Universidad Cesar Vallejo

ANTICUERPOS ANTINUCLEARES
Los anticuerpos antinucleares (ANA) es la prueba inicial de laboratorio para el despistaje de una gran variedad de enfermedades del tejido conectivo, como es el lupus eritematoso sistmico (LES), la esclerosis sistmica progresiva, el sndrome de Sjgren (SS) y la enfermedad mixta del tejido conectivo (EMTC), entre otras. En nuestro medio no somos ajenos a la incidencia de estas enfermedades raras del tejido conectivo. La enfermedad mas fulminante es el LES. Nuestros laboratorios deben tener gran infraestructura y equipos , con personal capacitado, para poder ayudar al diagnostico de estas enfermedades. Los ANA pueden ser detectados en el laboratorio por el mtodo de inmunofluorescencia indirecta (IFI) que se realiza sobre cortes de tejido o lneas celulares. usando el sustrato HEP-2. El laboratorio MEDLAB ha desarrollado un moderno sistema integrado de diagnostico de enfermedades autoinmunes que va desde el uso de tcnicas IFI de doble mosaico, el perfil ENA extendido (14 antgenos) y por la cuantificacin especfica del marcador positivo mediante tcnicas EIA para completar un buen diagnstico y un seguimiento estrecho de las enfermedades inmunes. Iniciamos el estudio realizando un test IFI, utilizando un sistema Biochip; el cual combina 2 sustratos: clulas HEP-2 y cortes de Hgado de mono, lo que permite: Confirmacin de patrones, ejemplo Anticuerpos anti actina. Diferenciar patrones, como un SSa/SSb de un Sm/RNP. Resultado adicional, como determinar anticuerpos anti Endomisio o Anca en ttulos altos, anticuerpos contra LMA, LSP, conductos biliares y clulas endoteliales.

INTERPRETACION: Las muestras se consideran positivas a partir de una dilucin de 1/100 (Positivo Dbil) e indica una posible enfermedad de tejido conectivo, se sugiere una evaluacin clnica para decidir mayores estudios. Las muestras positivas 1/320 indica presencia de una enfermedad autoinmune y se sugiere realizar estudios para identificacin de anticuerpos especficos para llegar al diagnostico preciso de enfermedad autoinmune.

Fluorescencia
Sin reaccin en 1:100 Reaccin positiva en 1:100

Interpretacin
Negativo. No se detectan anticuerpos contra ncleos celulares en la muestra del paciente. Rastros. Para tipos IF: patrn homogneo, centromrico, nuclear dots, Jo-1, patrones tpicos de SS-A/SS-B, Sm/RNP posible indicacin de varias enfermedades reumticas y otras enfermedades. Positivo. Indicacin de varias enfermedades reumticas y otras enfermedades.

Reaccin positiva en 1:320

En un ANA positivo se pueden identificar diferentes patrones de inmunoflurescencia y cada uno se correlaciona con la presencia de un determinado anticuerpo, lo que a su vez determinar la enfermedad especfica: Patrn Homogneo: anticuerpos anti DNA (ds), histonas. Relacionado con LES inducido por drogas y otras enfermedades del tejido conectivo. Patrn Perifrico: Anticuerpos anti protenas integrantes de la membrana nuclear, p.e., antilaminina, antigp210. Relacionado con lupus eritematoso sistmico (LES) ,lupus en actividad y lupus nefrtico. Patrn Nucleolar: anticuerpos anti- PM-Scl, fibrilarina, RNA polimerasa I, NOR. Ocurren fundamentalmente en Esclerodermia pero tambin en pacientes con LES. Patrn Moteado: anticuerpos contra una gran familia de antgenos no histnicos:

LIC. TM WILLIAM ALVARADO JUAREZ

Universidad Cesar Vallejo -Moteado grueso: anticuerpos anti Sm, anticuerpos anti U1RNP,asociado a LES, esclerodermia y enfermedad mixta del tejido conectivo (EMTC) -Moteado fino: anticuerpos anti SSA /Ro, Anticuerpos anti SSB/ La, relacionado con sndrome de Sjgren (SS) y LES. Patrn Centromerico: anticuerpos anti- centrmeros, son patognomnicos para la esclerosis sistmica progresiva de la forma limitada. Patrn Nuclear Dots: Los anticuerpos contra grnulos nucleares SP100 ocurren en casos de cirrosis biliar primaria , frecuentemente ,pero no siempre, en paralelo con anticuerpos contra mitocondria. Patrn Centriolar: Se observa puntos fluorescentes en los polos de clulas en mitosis, ubicados en extremos opuestos uno del otro. No se ha determinado aun su asociacin clnica. Otros autoanticuerpos asociados a mitosis tambin producen patrones fluorescentes como el Huso acromatico (MSA-1 , mitosis-specific antibody 1 ; anti-tubulina?), anticuerpos contra la zona de separacin (midbody, MSA-2),anticuerpos contra antgenos de los cromosomas asociados (MSA-3).

Un ANA positivo debe confirmarse con enzimoinmunoensayos especficos de acuerdo al patrn de inmunofluorescencia inicial y confirmado por un PERFIL ENA EXTENDIDO . ELISA. El estudio mediante Elisa nos permite determinar en forma monoespecifica cada autoanticuerpo presente y cuantificarlo aisladamente para el monitoreo de la enfermedad. Una desventaja del ANA es que en algunos ANA positivo pueden estar presentes mas dos anticuerpos que podran enmascararse por el autoanticuerpo de mayor ttulo. PERFIL ENA EXTENDIDO (LINEBLOT) . El PERFIL ENA EXTENDIDO (LINEBLOT) es un Ensayo In vitro que nos permite la determinacin de autoanticuerpos de la clase IgG contra 14 diferentes antgenos nucleares y citoplasmticos como: nRNP, Sm, SS-A (SS-A nativo y Ro-52), SS-B, Scl-70, PM-Scl, Jo-1, CENP B, PCNA, dsDNA, Nucleosomas, Histonas, Protena P-ribosomal y AMA-M2 en suero o plasma. Ventajas de esta novedosa prueba es que nos permite en forma simultanea. Determinar la presencia de varios autoanticuerpos a la vez. Un resultado negativo descarta la presencia de Autoanticuerpos incluidos en el perfil. Despus de determinar la presencia de los autoanticuerpos, se sugiere monitorear con Elisas monoespecificos para cada marcador.

Paciente con lupus eritematoso sistemico

LIC. TM WILLIAM ALVARADO JUAREZ