::. CARACTERIZAO DE TRIACILGLICERIS EM LEO VEGETAL.

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Introduo Os lipdeos se caracterizam por sua insolubilidade em gua e em presena solubilidade em solventes orgnicos como clorofrmio, ter, benzeno, mistura de Folch (clorofrmio:metanol). A grande maioria dos lipdeos apresenta cidos graxos esterificados em sua estrutura, abrangendo os acilgliceris ou glicerdeos, os cerdeos, os fosfolipdeos e os glicolipdeos. Estes compostos, mediante aquecimento em presena de bases fortes como KOH e NaOH, produzem sais de sdio ou potssio de cidos graxos ou sabes alcalinos. Devido a esta propriedade, estes lipdeos so denominados de lipdeos saponificveis j que podem ser caracterizados pela saponificao. Exemplo: em uma camada onde as cabeas polares interagem com a gua e as caudas apolares permanecem fora do lquido. Esta disposio provoca o abaixamento da tenso superficial da gua. Os cidos graxos dos sabes podem ser precipitados pela adio de cidos fracos (cido actico). SABES INSOLVEIS Os sabes de metais alcalinos terrosos (Ca+2) so insolveis porque se encontram praticamente no dissociados. CAPACIDADE EMULSIFICANTE Os sabes tambm possuem poder emulsificante visto que quando agitados com leo ou gordura, em meio aquoso, interagem com os mesmos atravs das caudas apolares produzindo gotculas carregadas que se mantm em emulso. Objetivos - Caracterizar os triacilgliceris atravs de hidrlise alcalina (reao de saponificao); Os sabes so molculas anfipticas, apresentando em sua estrutura uma longa cadeia hidrocarbonada (cauda apolar) e um grupo carboxilato (cabea polar). Formam solues coloidais estveis em gua, j que as molculas se associam por interaes hidrofbicas entre as caudas na apolares superfcie formando das micelas, Na apresentando negativamente grupos carboxilato carregados mesmas. - Analisar a composio desses lipdios atravs de reaes de saponificao e precipitao. Materiais e Reagentes: - leo vegetal (1 mL em cada tubo); - 1 bquer; - 3 tubos de ensaio; - 1 Basto de vidro; - Soluo de Hidrxido de potssio 40% em etanol (1:1); - Soluo de cloreto de clcio; - Soluo saturada de cloreto de sdio; - Banho-maria;
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superfcie da gua, as molculas de sabo se orientam

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- cido actico concentrado (CAPELA); - 3 pipetas (p/ medir volumes). Procedimentos Saponificao: Colocar 15 gotas do leo em um tubo de ensaio; Colocar 5 mL de KOH 40%; Aquecer o tubo a aproximadamente 90C por 30 minutos; Registrar os dados.

soluo de CaCl2 Questionrio

5 gotas

1. Escrever a reao de hidrlise do triglicerdeo Trinolena. 2. Por que se utiliza etanol na reao de saponificao? 3. Explicar a ao detergente dos sabes. 4. Explicar a precipitao de sabes por excesso de eletrlitos. BIBLIOGRAFIA ALFENAS, A. C. Eletroforese de isoenzimas e protenas afins: fundamentos e aplicaes em plantas e microorganismos. Viosa: U.F.V., 1998, 574p. ALFENAS, A. C.; PETERS, I.; BRUNE, W.; PASSADOR, G. C. Eletroforese de protenas e lisozimas de fungos e essncias florestais. Viosa: U.F.V., 1991. 242p. GORDON, D. B. 1995. Spectroscopic Techniques. pp. 324-344 in Principles and Techniques in Practical Biochemistry. K. Wilson & J. Walker Eds., Cambridge University Press, Cambridge LAEMMILI, U. K. Cleavage of strutural proteins during assembly of the head of bacteriophag T4. Nature, London, v.227, p.680-685, 1970. LEHNINGER, A. L.; NELSON, D. L. e COX, M. M. Principles of Biochemistry. New York, Worth Publishers, 1993. 1136p. REED, R., HOLMES, D., WEYERS, J. & JONES, A. J. 1998. Practical Stills in Biomolecular Sciences. Ed. Prentice Hall SAMBROOK, J.; FRITSCH & MANIATIS, E. F. T. Molecular Cloning. Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989.

Anlise de caractersticas de sabes: Agitar o tubo e verificar a formao de espuma; Registrar o ocorrido. Dividir o contedo em 3 tubos de ensaio; Adicionar cido actico concentrado em outro tubo de ensaio, gota a gota, at notar a presena de precipitado branco insolvel que so cidos graxos com baixo grau de dissociao; Registrar o ocorrido. Adicionar gotas de CaCL2 e agitar at a formao do precipitado branco, que so os sabes de clcio; Registrar o ocorrido. Ao ltimo tubo adicionar soluo de Cloreto de sdio saturada e observar a formao de um precipitado de sabo por excesso de sais neutros (efeito do on comum); Registrar o ocorrido. Explicar o processo de solubilizao dos lipdios. Explicar o mecanismo da reao de saponificao. Discutir como poderiam ser analisados os cidos graxos. REAGENTES soluo de sabo* soluo de NaCl soluo de H3CCOOH
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TUBO 1 2 ml 5 gotas -

TUBO 2 2 ml 5 gotas

TUBO 3 2 ml Pg.

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