10/05/2011

Instituto San Pablo-Curso de Titulacin

E-mail: hematology.virtual.class@gmail.com

Hematopoyesis
Produccin diaria de clulas hemticas:

GR 200.000 millones GB 70.000 millones

Slo un 5% alcanzan el estado final de maduracin

Vida Media de las clulas hemticas:

GR 120 das Granulocitos 6-8 horas Plaquetas 7-10 das

Automatizacin en el tiempo
Inicia con los hermanos Coulter (1950) quienes idearon el principio de impedancia, revolucionando la hematologa. Hasta entonces los conteos eran manuales y en hemocitmetros.

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Generaciones
PRIMERA GENERACION:
Hemograma manual, pipetas pasteur, recuento en cmara de newbauer, microhematcrito

VENTAJAS Y PROBLEMAS DE LA AUTOMATIZACION

VENTAJAS: Reduce errores y costos operativos Reduce el tiempo de emisin de resultados Mejora la habilidad del laboratorio en utilizacin de criterio profesional PROBLEMAS: Condiciones del paciente Toma de muestra y procesamiento Interpretacin clnica incorrecta

SEGUNDA GENERACION:
Semiautomatizacin: Contador celular de glbulos rojos, blancos y plaquetas.

TERCERA GENERACION:
Histogramas de glbulos rojos y plaquetas y Diferencial de 3 diff.

CUARTA GENERACION:
Scatter Light, Radiofrecuencia, Fluorescencia. 5 tipos de clulas.

QUINTA GENERACION:
Todo tipo de lquidos corporales, ampliacin a veterinaria, la impedancia pasa de moda, diferenciales de 10 diff, marcadores de inmadurez tipo citometra de flujo.

Principios de medicin
Impedancia ( Corriente Directa) Radiofrecuencia(Conductividad) Dispersin de Luz (Scatter Light) Citometra de Flujo Fluorescencia Citoqumica

Principio de Impedancia

Deteccin con Lser Semiconductor

Enfoque Hidrodinmico
Es un sistema que evita la recirculacin de las clulas en el rea de conteo. Las clulas pasan por la abertura en una sola fila
Semiconductor Laser (633 nm) Dichromic Mirror

Photo-multiplier (Fluorescence)

Photo-multiplier (Side Scattered Light)

Flow Cell Photo diode (Forward Scattered Light)

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Parametros generados de un Equipo Automatizado en Hematologa

HISTOGRAMA DE GLOBULOS ROJOS

Para determinar los GR se diluye la muestra en un medio isotnico, contiene a los tres tipos celulares La curva de GR es cnica, modal y su tamao es de 60 a 110 fl.

Al Contener los tres tipos celulares puede ser utilizado para mostrar en un grfico las relaciones entre cada tipo celular

ALTERACIONES EN HISTOGRAMAS
Izquierda: clulas microciticas, clulas poiquilociticas, esquistocitos, leptocitos, dacriocitos de registro menor de 60 fl. Derecha: clulas macrociticas, ovalocitos, eliptocitos Curva Bimodal: existe dos poblaciones celulares, en pacientes transfundidos, anemias una vez iniciado el tratamiento.

RBC

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HISTOGRAMA DE GLOBULOS BLANCOS

Se diluye la sangre en un medio que lisa los eritrocitos, a su vez desprender el citoplasma de los GB dejando libres los ncleos, los cuales sern medidos y contados. Los GB se agrupan formando 3 curvas : Linfocitos 50 a 100 fl. Mixtos o Intermedios 100 a 150 fl. Granulocitos 150 a 380 fl.

Anormalidades
CURVA DE LINFOCITOS: Perdida de altura: disminucin del numero de linfocitos. Arranque extenso en Y: clulas o restos celulares de menor tamao que un linfocito pequeo (macroplaquetas, ncleos de hemates).

CURVA DE LINFOCITOS

CURVA DE GRANULOCITOS

Distribucin no normal a la derecha: linfocitos atpicos, aumento de monocitos o de linfocitos grandes.

Curva plana o no existente: granulocitopenia, acompaada de linfocitosis. Curva extendida a 400 fl con extensin a mononucleares: neutrofilia, clulas de lneas mas inmaduras (mielos y metas).

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Histogramas de Plaquetas
La curva normal de plaquetas es cnica, modal y su tamao es 2 a 20 fl.

Anormalidades
No arranque en x: numero de plaquetas esta disminuido.

Extendida 25-30 fl: aumento en el tamao de las plaquetas y estn aumentadas.

Dispersograma s celulares
Son un tipo de representacin grfica utilizada para el recuento diferencial leucocitario, donde se mezclan diversas tecnologas y tienen en cuenta diferentes propiedades de los grupos celulares.

UTILIDAD
Separa poblaciones celulares, sean leucocitos, glbulos rojos y plaquetas, en base a caractersticas fsico-qumicas. Permite determinar la densidad celular de cada poblacin Orienta especficamente a la serie comprometida en la patologa. Se pueden obtener perfiles de algunas enfermedades combinando diferentes grficos.

Informacin celular (Citometra de flujo)

Fluorescencia

Canal WBC/Baso

Canal Diff
Mono

WBC

Fluorescence

Informacin del contenido de RNA y DNA

Forward scatter

Baso

Lymph

Neut + Baso

RBC ghost

RBC ghost

Eo

Espejo Dicroico

Dispersin lateral

Side scatter

Side scatter

Informacin de la estructura interna Lser

Dispersin frontal

Luz dispersada frontal ( Volumen Celular )

Tamao de la clula

Luz dispersada lateral (Estructura celular interna)

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Regiones de Alarma

(informacin del RNA/ DNA)

FLUORESCENCIA

DISPERSIN LATERAL (Estructura Celular Interna)

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1 Ruido electrnico 2 NRBCls 3 Plaquetas 4 Linfocitos y Basfilos 5 Clulas Grandes no teidas (LUC) 6 Monocitos 7 Neutrfilos 8 Eosinfilos

I N T E R P R E T A C I n

Leucemia Mieloide Aguda

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Determinacin de los Centroides (Densidad Poblacional)

Distribuciones normales vs anormales

Distribuciones normales vs anormales

Distribuciones normales vs anormales

ALARMAS

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Correlacin equipo automatizado vs frotis sanguneo

Correlacin equipo automatizado vs frotis sanguneo

Correlacin equipo automatizado vs frotis sanguneo

Interpretacin del dispersograma

Objetivos :
PRCTICA DE AUTOMATIZACIN
Reconocer los principios de medicin que emplean los autoanalizadores hematolgicos de 3 y 5 diferenciales. Interpretar los parmetros del CBC, dispersogramas e histogramas medidos y calculados por los autoanalizadores hematolgicos de uso ms frecuente (Coulter, ADVIA, Cell Dyn y Sysmex). Relacionar los datos proporcionados por el autoanalizador vs la revisin del frotis sanguneo. Discutir sobre los criterios para la validacin automtica de los resultados obtenidos por los autoanalizadores hematolgicos.

Parte 1

Parte 2
Correlacin Equipos vs Frotis sanguneo

Parte 3

Principios de medicin

Discusin de Casos

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Prctica N1: Principios y parmetros de medicin Autoanalizador con diferencial de 3 partes

DISPERSOGRAMAS

Autoanalizador con diferencial de 5 partes

Tipo de clula Linfocitos Mononucleares Granulocitos

Tamao en fL 35 - 90 90 - 160 160 - 450

Clulas presentes en el rango Linfocitos normales y atpicos Mo, Prmy, Mye, plasmocitos, blastos Segm, Abast, Metas, eos, basfilos

DISTRIBUCIONES NORMALES

REGIONES DE ALARMA

HISTOGRAMA NORMAL CON RBC BAJO

MACROCITOSIS

HISTOGRAMA NORMAL

TROMBOCITOPENIA

ALGUNOS CASOS:

ALGUNOS CASOS:

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Gracias

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