctica realizada. b. Cules son las precauciones que se debe tener en cuenta cuando se maneja una muestra de las cuales, se sospecha, contenga cianuro. c. Defina que es metahemoglobinemia. 8. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS I. Amadeo J. Pesce, Kaplan, L.A. Methods in Clinical Chemistry c.v. Mosby Co, USA 1987 Boer N.C: et, Al Clinical Chemistry, Plenum press. USA 1989 Frank, K.R., Blood Essay In Toxicology Academic Press, Vol. I. 1969, 84109

II. III.