23/02/2010

Biologa Celular y Molecular

Tema 2. Sistemas de Membranas

Dra. Nayely Padilla Montao Laboratorio de Farmacologa Facultad de Qumica

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Cruciales para la vida celular La membrana plasmtica rodea y define la clula manteniendo diferencias entre contenido y entorno La membrana de cada orgnulo delimita su forma y mantiene caractersticas de los contenidos y el citosol Los gradientes inicos que suceden en las membranas pueden ser usados para sintetizar ATP, dirigir el trafico en la membrana y para producir seales elctricas. La membrana plasmtica contiene protenas que actan como sensores de seales externas La estructura bsica comn de las membranas esta compuesta por molculas lipdicas y protecas

Doble capa continua (5nm) Barrera de permeabilidad Eslabones estructurales Receptores de seales qumicas Estructura asimetrica con dos caras y diferentes funciones en cada una

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Baseuniversaldelaestructuracelular C Constituye tit el l50%de d l lamasad del lamembrana b siendo i d el lresto t protenas t 5x106 molculaslipdicas en1mx1m Molculaslipdicas sonanfipticas Hidroflico Hidrofbico Fosofolpidos

Cabezapolar

2colas hidrocarbonadas hidrofbicas

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1970. Descubrieron que molculas lipdicas pueden difundir libremente en las bicapas lipdicas Membranas artificiales M b tifi i l

Bicapas laminares Liposomas Electron Spin Resonance Una molcula lpidica cambia de posicin 107 veces por segundo a 37 C Difunde en 1m/segundo

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La Fluidez de la membrana depende de la temperatura y de la composicin Al calentar los liposomas se experimenta un cambio en sus propiedades fsicas. (Transiscin de Fases) Bacterias y levaduras cuyas temperaturas varan con las de su entorno controlan la composicin de sus lpidos de membrana para mantener la fluidez constante. (Sintetizan cidos grasos cis que se pliegan y evitan el empaquetamiento, manteniendo la fluidez de la membrana por disminucin de la temperatura) El mantenimiento de la fluidez de la membrana es esencial para el crecimiento normal de la clula y para la reproduccin.

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Constituyen ms de la mitad de la masa de lpidos

Fosfatidilcolina Esfingomielina Fosfatidilserina Fosfatidiletanolamina

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La bicapa lipdica no esta compuesta esclusivamente de fosfolpidos, contiene habitualmente colesterol y glucolpidos Las membranas plasmticas L b l ti concentraciones elevadas de colesterol eucariotas i t contienen ti

Refuerza el carcter permeable de la bicapa lipdica A temperaturas por debajo de la transicin de fases mantiene el carcter fluido de la membrana

Se orienta con sus grupos hidroxilos prximos a las cabezas polares de las molculas de fosfolpidos

Los glucolpidos son azcares que se encuentran en la mitad no citoplasmtica de la bicapa lipdica, formando agregados y desempeando funciones de interaccin de la clula con el entorno
Se encuentran en la mayoria de las clulas animales constituyendo un 5% de los lpidos presentes Los glucolpidos mas complejos son los gangliosidos que contienen oligosacaridos con uno o ms residuos de c. Salico lo que les proporciona carga neta negativa En los glucolpidos con carga su importancia radica en sus efectos elctricos y pueden actuar con aislantes elctricos. Se cree que desempean alguna funcin en el reconocimiento celular.

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Pese a que la estructura bsica de las membranas biolgicas esta constituida por la bicapa lipdica, la mayora de las funciones son desempeada por protenas

Protenas P t t transmembrana b que atraviezan la membrana en forma de helice nica (1) o mltiple (2)

Protenas P t unidas id a la l membrana b a travez t de la unin covalente a un lpido (3) o un oligosacrido (4)
Protenas perifricas: se pueden liberar de la membrana mediante soluciones de pH extremo Protenas integrales: se encuentran fuertemente unidas a la bicapa lipdica y no pueden ser liberadas fcilmente (uso de detergentes)

Protenas unidas entre si de manera no covalente (5) o mltiple (6)

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La membrana celular mejor caracterizadas es la que rodea los eritrocitos de mamfero

Transporta oxgeno desde los pulmones a los tejidos y dixido de carbono hacia los pulmones

Los globulos rojos se pueden obtener en grandes cantidades y se encuentran relativamente poco contaminados por otros tipos celulares Al no poseer ncleo ni orgnulos celulares, la nica membrana que poseen es la membrana plasmtica, la cual se asla fcilmente y sin contaminacin de membranas internas.

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Obtencin de Fantasmas de eritrocitos, por medio de lisis celular. (Liberacin de hemoglobina) celular

Distintas condiciones ionicas

Elusodefantasmasdeeritrocitospermitidemostrarporprimeravez quealgunasprotenasdemembranaatraviesanlabicapa lipdica yquela composicindelasdosmitadesentotalmentedistinta.

15 bandas protecas principales con pesos moleculares de entre 15 000250 000 La espectrina, la glucofarina y la protena de la banda 3 constituyen el 60% (en peso) de las protenas totales de la membrana Cada una de las protenas esta dispuesta de manera distinta en la membrana
Patrn de electroforesis en gel de poliacrilamida con SDS de las protenas de la membrana de globulos rojos humanos

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Espectrina

Protenaperifricaasociadaalacaracitoplasmticadelabicapa lipdica Constituye aproximadamente el 25% del total de la masa de protenas asociadas a la cara citoplasmtica Mide 100 nm aprox. de longitud y es el principal componente del entramado proteco (citoesqueleto) que se extiende por el interior de la membrana del eritrocito Mantiene la integridad celular y la forma bicncava de la membrana del eritrocito

Espectrina

Heterodimero formado por dos grandes subunidades estructuralmente similares que se asocian cabeza cola formando tetrmeros de 200nm

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Espectrina
Las se enlazan entre L colas l de d 5 6 tetrmeros t t l t si i mediante di t filamentos fil t de d actina ti y otras t protenas citoesquelticas formando un complejo de unin, formando una red deformable que se extiende por toda la superficie citoplasmtica de la membrana

Anquirina: protena que sirve de unin de la espectrina y la protena de la banda 3 al dominio citoplasmtico

Humanos y ratones que poseen anomalas genticas en la espectrina, presentan anemia y glbulos rojos esfricos y anormalmente frgiles. El grado de anemia aumenta con el grado de deficiencia de espectrina

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Glucofarina Unadelasdosp protenasmayoritarias y delasuperficie p externadelg glbulo rojohumanoylaprimeraprotenademembranalacualsedeterminsu secuenciacompletadeaminocidos

Es una glicoprotena transmembrana (131 aminocidos) de paso nico que se haya colocada con la mayora de su masa en la superficie externa de la membrana En la a po porcin c a amino o te terminal a hidroflica d o ca se hallan a a unidos todos los carbohidratos (100 residuos de azcar) que representan al 60% de la masa total (c. Silico) Se desconoce su funcin e induviduos cuyos eritrocitos e carecen de esta glucoprotina estan totalmente sanos

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Protena banda 3 Protenatransmembrana depasomltiplequeatraviesalamembranaen unaconformacinaltamenteplegadaaproximadamente14veces ActacomountransportadordeanionesquepermitequeelHCO3 (forma transportabledelCO2)crucelamembranaintercambindoseconCl La mayor parte de carbohidratos estn unidos a la glucofarina (90% c. Slico) Por medio de criofractura se pudo observar que la protena banda 3 se queda asociada en la cara interna de la membrana La glucofarina permanece en la cara exterior de la criofractura

Perifricas Integrales

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Los carbohidratos estn presentes como regla general asociadas a las protenas de las clulas eucariotas Los en forma de de L carbohidratos b hid t se encuentran t f d cadenas d d oligosacridos li id unidas covalentemente a protenas de membrana (glicoprotenas) y a lpidos (glicolipdos) y como cadenas de polisacridos llamados proteglucanos integrales de membrana

Gl Glucocliz: li zona de la superficie celulas rica en carbohidratos

Los residuos de azucares se encuentran unidos entre si mediante enlaces covalentes Se ha demostrado que los polisacridos tienen un papel fundamental reconocimiento celular en especifico con las lectinas (protenas de membranas que se unen a los oligosacaridos) Proporcionan proteccin frente al dao mecnico y qumico, adems de mantener objetos extraos y otras clulas a distancia impidiendo reacciones indeseables entre protenaprotena

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