CAPTULO 13 AGITAO E AERAO EM BIORREATORES Nos captulos anteriores consideraram-se grandes diferenas de escala: do nvel molecular ao celular, volumes

s de fluidos contendo milhes ou bilhes de clulas / mL. As diferentes entidades (nutrientes, clulas e produtos metablicos) esto separadas na clula e no meio, logo a probabilidade dos fennemos de transporte influenciarem e dominarem o processo no volume reacional em estudo muito maior do que este controle ser exercido pelas reaes qumicas/bioqumicas. Clulas e seus componentes catalticos trabalham no mdulo de Thiele ~= 1, sempre esto na sua mxima taxa possvel sem alguma limitao difusional. Num bioprocesso com meio rico em fonte de carbono as clulas aerbias podero utiliz-las completamente, somente se for mantida uma alta concentrao de oxignio nas vizinhanas das clulas, e isto um problema tpico de transferncia da massa gs-lquido. O limite entre a atividade aerbia e anaerbia depende da concentrao de oxignio no meio reacional, do coeficiente de difuso e das taxas de respirao na regio aerbia. Isto separa as clulas viveis das mortas (no viveis). Fungos em pelletes ou clulas animais nos tumores cancerosos. Tambm esta concentrao que determina a profundidade da atividade aerbia nas lagoas de estabilizao, e as comunidades aerbias e anaerbias no solo. Uma populao de leveduras ativas e respirando tem um consumo de oxignio da ordem se 0,3 g O2 /h/g clulas secas. O pico de consumo para uma densidade populacional de 109 clulas/mL estimado supondo-se que a clula tenha um volume de 10-10 mL (80% gua). Logo a demanda de oxignio de 6 gO2 /L. H. A troca de materiais entre diferentes regies governada pelas equaes da conservao de massa, conservao das espcies (O2) e da quantidade de movimento.

13.1 IMPORTNCIA DA TRANSFERNCIA DE OXIGNIO - Processos em aerobiose mais utilizados, exemplos: Produo de antibiticos; Enzimas Vitaminas Fermentos e inoculantes
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Protenas recombinantes (hormnios de crescimento, insulina); Cultivo de clulas animais (vacinas) Tratamento biolgico de guas residurias - Processos fermentativos: cultivo de clulas aerbias ou aerbias facultativas exigem dimensionamento do sistema de transferncia de oxignio (dissoluo do oxignio contido na fase gasosa para a fase lquida). - Ponto de vista bioqumico: oxignio o ltimo elemento a aceitar eltrons (final da cadeia respiratria) sendo reduzido a gua reoxidao das coenzimas que participam das reaes de desidrogenao (gliclise e ciclo de Krebs) e ainda armazenamento de energia (ADP para ATP participam das reaes de sntese de molculas necessrias sobrevivncia e reproduo das clulas). - Cultivo eficiente: elevadas velocidades de crescimento celular altas velocidades de consumo de carbono (alta quantidade de eltrons transportados na cadeia respiratria ATP) necessidade de oxignio dissolvido. - Oxidao completa da glicose: C6H12O6 + 6 O2 6 CO2 + 6 H2O

Oxidao de 1 mol de glicose requer o consumo de 6 moles de oxignio. - Necessidade de agitao e aerao ao longo do processo fermentativo aerbio ao longo de todo o processo: Dissolver quantidades significativas das fontes de carbono, nitrognio, fsforo e outros nutrientes. Glicose solvel em gua (solubilizar centenas de gramas por litro) Oxignio: pouco solvel em gua na saturao a concentrao do oxignio dissolvido da ordem de 7 mgO2 / L (7 ppm) borbulhar ar (1 atm e 35C). - Extenso de um processo descontnuo aerbio elevada concentrao de produto desejado depende da capacidade de se transferir O2 para a fase lquida. - Processos contnuos e descontnuos alimentados: elevadas vazes de alimentao de nutrientes efetivas se houver um bom sistema de transferncia de O2. 13.2 SISTEMAS PARA TRANSFERNCIA DE OXIGNIO Formas para realizar a transferncia de O2

Esquemas 1 e 2 aerao superficial. Demais esquemas. Aerao em profundidade (transferncia de O2 por borbulhamento de ar). Esquema 1 operao de bandejas ou lagoas de oxidao para o tratamento biolgico de resduos: transferncia de O2 ocorre por difuso no lquido em contato com o ar atmosfrico. Esquema 2 biorreatores com clulas imobilizadas (aderidas) em leito fixo (cavacos de madeira vinagre; cascalho filtros aerbios para tratamento de guas residurias). Esquema 3 coluna de bolhas produo de fermento (serpentina no fundo do biorreator de onde surgem pequenas bolhas de ar que sobem toda a altura do fermentador agitao transferncia de O2). Esquema 4 air-lift ar introduzido em uma chamin no interior do reator atravs de um metal ou material cermico sinterizado com pequenos poros - intensa
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agitao no lquido. Ex. cultivo de clulas que apresentam grande sensibilidade ao cisalhamento (clulas animais). Evitam emprego de sistemas de agitao. Exigem vazes de aerao mais elevadas (manter bom nvel de agitao e transferncia de O2 maior consumo de energia para compresso do ar). Vazes especficas caractersticas da ordem de 1 min-1 (1 v.v.m. volume de ar por volume de meio por minuto), enquanto os aerados e agitados 0,5 min-1. Projeto: normalmente altura bem superior ao dimetro do tanque maior tempo de residncia do ar em contato com o lquido. Esquema 5 reator agitado e aerado: tanque agitado. Altura de lquido = dimetro do tanque, impelidor tipo turbina de 6 ps planas com dimetro igual a 1/3 do dimetro do tanque, 4 chicanas com largura de 1/10 ou 1/12 do dimetro do tanque (diametralmente opostas). Tanque Padro. Na prtica poucos biorreatores obedecem essa propores geomtricas. Normalmente tanques com altura maior que o dimetro e mltiplas turbinas isto para maior homogeneizao do contedo do reator e transferncia mais efetiva de O2. Difcil o correto dimensionamento por ausncia de dados em geometrias distintas. Esquema 6 impelidor no interior de um duto (formao de vrtice no interior) melhor transferncia de O2. Causa maior cisalhamento nas clulas em relao ao tanque agitado e aerado convencional.

13.3 CONCENTRAO DE OXIGNIO DISSOLVIDO EM SOLUES SATURADAS

Baixa solubilidade do oxignio dissolvido em gua: 7 mg/L a 35C e em equilbrio com o ar atmosfrico frao molar ou volumtrica de 20,9% de O2, a uma presso total de 1 atm apresenta uma presso parcial de oxignio de 0,209 atm. Concentrao de O2 dissolvido diminui com o aumento da temperatura e na presena de um sal dissolvido. Concentrao de O2 dissolvido aumenta com o aumento da presso parcial de O2 na fase gasosa, na saturao alcana 40,3 mg/L no equilbrio a 25C. Operao com presses parciais mais elevadas: alternativa interessante enriquecimento do ar com oxignio. Problema: maioria dos microrganismos aerbios apresenta tendncia inibio por elevadas concentraes de O2 dissolvido. Reduo da concentrao de O2 dissolvido em presena de outras espcies qumicas em um lquido sempre se fermenta solues nutrientes presena de muitas substncias dissolvidas, reduzem a concentrao de saturao do O2 dissolvido em relao ao valor observado para a gua. Ainda: microrganismo consome nutrientes ao longo do tempo, excretando produtos de metabolismo composio qumica do meio de cultura alterada a cada instante do processo e, portanto causando alterao na concentrao do O2 dissolvido na saturao.

13.4 TRANSFERNCIA DE OXIGNIO E RESPIRAO MICROBIANA Objetivo de sistema de agitao e aerao: fornecer oxignio para a manuteno de uma dada atividade respiratria de um certo conjunto de clulas. Transferir oxignio da fase gasosa para o lquido, fazer com que este oxignio dissolvido chegue s clulas suspensas, entre nestas clulas e, finalmente, seja consumido na reao. H muitas resistncias associadas a esse transporte de oxignio da fase gasosa at o seu consumo final.

Resistncias do gs para o lquido: Resistncia 1: transferncia do oxignio do gs para o lquido Resistncia 2: na interface gs lquido Resistncia 3: pelcula lquida estagnada ao redor da bolha de gs. Resistncia 4: difuso do oxignio at as clulas. Consumo de oxignio: Resistncia 5: pelcula de lquido ao redor da clula. Resistncia 6: membrana celular Resistncia 7: difuso do oxignio no citoplasma Resistncia 8: velocidade da reao de consumo final do oxignio. Consideraes: Dados da literatura permitem: Resistncia 1: transferncia do oxignio do gs para o lquido desprezvel devido intensa movimentao das molculas de oxignio. Resistncia 2: na interface gs lquido desprezvel
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Resistncia 4: difuso do oxignio at as clulas - espera-se que o lquido seja suficientemente agitado, a fim de que possa ocorrer o transporte convectivo resistncia desprezvel. Resistncia 5: pelcula de lquido ao redor da clula pequena dimenso da clula e grande rea exposta ao meio lquido desprezvel Resistncia 6: membrana celular membrana celular no deve opor resistncia difuso do oxignio desprezvel. Resistncia 7: difuso do oxignio no citoplasma pouco significativa tendo em vista a grande rea exposta pela clula ao meio ambiente Portanto, resistncias dominantes: Resistncia 3: pelcula lquida estagnada ao redor da bolha de gs que funo da difusividade do oxignio no lquido, assim como devido espessura desta pelcula. Resistncia 8: velocidade da reao de consumo final do oxignio respirao da clula, atividade biolgica. Projeto do sistema de transferncia de oxignio obter uma dissoluo eficiente do oxignio no meio lquido criando uma situao de no limitao de oxignio, para que elas possam consumir este substrato de forma plena.

A mxima capacidade de transferncia de oxignio de um sistema de agitao e aerao dada pelo produto: kLaCs concentrao de O2 nula no meio.

DETERMINAO EXPERIMENTAL : kLa : Colocar no reator soluo de sulfito de sdio, adicionar sulfato de cobre e estabelecer uma aerao desejada. Em determinado tempo retirar uma amostra e determinar a concentrao de sulfito por iodometria (iodo oxida o sulfito a sulfato e titular o iodo em excesso com soluo de tiossulfato). Em outro tempo retirar nova amostra e determinar a concentrao de sulfito remanescente. Supor que todo oxignio dissolvido reage instantaneamente, a velocidade de dissoluo do oxignio pode ser conhecida pela estequiometria da reao de oxidao do sulfito a sulfato: Na2SO3 + O2 Na2SO4 Conhecendo a massa total de O2 transferida para o volume total de reao, durante o intervalo de tempo entre as duas amostras, pode-se calcular o fluxo de oxignio (nO2).

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Referncia Bibliogrfica: SCHMIDELL, W et al., Biotecnologia Industrial, vol 2, cap. 14. BAILEY, J.E & OLIS, D.F. Biochemical Engineering Fundamentals, 2nd ed, 1986, cap. 8 12