MICROBIOLOGIA

EXIGNCIAS NUTRICIONAIS dos microrganismos

Prof. MSc. Carmen D. T. Heyder

ELEMENTOS QUMICOS

Carbono carboidratos, lipdeos e protenas energia Heterotrficos fonte de carbono = compostos orgnicos Autotrficos fonte de carbono = dixido de carbono

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Nitrognio parte essencial dos aminocidos nitrognio gasoso (fixao de nitrognio) compostos nitrogenados inorgnicos
(nitratos, nitritos ou sais de amnia)

compostos nitrogenados orgnicos

(aminocidos ou peptdeos)

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Hidrognio e Oxignio parte de compostos orgnicos
Enxofre biossntese de cistena, cistina e metionina
Fsforo sntese de cidos nucleicos e ATP

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outros elementos sdio (permeases) ferro (citocromos catalases e succinil desidrogenase)
elementos-trao zinco, cobre, mangans, molibdnio (fixao de nitrognio) e cobalto

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Classificao Nutricional dos microrganismos

Quimiotrficos utilizam compostos qumicos = fonte energia Fototrficos utilizam a luz = fonte de energia

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Quimioautotrficos
compostos inorgnicos (energia) CO (fonte de carbono)

Quimioheterotrficos
compostos orgnicos (fonte de energia e carbono)

Fotoautotrficos
Luz (energia) compostos inorgnicos (carbono)

Fotoheterotrficos
Luz (energia) compostos orgnicos (carbono)
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O cultivo de microrganismos requer meios de cultura apropriados, que so misturas de nutrientes utilizados para o crescimento dos microrganismos em laboratrio

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Meios para cultivo de microrganismos

quimicamente definidos composio conhecida determinar necessidades nutricionais quimicamente indefinidos complexos: contm acares, aminocidos, vitaminas e sais
(produtos naturais: extrato de carne, peptonas, extrato de levedura, sangue ...)
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Meios para cultivo de bactrias Os meios elaborados para o cultivo de bactrias especficas normalmente imitam seu habitat natural Autotrficas (CO ) Heterotrficas (compostos orgnicos) Fototrficas (luz) Quimiotrficas (compostos qumicos)

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Microrganismos fastidiosos necessitam de meios de cultivo complexos, que muitas vezes podem conter cerca de 20 aminocidos e vrias vitaminas para crescer

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Meios para cultivo de fungos fungos = heterotrficos geralmente: concentrao maior de acar (4%) e pH menor (3,8 a 5,6) Meios para cultivo de protozorios protozorios = heterotrficos aerbios exigncias nutricionais complexas contm variedade de aminocidos, vitaminas e carboidratos
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Meios para cultivo de algas fotoautotrficas necessitam de luz, CO, gua e vrios ons inorgnicos solveis heterotrficas algumas crescem no escuro com pequena variedade de substratos (ex.: Euglena sp)

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Meios para cultivo de anaerbios baixas concentraes de oxignio / livre de O camada profunda de meio solidificado adio de agente redutor: remove O
(tioglicolato de sdio, cistena)

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Meios de cultivo seletivos Permitem o crescimento de um tipo particular de microrganismo e/ou suprimem o crescimento de outros tipos
gar Sabouraud: seletivo p/ fungos (inibe bactrias) gar verde brilhante: seletivo p/ bact. Gram-negativas gar feniletanol: seletivo p/ bact. Gram-positivas adio de antibiticos especficos aos meios de cultivo

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Meios de cultivo diferenciais gar sangue: bactrias hemolticas no hemolticas

Meios de cultivo seletivos e diferenciais gar MacConkey: inibe bact. Gram-positivas (seletivo) bactrias lactose (+) e lactose (-)
(diferencial)

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Meios de enriquecimento Favorecem o crescimento da espcie desejada e no o de outras espcies presentes em uma populao mista Tcnicas de enriquecimento (ambiente qumico / fsico) resultam em aumento do nmero da espcie inicialmente em minoria

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Meios de cultivo para ensaios microbiolgicos Microrganismos especficos podem seu usados para medir concentraes de antibiticos e vitaminas
concentrao de antibiticos no soro usando microrganismos sensveis (o grau de inibio proporcional qtd. do frmaco) concentrao inibitria mnima (MIC) menor conc. da substncia testada que inibe o crescimento do microrganismo

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Meios para cultivo de tecidos desenvolvidos para cultivo de clulas animais e vegetais cuidadosa preparao e manuseio
(evitar contaminao com microrganismos que possam matar as clulas)

aplicaes: cultivo de vrus in vitro, clamdias, riqutsias e alguns espiroquetas fornecer produtos animais / plantas (hormnios)
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ISOLAMENTO E CONSERVAO DE CULTURAS PURAS Cultura pura todas as clulas da populao se originaram de uma mesma clula parental Cultura mista composta por muitas espcies diferentes num mesmo ambiente

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Tcnicas de isolamento tcnica de esgotamento por estrias tcnica de semeadura em superfcie

(ala de Drigalsky)

mtodo de pour-plate (agar a 45C)

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Conservao de culturas puras refrigerao (4 a 10C): curtos perodos (dias / meses) freezers (-70 a -120C) ou nitrognio lquido (-196C) armazena por longos perodos de tempo liofilizao: processo onde so congeladas, desidratadas e fechadas a vcuo (congelamento a seco) mantm vivel por muitos anos

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