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CORPORACIN TECNOLGICA DE BOGOT TECNOLOGA EN REGENCIA DE FARMACIA LABORATORIO DE FITOQUMICA 20628 GUA DE LABORATORIO N 2: MARCHA FITOQUMICA PRELIMINAR MATERIALES

S NOMBRE DEL MATERIAL Y CARACTERISTICAS Tubos de hemolisis Pipetas Pasteur Microesptulas Beaker de 100 ml Agitador de vidrio Vidrio de reloj Vaso de precipitados Gradilla Placa excavada CANTIDAD 10 3 1 2 1 1 1 1 1

REACTIVOS CANTIDAD 10 ml 10 ml 10 ml 10 ml 10 ml 10 ml 20 cm 1g 10 ml 10 ml NOMBRE DE LOS REACTIVOS ORGANICOS Etanol ter de petrleo CANTIDAD 500 ml 500 ml

NOMBRE DE LOS REACTIVOS INORGANICOS Acido sulfrico al 85 % Reativo de Lieberman burchard Cloruro ferrico al 1 % Acetato de plomo al 10 % Gelatina- sal Acido clorhdrico al 10 % Cinta de magnesio Zinc en polvo Acido clorhdrico concentrado Hidroxido de Sodio al 40 %

Reactivo de Antrona Reactivo de Molish Clorhidrato de hidroxilamina en metanol 2N Hidrxido de potasio en metanol 2 N Reactivo de Erlich Hidrxido de sodio 0.1 N Reactivo de Valser Reactivo de Mayer Dragendorff Schleiber Wagner

10 ml 10 ml 10 ml

10 ml 10 ml 10 ml 10 ml 10 ml 10 ml 10 ml 10 ml

EQUIPOS: Bao de Mara CONSULTA PREVIA/ MARCO TERICO: Clasificacin de los metabolitos secundarios Anlisis fitoqumico preliminar Reacciones de la marcha fitoqumica preliminar
GRUPO DE METABOLITOS SECUNDARIOS

PROCEDIMIENTO:

PRUEBA QUMICA

PROCEDIMIENTO

a. Carotenoides

Salkowski

A 0.1 ml de cido sulfrico al 85% en un tubo de ensayo aadir por lentamente por las paredes 0.1 ml de extracto etreo. Observar coloracin azul en la interfase. Agregar gotas del reactivo de Liebermann-Burchard a 0.1 ml de extracto etreo. Observar cambios de coloracin inmeditamente y a 5, 15, 30 y 45 minutos A 0.2mL de extracto etanlico agregar 1 gota de solucin de cloruro frrico al 1%. Observar coloracin azul o verde. A 0.1mL de extracto etanlico agregar 0.1mL de acetato de plomo al 10%. Observar turbidez o precipitado blanco. A 0.1mL de extracto etanlico agregar 0.1mL de reactivo de gelatina sal. Observar precipitacin. A 0.1mL de extracto etanlico agregar gotas de cido clorhdrico 10% y un trozo de cinta de magnesio. Observar coloracin rojiza.

b. Esteroides y triterpenoides

Liebermann Burchard

Cloruro frrico

c. Taninos

Acetato de plomo

Gelatina sal

d. Flavonoides

Shinoda

Leucoantocianidinas

A 0.5 mL de extracto etanlico agregar 1 mL de cido clorhdrico 10% durante 10 a 20 minutos. Observar coloracin roja intensa. A 0.2 ml de extracto etanlico agregar zinc en polvo y gotas de cido clorhdrico concentrado. Observar coloracin amarilla. Repetir la prueba con zinc en polvo e hidrxido de sodio 40%. A 1mL de extracto etanlico agregar 5mL de agua. Agitar vigorosamente. Observar formacin de espuma con altura de 2cm que permanece hasta media hora. A 0.5 ml de extracto etanlico en un tubo de ensayo aadir por las paredes gotas de reactivo de antrona. Observar coloracin azul-verdosa en la interfase. A 0.5 ml de extracto etanlico agregar 0.5 ml de reactivo de Molish, verter la mezcla gota a gota por las paredes de un tubo de ensayo que contenga 1 ml de cido sulfrico concentrado. Observar coloracin violeta en la interfase. A una gota de extracto etanlico o etreo aadir una gota de solucin metanlica 2N de clorhidrato de hidroxilamina y una gota de hidrxido de potasio 2N metanlico, calentar durante 2 minutos. Enfriar, acidular con cido clorhdrico 0.5N y aadir una gota de cloruro frrico 1%. Observar coloracin violcea. A una gota de extracto etanlico o etreo aadir una gota de solucin metanlica 2N de clorhidrato de hidroxilamina y una gota de hidrxido de potasio 2N metanlico, calentar durante 2 minutos. Enfriar, acidular con cido clorhdrico 0.5N y aadir una gota de cloruro frrico 1%. Observar coloracin violcea. A 1ml de extracto etanlico agregar 1mL de reactivo de Erlich. Observar coloracin naranja. Se calienta al bao mara hirviendo un tubo de ensayo con 1 ml de extracto etanlico con papel filtro impregnado con solucin 0.1N de NaOH en la boca, durante 5 a 10 minutos. Observar fluorescencia al UV. A 1 ml de extracto cido agregar gotas del reactivo de Valser. Observar formacin de precipitado. A 1ml de extracto cido agregar unas gotas de reactivo de Mayer. Observar formacin de precipitado blanco. A 1ml de extracto cido agregar unas gotas de reactivo de Dragendorff. Observar formacin de precipitado marrn. A 1 ml de extracto cido agregar gotas del reactivo de Schleiber. Observar formacin de precipitado blanco. A 1ml de extracto cido agregar unas gotas de reactivo de Wagner. Observar formacin de precipitado caf.

e. Quinonas

Comportamiento ante cido y donador de electrones

f. Saponinas

Espuma

Antrona g. Cardiotnicos Molish

h. Sesquiterpenlactonas

Hidroxamato frrico

Hidroxamato frrrico

i. Coumarinas

Erlich

Fluorescencia

Valser

Mayer

j. Alcaloides

Dragendorff

Schleiber

Wagner

PREGUNTAS ORIENTADORAS: Qu tipos de metabolitos secundarios se encuentran en mi especie vegetal? (Quimiotaxonoma) Cules son las reacciones que permiten la identificacin del metabolito secundario? Cules son las causas probables del resultado negativo?