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Julio de 2010
Blancos Moleculares
Alteracin de la sntesis de la pared celular
-lactmicos, glucopptidos, etc
Mecanismos de resistencia a
-lactmicos
Alteracin de los blancos moleculares
Disminucin en la afinidad de las PBPs Adquisicin de una PBP adicional de baja afinidad Sobreproduccin de una PBP de baja afinidad
- LACTAMASAS
Accin de - Lactamasas
Accin de - Lactamasas
- Lactamasas
Clasificacin de lactamasas
AmpC: generalidades
Serin - lactamasas Grupo C de Ambler Grupo 1 de la clasificacin de Bush-Jacoby-Medeiros (1995) Cefalosporinasas Resistencia a oximino-cefalosporinas y algunas cefamicinas No inhibidas por inhibidores clsicos
AmpC
Cromosmicas
Constitutivas Constitutivas/ Inducibles
Enterobacter cloacae Citrobacter freundii Serratia spp. Morganella morganii Providencia spp Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Proteus mirabilis Otras
Plasmdicas
AmpC plasmdicas
Descriptas por primera vez en 1989 (Philippon et al) Distribucin mundial, principalmente en aislamientos nosocomiales Derivan de AmpC cromosomales
AmpC plasmdicas
Hafnia alvei Desconocido
Desconocido
M. morganii
C. freundii
E. cloacae
JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY, June 2002, p. 21532162
AmpC plasmdicas
Laboratorio
CTX= 22mm
Bsqueda de BLEE
Aumento 5mm
CTX/ CLA
CAZ/
CLA
c
CTX CAZ
BLEE positiva
Prueba Confirmatoria
NO existen mtodos fentipicos estandarizados por el CLSI para la deteccin de enzimas AmpC
Sospecha de AmpC
Fenotipo no especfico de AmpC (TEM, OXA, carbapenemasas) R a FOX y oximino -lactmicos bsqueda de AmpC
Cepas con AmpC plasmdicas S a CTX, CRO y CAZ segn criterios de CLSI 2009 TEST CONFIRMATORIOS
Mtodos de deteccin
FOX
Test en 3D (Indirecto)
Cepa en estudio
E. coli
ATCC 25922
Mtodos de deteccin
Agar Cefoxitina
Cepa en estudio
(extracto enzimtico)
E. coli
ATCC 25922
Mtodos de deteccin
Mtodos de deteccin
Mtodos de deteccin
E-test
Bolmstrm, A et al. Evaluation of two new Etest strips for AmpC detection. Abstr. 46th Intersci. Conf. Antimicrob. Agents Chemother.
Mtodos de deteccin
E-test
Test positivo: Reduccin de CIM a cefamicina de 3 diluciones Deformacin de la elipse de inhibicin Presencia de zona fantasma
AmpC negativo
Bolmstrm, A et al. Evaluation of two new Etest strips for AmpC detection. Abstr. 46th Intersci. Conf. Antimicrob. Agents Chemother
Mtodos de deteccin
E-test
Mtodos de deteccin
Inhibidores no -lactmicos
18 mm
18 mm
30 mm
5mm
Mtodos de deteccin
Inhibidores no -lactmicos
AmpC
BLEE
Mtodos de deteccin
Mtodos moleculares
Mtodos de deteccin
Mtodos moleculares
Mtodos de deteccin
Mtodos moleculares
Objetivo: realizar un estudio Multicntrico y Prospectivo sobre la Prevalencia de AmpC plasmdica en nuestro medio durante el perodo Agosto-Octubre de 2009 En el estudio participaron 7 centros de la Ciudad de Buenos Aires y del Conurbano Bonaerense
Especies incluidas: Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Klebsiella oxytoca Proteus mirabilis Proteus vulgaris Shigella spp. Citrobacter koseri Salmonella spp.
Criterios de inclusin
1.Resistencia a Cefalotina y Ampicilina Halo de Inhibicin de Cefotaxima 27 mm y/o Ceftazidima 22 mm Resistente o Intermedio a Cefoxitina
Ampicilina R
Cefalotina R
CTX= 22mm
Criterios de inclusin
1.Resistencia a Cefalotina y Ampicilina Halo de Inhibicin de Cefotaxima 27 mm y/o Ceftazidima 22 mm Resistente o Intermedio a Cefoxitina
2.Ausencia de sinergia con cido Clavulnico (confirmacin de BLEE NG)
Bsqueda de BLEE
CTX
CTX/
CLA
c
CAZ CAZ/
CLA
CTX: cefotaxima CAZ: ceftazidima CLA: clavulnico Anlisis de la prevalencia de enzimas de tipo AmpC de codificacin plasmdica en Enterobacteriaceae
Bsqueda de BLEE
FEP
FEP/
CLA
Criterios de inclusin
1.Resistencia a Cefalotina y Ampicilina Halo de Inhibicin de Cefotaxima 27 mm y/o Ceftazidima 22 mm Resistente o Intermedio a Cefoxitina 2.Ausencia de sinergia con cido Clavulnico (confirmacin de BLEE NG) 3.Sinergia Positiva con cido Fenil Bornico
FOX
BOR
1,0 cm
c
CTX BOR CAZ
1,0 cm
1,0 cm
Conclusiones:
La prevalencia de AmpC plasmdica fue del 1% del total de enterobacterias recuperadas en este perodo
En Escherichia coli la produccin de AmpC plasmdicas correspondi a un 25% de la resistencia a cefalosporinas de 3 generacin
Conclusiones
La resistencia a cefoxitina no es especfico de la presencia de AmpC
Los aislamientos productores de AmpC fueron tanto de origen nosocomial como ambulatorio
Anlisis de la prevalencia de enzimas de tipo AmpC de codificacin plasmdica en Enterobacteriaceae
Consideraciones finales
Mtodo fenotpico: sinergia con cido bornico es buen predictor de presencia de AmpC
Cmo informamos?
CLSI 2009
Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Proteus mirabilis
CLSI 2010
Enterobacterias
R 22 17 14
Bsqueda de BLEE
Resultado Negativo
S I R 14 14 14 CTX 23 22-15 CAZ 18 17-15
FEP
18 17-15
Recomendacin local
CTX 26 CAZ 21
Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Proteus mirabilis
Bsqueda de BLEE
Resultado Negativo
S CTX CAZ FEP 26 21 18 I 25-23 20-18 17-15 R 22 17 14
Agradecimientos
Bioq. Liliana Fernandez Canigia Bioq. Ivana Maldonado Bioq. Daniela Cejas Jefa de Residentes Equipo de bioqumicos de Laboratorio Domecq y Lafage